專利名稱:南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于從植物中提取活性成分技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及南方紅 豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝。
技術(shù)背景紫杉醇具有良好的抗癌活性,尤其對晚期、轉(zhuǎn)移性卵巢癌、乳 腺癌、肺癌有十分顯著的療效,對宮頸癌、食管癌、胃癌、膀胱癌、 惡性黑色素瘤、惡性淋巴瘤亦有療效。目前提取紅豆杉紫杉醇的技 術(shù)主要有化學(xué)法(包括溶劑浸泡、酸降解、堿降解等方法。這類方 法的缺點是往往導(dǎo)致有效成分變性,產(chǎn)品中的有害殘留較高且難以 去除)、物理法(使用低溫、冷凍(脆化)、超聲波、微波等物理作 用破壞靈芝孢子壁,缺點是有效物質(zhì)很難提取充分,且設(shè)備昂貴)、 機械法(通過碾壓、擠壓、噴射粉碎、氣流粉碎、撞擊等機械作用 破壞細胞壁,缺點同物理法一樣,但設(shè)備造價較低)。由于紅豆杉細胞組織中具有一層堅硬的細胞壁外殼,且紫杉醇 通常狀態(tài)下表現(xiàn)為脂溶性物質(zhì),因此釆用常規(guī)方法難以使植物細胞 充分破壁,且必須使用有機溶劑,普遍存在提取時間長、收率低、 產(chǎn)品含有機物殘留。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提 取工藝,該方法對紫杉醇提取充分、提取效率高、工藝簡單、成本 低、無環(huán)境污染。本發(fā)明的提取方法特征是以南方紅豆杉枝葉為原料,以類酵母菌的D426為酶解微生物,在32-36。C條件下進行酶解,再經(jīng)過瞬間 冷凍、高速分離、噴霧干燥,得到高含量紫杉醇。上述酶解過程中的酶解微生物是以其活性菌體粉加入的,其制 備方法為將類酵母菌的D426置于菌種培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)菌種,菌種 培養(yǎng)基為肉湯瓊脂,而后由石臘油封存,3個月后再移植封存,加 大培養(yǎng)基溶液,使其擴群,然后取其浮生藻凍干成活性菌體粉。本發(fā)明通過選用特定的微生物菌株對紅豆杉進行酶解,使植物 細胞充分破壁,并對其分子結(jié)構(gòu)中的憎水基進行有效的包容,在不 改變其他官能團的前提下,使其具有親水性質(zhì),因而能夠以水為溶 劑在酶解后直接進行提取,解決了分子破壁和憎水性的技術(shù)難題。 與現(xiàn)有技術(shù)相比, 一級提取率高達96%、無有機溶劑殘留、無環(huán)境 污染。
具體實施方式
實施例1稱取清洗后紅豆杉的枝葉1000公斤,經(jīng)打漿榨汁,摻入150 克微生物活性菌體粉,攪拌均勻并在溫度為32t:條件下靜置5天, 瞬間低溫濃縮至25公斤,然后經(jīng)過高速離心分離、噴霧干燥獲得 粉狀干物質(zhì)755. 6克,按照江西德宇集團企業(yè)標準(Q/JDY01-2007 ) 方法,測得其紫杉醇的含量為1.63%。實施例2稱取清洗后紅豆杉的枝葉1000公斤,經(jīng)打漿榨汁,摻入150 克微生物活性菌體粉,攪拌均勻并在溫度為34。C條件下靜置5天, 瞬間低溫濃縮至25公斤,然后經(jīng)過高速離心分離、噴霧干燥獲得 粉狀干物質(zhì)798. 4克,按照江西德宇集團企業(yè)標準(Q/JDY01-2007 ) 方法,測得其紫杉醇的含量為1.53%。實施例3稱取清洗后紅豆杉的枝葉1000公斤,經(jīng)打漿榨汁,摻入150 克微生物活性菌體粉,攪拌均勻并在溫度為"。C條件下靜置5天, 瞬間低溫濃縮至25公斤,然后經(jīng)過高速離心分離、噴霧干燥獲得 粉狀干物質(zhì)853. 6克,按照江西德宇集團企業(yè)標準(Q/JDYOl-MO7 ) 方法,測得其紫杉醇的含量為1.42%。
權(quán)利要求
1、一種南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝,其特征是以南方紅豆杉枝葉為原料,以類酵母菌的D426為酶解微生物,在32-36℃條件下進行酶解,再經(jīng)過瞬間冷凍、高速分離、噴霧干燥,得到高含量紫杉醇。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝,其特征是以南方紅豆杉枝葉為原料,以類酵母菌的D426為酶解微生物,在32-36℃條件下進行酶解,再經(jīng)過瞬間冷凍、高速分離、噴霧干燥,得到高含量紫杉醇。本發(fā)明通過選定特定微生物菌株對紅豆杉枝葉進行酶解,解決了分子破壁和憎水性的技術(shù)難題,一級提取率高達96%、無有機溶劑殘留、無環(huán)境污染。
文檔編號C12R1/645GK101245360SQ200810086379
公開日2008年8月20日 申請日期2008年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月24日
發(fā)明者劉浩元, 李曉濱, 詹周榮 申請人:江西德宇集團