本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)，具體為一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法。

背景技術：

1、春蘭(cymbidium?goeringii)花香馥郁、葉子飄逸，對于中國人來說，蘭花有著極其特殊的意義和重要性，深受人民的喜愛。傳統(tǒng)春蘭雜交育種，需要通過實驗室無菌播種培養(yǎng)，并進行室外種植達到開花才能確定雜交后代形狀是否優(yōu)良，從授粉、出苗到開花、大規(guī)模種植至少需要10年的時間，具有研發(fā)周期長，投入高，產(chǎn)出低等缺陷，難以滿意快速轉變的市場需求。此外，現(xiàn)有誘導根狀莖開花存在花芽誘導率過低以及正?；蔬^低的問題。

技術實現(xiàn)思路

1、(一)解決的技術問題

2、針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供了一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法，直接促進春蘭試管苗根狀莖從營養(yǎng)生長轉入生殖生長階段，誘導成花，提前確定雜交后代形狀，大大縮短了傳統(tǒng)春蘭育種周期，提升花芽的誘導率和花率，解決了上述背景技術中提出的問題。

3、(二)技術方案

4、為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過以下技術方案予以實現(xiàn)：

5、根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法，包括以下步驟：

6、(1)無菌萌發(fā)獲取根狀莖：準備無菌的春蘭蒴果的種子均勻分散的接種于萌發(fā)培養(yǎng)基中封口，將接種后的萌發(fā)培養(yǎng)基移入培養(yǎng)室中培養(yǎng)，獲取0.5cm的根狀莖，所述萌發(fā)培養(yǎng)液為：1/2ms+0.5mg/l?6-ba+1.5mg/l?naa+1g/l活性碳+30g/l蔗糖，ph為5.5；

7、(2)根狀莖增殖：將步驟(1)獲得的根狀莖接種到增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲取2～8cm的健壯根狀莖，所述增殖培養(yǎng)基為：ms+1.5mg/l?6-ba+0.2mg/lnaa+蛋白胨+10％椰汁，ph為5.8；

8、(3)根狀莖花芽誘導：將步驟(2)獲得的健壯根狀莖接種到花芽誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)45天，使健壯根狀莖上生長明顯花苞，所述花芽誘導培養(yǎng)基為：ms+8mg/l?6-ba+0.02mg/lnaa+0.05mg/l?tdz+50g/l蔗糖+7.5g/l瓊脂+0.02g/l活性炭，ph為5.8；

9、(4)根狀莖成花培養(yǎng)：將步驟(3)中獲得的生長有花苞的根狀莖接種到成花培養(yǎng)基中，培養(yǎng)15～25天，形成完全形態(tài)的花，所述成花培養(yǎng)基為1/2ms+(1.5～3mg/l)6-ba+(0.1～0.5mg/l)naa+30g/l糖+5％椰汁，ph為5.5。

10、優(yōu)選的，所述步驟(1)、步驟(2)、步驟(3)和步驟(4)中的培養(yǎng)條件均為：溫度為24～26℃，光強為1500～2000lx，相對濕度為65～80％，每天光照16h。

11、優(yōu)選的，步驟(1)中，所述無菌的春蘭蒴果的種子的準備包括以下步驟：采用無菌水將春蘭蒴果洗凈，首先置于75％乙醇中靜置10s后用無菌水清洗3次，然后再置于0.1％次氯酸鈉中浸泡15～20min后用無菌水清洗3次，最后用0.1％次氯酸鈉中浸泡3～4min后用無菌水清洗3次。

12、優(yōu)選的，所述春蘭蒴果選自成熟未開裂前采收的春蘭蒴果。

13、(三)有益效果

14、本發(fā)明提供了一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法。具備以下有益效果：

15、(1)本方案提供的一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法，通過培養(yǎng)基中基液的調配，使春蘭根狀莖從營養(yǎng)生長直接過渡到生殖生長階段，自春蘭種子萌發(fā)到開花，只需可以在較短的時間內促使春蘭開花只需一年左右，能夠更快的評估蘭花的形狀，大大縮短了傳統(tǒng)春蘭的育種周期，提高育種效率。

16、(2)本方案提供的一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法，通過調配花芽誘導培養(yǎng)基中的naa和tdz的濃度，使春蘭試管苗根狀莖花芽誘導率提高至18％以上。

17、(3)本方案提供的一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法，通過調配成花培養(yǎng)基中6-ba和naa的濃度，使春蘭試管苗根狀莖的成花率提高至69％以上。

技術特征：

1.一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法，其特征在于：包括以下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法，其特征在于：所述步驟(1)、步驟(2)、步驟(3)和步驟(4)中的培養(yǎng)條件均為：溫度為24～26℃，光強為1500～2000lx，相對濕度為65～80％，每天光照16h。

3.根據(jù)權利要求1所述的一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法，其特征在于：步驟(1)中，采用無菌水將春蘭蒴果洗凈，首先置于75％乙醇中靜置10s后用無菌水清洗3次，然后再置于0.1％次氯酸鈉中浸泡15～20min后用無菌水清洗3次，最后用0.1％次氯酸鈉中浸泡3～4min后用無菌水清洗3次。

4.根據(jù)權利要求3所述的一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法，其特征在于：所述春蘭蒴果選自成熟未開裂前采收的春蘭蒴果。

技術總結
本發(fā)明提供一種誘導春蘭試管苗根狀莖開花的方法。屬于植物組織培養(yǎng)技術領域，具體步驟為：將種子取出接種于萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng)210天獲得根狀莖；再將根狀莖置于增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)成健壯根狀莖，然后再將健壯根狀莖接種到花芽誘導培養(yǎng)基中，誘導形成花苞，最后將花苞接種到成花培養(yǎng)基中，培養(yǎng)20天至花苞明顯彭大，形成完全形態(tài)的花。本發(fā)明采用的方法直接促進春蘭試管苗根狀莖從營養(yǎng)生長轉入生殖生長階段，誘導成花，提前確定雜交后代形狀，大大縮短了傳統(tǒng)春蘭育種周期，通過調控花芽誘導培養(yǎng)基和成花培養(yǎng)基中各組分的濃度，提升了花芽的誘導率和花率。

技術研發(fā)人員：智永祺,王森,王孫杰,趙虎,魏強,傅博,王麗麗
受保護的技術使用者：紹興市農(nóng)業(yè)科學研究院
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/10/21