本發(fā)明涉及植物培育,更具體地說,尤其涉及一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法。
背景技術(shù):
1、石斛屬植物是蘭科石斛屬植物的總稱,為多年附生草本植物,石斛屬植物也是商業(yè)化生產(chǎn)切花和盆栽最受歡迎的蘭花之一,具有很高的觀賞價值,其中40多種具有藥用價值,極具開發(fā)潛力,目前石斛市場需求與日俱增,其需求量已嚴重超過自然界的承載能力。
2、人工培育的石斛新品種“耀耀”石斛(dendrobium?gzslky?yaoyao),于2023年10月19日在英國皇家園藝學會注冊登錄并獲得了蘭花新品種登記證書,作為世界上唯一的、權(quán)威的蘭花新品種登錄機構(gòu),該機構(gòu)只登錄首次育成的蘭花屬間和種間雜交種,“耀耀”石斛是以鉤狀石斛為母本,重唇石斛為父本,進行人工雜交授粉并選育而成的全新石斛品種。
3、石斛屬的雜交育種由于受種子萌發(fā)條件的限制,發(fā)展較緩慢,自從蘭科植物無菌播種技術(shù)應(yīng)用后,石斛屬植物雜交育種得到了快速發(fā)展,但“耀耀”石斛屬于蘭科石斛屬植物的新品種,其組培快繁方法尚處于開發(fā)初期階段,“耀耀”石斛種子極其微小,采用其它石斛屬成熟的育苗方法,繁殖率低,甚至出現(xiàn)完全敗育的狀態(tài),而石斛的培育周期又長,僅雜交、育苗期動輒就要3~4年。
4、綜上,針對一種敗育率低,本技術(shù)采用人工雜交授粉并組培快繁方法,可實現(xiàn)批量工廠化育苗,為“耀耀”石斛快速走向市場、滿足人們需求提供先決條件。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明提供了一種石斛新品種“耀耀”石斛(dendrobium?gzslky?yaoyao)的組培快繁方法,以解決現(xiàn)有技術(shù)中“耀耀”石斛在自然狀態(tài)下繁殖困難,而采用其它石斛屬的成熟的育苗方法培育石斛品種“耀耀”,易出現(xiàn)極高敗育率,甚至出現(xiàn)完全敗育狀態(tài)的問題。
2、為達到上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
3、一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法,包括以下步驟:
4、a、人工雜交授粉:以鉤狀石斛為母本,重唇石斛為父本,選取生長健壯的父母本在開花時開展人工輔助授粉,授粉后120~150天,將發(fā)育至基本成熟而未開裂的果莢作為外植體;
5、b、無菌播種及原球莖萌發(fā):選取飽滿的果莢用酒精浸泡,置于升汞溶液中消毒,無菌水沖洗,用解剖刀切開果莢,用接種針將黃色粉末狀種子接種到盛有ms+自制營養(yǎng)包ⅰ的人工培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,培養(yǎng)30~50天,形成原球莖及芽混合體;
6、c、增殖分化培養(yǎng):為獲得更多的種苗,將芽和原球莖混合組織接種在1/2ms添加自制營養(yǎng)包ⅱ、6-芐氨基嘌呤(6-ba)、α-萘乙酸(naa)培養(yǎng)基上,經(jīng)70~90天培養(yǎng),長成叢生帶短根小苗;
7、d、壯苗生根:將長成的叢生植株用解剖刀和鑷子分開,接種到1/4ms添加α-萘乙酸(naa)的培養(yǎng)基上,經(jīng)55~65天培養(yǎng),直至長成高5~7厘米具4~6條根、3~4片葉的完整植株;
8、e、煉苗及移栽:當試管苗長至5~7厘米高時出瓶,出瓶前在溫室中的自然光照下煉苗(2~3天),后將其從玻璃瓶中取出,移入碎樹皮和火山石的混合(體積比1;1)基質(zhì)中;加強溫度、濕度、遮陰及通風管理,每年3~10月生長期間定期(10~15天)澆一次含氮、磷、鉀的復合肥,薄肥勤施。
9、優(yōu)選地,每年6月初鉤狀石斛及重唇石斛開花季節(jié),人工調(diào)節(jié)控制梳理父母本的開花狀況,母本鉤狀石斛花苞快張開時,噴灑一次濃度為1000ppm的乙烯利用于促進鉤狀石斛開花,同樣的處理方法促進父本重唇石斛開花,以鉤狀石斛開花為計時點開始計時,一周后取重唇石斛的團狀花粉進行人工輔助授粉。
10、優(yōu)選地,所述步驟b中酒精浸泡時優(yōu)選的酒精濃度為75%,浸泡時間為5min;所述升汞溶液優(yōu)選的升汞濃度為0.1%,浸泡10min;所述無菌水為蒸餾水,所述培養(yǎng)基為ms添加自制營養(yǎng)包ⅰ,所述自制營養(yǎng)包ⅰ含有5%蕓苔素內(nèi)酯。
