專利名稱：Tt1基因在提高棉花抗逆性中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及TTl基因在提高棉花抗逆性中的用途。
背景技術(shù)：
棉花(Gossypium spp,植物界被子植物門雙子葉植物綱錦葵目錦葵科棉屬)是重要的經(jīng)濟(jì)作物，在國民經(jīng)濟(jì)中占有很重要的地位，是天然纖維的重要來源之一，也是優(yōu)質(zhì)蛋白和食用油的潛在資源。20世紀(jì)90年代以來，隨著溫室效應(yīng)的不斷加劇，各類自然災(zāi)害頻繁發(fā)生，災(zāi)害程度逐漸提升、受災(zāi)范圍日益擴(kuò)大，每年給國家造成幾十億甚至上百億元的經(jīng)濟(jì)損失。為應(yīng)對這一嚴(yán)峻形勢，遺傳育種學(xué)家已通過各種途徑創(chuàng)造了多種突變材料，使得棉花種質(zhì)資源庫不斷拓展，為棉花品種選育及性狀改良提供了重要的遺傳信息。同時(shí)，隨著基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展，利用生物技術(shù)來創(chuàng)新棉花種質(zhì)資源和培育新品種是一條非常有效的途徑，極大地推動(dòng)了棉花遺傳育種的發(fā)展。與水稻等其他禾本科作物相比，棉花的轉(zhuǎn)基因研究起步較晚，但進(jìn)展很快。隨著國際轉(zhuǎn)基因技術(shù)的不斷發(fā)展和轉(zhuǎn)基因生物安全性方面的相關(guān)法律法規(guī)的不斷完善，轉(zhuǎn)基因作物的大面積推廣和種植勢不可擋。到2009年，全球轉(zhuǎn)基因作物的種植面積達(dá)到了 I. 3億 hm2，全球有25個(gè)國家種植，面積是1996年的79倍。棉花也不例外，全球棉花種植面積中轉(zhuǎn)基因棉占總種植面積的1/2。轉(zhuǎn)基因棉花的廣泛種植，在遏制各類自然災(zāi)害、降低勞動(dòng)強(qiáng)度、減少環(huán)境污染、促進(jìn)農(nóng)田微觀和宏觀環(huán)境改善等方面顯示出重要的作用。我國自20世紀(jì)80年代末開始進(jìn)行轉(zhuǎn)基因棉花的研究，已成為繼美國之后第二個(gè)自主研制轉(zhuǎn)基因棉花的國家。為我國主要農(nóng)作物之一，棉花在基因工程方面的研究進(jìn)展迅速，在抗蟲、抗除草劑、抗病、改善棉花纖維品質(zhì)及其生態(tài)影響方面均取得了一系列重要研究成果。但由于受到技術(shù)發(fā)展的限制，優(yōu)異功能基因資源比較有限，迄今已克隆的與棉花相關(guān)的基因與元件不計(jì)其數(shù)，然而具有應(yīng)用價(jià)值的基因卻很少，當(dāng)前主要是抗蟲類(Bar)和抗除草劑類(Bt、EPSPs)，其它如抗旱、耐鹽、抗黃萎病等基因的開發(fā)仍然存在許多不足，甚至無法從實(shí)驗(yàn)室走向大田。在我國16億畝耕地中，鹽堿地有I億多畝，中低產(chǎn)田約10億畝。其中大部分中低產(chǎn)田也是由于干旱和鹽堿所致，此外還有3億畝鹽堿荒地有待開發(fā)利用；灌溉地區(qū)次生鹽潰化田地還在逐年增加。淡水資源匱乏是我國北方棉花生產(chǎn)的主要限制因素，更是鹽堿荒地開發(fā)利用的限制因素。干旱、鹽堿和低溫等逆境脅迫環(huán)境因素已經(jīng)成為棉花生長的主要限制性因子，嚴(yán)重影響棉花的產(chǎn)量和種植面積。這些問題是我國棉花生產(chǎn)躍上新臺階，并成為生產(chǎn)強(qiáng)國必須面對和急需解決的重大命題。隨著人們對植物抗逆分子機(jī)制的深入了解，已分離出了許多與抗逆相關(guān)的功能蛋白基因和一些控制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的調(diào)控基因，然而具有應(yīng)用價(jià)值的基因卻很少。在轉(zhuǎn)基因研究過程中，還經(jīng)常會遇到基因沉默現(xiàn)象，轉(zhuǎn)基因的遺傳穩(wěn)定性等問題還需要做進(jìn)一步的研究。