專利名稱：乙醇在厚殼貽貝幼蟲變態(tài)調(diào)控中的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及乙醇的新用途，具體地說，是乙醇在厚殼貽貝幼蟲變態(tài)調(diào)控中的用途。
背景技術：
厚殼貽貝(Jfytilus coruscus )，軟體動物門/雙殼綱，分布于我國的黃海、渤海和東海沿岸以及臺灣等地。厚殼貽貝用足絲附著在附養(yǎng)物上生活，利用鰓濾食。選食海水中的微小生物以及有機碎屑等。其繁殖季節(jié)一年兩次，是海產(chǎn)貝類中生長最快的種類之一。厚殼貽貝的發(fā)育階段包括受精卵、桑葚期、囊胚期、擔輪幼蟲、D形幼蟲、殼頂幼蟲、匍匐幼蟲等階段，在變成附著成體之前有一個浮游幼蟲階段，幼蟲附著在基質(zhì)上，變態(tài)后成為稚貝。目前的厚殼貽貝人工育苗過程中，幼蟲的附著變態(tài)率低于10%，同時厚殼貽貝幼蟲的附苗時間很長，一般需要2周。如此低的附著變態(tài)率和較長的幼蟲附苗時間嚴重制約了厚殼貽貝養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。因此為了改善水產(chǎn)養(yǎng)殖苗種生產(chǎn)技術，探索和控制厚殼貽貝浮游幼蟲的附著變態(tài)行為，尋找厚殼貽貝幼蟲變態(tài)的誘導劑，以提高幼蟲變態(tài)率對于節(jié)約厚殼貽貝養(yǎng)殖成本、促進厚殼貽貝養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展具有重要的實踐意義，同時也將有助于解析厚殼貽貝幼蟲的附著變態(tài)機制，并進一步指導海洋防污。目前已有人使用腎上腺素來提高厚殼貽貝浮游幼蟲的附著變態(tài)率，但是其成本高，不適用于大規(guī)模苗種生產(chǎn)。因此亟需一種經(jīng)濟實用、高效的厚殼貽貝幼蟲變態(tài)調(diào)控的誘導劑。乙醇(Ethanol)在常溫、常壓下是一種易燃、易揮發(fā)的無色透明液體，它的水溶液具有特殊的、令人愉快的 香味，并略帶刺激性。乙醇的用途很廣，可用乙醇來制造醋酸、飲料、香精、染料、燃料、消毒劑等。而目前關于乙醇與厚殼貽貝幼蟲變態(tài)調(diào)控的關系還未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術中的不足，提供一種乙醇的新用途。本發(fā)明的再一的目的是，提供一種提高厚殼貽貝幼蟲變態(tài)率或縮短厚殼貽貝育苗周期的方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術方案是:
乙醇在促進厚殼貽貝幼蟲變態(tài)和/或縮短厚殼貽貝幼蟲的附苗時間中的用途。為實現(xiàn)上述第二個目的，本發(fā)明采取的技術方案是:
一種提高厚殼貽貝幼蟲變態(tài)率或縮短厚殼貽貝育苗周期的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟:將厚殼貽貝幼蟲放入0.1-1 M乙醇溶液中暴露處理1-24 h，將處理后的厚殼貽貝幼蟲轉移至盛有海水的器皿中培育。所述的乙醇溶液的溶劑是海水，但不僅限于此，蒸餾水、自來水均可。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述的乙醇溶液濃度為0.1-0.75 M，暴露處理24 h ；優(yōu)選的，所述的乙醇溶液濃度為0.5 M0
作為本發(fā)明的另一種實施方式，所述的乙醇溶液濃度為I M，暴露處理I h。本發(fā)明優(yōu)點在于:
1、使用乙醇暴露方法發(fā)現(xiàn)乙醇可將厚殼貽貝幼蟲的變態(tài)率提高至45%，同時顯著縮短厚殼貽貝幼蟲的附苗時間，僅需3-4 d，因此乙醇可作為厚殼貽貝幼蟲變態(tài)的有效誘導物，并用于縮短育苗周期；
2、乙醇成本低，適用于厚殼貽貝苗種的大規(guī)模生產(chǎn)；
3、提供了使用乙醇作為誘導物提高厚殼貽貝變態(tài)率的具體操作方法，如提供了乙醇的合適劑量、處理時間和誘導時間，該條件下的誘導效率高、作用穩(wěn)定、獲得的稚貝規(guī)格一致，對于生產(chǎn)實踐具有重要的指導意義；
4、本發(fā)明還為解析厚殼貽貝幼蟲 的附著變態(tài)機制提供了參考。
具體實施例方式下面對本發(fā)明提供的具體實施方式
作詳細說明。實施例1 I實驗材料
厚殼貽貝性成熟個體采自于浙江嵊泗縣枸杞海域；乙醇試劑購自國藥化學試劑有
限公司。2實驗方法
2.1厚殼貽貝眼點幼蟲的培育