11、優(yōu)選地,步驟c中,所述培養(yǎng)基為1/2ms添加6-芐氨基嘌呤(6-ba)濃度為0.1~2.0毫克/升、α-萘乙酸(naa)濃度為0.01~0.2毫克/升和自制營養(yǎng)包ⅱ,所述自制營養(yǎng)包ⅱ含有5%蕓苔素內(nèi)酯和5%植物活力素。
12、優(yōu)選地,步驟b中,無菌播種至萌發(fā)形成原球莖及芽混合體培養(yǎng)時間為45天時進行下一步驟。
13、優(yōu)選地,步驟c中,6-芐氨基嘌呤(6-ba)濃度為0.1~2.0毫克/升,α-萘乙酸(naa)濃度為0.01~0.2毫克/升,培養(yǎng)時間優(yōu)選為85天。
14、優(yōu)選地,步驟d中,叢生植株分開后接種到1/4ms添加α-萘乙酸(naa)濃度為0.1~0.5毫克/升的培養(yǎng)基上,優(yōu)選培育周期為65天。
15、優(yōu)選地,步驟e中,當試管苗長至5~7厘米時,出瓶前在溫室中的自然光照下煉苗3天,然后將其從玻璃瓶中取出,洗凈根部的培養(yǎng)基,移入碎樹皮和火山石為1:1的混合基質(zhì)中。溫室保持15~25℃的溫度、80%以上的濕度、70%的遮陰并通風,“耀耀”石斛即可正常生長,種苗的移栽成活率可達95%以上。通常10~15天澆一次氮:磷:鉀(n:p:k)的比例為14:16:15的復合肥,按1000倍稀釋,薄肥勤施,栽培中加強病蟲害管護措施。
1.一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法,其特征在于,包括以下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法,其特征在于:每年6月初鉤狀石斛及重唇石斛開花季節(jié),人工調(diào)節(jié)控制梳理父母本的開花狀況,母本鉤狀石斛花苞快張開時,噴灑一次濃度為1000ppm的乙烯利用于促進鉤狀石斛開花,同樣的處理方法促進父本重唇石斛開花,以鉤狀石斛開花為計時點開始計時,一周后取重唇石斛的團狀花粉進行人工輔助授粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法,其特征在于:所述步驟b中酒精浸泡時優(yōu)選的酒精濃度為75%,浸泡時間為5min;所述升汞溶液優(yōu)選的升汞濃度為0.1%,浸泡10min,所述無菌水為蒸餾水,所述培養(yǎng)基為ms添加自制營養(yǎng)包ⅰ,所述自制營養(yǎng)包ⅰ含有5%蕓苔素內(nèi)酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法,其特征在于:步驟c中,所述培養(yǎng)基為1/2ms添加6-芐氨基嘌呤(6-ba)濃度為0.1~2.0毫克/升,α-萘乙酸(naa)濃度為0.01~0.2毫克/升和自制營養(yǎng)包ⅱ,所述自制營養(yǎng)包ⅱ含有5%蕓苔素內(nèi)酯和5%植物活力素。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法,其特征在于:步驟b中,無菌播種至萌發(fā)形成原球莖及芽混合體培養(yǎng)時間為45天時進行下一步驟。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法,其特征在于:步驟c中,6-芐氨基嘌呤(6-ba)濃度為0.1~2.0毫克/升,α-萘乙酸(naa)濃度為0.01~0.2毫克/升,培養(yǎng)時間優(yōu)選為85天。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法,其特征在于:步驟d中,叢生植株分開后接種到1/4ms添加α-萘乙酸(naa)濃度為0.1~0.5毫克/升的培養(yǎng)基上,優(yōu)選培育周期為65天。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種石斛新品種“耀耀”石斛的組培快繁方法,其特征在于:步驟e中,當試管苗長至5~7厘米時,出瓶前在溫室中的自然光照下煉苗3天,然后將其從玻璃瓶中取出,洗凈根部的培養(yǎng)基,移入碎樹皮和火山石為1:1的混合基質(zhì)中。溫室保持15~25℃的溫度、80%以上的濕度、70%的遮陰并通風,“耀耀”石斛即可正常生長,種苗的移栽成活率可達95%以上。通常10~15天澆一次氮:磷:鉀(n:p:k)的比例為14:16:15的復合肥,按1000倍稀釋,薄肥勤施,栽培中加強病蟲害管護措施。