由于植物的抗逆性狀是受數(shù)量性狀基因控制的，至今無法尋求到的適合多基因共轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因體系，而同時(shí)提高植物多種抗逆性的單基因資源又極其匱乏，目前還未能獲得較為理想的綜合抗逆材料。因此加強(qiáng)基因組學(xué)和功能基因組學(xué)研究，加強(qiáng)抗鹽、旱、高、低溫等非生物逆境的轉(zhuǎn)基因棉花研究，有針對性的挖掘更多高效、低毒的功能基因用于轉(zhuǎn)基因棉的改良，培育耐鹽、耐早棉花品種，以拓寬棉花的種植區(qū)域和環(huán)境適應(yīng)性，對確保我國棉花生產(chǎn)的長期穩(wěn)定發(fā)展具有重要的戰(zhàn)略意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是針對棉花轉(zhuǎn)基因育種中缺乏可加強(qiáng)植株抗鹽、旱、高低溫等非生物逆境的基因資源，提供一種多效抗逆基因TTl在棉花抗逆改造中的應(yīng)用方法，為提高棉花抵御非生物逆境的轉(zhuǎn)基因技術(shù)領(lǐng)域提供一種新的有效選擇。本發(fā)明解決該技術(shù)問題的技術(shù)方案是提供了 TTl基因在提高棉花抗逆性中的用途。其中，上述TTl基因的核苷酸序列(I):如SEQ ID NO. I所示的核苷酸序列或者其簡并序列；或(2):在(I)限定的核苷酸序列中經(jīng)過取代、缺失或添加至少一個(gè)核苷酸衍生所得的核苷酸序列，且與SEQ ID NO. I的序列編碼功能相同或相似的多肽。即也能提高棉花對鹽、旱、高低溫等非生物逆境的抗逆性。進(jìn)一步的，上述(2)為在(I)限定的核苷酸序列中經(jīng)過取代、缺失或添加I個(gè)或幾個(gè)(10個(gè)以內(nèi))核苷酸衍生所得的核苷酸序列，且與SEQ ID NO. I的序列編碼功能相同或相似的多肽。本發(fā)明同時(shí)提供了 TTl基因編碼的多肽在提高棉花抗逆性中的用途。上述用途中的TTl基因具有如下核苷酸序列(I):如SEQ ID NO. I所示的核苷酸序列或其簡并序列；或(2):在(I)限定的核苷酸序列中經(jīng)過取代、缺失或添加至少一個(gè)核苷酸衍生所得的核苷酸序列，且能與SEQ ID NO. I的序列編碼功能相同或相似的多肽。進(jìn)一步的，上述(2)為在(I)限定的核苷酸序列中經(jīng)過取代、缺失或添加I個(gè)或幾個(gè)(10個(gè)以內(nèi))核苷酸衍生所得的核苷酸序列，且與SEQ ID NO. I的序列編碼功能相同或相似的多肽。本發(fā)明還提供了一種培育抗逆棉花的方法。該方法包括以下步驟(I):將TTl基因可操作地連于載體上的表達(dá)調(diào)控序列后，形成所述TTl基因的重組載體；(2):將步驟(I)中的重組載體轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞中；(3):經(jīng)篩選獲得轉(zhuǎn)化細(xì)胞,然后將轉(zhuǎn)化細(xì)胞培育成抗逆的棉花植株或其后代,所述后代包括棉花種子及棉花組織。上述方法中的TTl基因具有如下核苷酸序列(I):如SEQ ID NO. I所示的核苷酸序列或其簡并序列；或⑵在⑴限定的核苷酸序列中經(jīng)過取代、缺失或添加至少一個(gè)核苷酸衍生所得的核苷酸序列，且能與SEQ ID NO. I的序列編碼功能相同或相似的多肽。進(jìn)一步的，上述⑵為在⑴限定的核苷酸序列中經(jīng)過取代、缺失或添加I個(gè)或幾個(gè)(10個(gè)以內(nèi))核苷酸衍生所得的核苷酸序列，且與SEQ ID NO. I的序列編碼功能相同或相似的多肽。本發(fā)明中所述的TTl基因，其基本核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO. I所示，該基因來源于十字花科(Brassicaceae,也名Cruciferae)中芥屬(Brassica)的植物油菜 (Brassica napus)。上述的提高棉花的抗逆性可以為耐熱性、耐寒性、耐旱性或耐鹽性中的至少一種， 甚至可以起到減少棉花產(chǎn)量降低的穩(wěn)產(chǎn)增產(chǎn)作用。在本發(fā)明中，“在SEQ ID NO. I中的核苷酸序列經(jīng)過取代、缺失或添加至少一個(gè)核苷酸衍生序列”的TTl基因序列一般是指編碼具有SEQ ID NO. I所編碼的蛋白活性的多肽的核苷酸序列及其簡并序列。