酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，包括以下組成成分：賴氨酸0.2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海藻糖600-1000g/L、硫酸鈷0.023-0.12g/L、硫酸鋅0.1-0.45g/L、酵母硒0.1-0.5g/L、甘露聚糖酶100000-200000U/L；本發(fā)明不僅可以增加酵母菌、芽孢桿菌或乳酸菌單菌/混菌發(fā)酵后的益生菌的活菌數(shù)量，縮短發(fā)酵時(shí)間，提高生產(chǎn)效率，降低發(fā)酵成本，還可以提高酵母菌、芽孢桿菌和乳酸菌的保存時(shí)間，增強(qiáng)生物活性，具有良好的經(jīng)濟(jì)、生態(tài)及社會效益。
【專利說明】酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑

【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明涉及一種增效劑，特別涉及一種酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效 劑。

【背景技術(shù)】：
[0002] 微生物發(fā)酵飼料是以微生物發(fā)酵技術(shù)為核心生產(chǎn)的動物飼料，微生物飼料不僅能 夠改善飼料營養(yǎng)吸收水平，降解飼料原料中存在的抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)和可能存在的毒素，提高營 養(yǎng)物質(zhì)的含量，還能大大減少抗生素等藥物類添加劑的使用，提高禽蛋和肉產(chǎn)品等的食品 安全性。
[0003] 目前利用飼用益生菌發(fā)酵生產(chǎn)生物飼料，大部分都是采用固體發(fā)酵技術(shù)。使用微 生物發(fā)酵飼料一定要保證微生物發(fā)酵飼料產(chǎn)品中的活菌數(shù)。發(fā)酵產(chǎn)品中活菌數(shù)含量高能說 明發(fā)酵效果好，并且活菌數(shù)含量高才能在動物腸道中成為優(yōu)勢菌群，抑制致病菌的生長繁 殖，發(fā)揮防病治病和助生長的作用。但是由于發(fā)酵技術(shù)綜合水平較差，發(fā)酵產(chǎn)品中雜菌數(shù) 高，發(fā)酵周期長，成本高，發(fā)酵產(chǎn)品存在益生菌活菌數(shù)低等問題，大大降低了生物飼料的效 果。尤其是對于產(chǎn)品中芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌此類益生菌來說，在工業(yè)生產(chǎn)中在室溫保 存時(shí)活菌存留率低、死亡率高是普遍存在的問題。


【發(fā)明內(nèi)容】
：
[0004] 本發(fā)明的目的就是提供酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，能有效的克 服現(xiàn)有技術(shù)中發(fā)酵產(chǎn)品雜菌數(shù)高，發(fā)酵周期長，成本高，發(fā)酵產(chǎn)品存在益生菌活菌數(shù)低、降 低生物飼料的應(yīng)用效果等問題；尤其是能解決產(chǎn)品保存過程中芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌 活菌存留率低這個(gè)現(xiàn)實(shí)問題。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，包 括以下組成成分：賴氨酸0. 2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海藻糖600-1000g/L、硫酸鈷 0· 023-0. 12g/L、硫酸鋅 0· 1-0. 45g/L、酵母硒 0· 1-0. 5g/L、甘露聚糖酶 100000-200000U/L。
[0006] 用于在酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌發(fā)酵過程中的用途；所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢 桿菌為：釀酒酵母菌、植物乳桿菌、枯草芽孢桿菌中的一種或兩種或三種的混合菌。
[0007] 在發(fā)酵前按照0. 2-1. 8% (v/w)的添加量，添加到固體培養(yǎng)基中；添加前，需要先 配制成水溶液，再添加到固體培養(yǎng)基中。
[0008] 所用的固體培養(yǎng)基為：麩皮70-85%、豆柏5-10%、玉米粉5-10%、紅糖0.5-3%、 酵母粉0.5-2%、生物素0.01-0. 04%，pH自然。
[0009] 酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，其發(fā)酵方法為：
[0010] 第一步：配置固體培養(yǎng)基
[0011] 按照添加比例稱取各組分原料并混合均勻。麩皮70-85%、豆柏5-10%、玉米粉 5-10 %、紅糖 0· 5-3 %、酵母粉 0· 5-2 %、生物素 0· 01-0. 04 % ;
[0012] 第二步：配置增效劑溶液
[0013] 配制增效劑水溶液，使各組分濃度為賴氨酸0. 2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海 藻糖 600-1000g/L、硫酸鈷 0· 023-0. 12g/L、硫酸鋅 0· 1-0. 45g/L、酵母硒 0· 1-0. 5g/L、甘露 聚糖酶 100000-200000U/L ;
[0014] 第三步：將增效劑加入固體培養(yǎng)基中
[0015] 按照0. 2-1. 8% (v/w)的增效劑添加量，計(jì)算需要添加的增效劑溶液的體積；量取 增效劑水溶液先混合入一定體積的蒸餾水中，使得發(fā)酵的料水比為1 : 0.6-1. 0。攪拌均勻 后再將增效劑、種子液和蒸餾水混合液拌入第一步配好的固體培養(yǎng)基中，pH自然。發(fā)酵溫 度30-37°C，發(fā)酵時(shí)間為48-60h。
[0016] 本發(fā)明提供的一種用于固體發(fā)酵生物飼料的增效劑具有以下優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明立足于 提高微生物發(fā)酵飼料中的益生菌活菌數(shù)，提高發(fā)酵飼料產(chǎn)品質(zhì)量，縮短發(fā)酵時(shí)間，節(jié)約生產(chǎn) 成本，研制了一種用于酵母菌、芽孢桿菌和乳酸菌單菌/混菌固體發(fā)酵生物飼料的增效劑。 本發(fā)明不僅可以增加酵母菌、芽孢桿菌或乳酸菌單菌/混菌發(fā)酵后的益生菌的活菌數(shù)量， 縮短發(fā)酵時(shí)間，提高生產(chǎn)效率，降低發(fā)酵成本，還可以提高酵母菌、芽孢桿菌和乳酸菌的保 存時(shí)間，增強(qiáng)生物活性，具有良好的經(jīng)濟(jì)、生態(tài)及社會效益。

