專利名稱：一種培育耐逆轉(zhuǎn)基因植物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種培育耐逆轉(zhuǎn)基因植物的方法。
背景技術(shù)：
干旱、低溫、高溫是影響作物生長發(fā)育的常見的非生物脅迫因子，很大程度上限制了作物的產(chǎn)量和地理分布。為了提高作物在逆境下的產(chǎn)量并且打破地理分布限制，找到新的耐逆基因并利用基因工程手段提高作物耐逆性是一個行之有效的途徑。傳統(tǒng)方法由于植物抗逆調(diào)控機制的復雜性以及缺乏有效的篩選技術(shù)等原因而受到限制。有研究表明，植物中大部分基因組都參與了自身對干旱、高鹽等逆境因子的響應，改變某單一基因的表達量和表達模式可以顯著提高作物的抗旱、抗鹽能力。因此，克隆控制水稻逆境誘導相關(guān)基因十分必要，不僅可為我國水稻新品種的培育提供具有自主知識產(chǎn)權(quán)的目的基因，而且可加深對水稻等禾本科植物抵御非生物脅迫分子機制的認識，具有十分重要的現(xiàn)實價值與理論意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種培育耐逆轉(zhuǎn)基因植物的方法。本發(fā)明提供的培育耐逆轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因(命名為OsXLS)導入目的植物中，得到耐逆性強于所述目的植物的轉(zhuǎn)基因植物。上述序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因1)其編碼序列是序列表中序列1的第16-177位；2)其核苷酸序列是序列表中的序列1 ；3)在嚴格條件下與1)或2、的基因雜交且編碼上述蛋白的基因；4)與1)或2)的基因具有90%以上的同源性且編碼上述蛋白的基因。序列1有263個核苷酸，其中第16-177是開放閱讀框，可編碼序列2所示的蛋白。上述嚴格條件可為用0. IX SSPE (或0. 1XSSC)，0. SDS的溶液，在DNA或者RNA 雜交實驗中65°C下雜交并洗膜。上述序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因通過重組表達載體導入所述目的植物中的?？捎矛F(xiàn)有的植物表達載體構(gòu)建含有OsXLS基因的重組表達載體。所述植物表達載體包括雙元農(nóng)桿菌載體和可用于植物微彈轟擊的載體等，如pCAMBIA3301、pCAMBIA1300、 pBI121、pBinl9、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301-UbiN 或其它衍生植物表達載體。使用OsXLS基因構(gòu)建重組表達載體時，可在其轉(zhuǎn)錄起始核苷酸前加上任何一種增強型、組成型、組織特異型或誘導型啟動子，如花椰菜花葉病毒(CAMV) 35S啟動子、泛素 (Ubiquitin)基因啟動子(ρ^ )等，它們可單獨使用或與其它的植物啟動子結(jié)合使用；此外，使用本發(fā)明的基因構(gòu)建植物表達載體時，還可使用增強子，包括翻譯增強子或轉(zhuǎn)錄增強子，這些增強子區(qū)域可以是ATG起始密碼子或鄰接區(qū)域起始密碼子等，但必需與編碼序列的閱讀框相同，以保證整個序列的正確翻譯。所述翻譯控制信號和起始密碼子的來源是廣泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻譯起始區(qū)域可以來自轉(zhuǎn)錄起始區(qū)域或結(jié)構(gòu)基因。為了便于對轉(zhuǎn)基因植物細胞或植物進行鑒定及篩選，可對所用植物表達載體進行加工，如加入在植物中表達可產(chǎn)生顏色變化的酶或發(fā)光化合物的基因(GUS基因、GFP基因、 螢光素酶基因等)、具有抗性的抗生素標記物(慶大霉素標記物、卡那霉素標記物等)或是抗化學試劑標記基因(如抗除莠劑基因)等。從轉(zhuǎn)基因植物的安全性考慮，可不加任何選擇性標記基因，直接以逆境篩選轉(zhuǎn)化植株。