該簡并序列是指所述序列中有一個(gè)或多個(gè)密碼子被編碼相同氨基酸的簡并密碼子所取代后而產(chǎn)生的序列。由于密碼子的簡并性，所以與SEQ ID NO. I同源性低至約89%的簡并序列也能編碼出SEQ ID NO. I所述的序列。另外，“在SEQ ID NO. I 中的核苷酸序列經(jīng)過取代、缺失或添加至少一個(gè)核苷酸衍生序列”的含義還包括能在中度嚴(yán)謹(jǐn)條件下，更佳的在高度嚴(yán)謹(jǐn)條件下與SEQ ID NO. I核苷酸序列雜交的核苷酸序列。該術(shù)語還包括與SEQ ID NO. I中的核苷酸序列的同源性至少80%，較佳地至少89%，更佳地至少90%，最佳地至少95%的核苷酸序列。在本發(fā)明中的相同功能是指提高棉花對非生物逆境的抗逆性。該術(shù)語還包括能編碼具有與天然的SEQ ID NO. I相同功能的蛋白的SEQ ID NO. I 中開放閱讀框序列的變異形式。這些變異形式包括(但并不限于)若干個(gè)(通常為I 90個(gè)，較佳地I 60個(gè)，更佳地I 20個(gè)，最佳地I 10個(gè))核苷酸的缺失、插入和/或取代，以及在5’和/或3’端添加數(shù)個(gè)(通常為60個(gè)以內(nèi)，較佳地為30個(gè)以內(nèi)，更佳地為 10個(gè)以內(nèi)，最佳地為5個(gè)以內(nèi))核苷酸。本發(fā)明所述重組載體，是將TTl基因插入到載體中獲得，上述載體可選用本領(lǐng)域已知的各種載體，尤其是真核表達(dá)載體(如PBI121或pCAMBIA2301)。本發(fā)明用上述重組載體轉(zhuǎn)化宿主植物細(xì)胞，篩選獲得轉(zhuǎn)化細(xì)胞。然后將轉(zhuǎn)化細(xì)胞培育成抗逆的棉花植株或其后代，所述后代包括棉花種子及棉花組織。本發(fā)明中所述的“可操作地連于”表示如下情況即線性DNA序列的某些部分能夠影響同一線性DNA序列其他部分的活性。例如，如果信號肽DNA作為前體表達(dá)并參與多肽的分泌，那么信號肽(分泌前導(dǎo)序列)DNA就是可操作地連于多肽DNA ;如果啟動(dòng)子控制序列的轉(zhuǎn)錄，那么它是可操作地連于編碼序列；如果核糖體結(jié)合位點(diǎn)被置于能使其翻譯的位置時(shí)，那么它是可操作地連于編碼序列。一般，“可操作地連于”意味著相鄰，而對于分泌前導(dǎo)序列則意味著在閱讀框中相鄰。TTl基因?yàn)橐环N“一因多效”的基因，與植物的抗熱性、抗旱性、抗寒性、抗鹽性等抗逆性相關(guān)，通過轉(zhuǎn)基因方法將其轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可以提高植物的多種抗逆性，可培育出具有綜合抗逆性的植物新品系。本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明提供了 TTl基因在提高棉花抗逆性中的用途。TTl基因可用于制備高抗逆性的棉花轉(zhuǎn)化體，進(jìn)一步培養(yǎng)抗逆、優(yōu)質(zhì)的轉(zhuǎn)基因棉花新品種。本發(fā)明的實(shí)施例中也通過實(shí)驗(yàn)證明了轉(zhuǎn)入TTl的棉花對鹽、干旱、低溫、高溫均有較高的綜合抗逆性，同時(shí)也降低了外界逆境對棉花產(chǎn)量的影響，具有一定的穩(wěn)產(chǎn)增產(chǎn)效果。
本發(fā)明培育出抗逆棉花的方法也簡便而有效，利用本發(fā)明中的轉(zhuǎn)化體系能使得 TTl基因的各項(xiàng)抗逆性都得到良好的發(fā)揮，具有好的應(yīng)用前景，能夠拓寬棉花的種植區(qū)域和環(huán)境適應(yīng)性，對確保我國棉花生產(chǎn)的長期穩(wěn)定發(fā)展具有重要的戰(zhàn)略意義。