【具體實(shí)施方式】：
[0017] 下面通過實(shí)施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0018] 三種種子液的培養(yǎng)方法：
[0019] 釀酒酵母種子液：從試管斜面上挑取一環(huán)釀酒酵母菌種，接種至麥芽汁培養(yǎng)基， 28°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)24h，種子液待用。
[0020] 植物乳桿菌種子液：從試管斜面上挑取一環(huán)植物乳桿菌菌種，接種至MRS培養(yǎng)基， 37°C靜置培養(yǎng)24h，種子液待用。
[0021] 枯草芽孢桿菌種子液：從試管斜面上挑取一環(huán)枯草芽孢桿菌菌種，接種至肉湯培 養(yǎng)基，37°C、180rpm條件下振蕩培養(yǎng)20h，種子液待用。
[0022] 實(shí)施例1 :
[0023] 酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，包括以下組成成分：賴氨酸0. 28g/ L、山梨糖醇150g/L、海藻糖300g/L、硫酸鈷0. 03g/L、硫酸鋅0. 3g/L、酵母硒0. lg/L、甘露聚 糖酶110000U/L ;混合均勻，加入水至完全溶解；在發(fā)酵前按照1. 2% v/w的添加量，添加到 固體培養(yǎng)基中；
[0024] 固體培養(yǎng)基為麩皮80%、豆柏10%、玉米粉7%、紅糖1.5%、酵母粉1.47%、生物 素0.03%的培養(yǎng)基中，pH自然；再加入水和種子液（5%接種量），料水比1 : 0.6,發(fā)酵溫 度為30°C，發(fā)酵池中堆放發(fā)酵時(shí)間48h。
[0025] 所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌為：釀酒酵母菌、植物乳桿菌、枯草芽孢桿菌的混 合菌（三種種子液體積比1 : 1 : 1)。
[0026] 實(shí)施例2 :
[0027] 酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，包括以下組成成分：賴氨酸1. 5g/ L、山梨糖醇320g/L、海藻糖600g/L、硫酸鈷0. 08g/L、硫酸鋅0. 25g/L、酵母硒0. 3g/L、甘露 聚糖酶160000U/L ;混合均勻，加入水至完全溶解；在發(fā)酵前按照1. 0% v/w的添加量，添加 到固體培養(yǎng)基中；
[0028] 固體培養(yǎng)基為：麩皮76%、豆柏9%、玉米粉10%、紅糖2. 98%、酵母粉2%、生物 素0.02%，pH自然；再加入水和種子液（5%接種量），料水比1 : 0.8,發(fā)酵溫度為30°C，發(fā) 酵池中堆放發(fā)酵時(shí)間48h。
[0029] 所述的菌為：釀酒酵母菌、植物乳桿菌的混合菌（兩種種子液體積比1 : 1)。
[0030] 實(shí)施例3 :
[0031] 酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，包括以下組成成分：賴氨酸3g/L、 山梨糖醇500g/L、海藻糖1000g/L、硫酸鈷0. lg/L、硫酸鋅0. 45g/L、酵母硒0. 45g/L、甘露聚 糖酶200000U/L ;混合均勻，加入水至完全溶解；在發(fā)酵前按照0. 7% v/w的添加量，添加到 固體培養(yǎng)基中；
[0032] 固體培養(yǎng)基為：麩皮85%、豆柏6%、玉米粉7%、紅糖0. 56%、酵母粉1.4%、生物 素0.04(%，？!1自然；再加入水和種子液（5 (%接種量），料水比1:0.8，發(fā)酵溫度321：，發(fā)酵 池中堆放發(fā)酵時(shí)間48h。
[0033] 所述的菌為：枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌的混合菌（兩種種子液體積比1 : 1)。
[0034] 實(shí)施例4 :
[0035] 酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，包括以下組成成分：賴氨酸2. 2g/ L、山梨糖醇430g/L、海藻糖960g/L、硫酸鈷0. 03g/L、硫酸鋅0. lg/L、酵母硒0. 5g/L、甘露聚 糖酶200000U/L ;混合均勻，加入水至完全溶解；在發(fā)酵前按照0. 3% v/w的添加量，添加到 固體培養(yǎng)基中；
[0036] 固體培養(yǎng)基為：麩皮78%、豆柏10%、玉米粉10%、紅糖0.9%、酵母粉1.065%、 生物素0.035%，pH自然；加入水和種子液（5%接種量），料水比1 : 1，發(fā)酵溫度為30°C， 發(fā)酵池中堆放發(fā)酵時(shí)間48h。
[0037] 所述的菌為：釀酒酵母菌。
[0038] 實(shí)施例5 :
[0039] 酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，包括以下組成成分：賴氨酸0. 2g/ L、山梨糖醇100g/L、海藻糖800g/L、硫酸鈷0. lg/L、硫酸鋅0. 35g/L、酵母硒0. 4g/L、甘露聚 糖酶190000U/L ;加入水至完全溶解；在發(fā)酵前按照1. 7% v/w的添加量，添加到固體培養(yǎng) 基中；
[0040] 在發(fā)酵前按照（v/w)的添加量，加入水至完全溶解后，添加到固體培養(yǎng)基中；所 用的固體培養(yǎng)基為：麩皮84%、豆柏5%、玉米粉9%、紅糖0.5%、酵母粉1.49%、生物素 0.01%，pH自然；加入水和種子液（5%接種量），料水比1 : 0.8,發(fā)酵溫度為35°C，發(fā)酵池 中堆放發(fā)酵時(shí)間48h ;
[0041] 所述的菌為：植物乳桿菌。
[0042] 下面通過具體的實(shí)驗(yàn)來說明本發(fā)明的顯著功效：
[0043] 通過加速試驗(yàn)測定發(fā)酵產(chǎn)品的存放時(shí)間。選擇401：±21：、冊75(%±5 (%條件下 進(jìn)行6個(gè)月存放試驗(yàn)。在試驗(yàn)期間第0、1、2、3、6個(gè)月末取樣檢測考察指標(biāo)。其中1為添加 了本發(fā)明酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑進(jìn)行的固體發(fā)酵產(chǎn)品，2為未添加本 發(fā)明常規(guī)固體發(fā)酵產(chǎn)品。
[0044]

