一種酶解活性肽納米硒的制備工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1）酶解動(dòng)物腸粘膜提取肝素后的副產(chǎn)品，滅酶，得到酶解液；所加復(fù)合酶與所述豬腸粘膜液的質(zhì)量比為5~7:100；（2）將殼聚糖、硒化合物和維生素C或檸檬酸按一定比例混合，水相中制備納米硒溶液；（3）將納米硒溶液加入溫度為55~65℃的酶解液中，得到混合液，將混合液加熱至45~60℃反應(yīng)1~2h，得到成液；（4）將所述成液濃縮、干燥得到成品。本發(fā)明充分利用蛋白資源，同時(shí)還避免了對(duì)環(huán)境的污染，同時(shí)以殼聚糖作為介質(zhì)，吸附納米硒與多肽，形成一個(gè)多功能的富含納米硒和短肽鏈以及平衡氨基酸的活性肽蛋白粉，營養(yǎng)價(jià)值高、易吸收，亦能預(yù)防多種疾病。
【專利說明】一種酶解活性肽納米硒的制備工藝 【技術(shù)領(lǐng)域】
[〇〇〇1] 本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)蛋白粉的方法，具體涉及一種酶解活性肽納米硒的制備工 藝。 【背景技術(shù)】
[0002] 腸粘膜含有很豐富的蛋白資源，但卻沒有被充分開發(fā)利用，國內(nèi)腸粘膜主要用于 提取肝素，而后被當(dāng)做廢棄物，造成污染與浪費(fèi)。專利號(hào)為CN101209082的中國專利于2011 年8月31日公開了一種功能性飼料蛋白腸膜蛋白粉的制備方法，以豬腸粘膜或其提取肝素 后的下腳料為原料，利用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶分步酶解后，加入大豆皮或小麥麩皮等載 體最后干燥而制得所述蛋白粉。該方法能有效利用廢棄的腸粘膜，降低了污染與浪費(fèi)，同時(shí) 也解決了我國蛋白飼料短缺的現(xiàn)狀。但是該方法由于要分步酶解，工藝復(fù)雜，操作難度大， 成本高，制得的蛋白粉口感不佳，僅能作為飼料，沒有將腸粘膜內(nèi)的蛋白的利用發(fā)揮到最 佳。而且所得蛋白粉的功能性單一。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是公開一種可將腸粘膜內(nèi)的蛋白利用發(fā)揮到最佳的酶解活性肽納 米硒的制備工藝。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：一種酶解活性肽納米硒 的制備工藝，步驟如下：（1)選用復(fù)合酶酶解動(dòng)物腸粘膜提取肝素后的副產(chǎn)品，然后滅酶， 得到酶解液；所加復(fù)合酶與所述豬腸粘膜液的質(zhì)量比為5~7:100 ;所述復(fù)合酶為木瓜蛋白 酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶的混合物；（2)將殼聚糖、硒化合物和維生素 C或檸檬酸按一定比 例混合，水相中制備納米硒溶液；（3)將納米硒溶液加入溫度為55飛5°C的酶解液中，得到 混合液，將混合液加熱至45飛0°C反應(yīng)廣2h，得到成液；（4)將所述成液濃縮、干燥得到成 品。
[0004] 通過本發(fā)明的制備工藝： 1.硒是人體生命活動(dòng)中必需的微量元素之一，是人體內(nèi)的抗氧化劑，能提高人體免疫 力，具有多種生物功能。與無機(jī)硒相比，有機(jī)硒的利用價(jià)值好、易于吸收、毒性小等優(yōu)勢，逐 漸代替無機(jī)硒，納米硒則在許多方面更優(yōu)于有機(jī)硒，低毒高效：其體外清除自由基效率為有 機(jī)硒的2. 5倍，為無機(jī)硒的5倍；而且納米硒在是它在人體內(nèi)的營養(yǎng)計(jì)量和毒性計(jì)量之間 的范圍較無機(jī)硒和有機(jī)硒要寬很多。殼聚糖是一種直鏈型高分子聚合物，具有良好的生 物兼容性，在藥用載體、醫(yī)藥等方面有廣泛的應(yīng)用，在人體內(nèi)吸收率近1〇〇 %，具有提高免 疫，抑制癌腫細(xì)胞生長，促進(jìn)肝脾抗體形成，促進(jìn)鈣及礦物質(zhì)的吸收，增殖雙岐桿菌、乳酸菌 等人體有益菌群，能預(yù)防多種疾病。將具有生物學(xué)意義的納米硒與殼聚糖結(jié)合起來，納米態(tài) 的硒被殼聚糖吸附包裹成穩(wěn)定的粒子，在與高生物活性的氨基酸螯合，產(chǎn)物兼有納米硒和 殼聚糖免疫調(diào)節(jié)，養(yǎng)顏抗衰，預(yù)防癌癥及心血管疾病等功效，結(jié)合生物體極易消化利用的蛋 白質(zhì)，用于人們營養(yǎng)保健或者疾病治療或輔助治療，具有廣泛的應(yīng)用前景。