具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例進(jìn)一步說明而不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中，凡未注明具體實(shí)驗(yàn)條件的，均為按照本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的常規(guī)條件，例如 Sambrook, Russell 的分子克隆實(shí)驗(yàn)室手冊(New York Cold Spring Harbor LaboratoryPress, 1989)中所述的條件,或按照制造廠商所建議的條件。下述實(shí)施例中， 所用農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciensp)采用LBA4404菌株；大腸桿菌(E. coli)采用 DH5 α菌株,菌株均購自于Qiagen公司。載體ρΒΙ 121、pCAMBIA1301購自于Clontech公司。 TA克隆試劑盒pUCm-T Vector Kit, Taq Polymerase,限制性內(nèi)切酶,連接酶,DNA回收純化試劑盒均購于上海生工生物工程有限公司。其余化學(xué)實(shí)際均為市售分析純。下述實(shí)施例中， “SEQ ID NO :1”單獨(dú)出現(xiàn)時(shí)，本領(lǐng)域技術(shù)人員可理解其為“SEQ ID NO :1所示核苷酸序列” 的簡稱。實(shí)施例一TTl基因的克隆及獲取以油菜中的atp6 (genebank gi :89279377)基因?yàn)檎T館蛋白，根據(jù)酵母雙雜交方法(見Clontech公司所公開的資料)，篩選到油菜中的一個(gè)EST序列(SEQ ID N0:2所示)， 再根據(jù)這段篩選到的序列，通過5’RACE (見Takara公司所公開的資料)的方法獲得本發(fā)明所述的基因，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO. I所示。根據(jù)SEQ ID NO. I所示核苷酸序列設(shè)計(jì)引物上游引物(SEQID NO. 3) :5，-ATGTCGGATGATTTGAGTTTATG_3，，下游引物(SEQID NO. 4) :5，-TCAGACTGGTGTTGGGTTGGATAT-3，。 然后經(jīng)PCR從油菜cDNA中擴(kuò)增SEQ ID NO. I所示的核苷酸序列。對PCR產(chǎn)物純化(見Qiagen公司所公開的PCR產(chǎn)物純化資料)，經(jīng)測序驗(yàn)證，得到SEQ ID NO. I的基因序列。實(shí)施例二 ■ 轉(zhuǎn)TTl基因棉花的制備I、目的基因過量表達(dá)重組質(zhì)粒構(gòu)建根據(jù)SEQ ID NO 1所示核苷酸序列設(shè)計(jì)引物，上游引物(SEQID NO. 5) :5’ -CGC GGATCCATGTCGGATGATTTGAGTTTATG-3’，下游引物(SEQID NO. 6) :5，-CCGGAGC TCTCAGACTGGTGTTGGGTTGGATAT-3，。經(jīng)PCR，從油菜cDNA中擴(kuò)增完整的SEQ ID NO : I所示的核苷酸序列，對PCR產(chǎn)物純化(見Qiagen公司所公開的資料)，進(jìn)行TA克隆，BamH I與Sac I酶切鑒定陽性重組克隆。陽性克隆用BamHl與Sacl酶切，膠回收，與載體pBI121連接(連接位點(diǎn)BamHl與 Sacl)，獲含SEQ ID NO : I的過量表達(dá)重組質(zhì)粒。將含SEQ ID NO : I的過量表達(dá)重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌LBA4404中。2、棉花的遺傳轉(zhuǎn)化2-1、農(nóng)桿菌菌液的制備挑取含SEQ ID NO 1的過量表達(dá)重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，接種于含20mg/L鏈霉素，