收集厚殼貽貝的性成熟個體，用工具將附著于厚殼貽貝體表的污泥、藤壺等刷去，并用海水漂洗干凈。陰干24 h后轉移至10 L盛有20°C過濾海水(GF/C:1.2 μ m, FSff:過濾海水)的聚碳酸酯容器中。成體開始釋放出精子和卵子，攪勻使其受精。將受精卵放置在18°C培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)2 d。2 d后，受精卵發(fā)育為D形面盤幼蟲，在盛有2 L過濾海水的燒杯中培育幼蟲，密度保持為5個/ml，18± I°C條件下每天投喂約2-5萬cells/ml等鞭金藻，每兩天全量換水一次，培養(yǎng)至眼點幼蟲供實驗用。2.2待試溶液的配制
配制乙醇母液，其中乙醇濃度為5 M，按照倍比稀釋法取母液調(diào)成測試溶液，包括七個濃度梯度:0.05 M、0.1 M、0.5 M、0.75 Μ、I Μ、1.1Μ、1.5 Μ。其中，乙醇母液的配制是直接將乙醇試劑溶于一定量的過濾海水中，調(diào)節(jié)PH至7.8-8.2。實驗所用的燒杯、玻璃棒、移液管以及培養(yǎng)皿均要求滅菌處理，母液和測試溶液均在實驗的當天進行配制。2.3測試乙醇對厚殼貽貝幼蟲變態(tài)率的影響
實驗采用28 d以上成熟眼點幼蟲成熟幼蟲(殼高> 218 μπι，殼長> 280 ym)0將20只幼蟲放入含有20 mL裝有待試溶液的玻璃培養(yǎng)皿(60 mm直徑X 15 mm高)。將幼蟲暴露于各種濃度的待測乙醇溶液中，暴露時間為0.5 h、l h、3 h、24 h、48h。再將幼蟲轉移至盛有海水的玻璃培養(yǎng)皿，黑暗條件，溫度17_20°C培育。實驗開始后24、48、72、96 h顯微鏡下觀察幼蟲的變態(tài)率、死亡率及其行為變化。幼蟲的變態(tài)通過新生貝殼生長來判斷(具體可參見常亞青《貝類增養(yǎng)殖學》——第三章貝類的繁殖和發(fā)育中的P55，中國農(nóng)業(yè)出版社，2007年第一版)。整個實驗過程中均在黑暗、溫度17-20°C的條件下操作。實驗設對照組，即以過濾海水替代待測乙醇溶液處理厚殼貽貝幼蟲，其他操作同上。以上每個處理重復3次。
3實驗結果
不同處理條件下96 h后的厚殼貽貝幼蟲的變態(tài)率統(tǒng)計結果如表I所示。表I不同處理條件下96 h后的厚殼貽貝幼蟲的變態(tài)率(
X)
權利要求
1.乙醇在促進厚殼貽貝幼蟲變態(tài)和/或縮短厚殼貽貝幼蟲的附苗時間中的用途。
2.一種提高厚殼貽貝幼蟲變態(tài)率或縮短厚殼貽貝育苗周期的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟:將厚殼貽貝幼蟲放入0.1-1 M乙醇溶液中暴露處理1-24 h，將處理后的厚殼貽貝幼蟲轉移至盛有海水的器皿中繼續(xù)培養(yǎng)。
3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的乙醇溶液的溶劑是海水。
4.根據(jù)權利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的乙醇溶液濃度為0.1-0.75 M，暴露處理24 h。
5.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于，所述的乙醇溶液濃度為0.5 M0
6.根據(jù)權利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的乙醇溶液濃度為IM，暴露處理I h。
全文摘要
本發(fā)明涉及乙醇在促進厚殼貽貝幼蟲變態(tài)和/或縮短厚殼貽貝幼蟲的附苗時間中的用途，還涉及一種提高厚殼貽貝幼蟲變態(tài)率或縮短厚殼貽貝育苗周期的方法，所述的方法是將厚殼貽貝幼蟲放入0.1-1M乙醇溶液中暴露處理1-24h，再轉移至盛有海水的器皿中培育。本發(fā)明證實乙醇可顯著提高厚殼貽貝幼蟲變態(tài)率并縮短其附苗時間，且乙醇成本低，因而在厚殼貽貝養(yǎng)殖業(yè)中具有廣闊的應用前景；本發(fā)明還提供了使用乙醇作為誘導物提高厚殼貽貝變態(tài)率時的合適劑量、處理時間和誘導時間，該條件下誘導效率高、作用穩(wěn)定、獲得的稚貝規(guī)格一致，為生產(chǎn)實踐提供了指導。
文檔編號A01K61/00GK103210856SQ201310106478
公開日2013年7月24日 申請日期2013年3月29日 優(yōu)先權日2013年3月29日
發(fā)明者楊金龍, 李樹恒, 梁簫, 李家樂 申請人:上海海洋大學