【權(quán)利要求】
1. 酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，其特征在于：包括以下組成成分：賴 氨酸 0· 2-3g/L、山梨糖醇 100-500g/L、海藻糖 600-1000g/L、硫酸鈷 0· 023-0. 12g/L、硫酸鋅 0· 1-0. 45g/L、酵母硒 0· 1-0. 5g/L、甘露聚糖酶 100000-200000U/L。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，其特征在于： 用于在酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌發(fā)酵過程中的用途；所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌為： 釀酒酵母菌、植物乳桿菌、枯草芽孢桿菌中的一種或兩種或三種的混合菌。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，其特征在于： 在發(fā)酵前按照0.2-1.8% (v/w)的添加量，添加到固體培養(yǎng)基中；添加前，需要先配制成水 溶液，再添加到固體培養(yǎng)基中。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑，其特征在于： 所用的固體培養(yǎng)基為：麩皮70-85 %、豆柏5-10 %、玉米粉5-10 %、紅糖0. 5-3 %、酵母粉 0· 5-2%、生物素 0· 01-0. 04%，pH 自然。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌固體發(fā)酵的增效劑， 其特征在于：其發(fā)酵方法為： 第一步：配置固體培養(yǎng)基 按照添加比例稱取各組分原料并混合均勻；麩皮70-85 %、豆柏5-10%、玉米粉 5-10%、紅糖 0· 5-3%、酵母粉 0· 5-2%、生物素 0· 01-0. 04% ; 第二步：配置增效劑溶液 配制增效劑水溶液，使各組分濃度為賴氨酸〇. 2-3g/L、山梨糖醇100-500g/L、海藻糖 600-1000g/L、硫酸鈷 0· 023-0. 12g/L、硫酸鋅 0· 1-0. 45g/L、酵母硒 0· 1-0. 5g/L、甘露聚糖 酶 100000-200000U/L ; 第三步：將增效劑加入固體培養(yǎng)基中 按照0.2-1. 8% (v/w)的增效劑添加量，計(jì)算需要添加的增效劑溶液的體積；量取增 效劑水溶液先混合入一定體積的蒸餾水中，使得發(fā)酵的料水比為1 : 0. 6-1. 0 ;攪拌均勻后 再將增效劑、種子液和蒸餾水混合液拌入第一步配好的固體培養(yǎng)基中，pH自然；發(fā)酵溫度 30-37 °C，發(fā)酵時(shí)間為48-60h。
【文檔編號】C12N1/38GK104140946SQ201410355239
【公開日】2014年11月12日 申請日期:2014年7月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月25日
【發(fā)明者】于長青, 藺興盛, 李俊霞 申請人:內(nèi)蒙古斯隆生物技術(shù)有限責(zé)任公司