650mg/L卡那霉素，40mg/L利福平的LB液體培養(yǎng)基中，28°C搖菌過夜后收集菌體，重懸于含 100mg/L乙酰丁香酮的MS液體培養(yǎng)基中至0D600 = O. 6 1，28°C搖菌I 2h。2-2、外植體的制備棉花種子用95%濃硫酸浸泡脫去表面短絨，清水沖洗掉表面硫酸后于陰涼處晾干。將得到的種子先用75%乙醇浸泡消毒30s，倒去乙醇并用無菌水沖洗I 2次，用O. I % 升汞浸泡15min，然后用無菌水洗滌5 6次。將消毒后種子放入墊有雙層濾紙并被濕潤過的無菌瓶中，于28°C 30°C條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)2 3d后下胚軸長到I 2cm左右時(shí)，將萌發(fā)種子插入MS固體培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)。約5 7d后待小苗長至8 12cm時(shí)可用于莖尖轉(zhuǎn)化。2-3、基因轉(zhuǎn)化及抗性植株的獲得將長至8 12cm的無菌小苗，用鑷子剝?nèi)ヒ黄尤~，刀片輕輕劃傷頂端分生組織后，將蘸有農(nóng)桿菌的脫脂棉放到小苗莖尖處，浸染20min后將多余的菌液吸去。置于共培養(yǎng)基上，于22°C下培養(yǎng)；3d后，用含有300mg/L頭孢霉素(Cef)的大量滅菌水沖洗莖尖，用滅菌濾紙吸去多余水分后置于恢復(fù)培養(yǎng)基上，在28°C 30°C光照條件下培養(yǎng)7d ;后轉(zhuǎn)移到篩選培養(yǎng)基上，在相同條件下培養(yǎng)20 25d，然后每20d繼代I次，將篩選后成活的莖尖或不定芽轉(zhuǎn)移到根誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在相同條件下培養(yǎng)，20d后繼代I次，轉(zhuǎn)移到含有吲哚丁酸 (IBA)的根誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行根誘導(dǎo)，約20d后出現(xiàn)不定根。培養(yǎng)基配方如下MSB 培養(yǎng)基MS+B5 有機(jī)；共培養(yǎng)基MSB+3 %葡萄糖+0. lmg/L 6_芐氨基腺嘌呤(6-BA) +0. lmg/L α -萘乙酸 (NAA) +40mg/L 乙酸丁香酮(AS) +0. 2% Phytogel, pH 5. O ；篩選培養(yǎng)基MSB+3% 葡萄糖 +0. lmg/L 6-BA+O. lmg/L NAA+400mg/L 頭抱霉素 (Cef) +0. 2% Phytogel, pH 5. 8 ；恢復(fù)培養(yǎng)基MSB+3%葡萄糖+0.lmg/L 6-BA+O. lmg/L NAA+400mg/L Cef+0. 2% Phytogel, pH 5. 8 ；根誘導(dǎo)培養(yǎng)基1/2MS+2%葡萄糖+0.4mg/L IBA+400mg/L Cef+0. 2% Phytogel, pH5. 8o3、轉(zhuǎn)基因植株的PCR檢測待土壤中再生植株長大后，各取葉片少量用CTAB法抽提總DNA，以提取的DNA做模板，分別進(jìn)行PCR檢測上游引物(SEQID NO. 7) :5’ -ATTTCATTTGGAGAGAACACGG-3’ ；下游引物(SEQID NO. 8) :5’ -TCAGACTGGTGTTGGGTTGGATAT-3’。然后1.0%瓊脂糖電泳檢測，檢測結(jié)果有目標(biāo)條帶出現(xiàn)則代表目的基因已轉(zhuǎn)入棉花。所檢測出目的條帶的大小和預(yù)期SEQ ID NO :1大小一致，約為860bp。制得SEQ ID NO I核苷酸序列過量表達(dá)棉花植株備用。實(shí)施例三轉(zhuǎn)TTl基因棉花的耐熱性測定I、棉花幼苗的培育將蛭石高溫滅菌，加入滅菌自來水，充分拌勻，含水量約20 %，置于底部帶有孔洞的發(fā)芽盒內(nèi)，鋪平壓實(shí)后，取轉(zhuǎn)TTl基因型棉花和非轉(zhuǎn)基因型棉花健壯、均勻、一致的種子均勻鋪種。每個(gè)株系做2次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50粒種子。置于25-28°C、光暗=12h 12h、 相對濕度約65%的培養(yǎng)箱內(nèi)，7d后調(diào)查出苗數(shù)并進(jìn)行高溫處理。2、棉花苗期高溫脅迫處理將棉花幼苗置入溫度為46°C、光暗=12h 12h、相對濕度約100%的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行高溫脅迫處理4h，之后置于28°C、光暗=12h 12h、相對濕度約65%的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行恢復(fù)生長，恢復(fù)6d與13d后統(tǒng)計(jì)幼苗成活率。3、結(jié)果統(tǒng)計(jì)棉花苗期經(jīng)過高溫脅迫處理后恢復(fù)生長，隨著恢復(fù)生長的天數(shù)增加，其活苗率也隨之降低，恢復(fù)6d與13d后統(tǒng)計(jì)幼苗成活率如表I :表I恢復(fù)6d與13d后統(tǒng)計(jì)幼苗成活率
