專利名稱：植物提取物用于制備治療骨吸收增加性疾病的藥物的用途及其組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及包含某些植物提取物或濃縮物的營養(yǎng)或藥物組合物， 以及它們作為骨吸收抑制劑的用途。
背景技術(shù)：
最常見的代謝性骨疾病是骨質(zhì)疏松癥。骨質(zhì)疏松通?？啥x為骨 質(zhì)數(shù)量減少，它是由骨形成減少或骨吸收加快引起的，無論哪種情形， 結(jié)果都是骨胳組織的數(shù)量減少了。在吸收過程中，破骨細(xì)胞(骨再吸 收細(xì)胞)引起部分骨的陷凹。吸收后，成骨細(xì)胞(骨形成細(xì)胞)出現(xiàn)，
用新的骨填滿被再吸收的部分。
在年輕的健康成人體內(nèi)，破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞的形成速率以及它 們的作用使骨吸收和骨形成之間維持平衡。然而，隨著年齡的增長， 在這種改型過程的發(fā)展中出現(xiàn)了不平衡，導(dǎo)致了骨喪失。當(dāng)不平衡持 續(xù)時(shí)間過長，就導(dǎo)致骨質(zhì)減少，從而骨強(qiáng)度導(dǎo)致骨折。
在醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中記栽了許多關(guān)于治療骨質(zhì)疏松癥的組合物和方法。 例如，雌激素、降鈣素和雙膦酸鹽是已知的骨吸收的有效抑制劑。
現(xiàn)在，我們已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，從某些植物或蔬菜獲得的產(chǎn)物，例如， 屬于百合科、4^科和十字花科的植物，它們對骨吸收有強(qiáng)大的抑制作用。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明涉及對骨吸收具有抑制作用的植物提取物或濃縮物、 但不包括豆科和蛇麻花的提取物或濃縮物，在用于制備治療或預(yù)防以 骨吸收增加為特征的疾病或狀態(tài)的藥物或營養(yǎng)制劑中的用途。以骨吸 收增加為特征的疾病可以是，例如佩吉特氏病、腫瘤誘導(dǎo)的骨疾病， 或特別是骨質(zhì)疏松癥。
術(shù)語"豆科，，是指植物分科-豆科(豌豆類)，例如，它包括大 豆、菜豆、鷹嘴豆或兵豆。蛇麻花的意思是指植物種-啤酒花。
本文中所用的"骨質(zhì)疏松癥，，包括因激素不足(例如絕經(jīng)后)和 老齡引起的骨質(zhì)疏松，以及繼發(fā)性骨質(zhì)疏松，諸如繼發(fā)于類固醇治療或繼發(fā)于因神經(jīng)性食欲缺乏導(dǎo)致的營養(yǎng)不良的骨質(zhì)疏松。
本發(fā)明還提供了治療或預(yù)防諸如佩吉特氏病、腫瘤誘導(dǎo)的骨疾病、 特別是骨質(zhì)疏;松癥等以骨吸收增加為特征的疾病或狀態(tài)的方法，它包 括給人或其他哺乳動(dòng)物服用藥物或營養(yǎng)制劑，所述藥物或營養(yǎng)制劑包 含除來自于豆科和蛇麻花以外的蔬菜提取物或濃縮物，其量能有效地 抑制骨吸收。
本發(fā)明還預(yù)見了選自蔥、石蛇床、蕓苔和芝麻菜提取物和濃縮物 的植物提取物或濃縮物，在用于制備治療或預(yù)防諸如佩吉特氏病、胂 瘤誘導(dǎo)的骨疾病、特別是骨質(zhì)疏松癥等以骨吸收增加為特征的疾病或 狀態(tài)的藥物或營養(yǎng)制劑中的用途。
本發(fā)明還提供了治療或預(yù)防諸如佩吉特氏病、腫瘤誘導(dǎo)的骨疾病、 特別是骨質(zhì)疏;松癥等以骨吸收增加為特征的疾病或狀態(tài)的方法，它包 含給人或其他哺乳動(dòng)物服用藥物或營養(yǎng)制劑，所述藥物或營養(yǎng)制劑包 含選自蔥、石蛇床、蕓苔和芝麻菜提取物和濃縮物的植物提取物或濃 縮物，其量能有效地抑制骨吸收。
優(yōu)選的是，來源于蔥、石蛇床、蕓苔和/或芝麻菜的提取物和濃縮 物是蔬菜提取物或濃縮物。
在本文中，術(shù)語"蔬菜"指的是具有可食用部分的草本植物，人 以生或熟的形式消耗它們。可食用部分可以是根，諸如蕪菁甘藍(lán)、甜
菜、胡蘿卜、和甘薯；可以是塊莖或貯藏莖，諸如馬鈴薯和芋頭；莖， 如天門冬屬和苤藍(lán)；芽，諸如抱子甘藍(lán)；球莖，諸如洋蔥和大蒜；梗 或葉柄，諸如芹菜和大黃；葉，諸如巻心菜、萵苣、歐芹和菠菜；未 成熟花，諸如花椰菜、花莖甘藍(lán)和朝鮮薊；種子；未成熟果實(shí)，如茄 子、黃瓜、和甜玉米(玉蜀黍)；或成熟果實(shí)，如番茄和辣椒。
在本文中，術(shù)語"蔥"指的是蔥屬(大蒜的拉丁文，洋蔥科的一 員)，它包括例如植物種-洋蔥、火蔥(冬蔥、大頭蒜、韭蔥、北蔥、 熊蔥、蒜或大蔥(葉蔥)中的任何一員。優(yōu)選的種是火蔥(冬蔥)、韭蔥、 洋蔥和熊蔥(也稱作熊爪蔥)，特別是后兩種，而洋蔥是尤為優(yōu)選的。洋 蔥種的成員的實(shí)例有普通洋蔥(紅皮或白皮或黃皮的)或冬蔥，紅皮或白皮普通洋蔥是優(yōu)選的。