具體地講，上述重組表達載體包括如下構(gòu)建步驟將序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因插入質(zhì)粒PJIT163的多克隆位點，得到的中間載體；將所述中間載體用KpnI和 XhoI酶切得到的含Double 35S啟動子和所述編碼基因的DNA片段與經(jīng)KpnI和Mil酶切 PCAMBIA1300得到的大片段連接，得到重組表達載體。攜帶有本OsXLS基因的植物表達載體可通過Ti質(zhì)粒、Ri質(zhì)粒、植物病毒載體、直接DNA轉(zhuǎn)化、顯微注射、電導、農(nóng)桿菌介導等常規(guī)生物學方法轉(zhuǎn)化到植物細胞或組織中。進一步講，上述耐逆性是耐鹽和/或耐旱。上述植物可以為雙子葉植物或單子葉植物，優(yōu)選是水稻。序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因在培育耐逆轉(zhuǎn)基因植物中的應用也屬于本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。上述序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因1)其編碼序列是序列表中序列1的第16-177位；2)其核苷酸序列是序列表中的序列1 ；3)在嚴格條件下與1)或2、的基因雜交且編碼所述蛋白的基因；4)與1)或2)的基因具有90%以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。上述耐逆性是耐鹽和/或耐旱。上述植物可為雙子葉植物或單子葉植物，優(yōu)選是水稻。上述嚴格條件可為用0. IX SSPE (或0. 1XSSC)，0. SDS的溶液，在DNA或者RNA 雜交實驗中65°C下雜交并洗膜。實驗證明在1-2葉期的耐鹽性檢測實驗中，轉(zhuǎn)空載體對照材料和野生型對照比轉(zhuǎn)基因的植株T-34(B)生長均要滯后；在3-4葉期的耐鹽性檢測實驗中IOOmM鹽處理的第3 天轉(zhuǎn)基因植株的表現(xiàn)基本正常，轉(zhuǎn)空載體對照材料和野生型對照大部分出現(xiàn)葉片卷曲的現(xiàn)象，IOOmM鹽處理的第10天轉(zhuǎn)基因植株大部分存活，轉(zhuǎn)空載體對照材料和野生型對照基本上死亡，以上結(jié)果說明轉(zhuǎn)OsXLS基因的植株耐鹽性比空載體對照和野生型對照明顯增強。 在耐旱性檢測實驗中，干旱處理的第3天，轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)所有植株和野生型對照均出現(xiàn)葉片變黃、卷曲的現(xiàn)象，轉(zhuǎn)基因植株T-13生長正常。第四天轉(zhuǎn)基因植株T-13也出現(xiàn)所有植株均出現(xiàn)葉片變黃、卷曲的現(xiàn)象，在此時給植株加水，觀察其恢復情況；復水之后轉(zhuǎn)基因植株T-13大部分植株葉片展開、顏色變綠。而轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)和野生型對照基本上死亡，以上結(jié)果進一步說明轉(zhuǎn)基因的植株耐旱性比轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)和野生型對照明顯增強。


圖1為OsXLS基因PCR克隆，利用cDNA為模板，擴增目標基因，產(chǎn)物大小與預測大小一致，M為Marker, 1為PCR擴增的cDNA。圖2為菌落PCR鑒定，以轉(zhuǎn)化的菌斑為模板，擴增目標基因，獲得目的條帶，說明所選克隆為陽性克隆，M為Marker，1-5為陽性克隆，6為陰性對照。圖3為T載體酶切鑒定，利用HindIII和BamH I酶切克隆載體，有目的條帶出現(xiàn)， 證明基因已連接到克隆載體上，M為Marker，1為酶切過的載體。圖4為表達載體pCAMBIA1300圖譜。圖5 為 pJIT163 圖譜。圖6為電泳檢測PCR結(jié)果，利用篩選基因潮霉素的檢測引物，對轉(zhuǎn)基因水稻植株進行鑒定，A中M為Marker，泳道1為陽性質(zhì)粒對照，泳道2_18為17個轉(zhuǎn)基因植株的檢測；B 中M為Marker，泳道19-34為另17個轉(zhuǎn)基因植株的檢測，泳道36為野生型對照。