專利名稱：一種鴨血球活性小肽的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物工程酶工程技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種鴨血球活性小肽的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
目前我國畜牧業(yè)對動物蛋白的需求量不斷上升，魚粉一直是詞料工業(yè)中最重要的動物蛋 白資源，據(jù)不完統(tǒng)計，我國每年魚粉使用量在120萬噸左右，其中近100萬噸需從國外進(jìn)口， 外匯花費(fèi)近4億美元，更為重要的是，目前世界魚粉產(chǎn)量不斷下降，而隨著飼料工業(yè)的發(fā)展 需求卻不斷增加，魚粉短缺的局面已成為飼料工業(yè)的首要問題。如何減少配合飼料中魚粉的 使用量正越來越成為動物營養(yǎng)學(xué)界的研究熱點(diǎn)。
最新研究結(jié)果揭示，作為水產(chǎn)動物與幼齡畜禽動物全價配合飼料的關(guān)鍵組分，魚粉并不 僅僅是提供優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)以及平衡氨基酸，更為重要的是魚粉蛋白能在動物體內(nèi)分解成被小腸 直接吸收的小肽和一些具有生理功能的活性肽，但目前普遍使用的魚粉由于加工工藝的局限 性，小肽含量有限，另一方面由于魚粉在動物胃腸道內(nèi)停留時間較短，以及幼齡動物消化酶 分泌尚不充分，因此魚粉蛋白依靠體內(nèi)內(nèi)源酶降解產(chǎn)生小肽數(shù)量也極少，這就要求在這類動 物飼料配方中加入相當(dāng)量魚粉以滿足動物對小肽的需求。
從小肽功能性角度，利用鴨血球蛋白采用酶工程技術(shù)生產(chǎn)的鴨血球活性小肽，不僅能減 少配方中魚粉的用量，而且由于鴨血球活性小肽中含有天然誘食成分，對于水產(chǎn)動物還能克 服通常采取的利用植物蛋白源替代魚粉方法所引起的誘食問題。
鴨血液占鴨總蛋白量的7 8%，本身營養(yǎng)豐富，粗蛋白質(zhì)含量18 20%，被成為"液體肉"， 是一種優(yōu)質(zhì)的動物蛋白原料，目前大多數(shù)是將血液處理后噴霧干燥成血球蛋白粉出售，由于 加工過程中血球細(xì)胞膜的破裂有限，致使動物吸收率不高，限制了其在詞料工業(yè)的大規(guī)模使 用。
本發(fā)明采用酶工程技術(shù)，通過血蛋白水解專用酶酶解血球細(xì)胞膜，然后對釋放出的大分 子蛋白質(zhì)進(jìn)行定向酶切，使其分解成小分子量的小肽和氨基酸，本血蛋白水解專用酶中加入 了一定量的風(fēng)味酶，可減少苦味肽的生成，提高產(chǎn)品的適口性，本產(chǎn)品不僅可以鈐代魚粉緩 解動物蛋白緊缺的局面，還可以部分取代多種提高免疫抗病的藥物添加劑，真正生產(chǎn)出自然 健康的食品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的和有益效果是提供了一種利用鴨血球生產(chǎn)活性小肽的生產(chǎn)方法和工藝，采用
該生產(chǎn)方法和工藝生產(chǎn)出的鴨血球活性小肽不僅富含大量的分子量在3000道爾頓以下的生物活性小肽，還含有血紅素、有機(jī)酸、有機(jī)鐵和B族維生素，適口性好，可提高動物尤其是 幼齡動物的免疫力，促使其健康成長，減少預(yù)防性藥物和治療性藥物的用量。 本發(fā)明技術(shù)方案為，其步驟如下
(1) 選用大型宰鴨廠新鮮血液，經(jīng)過抗凝處理，離心分離(10000 20000r/min)后得到血 球，置于酶解設(shè)備中，以血球水二l: 2 6的重量比加入自來水，升溫至40 45。C后用濃度 0. 5mol/L的氫氧化鈉調(diào)pH值6. 5 8. 0。
(2) 酶解。升溫至50 58匸，加入0.2 0.6%的血球蛋白水解專用蛋白酶，用溫控設(shè)備將鴨 血球酶解液溫度在55~58°C，酶解時間18小時
(3) 滅酶。將鴨血球酶解液升溫至80 90。C，恒溫維持20 30min。
(4) 離心分離。將滅酶后的鴨血球酶解液經(jīng)過高速離心機(jī)進(jìn)行固液分離，收集上清液，加入 10y。鹽酸調(diào)節(jié)pH值為中性。
(5) 脫鹽處理。采用強(qiáng)酸型聚苯乙烯陽離子交換樹脂和強(qiáng)堿型聚苯乙烯陰離子交換樹脂裝成 樹脂柱進(jìn)行脫鹽處理。
(6) 濃縮。通過高效順流降膜濃縮器濃縮至干物質(zhì)含量為10 20%。
(7) 干燥。通過噴霧T燥機(jī)將濃縮液干燥成粉末狀產(chǎn)品。
具體實施例方式
實施例1
(1) 選用大型宰鴨廠新鮮血液為原料，離心分離(14000r/min)后得到血球，置于酶解設(shè)備 中，然后以血球水=1: 3的重量比加入自來水，升溫至4(TC后用濃度0. 5mol/L的氫氧化鈉 調(diào)pH值7.0。
(2) 酶解。升溫至56'C,按血球蛋白水解專用蛋白酶血球=1: 300的重量比加入血球蛋白 水解專用蛋白酶，用溫控設(shè)備將鴨血球酶解液溫度在56。C，酶解時間24小時
(3) 滅酶。將鴨血球酶解液升溫至90。C，恒溫維持30min。