例如，洋蔥提取物和濃縮物是用該種蔬菜的整個(gè)可食用部分制備 的。合適的北蔥提取物和濃縮物是從北蔥草得到的。合適的熊蔥提取 物和濃縮物是從熊蔥的球莖、新鮮的草或從整個(gè)盛開的植物獲得的， 優(yōu)選它們是從新鮮的草得到的。
本文中所用的術(shù)語"石蛇床"是指石蛇床屬(俗名歐,)，例如，
它包括植物種-皺葉歐芽的任何成員。實(shí)例是尸"/Y^eh7 咖 cjrj'57 w邁，即具有巻曲葉片的普通歐芽,尸etrose/j'/7〃歷or/5/w邁ra^/oswzz 或戶etrase/z'/ 〃頂cr/s/ 〃巡rar, / ea/ a/"a/ 鵬也叫作意大利歐芽， 它的葉子是平的。
例如，合適的石蛇床提取物或濃縮物可以用根、果實(shí)或種子，或 者特別是用草制備。
本文中所用的術(shù)語"蕓莒"是指蕓苔屬(巻心菜的拉丁文)，例 如，它包括植物種-甘藍(lán)、歐洲油菜、蕪青、芥藍(lán)、齊菜、5rasWca / erpa'n'o^'s、 白齊和j^中的任何成員。
甘藍(lán)是優(yōu)選的種，該種中特別優(yōu)選的成員是^grasw'ca Weracea /ta7ica， ^卩花蓬#藍(lán),或 ^5r35"5^'C3 oJerscea Kar. ^^歷范2-/"6/"3， 抱子甘藍(lán)?；ㄇo甘藍(lán)提取物和濃縮物是特別優(yōu)選的蕓苔屬提取物或濃 縮物。合適的甘藍(lán)種的提取物和濃縮物是有利地用該種蔬菜的整個(gè)可 食用部分制備的，或是用新鮮的嫩芽或枝條制備的。
本文中所用的術(shù)語"芝麻菜"是指芝麻菜屬，它包括，特別是， 植物種_芝麻菜(野生型)或俗名為arrugula或roquette的^rwca Kesicaria 5T/Z s/ . satira (栽培型)的任何成員。
本發(fā)明的植物/蔬菜提取物和濃縮物優(yōu)選是用該植物或蔬菜的可食 用部分得到的。可食用部分是指人以生或熟的形式消耗的部分。
優(yōu)選的本發(fā)明的植物/蔬菜提取物和濃縮物包含來自植物種- 洋 蔥、火蔥、熊蔥、皺葉歐芽、甘藍(lán)或芝麻菜的任何成員的濃縮物或提 取物。更優(yōu)選的本發(fā)明的植物/蔬菜提取物和濃縮物包含來自植物種-
洋蔥、鈹葉歐芹(特另'J是尸"JT。5"eh'/7M7 Cn'5"/7W邁 Cm'邵W邁和尸"jraseh77〃57 cr/5/ 〃歷/7ea/ o7j^a/ 〃邁)和甘藍(lán)(特另'j是Biassica oleracea var. italica)的任何成員的提取物和濃縮物，特別是洋蔥 (爿i7jfw邁 ce/ a)、 意大利石蛇床(尸etro^e7/n咖 c"'s/ 咖 /7ea/7o/j't朋jf〃邁)或花莖甘藍(lán)Cfira5^.ca o7eracea rar. itah'cs)的提 取物和濃縮物。使用洋蔥提取物(特別是白皮洋蔥提取物)是尤為優(yōu) 選的。
上述植物或蔬菜的提取物和濃縮物可以是液體形式或固體形式， 諸如顆粒或粉末形式。
例如，合適的植物或蔬菜濃縮物可以通過將剛采摘的植物或蔬菜 或其根、果實(shí)或種子分別干燥或冷凍干燥，然后可選地將干燥后的材
料研磨或制粒；或者通過將剛采摘的植物或蔬菜或其根、果實(shí)或種子
分別壓榨，將液體部分集中在一起并可選地將其干燥而制得。優(yōu)選上 述植物或蔬菜濃縮物以固體形式，特別是以粉末形式使用。
得到上述植物或蔬菜的提取物的適當(dāng)方法是本領(lǐng)域中已知的。例
如，植物或蔬菜提取物可以通過以下方法得到將剛采摘的或干燥的 植物或蔬菜或其根、果實(shí)或種子分別用例如水、或用一種或多種食品 級溶劑、或用水和一種或多種食品級溶劑的混合物進(jìn)行提取。合適的 食品級溶劑包括丙烷、丁烷、乙酸丁酯、乙酸乙酯、乙醇、二氧化碳、 丙酮、 一氧化氮、甲醇和丙-2-醇，優(yōu)選乙醇和二氧化碳；乙醇是特別
優(yōu)選的食品級溶劑。經(jīng)過提取步驟后，可選地將液相濃縮或通過蒸發(fā) 干燥或冷凍干燥。剛采摘的或干燥的植物或蔬菜原料可以加入冷水或 優(yōu)選熱水和/或溶劑中，優(yōu)選加入水或水與一種或多種溶劑的混合物 中，經(jīng)過規(guī)定時(shí)間，該時(shí)間可以根據(jù)植物或蔬菜原料的種類或所用的 溶劑而在較寬的范圍內(nèi)變化，不過一般對于水提取來說，是例如1至
30分鐘，優(yōu)選2至15分鐘，最優(yōu)選5至10分鐘，對于乙醇/水提取 來說，是例如30至90分鐘，優(yōu)選60分鐘。對于水提取來說，溫度優(yōu) 選在85"C至95。C的范圍內(nèi)，對于醇/水提取來說，溫度優(yōu)選在55"至 65。C的范圍內(nèi)。對于二氧化碳提取來說，優(yōu)選在0至4(TC的溫度和超 臨界壓力(例如80-200巴)下進(jìn)行。經(jīng)過提取后，按照已知方法將液相分離并有利地濃縮或蒸發(fā)至干。為了得到濃提取物，上述提取步驟 可以聯(lián)合進(jìn)行兩次或多次。另外，也可以通過以下方法得到植物或蔬
菜提取物將剛采摘的或干燥的植物或蔬菜加入水中，然后該混合物 進(jìn)行水蒸汽蒸餾，收集餾出液并有利地將其濃縮或蒸發(fā)至干。