圖7為鹽脅迫處理1-2葉期水稻苗，圖7-II是圖7_1中B、C的放大圖。圖8為鹽脅迫處理3-4葉期水稻苗的照片，WT為轉(zhuǎn)空載體對照，T34為轉(zhuǎn)OsXLS株糸34 ；A為第3d的照片、B為第IOd的照片。圖9為PEG處理水稻苗第3d、10d照片，WT為轉(zhuǎn)空載體對照，T34.T13.T26分別為轉(zhuǎn)OsXLS株糸34、T13.26 ；A為第3d的照片、B為第IOd的照片。圖10分別為干旱脅迫處理水稻苗第3d、復水之后的照片，WT為轉(zhuǎn)空載體對照，T13 為轉(zhuǎn)OsXLS株糸T13 ；A為第3d的照片、B為復水之后的照片。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明并不限于以下實施例。下述實施例中，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。實施例1、培育轉(zhuǎn)基因植物及其耐逆性檢測一、培育轉(zhuǎn)基因植物1、基因克?、偎究俁NA提取水稻(培矮64s)(公眾可從中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所獲得；記載的文獻是傅亞萍等.抗除草劑基因?qū)肱喟?4S實現(xiàn)雜交水稻制種機械化的初步研究.中國水稻科學.2001 15(2))組織材料取材后迅速在液氮中研磨成粉末狀，取約IOOmg粉末狀材料置于盛有1.0ml TRIzol(Invitrogen)的1. 5ml離心管中，置-80oC保存?zhèn)溆?。采用TRIzol 試劑提取法將-SOoC保存?zhèn)溆玫臉悠啡〕?，室溫解凍后，加?00μ 1氯仿，振蕩混勻，離心后，小心取出上層水相，轉(zhuǎn)入另一離心管中，加入500μ 1異丙醇，沉淀、離心分離出RNA，再經(jīng)75%酒精洗滌，室溫微干后，加入適當體積的RNase-free的水，充分溶解。所提RNA經(jīng) DNA 酶(Fermentas)處理。②反轉(zhuǎn)錄反應取培矮64s總RNA2 μ g進行反轉(zhuǎn)錄，加入0. 5 μ g/ μ L Oligo (dT) 1 μ L，加入去離子水補足到12 μ L，70°C保溫5min后，依次加入5 X RT buffer 4 μ L，20U/ μ L RNase抑制劑 1 μ L，10mmol/L dNTP 2 μ L，37°C保溫 5min 后加入 200U/ μ LM-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶 1 μ L，反應終體積為20 μ L。42°C反應60min，70°C加熱IOmin終止反應。
③PCR體外擴增根據(jù)GenBank搜索到的核苷酸序列設(shè)計該基因特異性PCR擴增引物OsXLS-F 5' -CTGAGAAGAGGGAGAATGGCGT-3‘，OsXLS-R,5' -CACCACAGCACAGCATCAGTTG-3‘。以上述培矮64s cDNA作為模板，采用保真性較高的LA Taq聚合酶(TaKaRa)進行PCR擴增。在滅菌的PCR管中建立如下反應體系GCXBuffer溶液25 μ 1，dNTPMixture 8 μ 1，LA Taq 聚合酶 0· 5 μ 1，OsLS-F (IOnmol) 2 μ 1，OsLS-R(IOnmol) 2 μ 1，培矮 64s cDNA 3. 5 μ 1，ddH20 9 μ 1，總反應體積50 μ 1.反應程序95°C預變性4min, PCR擴增94°C變性 30s，56°C退火40s，72°C延伸30s，35個循環(huán)，最后72°C延伸lOmin，反應結(jié)束后，電泳檢測 PCR結(jié)果(圖1)，擴增產(chǎn)物大小為263bp左右。④PCR產(chǎn)物的純化電泳后，在紫外光照射下進行切膠回收，利用凝膠回收試劑盒(天根)回收目的基因片斷。⑤DNA連接反應參照pMD18-T Vector (TaKaRa)說明書，按試劑盒要求建立連接反應體系 pMD18-TVector 0. 5 μ 1，Solution I 4. 