[0005] 2.利用動(dòng)物腸粘膜提取肝素后的副產(chǎn)品酶解制備高性能的生物活性肽，其免疫 球蛋白的含量高，僅次于血漿蛋白；然后利用酶解獲得的該活性肽與由殼聚糖、硒化合物混 合，由于殼聚糖大分子中有活潑的羥基和氨基，活性肽可以很好的反應(yīng)結(jié)合在殼聚糖上，從 而制得納米硒并螯合成活性肽納米硒，螯合的溫度過高或過低，影響活性肽的活性，而且溶 液的粘度減弱，殼聚糖對(duì)納米硒以及活性肽的包裹吸附作用減弱，通過本發(fā)明的具體條件 控制得到高活性、易吸收，富含納米硒和短肽鏈以及平衡氨基酸的活性肽蛋白粉，易于消化 吸收，提高機(jī)體免疫力，預(yù)防多種疾病，改善健康狀況。
[0006] 3.木瓜蛋白酶和中性蛋白酶都是多功能蛋白酶，其特異性低，可以水解大部分蛋 白質(zhì)，木瓜蛋白酶對(duì)pH的要求低，在酸性、中性、堿性環(huán)境下均能分解蛋白質(zhì)，對(duì)工藝要求 低，中性蛋白酶水解度高，同時(shí)能夠優(yōu)化所得多肽的口感，再結(jié)合用于出去多肽苦味的風(fēng)味 酶，如此，在保證活性肽的活性和長度以及量的同時(shí)，所得產(chǎn)品的口感更好；本發(fā)明利用三 種酶的協(xié)同增效作用從而可以有效提取動(dòng)物腸粘膜提取肝素后的副產(chǎn)品中的活性肽； 4.維生素 C可以促成納米硒的形成，同時(shí)還為反應(yīng)體系提供一個(gè)酸性環(huán)境；殼聚糖分 子上的氨基性質(zhì)活潑，具有很好的吸附能力，而且殼聚糖在酸性環(huán)境中所構(gòu)成的微環(huán)境具 有良好的懸浮、乳化、穩(wěn)定作用，可以很好的穩(wěn)定納米硒的作用，殼聚糖還是一個(gè)很好的緩 釋載體，可以逐步將硒釋放出來，起到持久補(bǔ)硒作用。
[0007] 作為優(yōu)選，所述木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶的質(zhì)量混合比為 100?150:50?100:10。
[0008] 作為優(yōu)選，所述殼聚糖、硒化合物和維生素C或檸檬酸的質(zhì)量比為 80?100:1:10?15。
[0009] 作為優(yōu)選，步驟（2)中所述殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2ΧΚΓ4飛Χ10Λ所述硒化合物的濃 度為2~3mmol/L，所述維生素 C或檸檬酸的濃度為5~7 g/L。
[0010] 作為優(yōu)選，所述殼聚糖為羧甲基殼聚糖、水溶性殼聚糖和殼寡糖中的一種或多種 混合物。
[0011] 作為優(yōu)選，步驟（2)中將得到的所述納米硒溶液進(jìn)行超聲波處理3(T60min。
[0012] 超聲波處理有利于粒子分散，使其粒度減小，降低聚合度，易于下一步的吸附。
[0013] 作為優(yōu)選，所述超聲波功率為10(Tl50w、頻率為15?20kHz，連續(xù)處理5?lOmin后間 歇 5min。
[0014] 超聲波可以一定程度上降低殼聚糖的分子量，而低分子量殼聚糖同超高分子量殼 聚糖相比具有很強(qiáng)的殺菌和優(yōu)越的生物活性，但是超聲波功率過大、頻率過快則會(huì)導(dǎo)致殼 聚糖降解，間歇性的使用超聲波處理，效果更顯著。
[0015] 作為優(yōu)選，步驟（3)中向所述酶解液中再加入所述酶解液質(zhì)量0. 1~0. 3%的半胱氨 酸或甲硫氨酸。
[0016] 納米硒可以跟半胱氨酸或甲硫氨酸中的巰基相互作用，半胱氨酸或甲硫氨酸作為 軟介質(zhì)，更加穩(wěn)定了殼聚糖、氨基酸和納米硒之間的吸附效果。
[0017] 作為優(yōu)選，所述動(dòng)物腸粘膜為豬腸粘膜，所述硒化合物為亞硒酸鈉。
[0018] 作為優(yōu)選，步驟（4)中所述干燥方式為噴霧干燥，所述噴霧干燥進(jìn)風(fēng)口溫度為 19(T210°C，出風(fēng)口溫度為70?80°C。
[0019] 通過實(shí)施上述的技術(shù)方案，本發(fā)明具有如下的有益效果：本發(fā)明利用豬腸粘膜提 取肝素后的副產(chǎn)品，充分利用蛋白資源，同時(shí)還避免了對(duì)環(huán)境的污染，工藝中以酶解的方式 得到多肽，其酶解徹底，得到的生物活性多肽含量高，而且免疫蛋白含量高，利于提高機(jī)體 的免疫力，同時(shí)以殼聚糖作為介質(zhì)，吸附納米硒與多肽，形成一個(gè)多功能的富含納米硒和短 肽鏈以及平衡氨基酸的活性肽蛋白粉，營養(yǎng)價(jià)值高、易吸收，亦能預(yù)防多種疾病。 【具體實(shí)施方式】