該提取物可以液體形式，特別是以含水液體形式使用，或者以固 體形式，特別是以顆?；蚍勰┬问绞褂?。如果該提取物是液體形式的， 例如，其固體含量為1至25%重量，優(yōu)選為2至20%重量，最優(yōu)選為 2至15%重量。
本發(fā)明植物/蔬菜提取物或濃縮物的使用量可以在寬范圍內(nèi)變化， 這取決于，特別是，預(yù)期的治療、欲治療的主體及其需要。因此，當(dāng) 欲治療的主體是成人時(shí)(一般體重為約60至75公斤)，用配制成能 每曰給予0.1-20g、優(yōu)選O. 2-15g、最優(yōu)選0. 4-10g蔥屬、石蛇床屬、 蕓苔屬和/或芝麻菜屬濃縮物或提取物(在沒有溶劑的基礎(chǔ)上)的組合 物，大多數(shù)能得到令人滿意的'對骨吸收的抑制作用。
本發(fā)明的另 一個(gè)目的是適當(dāng)?shù)陌鲜鲋参?蔬菜提取物或濃縮物 的營養(yǎng)組合物。其特征在于它們包含
(a) 選自以下成員的至少一種植物/蔬菜提取物或濃縮物蔥屬、 石蛇床屬、蕓莒屬和芝麻菜屬提取物和濃縮物，
(b) —種鉤源，和
(c) 選自以下成員的至少一種能量來源碳水化合物、脂肪和氮源， 以及可選;也
(d) 維生素D。
關(guān)于組分(a),適用上文中給出的有關(guān)蔥屬、石蛇床屬、蕓苔屬和 芝麻菜屬提取物和濃縮物的定義、優(yōu)選及用量。也有可能用兩種或多 種所迷植物/蔬菜提取物和濃縮物的混合物作為組分(a)。本發(fā)明的營 養(yǎng)組合物適當(dāng)?shù)匕?以重量百分?jǐn)?shù)計(jì))，例如，約0.1-40%、優(yōu)選 約3-25%、最優(yōu)選5-15。/。植物/蔬菜提取物或濃縮物組分(a)。
鈣源(b)可以包含任何生理學(xué)上可接受的含有鉀的無機(jī)或有機(jī)化合 物。實(shí)例有無機(jī)鈣鹽，例如氯化釣、磷酸釣、硫酸^5、氧化*、氫氧化釣或碳酸釣，或有機(jī)釣組分，象全脂或脫脂奶粉、蛋殼釣、酪蛋白
鈣、或有機(jī)酸的鈣鹽，諸如檸檬酸鈣、馬來酸45,或其混合物。優(yōu)選 使用有機(jī)^5化合物，特別是脫脂奶粉、蛋殼甸、酪蛋白釣或其混合物 作為鈣源(b)。鈣組分的用量可以在寬范圍內(nèi)變化。 一般說來，本發(fā)明 組合物包含一個(gè)單位劑量為約lOOmg-1000mg、優(yōu)選為200mg-700mg、 最優(yōu)選為300mg-600mg的鉤(以元素為基準(zhǔn))。
本發(fā)明的營養(yǎng)組合物適當(dāng)?shù)匕?以重量百分?jǐn)?shù)計(jì))，例如，約l 至60%、優(yōu)選約5至50%、最優(yōu)選為10至40%鉤組分(1>)。
合適的碳水化合物源包括，例如，麥芽糖糊精、淀粉、乳糖、葡 萄糖、蔗糖、果糖、木糖醇和/或山梨糖醇。這些形式的碳水化合物即 是能量供應(yīng)者又是甜味劑。本發(fā)明組合物可以含有 一種或多種不同的 碳水化合物源。
合適的脂肪源包括 -6多不飽和脂肪酸源、 -3多不飽和脂肪酸 源、單不飽和脂肪酸源、中鏈脂肪酸源(即C6-(:12脂肪酸)；或其混 合物。在每種情況下，上述脂肪酸可以游離酸的形式，以一、二或特 別是以甘油三酸酯的形式，或以藥理學(xué)上或營養(yǎng)上可接受的天然來源 的形式使用。
合適的co-6多不飽和脂肪酸的天然來源包括植物油，諸如紅花油、 向日葵油、豆油、棉油和玉米油。合適的 -3多不飽和脂肪酸的天然 來源包括亞麻子油和魚油，諸如緋油、鮭魚油、鯖魚油、金槍魚油、 鱈魚肝油和鱭魚油。
合適的單不飽和脂肪酸源的天然來源特別是①-9單不飽和脂肪酸， 例如橄欖、低芥酸菜子(canola)、紅花(雜種)和向日葵(雜種)。
優(yōu)選的脂肪源包含能提供預(yù)期量的(D-6多不飽和脂肪酸和 -3多 不飽和脂肪酸的甘油三酸酯油，以及富含中鏈脂肪酸殘基(即C6-C12 脂肪酸殘基)和/或單不飽和脂肪酸殘基的甘油三酸酯油。本發(fā)明組合 物可以含有一種或多種不同的脂肪源。
本發(fā)明營養(yǎng)組合物的合適的氮源的實(shí)例包括含有營養(yǎng)上可接受的 蛋白質(zhì)的來源，諸如大豆蛋白；乳蛋白，如乳清蛋白或酪蛋白酸鹽；和/或蛋白水解物；和/或游離氨基酸形式或鹽形式的必需氨基酸混合 物；和/或與多元胺的合成有關(guān)的化合物，諸如精氨酸、精氨酸前體、 鳥氨酸等，為游離氨基酸的形式或鹽的形式。 優(yōu)選的該營養(yǎng)組合物的氮源是
(i) 大豆蛋白，它可以大豆的形式、或以任何適當(dāng)?shù)拇蠖固崛∥?或濃縮物的形式使用，例如以豆粉、干豆芽、豆奶的形式，或制成大 豆的干燥水提取物；或
(ii) 乳蛋白，例如乳清蛋白或酪蛋白酸鹽，例如，它可以乳清粉 的形式、諸如酪蛋白釣等酪蛋白酸鹽的形式、和/或以全脂或優(yōu)選脫脂 奶粉的形式使用，和/或
(ii i)必需氨基酸的混合物和/或 (iv)作為氮源的精氨酸。
乳蛋白，諸如乳清粉、酪蛋白酸鹽，特別是酪蛋白鈣、和/或脫脂 奶粉，是該請求保護(hù)的營養(yǎng)組合物的特別優(yōu)選的氮源。本發(fā)明組合物 可以含有一種或多種不同的氮源。