5 μ 1，回收基因片斷 2 μ 1，ddH20 3 μ 1，總反應體積 10 μ 1。16°C過夜連接。⑥連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細胞(熱激法)無菌條件下取5 μ 1連接產(chǎn)物加到感受態(tài)細胞中，輕輕混勻后冰浴30min。42°C熱激90s，將離心管迅速轉(zhuǎn)到冰浴中放置2-aiiin。加無抗生素的LB培養(yǎng)基800 μ 1，37°C搖床 (100-160rpm)，溫和搖振Ih左右。取200 μ 1培養(yǎng)液涂于含抗生素50 μ g/ml的LB固體培養(yǎng)基上，在涂菌液之前首先加入X-Gal和IPTG涂勻，37°C倒置培養(yǎng)12_1他。⑦陽性克隆的篩選及鑒定1)陽性克隆的篩選培養(yǎng)基中長出許多的藍色和白色菌斑，待菌斑長到合適大小時，用滅菌的芽簽挑取幾個白斑，分別于含有50 μ g/ml Amp的LB液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)12_1他。2)堿裂解法小量提取質(zhì)粒DNA3) PCR鑒定和酶切鑒定鑒定分別采用PCR擴增和酶切鑒定。以上述克隆載體質(zhì)粒為模板，進行PCR擴增 (引物是OsXLS-F和OsXLS-R)，鑒定所提質(zhì)粒中是否含有目的基因片段(圖2)。對克隆載體進行酶切(HindIII和Bamh I)，鑒定目的基因是否已經(jīng)連入載體(圖3)。選取鑒定出的陽性克隆，送交公司測定序列。測序結(jié)果表明目的片段的DNA序列為序列表中序列1，其中序列1的第16-177位為開放閱讀框，編碼序列表中序列2所示的蛋白，將該蛋白命名為 OsXLS，將蛋白OsXLS的編碼基因命名為OsXLS。2、重組表達載體構(gòu)建1)中間載體的構(gòu)建將基因OsXLS從含OsXLS的pMD18_T Vector用HindIII和Bamh I酶切下來插入如圖 5 所示 pJIT163(pGreen, http //www. ρ green, ac. uk/)的 HindIII 禾口 Bamh I 位點間， 構(gòu)成中間載體。
6
2)構(gòu)建重組表達載體將步驟1)得到的中間載體用KpnI和BioI酶切，回收含Double 35S啟動子和基因 OsXLS 的 DNA 條帶。將如圖 4 所示的 pCAMBIA1300 (CambiaLabs, http//www. cambia. org/ daisy/bioforge_legacy/3725. html)用 KpnI 和 Sail 酶切，回收大片段。XhoI 和 SalI 是同尾酶，回收到的兩個片段用T4連接酶連接過夜，構(gòu)建成重組表達載體。3、轉(zhuǎn)基因植物獲得選用超級雜交稻的日本晴(公眾可從中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所獲得；記載的文獻梁永書等，秈粳交組合培矮64S/日本晴F2、F3及F6代主要農(nóng)藝性狀分析，植物學通報Chinese Bulletin of Botany 2008,25(1) :59-66)作為轉(zhuǎn)化受體，通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將上述重組表達載體采用農(nóng)桿菌介導法轉(zhuǎn)化到水稻愈傷，其后經(jīng)共培養(yǎng)、在含潮霉素(50mg/L)的篩選培養(yǎng)基篩選抗性愈傷、分化、生根等一系列步驟，最終得到轉(zhuǎn)基因水稻植株。CTAB法提取水稻葉片DNA，利用PCR技術(shù)鑒定陽性植株。我們根據(jù)表達載體上潮霉素基因序列設(shè)計特異性引物，對轉(zhuǎn)基因植株進行PCR驗證。pC13-F 5' -ACCTGCCTGAAACCGAACTG-3‘pC13-R 5' -CTGCTCCATACAAGCCAACC-3‘PCR擴增體系及程序如下IOXBuffer 溶液 5 μ 1，dNTP 4 μ 1, Tap DNA 聚合酶 0.5 μ 1， primer-F (IOpmol) 2 μ 1， primer-R (IOpmol) 2 μ 1,11 4 μ 1， ddH20 32. 5 μ 1,