[0020] 實(shí)施例1 : 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其5倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至65°C，加入復(fù)合酶，用小蘇 打調(diào)pH至7. 0,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至90°C滅酶半小時(shí)，得到酶解液， 保溫在60°C ;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為100:50:10的混合物， 其總質(zhì)量與所述溶解液的質(zhì)量比為6:100 ; (2)將羧甲基殼聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C按質(zhì) 量比為80:1:10混合，在水相中制備納米硒溶液，溫度控制在60°C，溶液中殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為2X 10Λ硒化合物的濃度為2mmol/L，維生素 C的濃度為5 g/L ; (3)將納米硒溶液加入 溫度為60°C的酶解液中，得到混合液，混合液在60°C螯合2h，得到成液；（4)將所述成液濃 縮、噴霧干燥得到成品，其中噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為200°C、出風(fēng)口溫度為80°C。
[0021] 實(shí)施例2: 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其6倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至60°C，加入復(fù)合酶，用小蘇 打調(diào)pH至7. 8,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至90°C滅酶半小時(shí)，得到酶解液， 保溫在55°C ;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為150:100:10的混合 物，其總質(zhì)量與所述溶解液的質(zhì)量比為7:100 ; (2)將羧甲基殼聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C按 質(zhì)量比為100:1:15混合，在水相中制備納米硒溶液，溫度控制在60°C，溶液中殼聚糖質(zhì)量 分?jǐn)?shù)為5X 10Λ硒化合物的濃度為3mmol/L，維生素 C的濃度為7g/L ; (3)將納米硒溶液加 入溫度為55°C的酶解液中，再加入酶解液質(zhì)量0. 1%的半胱氨酸或甲硫氨酸，得到混合液， 混合液在60°C螯合2h，得到成液；（4)將所述成液濃縮、噴霧干燥得到成品，其中噴霧干燥 時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為190°C、出風(fēng)口溫度為75°C。
[0022] 實(shí)施例3 : 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其5倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至60°C，加入復(fù)合酶，用小蘇 打調(diào)pH至6. 5,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至95°C滅酶20分鐘，得到酶解液， 保溫在55°C ;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為120:80:10的混合物， 其總質(zhì)量與所述溶解液的質(zhì)量比為5:100 ; (2)將羧甲基殼聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C按質(zhì) 量比為90:1:12混合，在水相中制備納米硒溶液，溫度控制在65°C保溫2小時(shí)，再超聲波 100W、15kHz處理30分鐘，處理6分鐘間歇7分鐘，溶液中殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5X 10_4,硒化 合物的濃度為3mmol/L，維生素 C的濃度為6g/L ; (3)將納米硒溶液加入溫度為60°C的酶 解液中，再加入酶解液質(zhì)量〇. 1%的半胱氨酸，得到混合液，混合液在45°C螯合1. 5h，得到成 液；（4)將所述成液濃縮、噴霧干燥得到成品，其中噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為210°C、出風(fēng)口 溫度為70°C。