該營養(yǎng)組合物包含(以重量百分?jǐn)?shù)計(jì))，例如，約0.1%-98.9%、 優(yōu)選約1-約95%、最優(yōu)選為10-9096能量來源組分(c)。
氮源、碳水化合物源和脂肪源對本發(fā)明營養(yǎng)組合物的熱量的貢獻(xiàn) 可以在寬范圍內(nèi)變化。例如，碳水化合物源提供該組合物總能量供給 的30%至70%,氮源提供5%至45%,而脂肪源提供O. 1%至15%。 在本發(fā)明的優(yōu)選組合物中，碳水化合物源提供該組合物總能量供給的 40%至60%,氮源提供20%至35%,脂肪源提供3%至12%。還可 以是，碳水化合物源提供該組合物總能量供給的30%至70%,氮源提 供5%至40%,脂肪源提供O. 01%至5%。
本發(fā)明組合物的優(yōu)選能量來源包括
總能量供給的30%至70%由選自以下成員的一種或多種碳水化合 物源提供麥芽糖糊精、淀粉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、木糖醇 和山梨糖醇；
總能量供給的5%至45%由選自以下成員的一種或多種氮源提供 大豆蛋白、乳蛋白、必需氨基酸的混合物和精氨酸，和
總能量供給的0.1%至15%由包含(0-3和 -6多不飽和脂肪酸的一種或多種脂肪源提供。
本發(fā)明組合物的特別優(yōu)選的能量來源包括
總能量供給的40%至60%由選自以下成員的一種或多種碳水化合 物源提供麥芽糖糊精、淀粉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、木糖醇 和山梨糖醇；
總能量供給的20%至35%由選自以下成員的一種或多種氮源提 供大豆蛋白、脫脂奶粉和酪蛋白酸鹽；和
總能量供給的3%至12%由包含(0_3和 -6多不飽和脂肪酸的一 種或多種脂肪源提供。
維生素D (可選組分(d))的用量可以在寬范圍內(nèi)變化。 一般說來， 本發(fā)明組合物一個(gè)單位劑量包含，為約400 IU至1000 IU,優(yōu)選為約 500 IU。
本發(fā)明的營養(yǎng)制劑可以包含營養(yǎng)上可接受的其他成分，諸如維生 素、礦物質(zhì)、痕量元素、纖維(優(yōu)選可溶性纖維)、調(diào)味劑、防腐劑、 著色劑、甜味劑、乳化劑等等。
適于加入本發(fā)明組合物的維生素的實(shí)例包括藥學(xué)或營養(yǎng)上可接受 形式的維生素A、維生素D、維生素E、維生素K、維生素C、葉酸、 維生素Bl、維生素B2、維生素B6、維生素B12、煙酸、維生素H和泛 酸(panthotenic acid)。
適于加入本發(fā)明組合物的礦物元素和痕量元素的實(shí)例包括藥學(xué)或 營養(yǎng)上可接受形式的鈉、鉀、磷、鎂、銅、鋅、鐵、硒、鉻和鉬。
本文中所用的術(shù)語"可溶性纖維"是指能基本上在結(jié)腸中經(jīng)過發(fā) 酵生成短鏈脂肪酸的纖維。合適的可溶性纖維的實(shí)例包括瓊脂、藻酸 鹽、卡如賓(carubin)、角叉菜膠、阿拉伯膠、瓜爾膠、刺梧桐膠、 槐樹豆膠、果膠、西黃蓍膠、或黃原膠。它們可以是已水解的，也可 以是未水解的。
合適的調(diào)味劑包括天然或人造調(diào)味劑，例如水果調(diào)味劑，如香蕉、 柑橘、挑子、鳳梨或覆盆子(rasberry);蔬菜調(diào)味劑；或香草、可 可、巧克力、咖啡等等。本發(fā)明營養(yǎng)組合物除了組分(a)、 (b)、 (c)和(d)以外的優(yōu)選成分 包括藥學(xué)或營養(yǎng)上可接受形式的P-胡蘿卜素(維生素A)、維生素E、 維生素C、硫胺、維生素Bp Be和/或B^、鉀、鎂、硒、鋅、磷和可溶 性纖維。
該營養(yǎng)組合物可以包含(以重量百分?jǐn)?shù)計(jì))，例如，約從0.196至 15%、優(yōu)選約從O. 2%至10%、最優(yōu)選從O. 5%至5%的、除組分(a)、 (b)、 (c)和可選的(d)以外的這些附加組分。
本發(fā)明的營養(yǎng)制劑可以任何適于腸內(nèi)給藥、例如口服給藥，或管 銅、例如鼻內(nèi)給藥的形式配制和給藥。該制劑可方便地以含水液體的 形式給藥。因此，適于腸內(nèi)應(yīng)用的制劑優(yōu)選為含水形式或粉末或顆粒 形式，該粉末或顆?？稍谑褂们胺奖愕丶尤胨?。為了用于管飼，加 入的水的量將尤其取決于患者的流體需要和病情。
本發(fā)明的營養(yǎng)組合物可以是全營養(yǎng)配方飲食的形式(液體或粉末 形式)，這樣，當(dāng)它作為唯一的營養(yǎng)源時(shí)，本質(zhì)上應(yīng)含有所有日常所 需的熱量、氮、脂肪酸、維生素、礦物質(zhì)和衡量元素。 一般而言，應(yīng) 提供給成人的日常量范圍是750至3500千卡/天，特別是1000至加00 千卡/天。不過，本發(fā)明的營養(yǎng)組合物優(yōu)選用作食品增補(bǔ)劑。由增補(bǔ)劑 提供的能量不應(yīng)太過量，以免不必要地抑制患者的食欲。該增補(bǔ)劑可 方便地包含能量來源，其量可提供50至1500千卡/天、優(yōu)選100至900 千卡/天、最優(yōu)選150至700千卡/天的能量。