50 μ 1。反應程序94°C預變性5min ；PCR擴增:94°C變性，40s ；57°C退火，40s ；72°C延伸， lmin，共35個循環(huán)，最后72°C延伸lOmin。電泳檢測PCR結(jié)果(圖6)，其中34個植株中有 28個轉(zhuǎn)OsXLS陽性株系，取3株(分別命名為Τ-13、Τ46、Τ-34)進行下面的耐逆性檢測。二、耐逆性檢測本步驟設(shè)置空載體對照用KpnI和BioI酶切pJIT163，瓊脂糖凝膠電泳鑒定酶切結(jié)果后回收含Double 35S啟動子的DNA條帶。將pCAMBIA1300用KpnI和SalI酶切，回收大片段。XhoI和SalI 是同尾酶，回收到的兩個片段用T4連接酶連接過夜，構(gòu)建成163-1300空載體。按照獲得上述轉(zhuǎn)OsXLS陽性株系的方法，將163-1300空載體轉(zhuǎn)入日本晴中獲得空載體對照。1、耐鹽性檢測1) 1-2葉期實驗將陽性株系T-34、空載體對照分別進行如下實驗在1-2葉期分別用0mM、50mM、 100mM、125mM、150mM不同濃度Nacl鹽處理，在處理后的3天拍照觀察。圖7-1中A為不加鹽處理的轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)，B為IOOmM鹽處理的轉(zhuǎn)基因植株T-34，C為IOOmM鹽處理的轉(zhuǎn)空載體對照材料WT。結(jié)果如圖7-1可知，鹽處理的水稻(B、C)比未經(jīng)處理的(A)生長明顯滯后，而鹽處理的材料中，轉(zhuǎn)空載體對照材料WT(C)比轉(zhuǎn)基因的植株T-34(B)生長均要滯后，并且由圖 7-II可知，C的葉片明顯發(fā)生卷曲。2) 3-4葉期實驗
本步驟與上述1-2葉期實驗的區(qū)別在于將鹽處理時間改為在3-4葉期處理3天時間，其余步驟相同。在處理后的第3天和第10天分別進行拍照觀察。由圖8A(左圖為T-34，右圖為空載體對照)可知，IOOmM鹽處理的第3天轉(zhuǎn)基因植株的表現(xiàn)基本正常，轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)大部分出現(xiàn)葉片卷曲的現(xiàn)象，由圖8B(左圖為 T-34，右圖為空載體對照)可知，IOOmM鹽處理的第10天轉(zhuǎn)基因植株大部分存活(存活率 90%)，轉(zhuǎn)空載體對照材料基本上死亡(存活率10%)。以上結(jié)果說明轉(zhuǎn)OsXLS基因的植株耐鹽性比空載體對照明顯增強。2、耐旱性檢測1)聚乙二醇(PEG)模擬干旱實驗步驟將Τ-13、Τ46、Τ-34、空載體對照和野生型對照分別在3葉期進行10% PEG、15% PEG,25% PEG的干旱模擬處理。將3葉期的植株放在盛有不同濃度PEG的的塑料杯中，在第3天，第7天和第10天分別觀察表型變化。由圖9A可知，10% PEG處理的第3天大部分材料均出現(xiàn)葉片變黃、卷曲的現(xiàn)象，轉(zhuǎn) OsXLS基因植株、轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)和野生型對照差異不明顯。由圖9B可知，10% PEG 處理的第10天轉(zhuǎn)OsXLS基因植株T-13大部分恢復生長(存活率100% )，葉片展開顏色變綠。而轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)全部死亡(存活率0% )。以上結(jié)果說明轉(zhuǎn)基因的植株耐旱性比轉(zhuǎn)空載體對照材料明顯增強。2)缺水干旱實驗實驗步驟T-13、空載體對照在3-4葉期進行干旱處理，將植株用吸水紙吸干水分后置于干燥的培養(yǎng)皿進行干旱處理，使植株處于完全缺水的狀態(tài)，記錄表型變化，第4天復水，并觀察表型差異。由圖IOA可知，干旱處理的第3天，轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)所有植株均出現(xiàn)葉片變黃、卷曲的現(xiàn)象，轉(zhuǎn)基因植株Τ-13生長正常。第4天轉(zhuǎn)基因植株Τ-13也出現(xiàn)葉片變黃、卷曲的現(xiàn)象，在此時給植株復水，觀察其恢復情況。由圖IOB可知，復水之后轉(zhuǎn)基因植株Τ-13 大部分植株葉片展開、顏色變綠并恢復生長(存活率30%)。而轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)全部死亡(存活率0%)。以上結(jié)果進一步說明轉(zhuǎn)基因的植株耐旱性比轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT) 明顯增強。
