專利名稱：一種含有固氮菌的微生物肥料的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種微生物肥料，屬于種植領域。
背景技術(shù)：
微生物肥料是以微生物的生命活動導致作物得到特定肥料效應的一種制品，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用肥料的一種。其在中國已有近50年的歷史。微生物肥料是活體肥料，它的作用主要靠它含有的大量有益微生物的生命活動來完成。只有當這些有益微生物的生命活動來完成。只有當這些有益微生物處于旺盛的繁殖和新陳代謝的情況下，物質(zhì)轉(zhuǎn)化和有益代謝產(chǎn)物才能不斷形成。因此，微生物肥料中有益微生物的種類、生命活動是否旺盛是其有效性的基礎，而不像其它肥料是以氮、磷、鉀等主要元素的形式和多少為基礎。正因為微生物肥料是活制劑，所以其肥效與活菌數(shù)量、強度及周圍環(huán)境條件密切相關，包括溫度、水分、酸堿度、營養(yǎng)條件及原生活在土壤中土著微生物排斥作用都有一定影響。隨著化肥的大量使用，其利用率不斷降低已是眾所周知的事實。這說明，僅靠大量增施化肥來提高作物產(chǎn)量是有限的，更何況還有污染環(huán)境等一系列的問題。為此各國科學家一直在努力探索提高化肥利用率達到平衡施肥、合理施肥以克服其弊端的途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有抗病能力的微生物肥料。為達到上述目的，本發(fā)明所述的肥料各種微生物菌種為
7 ^(photosynthetic bacteria)^ Ii fe it @ M ^(Azotobacter
chroococcum)、角軍憐巨大芽抱桿菌(Bacillus megatherium phosphaticum)禾口凍膠樣芽抱桿菌(Bacillus mecilaginosus)、放線菌(Actinomycete)禾口乳酸菌(Lactobacillus)； 所述的微生物肥料由上述微生物發(fā)酵液按下列體積百分比配制而成 1-15 2-10 5-9 1-8 :2_10 :3_8
優(yōu)選的，微生物發(fā)酵液體積比為:3-10 4-8 6-8 3-7 :4_8 :4_6 ； 進一步優(yōu)選的，微生物發(fā)酵液體積比為4 6 6 6 5 :5。所述的光合細菌選自沼澤紅假單胞菌ahodopseudomonas palustris)、加墨 Χ Iix Ifi lif (Rhodopseudomonas capsulatus ) δ < ^ Χ Iix Ifi lif (Rhodopseudomonas sphaeroides)中的任意一種或幾種。所述的放線菌優(yōu)選為諾卡氏菌屬(Nocardia)。所述的乳酸菌優(yōu)選為植物乳酸菌 (Lactobacillus plantarum)0微生物肥料的制備方法，包括分別將光合細菌、褐色球形固氮菌(Azotobacter chroococcum)、角軍憐巨大芽抱桿菌(Bacillus megatherium phosphaticum))禾口凍膠樣芽抱桿菌(Bacillus mecilaginosus)、放線菌和乳酸菌的母種接種于一級培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，獲得一級菌種；分別將上述一級菌種接種于二級培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，獲得二級菌種；分別將上述二級菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，獲得發(fā)酵菌液；將各發(fā)酵菌液按比例混勻即得。
褐色球形固氮菌
一級培養(yǎng)
蔗糖1. 5%，磷酸二氫鉀0. 05%,碳酸鈣0. 05%,硫酸鎂0. 05%,氯化鈉0. 02%,瓊脂3%。PH 7-7. 2，25-27 °C 培養(yǎng) 2-3 天。二級培養(yǎng)基
一級去掉瓊脂，25-27°C培養(yǎng)3-5天。三級培養(yǎng)基
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%醋酸鈉、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，余量為水。25-27°C培養(yǎng)3_5天。解磷巨大芽孢桿菌
一級培養(yǎng)
常規(guī)馬鈴薯加瓊脂培養(yǎng)基，25-27°C培養(yǎng)2-3天。二級培養(yǎng)
去掉瓊脂，25-27°C培養(yǎng)3-5天。三級培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%醋酸鈉、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，余量為水。25-27°C培養(yǎng)5-7天。凍膠樣芽孢桿菌
一級培養(yǎng)
蔗糖1. 5%，磷酸二氫鉀0. 05%,碳酸鈣0. 05%,硫酸鎂0. 05%,氯化鈉0. 02%,酵母膏 0. 05%，瓊脂3%，余量為水。25-27°C培養(yǎng)2-3天。二級培養(yǎng)
一級培養(yǎng)基去掉瓊脂，25-27°C培養(yǎng)3-5天。三級培養(yǎng)基
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%醋酸鈉、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉。調(diào)pH值，將二級培養(yǎng)菌種接種在種子罐中，25-27°C培養(yǎng)5-7天。光合細菌