本發(fā)明的營養(yǎng)組合物，無論是液體形式的，例如飲料形式的，或 優(yōu)選為固體形式的，例如顆?；蚍勰┬问降模伎梢杂帽旧硪阎姆?式獲得，例如，通過將各成分混合并可選地加入水中。
本發(fā)明還涉及單劑量單位形式的藥物組合物，它包含
(a) 選自以下成員的至少一種植物/蔬菜提取物或濃縮物蔥屬、 石蛇床屬、蕓苔屬和芝麻菜屬提取物和濃縮物，和
(b) 藥學(xué)上可接受的載體。
這些藥物組合物是用于腸內(nèi)給藥，例如口服、鼻內(nèi)或直腸給藥的 組合物。合適的藥物組合物可以是液體形式，或優(yōu)選為固體形式，其包含(以重量百分?jǐn)?shù)計(jì))，例如，約0. 001%至100%、優(yōu)選約0. 1%至50% 的活性成分(a)。
活性成分(a)是選自以下成員的一種植物/蔬菜提取物或濃縮物 蔥屬、石蛇床屬、蕓苔屬和芝麻菜屬提取物和濃縮物，其中適用上文 所給出的定義和優(yōu)選。(a)也可能是兩種或多種所述植物/蔬菜提取物 和濃縮物的混合物。
用于腸內(nèi)給藥的藥物組合物是，例如，單劑量單位形式的那些， 諸如糖衣丸劑、片劑、膠嚢劑或扁嚢劑。它們是用本身已知的方式制 備的，例如，利用常規(guī)的混合、制粒、成型、溶解或冷凍干燥方法。
例如，用于口服的藥物組合物可以用下述方法制得用固體載體 將活性成分結(jié)合在一起，可選地將所得混合物制粒，如果希望或需要， 加入合適的賦形劑將該混合物或顆粒加工成片劑或糖衣丸芯。
合適的載體尤其是填充劑，諸如糖，如乳糖、蔗糖、甘露糖醇或 山梨糖醇，纖維素制劑和/或磷酸鈣鹽，如磷酸三鈣或磷酸氫鈣，以及 粘合劑，諸如用例如玉蜀黍、小麥、米或馬鈴薯淀粉制成的淀粉糊， 明膠，西黃蓍膠，甲基纖維素和/或聚乙烯吡咯烷酮，如果需要，還可 有崩解劑，如上面所提到的淀粉，以及羧甲基淀粉，交聯(lián)聚乙烯吡咯 烷酮，瓊脂，或海藻酸或其鹽，如藻酸鈉。賦形劑尤其是流動(dòng)調(diào)節(jié)劑 和潤滑劑，例如硅酸、滑石、硬脂酸或其鹽，如硬脂酸鎂或硬脂酸鉤， 和/或聚乙二醇。糖衣丸芯包覆合適的、可選的腸溶衣，特別是用濃糖 溶液包衣，該溶液可含有阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二 醇和/或二氧化鈦，或用合適的有機(jī)溶劑或溶劑混合物制成的包衣溶液 包衣，或者，為了制備腸溶衣，用合適的纖維素制劑，如乙酸纖維素 鄰笨二甲酸酯或羥丙甲基纖維素鄰苯二甲酸酯的溶液包衣。片劑或糖 衣丸包衣中可以加入染料或顏料，例如為了鑒別的目的或?yàn)榱酥甘静?同劑量的活性成分。
其他可口服給藥的藥物組合物是硬明膠膠嚢和由明膠和增塑劑組 成的密封軟膠嚢，增塑劑如甘油或山梨糖醇。硬明膠膠嚢可以包含顆 粒形式的活性成分，例如與諸如乳糖等填充劑混合，與諸如淀粉等粘合劑混合，和/或與諸如滑石或硬脂酸鎂等潤滑劑混合，以及如果需要， 與穩(wěn)定劑混合。在軟膠嚢中，活性成分優(yōu)選溶解或懸浮于適當(dāng)?shù)囊后w 中，如脂肪油、石蠟油或液態(tài)聚乙二醇，同樣也可能加入穩(wěn)定劑。
合適的可直腸給藥的藥物組合物是，例如，由活性成分與栓劑基 質(zhì)的混合物組成的栓劑。合適的栓劑基質(zhì)是，例如，天然或合成甘油 三酸酯、石蠟烴、聚乙二醇或更高級的鏈烷醇。也有可能使用包含活 性成分與基質(zhì)的混合物的明膠直腸膠嚢。合適的基質(zhì)是，例如，液態(tài) 甘油三酸酯、聚乙二醇或石蠟烴。
本發(fā)明植物或蔬菜提取物和濃縮物對骨吸收的抑制作用可以通過
測量慢性預(yù)標(biāo)記大鼠的[3H]-四環(huán)素的尿排泄來評定，如R.C. Miihlbauer和H. Fleisch在《美國生理學(xué)雜志》，，R679-R689(1990) 中描述的。該方法基于以下特征(i)3H-標(biāo)記的四環(huán)素在它們的形成 過程中沉積于硬組織上；和(ii)當(dāng)骨被吸收時(shí)，[3扣-四環(huán)素被釋放， 其在血液中循環(huán)并排泄到尿中，此時(shí)可通過對3H計(jì)數(shù)對其進(jìn)行評定。 這有可能是因?yàn)榻?jīng)歷骨循環(huán)的[SH]-四環(huán)素是與羥磷灰石不充分結(jié)合的 形式，因此，卩H]-四環(huán)素一旦從骨中釋放出來，在骨更新過程中只能 很少被再利用，以及有效的腎排泄的原因。該方法可如下進(jìn)行從出 生后不久直至約六周齡的大鼠，每周兩次，皮下注射體積逐漸升高的 含有PH]-四環(huán)素的溶液。約50天大時(shí)，將這些動(dòng)物轉(zhuǎn)移到單獨(dú)的代 謝籠中，每只大鼠供給相同量的標(biāo)準(zhǔn)化飲食，持續(xù)約3周。之后，一 組大鼠供給純食物，另 一組大鼠供給還含有一定量的本發(fā)明植物或蔬 菜濃縮物或提取物的純食物。在實(shí)驗(yàn)過程中，動(dòng)物可自由飲用軟化水。 當(dāng)這些大鼠約60天大時(shí)，開始每天收集24小時(shí)的尿液，并通過液體 閃爍計(jì)數(shù)測定尿中的M含量，然后制圖，其中兩組大鼠的尿中的[ ]-四環(huán)素含量作為時(shí)間(天)的函數(shù)。