[0023] 實(shí)施例4 : 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其5倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至60°C，加入復(fù)合酶，用小 蘇打調(diào)pH至6. 5,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至95°C滅酶20分鐘，得到酶解 液，保溫在55°C;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為120:80:10的混合 物，其總質(zhì)量與所述溶解液的質(zhì)量比為5:100 ;(2)將羧甲基殼聚糖、亞硒酸鈉和檸檬酸按 質(zhì)量比為90:1:12混合，在水相中制備納米硒溶液，溫度控制在65°C保溫2小時(shí)，再超聲波 150W、20kHz處理60分鐘，處理10分鐘間歇10分鐘，溶液中殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5X 10_4,硒 化合物的濃度為3mmol/L，檸檬酸的濃度為6g/L ; (3)將納米硒溶液加入溫度為60°C的酶 解液中，再加入酶解液質(zhì)量〇. 3%的半胱氨酸，得到混合液，混合液在45°C螯合1. 5h，得到成 液；（4)將所述成液濃縮、噴霧干燥得到成品，其中噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為210°C、出風(fēng)口 溫度為70V。
[0024] 實(shí)施例5 : 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其5倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至60°C，加入復(fù)合酶，用小 蘇打調(diào)pH至6. 5,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至95°C滅酶20分鐘，得到酶解 液，保溫在55°C;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為120:80:10的混合 物，其總質(zhì)量與所述溶解液的質(zhì)量比為5:100 ;(2)將羧甲基殼聚糖、亞硒酸鈉和檸檬酸按 質(zhì)量比為90:1:12混合，在水相中制備納米硒溶液，溫度控制在65°C保溫2小時(shí)，再超聲波 120W、18kHz處理50分鐘，處理5分鐘間歇5分鐘，溶液中殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5X 10Λ硒化 合物的濃度為3mmol/L，檸檬酸的濃度為7g/L ; (3)將納米硒溶液加入溫度為60°C的酶解液 中，再加入酶解液質(zhì)量〇. 2%的甲硫氨酸，得到混合液，混合液在45°C螯合1. 5h，得到成液； (4)將所述成液濃縮、噴霧干燥得到成品，其中噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為210°C、出風(fēng)口溫度 為 7QV。
[0025] 實(shí)施例6 : 同實(shí)施例3,不同之處在于步驟（2)中沒有進(jìn)行超聲波處理。
[0026] 實(shí)施例7 : 同實(shí)施例3,不同之處在于步驟（3)中沒有加入半胱氨酸或甲硫氨酸。
[0027] 實(shí)施例8 : 同實(shí)施例3,不同之處在于步驟（3)中加入1%的半胱氨酸或甲硫氨酸。
[0028] 對(duì)比例1 : 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其5倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至65°C，加入復(fù)合酶，用小蘇 打調(diào)pH至7. 0,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至90°C滅酶半小時(shí)，得到酶解液， 保溫在60°C ;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為50:150:10的混合物， 其總質(zhì)量與所述溶解液的質(zhì)量比為6:100 ; (2)將羧甲基殼聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C按質(zhì) 量比為80:1:10混合，在水相中制備納米硒溶液，溫度控制在60°C，溶液中殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為2X 10Λ硒化合物的濃度為2mmol/L，維生素 C的濃度為5 g/L ; (3)將納米硒溶液加入 溫度為60°C的酶解液中，得到混合液，混合液在60°C螯合2h，得到成液；（4)將所述成液濃 縮、噴霧干燥得到成品，其中噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為200°C、出風(fēng)口溫度為80°C。