一級培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%酵母膏、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，余量為水；
PH6 10，溫度^_35°C，光照強度3000-4000勒克斯，時間6-8天。二級培養(yǎng)
一級培養(yǎng)基加0. 1%檸檬酸鐵銨，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為 35°C，培養(yǎng)時間5-7天；
三級培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%醋酸鈉、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，余量為水；
將二級培養(yǎng)菌種接種種子罐，PH7、，溫度^_35°C，光照強度3000-4000勒克斯，時間 6-8天；之后再接種于發(fā)酵罐培養(yǎng)2-3天，培養(yǎng)條件同上。
放線菌
一級培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%酵母膏、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，調(diào)pH值，溫度28-32°C，時間5-7天。二級培養(yǎng)基去瓊脂
一級培養(yǎng)基加0.1%檸檬酸鐵銨，培養(yǎng)條件同一級培養(yǎng)。三級(發(fā)酵)培養(yǎng)基
葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氫鉀0. 01-0. 05%,氯化鈉0. 02-0. 05%,硫酸亞鐵 0. 001-0. 005%，余量為水。調(diào)PH值，將二級培養(yǎng)菌種接種在種子罐中，溫度^-32°c，時間 5-7 天。乳酸菌
一級培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%酵母膏、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，PH6 8，溫度^_32°C，時間2_5天。二級培養(yǎng)
一級培養(yǎng)基加0.1%檸檬酸鐵銨，培養(yǎng)條件同一級培養(yǎng)。三級培養(yǎng)
將二級培養(yǎng)菌種接種在種子罐中，溫度^_32°C，時間5-7天。培養(yǎng)基葡萄糖1_3%，酵母汁1_2%，磷酸二氫鉀0. 01-0. 05%,氯化鈉0. 02-0. 05%, 硫酸亞鐵0. 001-0. 005%，余量為水。本發(fā)明細菌培養(yǎng)未記載事項，均以現(xiàn)有技術(shù)的手段進行。本發(fā)明的發(fā)酵液中也可以加入吸附劑、賦形劑，低溫干燥，制成固體菌劑。本發(fā)明所述的微生物肥料，除具有固氮、解磷、提高育苗成活率、種子的發(fā)芽率外， 同時還能夠有效的預防病蟲害、提高植物的抗病能力。對棉花黃萎、黑根腐、炭疽病、赤霉病；玉米全蝕??；水稻白葉枯?。换ㄉ嗫莶。获R鈴薯軟腐??；黃瓜角斑；青椒瘡痂具有顯著的效果。試驗例
1、試驗方法和材料
觀察患有棉花黃萎、黑根腐、炭疽病、赤霉病；玉米全蝕病；水稻白葉枯??；花生青枯病；馬鈴薯軟腐??；黃瓜角斑；青椒瘡痂的植株各200株；實驗組試驗本發(fā)明實施例10制備的肥料，稀釋40倍噴灑15天；對照組使用多粘芽孢桿菌制劑。實驗組和對照組各100株， 觀察15天后治愈數(shù)(株)，結(jié)果如下
W I棉花黃萎I棉花S根腐丨棉花炭疽病丨棉花赤霉病丨玉米全燭病丨水稻S葉枯病丨花生青枯病丨馬鈴薯軟腐病丨黃瓜角斑丨青椒疫痂
對照組 64_OT_61_69_49_71_70_60_62_71_
實驗組 87_83_78_86_OT_95_93_79_89_91_
2、結(jié)論
本發(fā)明的肥料較多粘芽孢桿菌制劑對上述植物疾病具有良好的治療作用，可以用于防治上述疾病。
具體實施方式
實施例1
褐色球形固氮菌培養(yǎng)基 一級培養(yǎng)
蔗糖1. 5%，磷酸二氫鉀0. 05%,碳酸鈣0. 05%,硫酸鎂0. 05%,氯化鈉0. 02%,瓊脂3%。PH 7-7. 2，25-27 °C 培養(yǎng) 2-3 天。二級培養(yǎng)基
一級去掉瓊脂，25-27°C培養(yǎng)3-5天。三級培養(yǎng)基
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%醋酸鈉、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，余量為水。25-27°C培養(yǎng)3_5天。實施例2 凍膠樣芽孢桿菌
一級培養(yǎng)
蔗糖1. 5%，磷酸二氫鉀0. 05%,碳酸鈣0. 05%,硫酸鎂0. 05%,氯化鈉0. 02%,酵母膏 0. 05%，瓊脂3%，余量為水。25-27°C培養(yǎng)2-3天。二級培養(yǎng)
一級培養(yǎng)基去掉瓊脂，25-27°C培養(yǎng)3-5天。三級培養(yǎng)基
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%醋酸鈉、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉。調(diào)pH值，將二級培養(yǎng)菌種接種在種子罐中，25-27°C培養(yǎng)5-7天。實施例3