適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)顯示，本發(fā)明的植物或蔬菜提取物和濃縮物能顯著降 低整體雄性大鼠和去除生殖腺的雌性大鼠的尿中蓄積的PH]-四環(huán)素排 泄物，這表明了對骨吸收的高度抑制作用。因此，本發(fā)明請求保護(hù)的 營養(yǎng)和藥物組合物可用于治療及預(yù)防各種以骨吸收增加為特征的疾病或狀態(tài)，諸如佩吉特氏病、腫瘤誘導(dǎo)的骨疾病、或特別是骨質(zhì)疏松癥。
該植物或蔬菜提取物或濃縮物對骨吸收的抑制作用還可以通過體
外試驗(yàn)(在實(shí)施例3中描述)來評定，其中，在其上已固定了新分離
骨細(xì)胞的抑制作用。
在下列闡述本發(fā)明的實(shí)施例中，除非另有說明，否則％是重量百 分?jǐn)?shù)，所給溫度為攝氏溫度"C。
實(shí)施例1:
以下是一個(gè)粉末形式的、合適的本發(fā)明增補(bǔ)劑組合物的例子。
粉末形式的增補(bǔ)劑(l份)
含量 65. 0 g
本發(fā)明提取物/濃縮物" 14. 5 g 包括碳水化合物、蛋白質(zhì)和纖維
蛋白質(zhì) 20.0 g
包括-酪蛋白鉤蛋白 8.7 g
-脫脂奶粉 11.0 g
脂肪 2.8 g
包括-co-6多不飽和酸 1.3 g
-o-3多不飽和酸 0.03 g
碳水化合物(包括本發(fā)明提取物) 31. 0 g
包括_乳糖 16. 5 g
-麥芽糖糊精 3.5 g
纖維(可溶的) 5.0 g
其他成分 3.0 g
包括-Na 230 mg
- K 500 mg
_ Ca 600 mg- Mg 90 mg
- P 430 mg
- CI 350 mg
- Zn 150 mg -視黃醇(維生素A) 0.3 mg
_麥角鈣化醇(維生素D) 5. 0 meg
-生育酚(維生素E) 3. 0 mg
-葉綠醌(維生素Kl) 30. 0 meg
-硫胺(維生素Bl) 0. 4 mg
_核黃素(維生素B2) 0. 5 mg
-吡多醇(維生素B6) 0. 8 mg
-氰鈷胺(維生素B12) 0. 8 meg
-抗壞血酸(維生素C) 20. 0 mg
-生物素 50. 0 meg
-葉酸 120. 0 meg
-煙酰胺 5. 0 mg
-泛酸 2. 0 mg
能量值 229 kcal
0 a)提取物1， 48. 3g干燥花椰菜用483ml蒸餾水在89土3t:下提取 10分鐘，然后將該提取物蒸發(fā)至干。
b) 提取物2， 48. 3g干燥的意大利歐芹用483ml蒸餾水在89±3°C 下提取10分鐘，然后將該提取物蒸發(fā)至干。
c) 提取物3， 26.4g干燥洋蔥用264ml蒸餾水在89土3。C下提取10 分鐘，然后將該提取物蒸發(fā)至干。
d) 提取物4, 58. 9g干燥洋蔥用589ml蒸餾水在89土3t:下提取10 分鐘，然后將該提取物蒸發(fā)至干，接著，該干燥水提物再用324ml 85% 乙醇/15%水在60。C下進(jìn)行二次提取1小時(shí)，將其冷卻至室溫并在-20 。C下放置過夜，潷去上清液，蒸除乙醇并將該提取物冷凍干燥。
e) 提取物5， 45. 3g干燥洋蔥用453ml 85%乙醇/15%水在6(TC下提取l小時(shí)，過濾，蒸除乙醇并將該提取物冷凍干燥。
f)濃縮物6，將新鮮的熊蔥干燥并將其研磨成細(xì)粉。
上述增補(bǔ)劑可以與水混合，并以適當(dāng)?shù)臐舛仍趦刹椭g服用。
實(shí)施例2:花椰菜、皺葉歐芽(dog-parsley)和洋蔥的水提取物對骨吸 收的作用
本發(fā)明的植物或蔬菜提取物和濃縮物對骨吸收的作用是基于 R. C.Miihlbauer和H. Fleisch在《美國生理學(xué)雜志》259， R679-R689 (1990)
中描述的方法。如上面所提到的參考文獻(xiàn)中所描述的那樣，利用從出 生到六周齡的、用[3H]-四環(huán)素預(yù)標(biāo)記的Wistar大鼠的尿中的3H排泄 物來監(jiān)測骨吸收。之后將這些大鼠關(guān)在單獨(dú)的代謝籠中，并用含有l(wèi).Og Ca、 0. 7gP、和80 IU維生素D3/100g食物的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)食物(Kliba331， Klingental邁lihle， Kaiseraugst， Switzerland)艱養(yǎng)10天。經(jīng)過該 適應(yīng)期后，所有大鼠供給含有1. Og Ca、 1. 2g P、和80 IU維生素D3/100g 干重的飲食。這是通過向基本低鈣、低磷飲食中加入適當(dāng)量的粉末形 式的葡萄糖酸鈣和中性磷酸鹽(Sodi 2134， Klingenthalmiihle， Kaiseraugst, Switzerland)而實(shí)現(xiàn)的，再"畏養(yǎng)10天，并在此過程中 收集尿樣。然后這些大鼠"成對喂養(yǎng)"，每天接受28g濕食物。 一組