權(quán)利要求
1.一種培育耐逆轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因?qū)肽康闹参镏?，得到耐逆性強于所述目的植物的轉(zhuǎn)基因植物。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因1)其編碼序列是序列表中序列1的第16-177位；2)其核苷酸序列是序列表中的序列1；3)在嚴格條件下與1)或幻的基因雜交且編碼所述蛋白的基因；4)與1)或2)的基因具有90%以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因通過重組表達載體導入所述目的植物中的；所述重組表達載體的制備包括如下構(gòu)建步驟將序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因插入質(zhì)粒pJIT163的多克隆位點，得到的中間載體；將所述中間載體用KpnI和B10I酶切得到的含Double 35S啟動子和所述編碼基因的DNA片段與經(jīng)KpnI和Mil酶切pCAMBIA1300得到的大片段連接，得到重組表達載體。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述耐逆性是耐鹽和/或耐旱。
5.如權(quán)利要求3或4所述的方法，其特征在于所述植物為雙子葉植物或單子葉植物， 優(yōu)選是水稻。
6.序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因在培育耐逆轉(zhuǎn)基因植物中的應用。
7.如權(quán)利要求6所述的應用，其特征在于所述序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因1)其編碼序列是序列表中序列1的第16-177位；2)其核苷酸序列是序列表中的序列1；3)在嚴格條件下與1)或幻的基因雜交且編碼所述蛋白的基因；4)與1)或2)的基因具有90%以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。
8.如權(quán)利要求6或7所述的應用，其特征在于所述耐逆性是耐鹽和/或耐旱。
9.如權(quán)利要求6-8中任一所述的應用，其特征在于所述植物為雙子葉植物或單子葉植物，優(yōu)選是水稻。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種培育耐逆轉(zhuǎn)基因植物的方法。該方法，是將序列表中序列2所示的蛋白的編碼基因?qū)肽康闹参镏校玫侥湍嫘詮娪谒瞿康闹参锏霓D(zhuǎn)基因植物。實驗證明無論在在1-2葉期、還是在3-4葉期，轉(zhuǎn)OsXLS基因的植株耐鹽性比空載體對照和野生型對照明顯增強；在耐旱性檢測實驗中，轉(zhuǎn)OsXLS基因植株大部分植株葉片展開、顏色變綠。而轉(zhuǎn)空載體對照材料和野生型對照基本上死亡，說明轉(zhuǎn)基因的植株耐旱性比轉(zhuǎn)空載體對照材料(WT)和野生型對照明顯增強。
文檔編號C12N15/63GK102443588SQ201010512359
公開日2012年5月9日 申請日期2010年10月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月12日
發(fā)明者夏新界, 李莉 申請人:中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所, 湖南雜交水稻研究中心