光合細菌
一級培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%酵母膏、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，余量為水；
PH6 10，溫度^_35°C，光照強度3000-4000勒克斯，時間6-8天。二級培養(yǎng)
一級培養(yǎng)基加0. 1%檸檬酸鐵銨，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為 35°C，培養(yǎng)時間5-7天；
三級培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%醋酸鈉、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，余量為水；
將二級培養(yǎng)菌種接種種子罐，PH7、，溫度^_35°C，光照強度3000-4000勒克斯，時間 6-8天；之后再接種于發(fā)酵罐培養(yǎng)2-3天，培養(yǎng)條件同上。實施例4 放線菌
一級培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%酵母膏、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，調(diào)pH值，溫度28-32°C，時間5-7天。
二級培養(yǎng)
一級培養(yǎng)基加0.1%檸檬酸鐵銨，培養(yǎng)條件同一級培養(yǎng)。三級培養(yǎng)基
葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氫鉀0. 01-0. 05%,氯化鈉0. 02-0. 05%,硫酸亞鐵 0. 001-0. 005%，余量為水。調(diào)PH值，將二級培養(yǎng)菌種接種在種子罐中，溫度^-32°c，時間 5-7 天。實施例5
乳酸菌
一級培養(yǎng)
培養(yǎng)基成分以質(zhì)量百分比計為0. 5%酵母膏、0. 5%蛋白胨、0. 05%氯化鈉、0. 05%磷酸氫二鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%碳酸鈉，PH6 8，溫度^_32°C，時間2_5天。二級培養(yǎng)
一級培養(yǎng)基加0.1%檸檬酸鐵銨，培養(yǎng)條件同一級培養(yǎng)。三級培養(yǎng)
將二級培養(yǎng)菌種接種在種子罐中，溫度^_32°C，時間5-7天。培養(yǎng)基葡萄糖1_3%，酵母汁1_2%，磷酸二氫鉀0. 01-0. 05%,氯化鈉0. 02-0. 05%, 硫酸亞鐵0. 001-0. 005%，余量為水。實施例6
將制備的細菌按照下列比例配制 上述微生物發(fā)酵液體積比為=1:2:5:1:2:3。實施例7
將制備的細菌按照下列比例配制 微生物發(fā)酵液體積比為15 10: 9 8 10:8 實施例8
將制備的細菌按照下列比例配制 微生物發(fā)酵液體積比為3 4 6 3 4 :4。實施例9
將制備的細菌按照下列比例配制
微生物發(fā)酵液體積比為10: 8 8 7 8 6。實施例10
將制備的細菌按照下列比例配制 微生物發(fā)酵液體積比為4 6 6 6 5 :5。
權(quán)利要求
1.一種微生物肥料，由下列體積百分比的微生物發(fā)酵液組成所述的微生物為光合細菌、褐色球形固氮菌、解磷巨大芽孢桿菌、凍膠樣芽孢桿菌、放線菌、乳酸菌；所述的微生物發(fā)酵液體積比為1-15 2-10 5-9 1-8 2-10 :3_8。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肥料，其特征在于，所述的微生物發(fā)酵液體積比為3-10 4-8 6-8 3-7 4-8 :4_6。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肥料，其特征在于，所述的微生物發(fā)酵液體積比為46 6 6 5 :5ο
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的肥料，其特征在于，所述的光合細菌選自沼澤紅假單胞菌、加墨紅假單胞菌或球形紅假單胞菌中的任意一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的肥料，其特征在于，所述的放線菌為諾卡氏菌屬。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種微生物肥料，由下列體積百分比的微生物發(fā)酵液組成所述的微生物為光合細菌、褐色球形固氮菌、解磷巨大芽孢桿菌、凍膠樣芽孢桿菌、放線菌、乳酸菌；所述的微生物發(fā)酵液體積比為1-152-105-91-82-103-8。本發(fā)明所述的微生物肥料，除具有固氮、解磷、提高育苗成活率、種子的發(fā)芽率外，同時還能夠有效的預防病蟲害、提高植物的抗病能力。
文檔編號C05F11/08GK102531716SQ20121000370
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月9日
發(fā)明者王明云, 羅明樹, 趙振元 申請人:信息產(chǎn)業(yè)電子第十一設計研究院科技工程股份有限公司