(n二6)轉(zhuǎn)換為純食物("食物P" ， Sodi 2160， Klingenthalmiihle， Kaiseraugst, Switzerland,用水調(diào)濕，水含量為45±2%，含有1. Og Ca、 1.2g P、和80 IU維生素D3/100g干重)，第二組(n=5)每天給予還 含有300mg花椰菜提取物(相當(dāng)于l.Og干燥花椰菜用10ml蒸餾水在 89士3X:下提取10分鐘)的純食物，第三組(n二5 )每天給予還含有300mg 意大利歐芽提取物(相當(dāng)于l.Og干燥意大利歐芽用10ml蒸餾水在89±3 。C下提取10分鐘)的純食物，第四組(n=5)每天給予還含有550mg 洋蔥提取物(相當(dāng)于1. Og干燥洋蔥用10ml蒸鎦水在89士3X:下提取10 分鐘)的純食物。
經(jīng)過不采集尿樣的10天適應(yīng)期和采集尿樣的10天后，將這些大 鼠分配到不同的治療組中。利用基線24小時(shí)PH]-四環(huán)素排泄作為選擇標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)過仔細(xì)處理，每組得到了類似的起始均值。之后，這些大
鼠改為用含有或不含有本發(fā)明提取物的純食物喂養(yǎng)，并在14天內(nèi)，每 天采集24小時(shí)的尿樣，然后利用液體閃爍計(jì)數(shù)測定尿中的累積PH]-四環(huán)素排泄物。
經(jīng)過14天的治療后，每日分別食用花椰菜、意大利歐芽和洋蔥的 大鼠，累積骨吸收比相應(yīng)的對照組低9. 2%、 9. 5%和17. 5%(p〈0. 05)。
實(shí)施例3:熊蔥濃縮物對骨吸收的作用
使用與實(shí)施例2中描述的相同方法，只是治療只持續(xù)6天，且測 試組(n二5)給予還含有1 g熊蔥濃縮物(將新鮮的熊蔥干燥并研磨而 得到)的純食物。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，熊蔥對雄性大鼠的骨吸收的抑制為 13. 5%(p<0. 05)。
實(shí)施例4:洋蔥提取物對體外吸收的作用
洋蔥提取物對體外吸收的作用用破骨細(xì)胞介導(dǎo)的吸收來研究(如 Arnett TR, Spowage M， 1996，"通過輕微改變與生理學(xué)范圍接近的 胞外pH來調(diào)節(jié)大鼠破骨細(xì)胞的吸收活性"，《骨》18: 277-279)， 但進(jìn)行以下修正用牙質(zhì)切片代替骨薄片作為礦質(zhì)底物來評估破骨細(xì) 胞的吸收凹坑，經(jīng)過金斑標(biāo)記(gold spottering)后(Vitt6 C， Fleisch H， Guenther HL， 1996，"雙膦酸鹽誘導(dǎo)成骨細(xì)胞分泌破骨細(xì)胞介導(dǎo)的 吸收的抑制劑"，《內(nèi)分泌學(xué)》137:2324-2333)在切線照明下計(jì)數(shù)。 在該試驗(yàn)中，在48孔板的每一個(gè)孔中，在5%002/空氣氣氛和37。C下， 將一個(gè)其上已固定了新分離的破骨細(xì)胞的4x 4毫米牙質(zhì)切片用含有欲 測試提取物的25(HU培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時(shí)。每種劑量使用8個(gè)切片。破 骨細(xì)胞是從新生大鼠的股骨采集的，將軟骨端去除后，將其劈成兩半 并橫向割下來。此過程得到了一個(gè)富含其他細(xì)胞如成骨細(xì)胞的細(xì)胞懸 液。這允許在較寬條件下檢測作用效果，也就是說，對于對破骨細(xì)胞 的直接作用和由其他細(xì)胞如成骨細(xì)胞介導(dǎo)的對破骨細(xì)胞的間接作用這 兩種情況都能如此。洋蔥的細(xì)粉用蒸餾水(100g/l)在9(TC下提取10分鐘，過濾并 將濾液冷凍干燥，接著，該干燥水提物在6(TC下用85%乙醇/15%水進(jìn) 行二次提取l小時(shí)，冷卻至室溫，在-2(TC下放置過夜，使不需要的物 質(zhì)沉淀出來，潷析上清液，蒸除乙醇并將由此得到的殘余物冷凍干燥， 從而由每g干燥整洋蔥得到250mg凍干的洋蔥提取物。
該洋蔥提取物(0. 017mg、 0. 17mg、 1. 7mg洋蔥提取物/ml培養(yǎng)基) 以劑量依賴方式抑制了牙質(zhì)的由破骨細(xì)胞介導(dǎo)的吸收，同時(shí)，耐酒石 酸的堿性磷酸酶陽離子(TRAP+)多核細(xì)胞(MNC)沒有顯著減少。因此， 凹坑/TRAP+MNC的比值顯著降低(p<0.001)。由此可得出結(jié)論，存在 于這些培養(yǎng)物中的大量TRAP+MNC與洋蔥提取物的加入無關(guān)，這表明， 洋蔥提取物對于這些細(xì)胞是無毒的，而是僅抑制破骨細(xì)胞的活性。
權(quán)利要求
1. 芝麻菜植物在用于制備治療或預(yù)防以骨吸收增加為特征的疾病或狀態(tài)的藥物或營養(yǎng)制劑中的用途。