(4) 離心分離。將滅酶后的鴨血球酶解液經(jīng)過高速離心機(jī)進(jìn)行固液分離，收集上清液，加入 10呢鹽酸調(diào)節(jié)pH值為中性。
(5) 脫鹽處理。采用強(qiáng)酸型聚苯乙烯陽離子交換樹脂和強(qiáng)堿型聚苯乙烯陰離子交換樹脂裝成 樹脂柱進(jìn)行脫鹽處理。
(6) 濃縮。通過高效順流降膜濃縮器濃縮至干物質(zhì)含量為20%。
(7) 干燥。通過噴霧干燥機(jī)將濃縮液干燥成粉末狀產(chǎn)品。 實施例2
(1)選用大型宰鴨廠新鮮血液為原料，離心分離(14000r/min)后得到血球，置于酶解設(shè)備中，然后以血球水=1: 4的重量比加入自來水，升溫至40。C后用濃度0.5mol/L的氫氧化鈉 調(diào)pH值8.0。
(2) 酶解。升溫至58。C，按血球蛋白水解專用蛋白酶血球=1: 200的重量比加入血球蛋白 水解專用蛋白酶，用溫控設(shè)備將鴨血球酶解液溫度在58。C，酶解時間18小時
(3) 滅酶。將鴨血球酶解液升溫至90。C，恒溫維持30min。
(4) 離心分離。將滅酶后的鴨血球酶解液經(jīng)過高速離心機(jī)進(jìn)行固液分離，收集上清液，加入 10y。鹽酸調(diào)節(jié)pH值為中性。
(5) 脫鹽處理。采用強(qiáng)酸型聚苯乙烯陽離子交換樹脂和強(qiáng)堿型聚苯乙烯陰離子交換樹脂裝成 樹脂柱進(jìn)行脫鹽處理。
(6) 濃縮。通過高效順流降膜濃縮器濃縮至干物質(zhì)含量為20%。
(7) 干燥。通過噴霧干燥機(jī)將濃縮液干燥成粉末狀產(chǎn)品 實施例3
(1)選用大型宰鴨廠新鮮血液為原料，離心分離G4000r/min)后得到血球，置于酶解 設(shè)備中，然后以血球水=1: 5的重量比加入自來水，升溫至4(TC后用濃度0.5mol/L的氫氧 化鈉調(diào)pH值7.0。
(2) 酶解。升溫至56'C，按血球蛋白水解專用蛋白酶血球=1: 400的重量比加入血球蛋白 水解專用蛋白酶，用溫控設(shè)備將鴨血球酶解液溫度在56 °C ，酶解時間36小時
(3) 滅酶。將鴨血球酶解液升溫至85。C，恒溫維持40min。
(4) 離心分離。將滅酶后的鴨血球酶解液經(jīng)過高速離心機(jī)進(jìn)行固液分離，收集上清液，加入 5M鹽酸調(diào)節(jié)pH值為中性。
(5) 脫鹽處理。采用強(qiáng)酸型聚苯乙烯陽離子交換樹脂和強(qiáng)堿型聚苯乙烯陰離子交換樹脂裝成 樹脂柱進(jìn)行脫鹽處理。
(6) 濃縮。通過高效順流降膜濃縮器濃縮至干物質(zhì)含量為15%。
(7) 干燥。通過噴霧干燥機(jī)將濃縮液干燥成粉末狀產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種鴨血球活性小肽的生產(chǎn)方法，其特征是生產(chǎn)步驟為(1)選用大型宰鴨廠新鮮血液，用10000～20000r/min離心分離后得到血球，置于酶解設(shè)備中，以血球∶水＝1∶2～6的重量比加入自來水，升溫至40～45℃后用濃度0.5mol/L的氫氧化鈉調(diào)pH值6.5～8.0；(2)酶解，升溫至50～58℃，加入0.2～0.6％的血球蛋白水解專用蛋白酶，用溫控設(shè)備將鴨血球酶解液溫度在55～58℃，酶解時間18小時；(3)滅酶，將鴨血球酶解液升溫至80～90℃，恒溫維持20～30min；(4)離心分離，將滅酶后的鴨血球酶解液經(jīng)過高速離心機(jī)進(jìn)行固液分離，收集上清液，加入10％鹽酸調(diào)節(jié)pH值為中性；(5)脫鹽處理，采用強(qiáng)酸型聚苯乙烯陽離子交換樹脂和強(qiáng)堿型聚苯乙烯陰離子交換樹脂裝成樹脂柱進(jìn)行脫鹽處理；(6)濃縮，通過高效順流降膜濃縮器濃縮至干物質(zhì)含量為10～20％；(7)干燥，通過噴霧干燥機(jī)將濃縮液干燥成粉末狀產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種鴨血球活性小肽的生產(chǎn)方法，采用酶工程技術(shù)，通過血蛋白水解專用酶酶解血球細(xì)胞膜，然后對釋放出的大分子蛋白質(zhì)進(jìn)行定向酶切，使其分解成小分子量的小肽和氨基酸，本血蛋白水解專用酶中加入了一定量的風(fēng)味酶，可減少苦味肽的生成，提高產(chǎn)品的適口性，本產(chǎn)品不僅可以替代魚粉緩解動物蛋白緊缺的局面，還可以部分取代多種提高免疫抗病的藥物添加劑，真正生產(chǎn)出自然健康的食品。本發(fā)明工藝所得的產(chǎn)品富含大量的分子量在3000道爾頓以下的生物活性小肽，具有明顯的促進(jìn)幼齡動物的生長發(fā)育作用，該制備工藝簡單合理，生產(chǎn)成本低，適合于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C12P21/06GK101591692SQ20091003365
公開日2009年12月2日 申請日期2009年6月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月25日
發(fā)明者張志斌 申請人:張志斌