專利名稱：大蒜胚性愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于大蒜組織培養(yǎng)技術(shù)，特別是大蒜胚性愈傷組織高效誘導(dǎo)的培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
植物受創(chuàng)傷后，在傷面新生的組織稱為愈傷組織。植物組織培養(yǎng)中誘導(dǎo)外植體細(xì)胞分裂形成的愈傷組織，大都不是損傷的結(jié)果，而是利用外源的植物激素類物質(zhì)誘導(dǎo)細(xì)胞開始分裂形成的，常用的有生長素類物質(zhì)如2，4-二氯苯氧乙酸、萘乙酸、吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素如6-芐基嘌呤等。生長素和細(xì)胞分裂素按一定濃度和比例配合使用，易于誘導(dǎo)出愈傷組織。愈傷組織一般分為兩類，一類是疏松愈傷組織(非胚性愈傷組織)，一類是胚性愈傷組織。只有胚性愈傷組織在適宜的條件下，才可以繼續(xù)再分化，形成胚狀體，進(jìn)而形成芽、根，再生出完整植株。目前大蒜莖尖組織培養(yǎng)中胚性愈傷組織誘導(dǎo)率偏低，一般在32％以下。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服大蒜莖尖組織培養(yǎng)中胚性愈傷組織誘導(dǎo)率低的問題，提供一種大蒜莖尖組織培養(yǎng)中胚性愈傷組織高效誘導(dǎo)的培養(yǎng)基，用于大蒜的科研和生產(chǎn)。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下該大蒜胚性愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基是將6-芐基嘌呤6-BA、2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、水解酪蛋白CH、蔗糖、瓊脂溶解于基本培養(yǎng)基MS中而成的，其各組份的用量為以1L基本培養(yǎng)基MS加入量計(jì)MS 1L6-BA1.0-2.0mg2，4-D 0.05-0.5mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g優(yōu)選為
MS 1L6-BA 1.0mg2，4-D 0.5mgCH 200mg蔗糖 20g瓊脂 6g上述原料中，MS為基本培養(yǎng)基，提供培養(yǎng)組織生長發(fā)育所需的無機(jī)營養(yǎng)和部分有機(jī)營養(yǎng)元素；6-芐基嘌呤6-BA和2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D是植物生長調(diào)節(jié)劑，具有促進(jìn)培養(yǎng)組織形成胚性愈傷組織的作用；、水解酪蛋白CH提供有機(jī)多肽類營養(yǎng)元素；蔗糖提供培養(yǎng)組織生長發(fā)育所的碳素營養(yǎng)；瓊脂主要作用是固化培養(yǎng)基，起支撐作用。
上述各組份的用量是發(fā)明人在理論分析的基礎(chǔ)上進(jìn)行大量試驗(yàn)摸索總結(jié)得出的，按上述比例配制培養(yǎng)基，具有較好誘導(dǎo)效果。
上述培養(yǎng)基的制作方法是將6-BA、2，4-D、CH、蔗糖、瓊脂溶解于MS，攪拌均勻，PH值調(diào)整為5.8-6.0之間即可。
本發(fā)明的積極效果是利用本培養(yǎng)基大蒜莖尖組織培養(yǎng)中胚性愈傷組織的誘導(dǎo)率均大于34％，并可達(dá)到82％左右。
具體實(shí)施例方式
以下通過實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明的有益效果實(shí)施例1培養(yǎng)基配方MS 1L6-BA1.0mg2，4-D 0.05mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g實(shí)施例2培養(yǎng)基配方
MS 1L6-BA1.0mg2，4-D 0.5mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g實(shí)施例3培養(yǎng)基配方MS 1L6-BA2.0mg2，4-D 0.5mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g試驗(yàn)方法及結(jié)果將上述實(shí)施例的培養(yǎng)基用于大蒜胚性愈傷組織誘導(dǎo)試驗(yàn)材料大蒜徐州白蒜鱗莖上約0.1mm長的莖尖分生組織。
方法在體視顯微鏡下剝?nèi)〈笏馇o尖分生組織放入培養(yǎng)基上，莖尖分生組織與培養(yǎng)基要結(jié)合緊密，每試管接種1個(gè)莖尖分生組織，置于25℃、光強(qiáng)約2000Lux、每日光照12小時(shí)，培養(yǎng)4周后統(tǒng)計(jì)結(jié)果見下表大蒜胚性愈傷組織誘導(dǎo)率(4周) 由表中結(jié)果分析得出如下結(jié)論實(shí)施例3中培養(yǎng)基所誘導(dǎo)出的愈傷組織中胚性愈傷組織只有34.0％，約65％為非胚性愈傷組織；實(shí)施例1中的培養(yǎng)基所誘導(dǎo)出非胚性愈傷組織占29.1％、胚性愈傷組織占65.5％；實(shí)例2中培養(yǎng)基所誘導(dǎo)出的愈傷組織胚性愈傷組織誘導(dǎo)率為81.5％。
綜合以上分析，得出大蒜莖尖培養(yǎng)胚性愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS 1L6-BA1.0mg2，4-D 0.5mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g。
權(quán)利要求
1.一種大蒜胚性愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基，其特征在于，它是將將6-芐基嘌呤6-BA、2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、水解酪蛋白CH、蔗糖和瓊脂溶解于基本培養(yǎng)基MS中制成，其各組份的用量為以1L基本培養(yǎng)基MS加入量計(jì)MS1L6-BA 1.0-2.0mg2，4-D0.05-0.5mgCH200mg蔗糖 20g瓊脂 6g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征是，各組份的用量為MS1L6-BA 1.0mg2，4-D0.5mgCH200mg蔗糖 20g瓊脂 6g。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種大蒜胚性愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基。它是將6－芐基嘌呤6－BA、2，4－二氯苯氧乙酸2，4－D、水解酪蛋白CH、蔗糖和瓊脂溶解于基本培養(yǎng)基MS中制成，利用本發(fā)明大蒜莖尖組織培養(yǎng)中胚性愈傷組織的誘導(dǎo)率可達(dá)82％，可應(yīng)用于大蒜的工廠化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C12N5/04GK1857065SQ20061008591
公開日2006年11月8日 申請(qǐng)日期2006年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月26日
發(fā)明者張?jiān)蕜?申請(qǐng)人:江蘇徐淮地區(qū)徐州農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所