2. 芝麻菜提取物或濃縮物在用于制備治療或預(yù)防以骨吸收增加為特 征的疾病或狀態(tài)的藥物或營養(yǎng)制劑中的用途，所述提取物是用水或者是 水和乙醇的混合物提取得到的。
3. 按照權(quán)利要求1或2的用途，其中a菜提取物或濃縮物以固體 形式應(yīng)用。
4. 按照權(quán)利要求1或2的用途，其中該藥物或營養(yǎng)制劑配制成單位 劑量形式，它在無溶劑的基礎(chǔ)上，含有0. 1至20克芝麻菜提取物或濃縮 物。
5. 按照權(quán)利要求4的用途，其中所述藥物或營養(yǎng)制劑中進(jìn)一步包括花椰菜或意大利歐芽的提取物或濃縮物。
6. 按照權(quán)利要求1或2的用途，其中所述疾病為佩吉特氏病、腫瘤誘導(dǎo)的骨疾病或骨質(zhì)疏松癥。
7. 按照權(quán)利要求1或2的用途，其中所述疾病為骨質(zhì)疏松癥。
8. —種用于治療或預(yù)防以骨吸收增加為特征的疾病或狀態(tài)的營養(yǎng)組 合物，它包含(a) ^菜植物提取物或濃縮物，所述提取物是用水或者是水和乙醇 的混合物提取得到的，(b) —種^源，和(c) 選自以下成員的至少一種能量來源碳7JC化合物、脂肪和氮源， 以及可選地(d) 維生素D。
9，按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，其中鈣源(b)是有機(jī)鈣鹽。
10.按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，其中組分(c)中的碳水化合物源選自以下成員麥芽糖糊精、淀粉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、 木糖醇和山梨糖醇。
11. 按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，其中組分(c)中的脂肪源選 自以下成員co-6多不飽和脂肪酸源、co-3多不飽和脂肪酸源、單不飽 和脂肪酸源、C6-dJ旨肪酸源，及其混合物。
12. 按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，其中組分(c)中的氮源選自 以下成員中的一種或多種大豆蛋白，乳蛋白，蛋白水解物，必需#^ 酸的混合物，和精氨酸。
13. 按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，其中碳水化合物源提供了 該組合物總能量供給的30%至70%，氮源提供5%至45%,脂肪源提供0. 1% 至15%，且滿足各組分之和為100%。
14. 按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，它包含，以重量％計(jì)，3至 25^的組分(a)、 5至50。/。的組分(b)，和1至95°/。的組分(c),且滿足各組 分之和為100%。
15. 按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，它還包含，以重量%計(jì)，0.2 至10%的選自以下成員的營養(yǎng)上可接受的其他組分維生素、礦物質(zhì)、 痕量元素、纖維、調(diào)味劑、防腐劑、著色劑、餘朱劑和乳化劑。
16. 按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，它是具有50至1500千卡的單位劑量食品增補(bǔ)劑的形式。
17. 按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，它是液體形式。
18. 按照權(quán)利要求8所述的營養(yǎng)組合物，它是固體形式。
19. 按照權(quán)利要求18所述的營養(yǎng)組合物，它是顆?；蚍勰┬问健?br> 20. —種用于治療或預(yù)防以骨吸收增加為特征的疾病或狀態(tài)的單劑 量單位形式的藥物組合物，它包含(a) 芝麻菜提取物或濃縮物，所述提取物是用水或者是水和乙醇的混 合物提取得到的，和(b) 藥學(xué)上可接受的載體。
21. 按照權(quán)利要求20的藥物組合物，其中進(jìn)一步包括花椰菜或意大 利歐芽植物的提取物或濃縮物。
22. 按照權(quán)利要求20或21的藥物組合物，用于胃腸內(nèi)給藥，它是 糖衣丸劑、片劑、膠嚢劑、扁嚢劑或栓劑的形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及含有選自由蔥屬、蕓苔屬、石蛇床屬和芝麻菜屬提取物和濃縮物或其混合物構(gòu)成的組中的植物提取物或濃縮物的營養(yǎng)或藥物組合物。本發(fā)明的該組合物用于治療或預(yù)防諸如佩吉特氏病、腫瘤誘導(dǎo)的骨疾病，或特別是骨質(zhì)疏松癥等以骨吸收增加為特征的疾病或狀態(tài)。
文檔編號A01NGK101301329SQ20081010960
公開日2008年11月12日 申請日期1998年5月4日 優(yōu)先權(quán)日1997年5月6日
發(fā)明者羅曼·康拉德·米爾鮑爾 申請人:伯爾尼大學(xué)