權(quán)利要求
1.TTl基因在提高棉花抗逆性中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于所述TTl基因具有如下核苷酸序列(I):如SEQ ID NO. I所示的核苷酸序列或者其簡并序列；或(2):在(I)限定的核苷酸序列中經(jīng)過取代、缺失或添加至少一個(gè)核苷酸衍生所得的核苷酸序列，且與SEQ ID NO. I的序列編碼功能相同或相似的多肽。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的用途，其特征在于所述抗逆性為耐熱性、耐寒性、耐旱性或耐鹽性中的至少一種。
4.TTl基因編碼的多肽在提高棉花抗逆性中的用途。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于所述TTl基因具有如下核苷酸序列(I):如SEQ ID NO. I所示的核苷酸序列或者其簡并序列；或(2):在(I)限定的核苷酸序列中經(jīng)過取代、缺失或添加至少一個(gè)核苷酸衍生所得的核苷酸序列，且與SEQ ID NO. I的序列編碼功能相同或相似的多肽。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的用途，其特征在于所述抗逆性為耐熱性、耐寒性、耐旱性或耐鹽性中的至少一種。
7.培育抗逆棉花的方法，其特征在于包括以下步驟(1):將TTl基因可操作地連于載體上的表達(dá)調(diào)控序列后，形成所述TTl基因的重組載體；(2):將步驟(I)中的重組載體轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞中；(3):經(jīng)篩選獲得轉(zhuǎn)化細(xì)胞，然后將轉(zhuǎn)化細(xì)胞培育成抗逆的棉花植株或其后代，所述后代包括棉花種子及棉花組織。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述TTl基因具有如下核苷酸序列(I):如SEQ ID NO. I所示的核苷酸序列或者其簡并序列；或(2):在(I)限定的核苷酸序列中經(jīng)過取代、缺失或添加至少一個(gè)核苷酸衍生所得的核苷酸序列，且與SEQ ID NO. I的序列編碼功能相同或相似的多肽。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及TT1基因在提高棉花抗逆性中的用途。本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是為提高棉花抗逆性的轉(zhuǎn)基因技術(shù)領(lǐng)域提供一種新的有效選擇。本發(fā)明解決技術(shù)問題的技術(shù)方案是提供了TT1基因在提高棉花抗逆性中的用途，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明轉(zhuǎn)入了TT1基因并過表達(dá)的棉花，其抗逆性如耐熱性、耐寒性、耐旱性、耐鹽性都有了明顯的提高，同時(shí)也降低了外界逆境對棉花產(chǎn)量的影響，具有一定的穩(wěn)產(chǎn)增產(chǎn)效果。本發(fā)明培育出抗逆、高產(chǎn)棉花的方法也簡便而有效，為本領(lǐng)域提供了新的有效選擇。
文檔編號C12N15/82GK102604961SQ20111002265
公開日2012年7月25日 申請日期2011年1月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月20日
發(fā)明者楊毅 申請人:四川貝安迪生物基因工程有限公司