[0029] 對(duì)比例2 : 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其5倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至65°C，加入復(fù)合酶，用小蘇 打調(diào)pH至7. 0,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至90°C滅酶半小時(shí)，得到酶解液， 保溫在60°C ;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為100:50:10的混合物， 其總質(zhì)量與所述溶解液的質(zhì)量比為6:100 ; (2)將羧甲基殼聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C按質(zhì) 量比為80:1:10混合，在水相中制備納米硒溶液，溫度控制在60°C，溶液中殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為2 X 10Λ硒化合物的濃度為2mmol/L，維生素 C的濃度為5 g/L ; (3)將納米硒溶液加入 溫度為60°C的酶解液中，得到混合液，混合液在60°C螯合2h，得到成液；（4)將所述成液濃 縮、噴霧干燥得到成品，其中噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為200°C、出風(fēng)口溫度為80°C。
[0030] 對(duì)比例3 : 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其5倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至65°C，加入復(fù)合酶，用小蘇 打調(diào)pH至7. 0,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至90°C滅酶半小時(shí)，得到酶解液， 保溫在60°C ;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為100:50:10的混合物， 其總質(zhì)量與所述溶解液的質(zhì)量比為6:100 ; (2)將羧甲基殼聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C按質(zhì) 量比為60:1:30混合，在水相中制備納米硒溶液，溫度控制在60°C，溶液中殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為1 X 10Λ硒化合物的濃度為4mmol/L，維生素 C的濃度為8g/L ; (3)將納米硒溶液加入溫 度為60°C的酶解液中，得到混合液，混合液在60°C螯合2h，得到成液；（4)將所述成液濃縮、 噴霧干燥得到成品，其中噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為200°C、出風(fēng)口溫度為80°C。
[0031] 對(duì)比例4: 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其5倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至45°C，加入復(fù)合酶，調(diào)pH 至5. 0,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至90°C滅酶半小時(shí)，得到酶解液，保溫在 60°C ;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為100:50:10的混合物，其總質(zhì) 量與所述溶解液的質(zhì)量比為4:100 ; (2)將羧甲基殼聚糖、亞硒酸鈉和維生素 C按質(zhì)量比 為80:1:10混合，在水相中制備納米硒溶液，溫度控制在60°C，溶液中殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 5X 10Λ硒化合物的濃度為lmmol/L，維生素 C的濃度為2g/L ; (3)將納米硒溶液加入溫度 為70°C的酶解液中，得到混合液，混合液在40°C螯合半小時(shí)，得到成液；（4)將所述成液濃 縮、噴霧干燥得到成品，其中噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為250°C、出風(fēng)口溫度為100°C。
[0032] 對(duì)比例5 : 一種酶解活性肽納米硒的制備工藝，步驟如下：（1)在酶解灌中將豬腸粘膜提取肝素 后的副產(chǎn)品的粉末以其5倍質(zhì)量的水溶解得到溶解液，溫度升至65°C，加入復(fù)合酶，用小蘇 打調(diào)pH至7. 0,酶解豬腸粘膜6小時(shí)后，將酶解灌溫度升至90°C滅酶半小時(shí)，得到酶解液， 保溫在60°C ;復(fù)合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味酶以質(zhì)量比為100:50:10的混合物， 其總質(zhì)量與所述溶解液的質(zhì)量比為6:100 ; (2)將所述酶解液過濾濃縮、噴霧干燥得到成 品，其中噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)口溫度為200°C、出風(fēng)口溫度為80°C。
[0033] 對(duì)上述實(shí)施例和對(duì)比例的工藝將等量的腸粘膜提取肝素后的副產(chǎn)品制備所得到 的成品進(jìn)行活性肽含量以及大小的檢測以及功效檢測。
[0034] 活性寡肽含量：取等量的成品溶于等量的水中，得到檢測液進(jìn)行檢測；其中活性 肽含量檢測所用儀器為日立L-8800型氨基酸自動(dòng)分析儀，活性肽的大小檢測儀器為高效 液相色譜儀；功效檢測是對(duì)抵抗力差的人進(jìn)行臨床試驗(yàn)。
[0035] 結(jié)果如表1 : 表1 :
【權(quán)利要求】
1. 一種復(fù)合氨基酸螯合納米硒葉面肥的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：（1) 將血球蛋白粉用復(fù)合酶酶解得到酶解液；（2)向所述酶解液中加入重量比為3-5%的糖醇， 在5(T70°C條件下反應(yīng)l?2h，得到反應(yīng)液；所述糖醇為甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇和丙三 糖醇混合所得到的混合糖醇；（3)向所述反應(yīng)液中加入納米硒，在45飛5°C下反應(yīng)l~2h， 得到初液；（4)向所述初液中加入所述初液重量5-6%的納米二氧化鈦，在45飛5°C下反應(yīng) 0. 5?lh，然后升溫至90?95°C保溫l(T20min，形成終產(chǎn)品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種復(fù)合氨基酸螯合納米硒葉面肥的制備方法，其特征在于： 所述甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇和丙三糖醇的混合比為廣3:2?5: f 3: f 3。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種復(fù)合氨基酸螯合納米硒葉面肥的制備方法，其特征在于： 所述納米硒為將亞硒酸鈉和檸檬酸混合制備所得；所述亞硒酸鈉和檸檬酸的混合重量比為 5?10:10?20。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種復(fù)合氨基酸螯合納米硒葉面肥的制備方法，其特征在于： 所述復(fù)合酶為胰酶、木瓜蛋白酶和風(fēng)味酶，酶解條件為50-58°C，pH8. 0-8. 5,酶解4. 5-5. 5 小時(shí)。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述一種復(fù)合氨基酸螯合納米硒葉面肥的制備方法，其特征在于： 所述胰酶、木瓜蛋白酶和風(fēng)味酶的質(zhì)量混合比為1-3:1-2:0. 5-1。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種復(fù)合氨基酸螯合納米硒葉面肥的制備方法，其特征在于： 步驟（4)所述中向所述初液中還加入了占所述初液重量0. 01-0. 06%的生物表面活性劑，所 述生物表面活性劑為糖脂類表面活性劑或脂肽類表面活性劑。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述一種復(fù)合氨基酸螯合納米硒葉面肥的制備方法，其特征在于： 所述生物表面活性劑為脂肽類表面活性劑，所述脂肽類表面活性劑為表面活性素類或伊枯 草菌素或桿菌霉素。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種復(fù)合氨基酸螯合納米硒葉面肥的制備方法，其特征在于： 步驟（3)中所述反應(yīng)中還加入了螯合劑，所述螯合劑為檸檬酸、蘋果酸和乳酸中的一種或多 種。
【文檔編號(hào)】C12P21/06GK104095243SQ201410338733
【公開日】2014年10月15日 申請(qǐng)日期:2014年7月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月17日
【發(fā)明者】陸杰坤 申請(qǐng)人:湖州五福農(nóng)業(yè)科技有限公司