一種納米硒貽貝粉的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及一種貽貝粉的制備方法，具體地說是一種納米硒貽貝粉的制備方法， 屬于水產(chǎn)品加工技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 根據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報道，貽貝蛋白肽和貽貝多糖均具有體外抗氧化活性，因此對貽貝 蛋白提取、酶解和貽貝多糖的提取進(jìn)行了大量研究，但是這些研究都是針對貽貝中的單一 成分(蛋白肽或多糖)進(jìn)行提取及抗氧化活性研究，而針對同時提取蛋白質(zhì)和多糖類物質(zhì)的 提取工藝以及蛋白肽-多糖復(fù)合物的協(xié)同抗氧化活性方面的研究還未見報道。
[0003] 硒是人體生命中必須的重要微量元素，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫能力、抵抗自由基損傷、 防病和調(diào)節(jié)甲狀腺機(jī)能等多種功能。研究表明，硒化能夠顯著增強(qiáng)體內(nèi)抗氧化活性。目前硒 化的方法包括化學(xué)硒化、納米硒化和生物硒化?；瘜W(xué)硒化就是利用化學(xué)反應(yīng)使待硒化物的 某些基團(tuán)與硒共價結(jié)合;生物硒化是在生物體(酵母、植物、動物)的飼料、肥料中加入硒，通 過生物轉(zhuǎn)化作用使硒富集結(jié)合在生物體的生物分子中；納米硒化是在亞硒酸鈉還原為單質(zhì) 硒的化學(xué)反應(yīng)中，利用生物大分子作為模板調(diào)控單質(zhì)硒的粒徑在納米范圍。納米硒生物吸 收性尚，能尚效清除自由基，抗氧化活性尚，是一種有效的補(bǔ)砸廣品。但是目如還未見利用 貽貝提取物進(jìn)行硒化的研究，在納米硒的研究中也只是局限于以多糖為模板。由于模板單 一，調(diào)控效果差，要求反應(yīng)體系中的模板濃度低(約100-400ppm)，給后續(xù)濃縮、干燥帶來麻 煩。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供了一種納米硒貽貝粉的制備方法。該方 法簡單易行，提高生產(chǎn)效率。利用貽貝中的蛋白質(zhì)和多糖作為混合模板，對單質(zhì)硒的調(diào)控能 力增強(qiáng)，得到的納米硒粒徑小而均勻；充分利用貽貝中的蛋白質(zhì)和多糖，避免浪費(fèi)，二者協(xié) 同作用，體外抗氧化活性大大增加。
[0005] 本發(fā)明采用以下技術(shù)方案： 一種納米硒貽貝粉的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟： 1) 貽貝前處理:貽貝取肉后，用清水清洗，去除足絲、雜質(zhì)等，控干水分，置于組織搗碎 機(jī)中勻漿，漿液用95%乙醇萃取，重復(fù)萃取2次，過濾除去脂肪，濾餅用少量乙醇沖洗，真空干 燥、粉碎過100目篩，得脫脂貽貝粉； 2) 貽貝蛋白多糖同提：將步驟1)所制的脫脂貽貝粉用堿性蛋白酶60°C條件下酶解 180min，然后加熱到95°C保持lOmin，降溫至70°C下抽提45min;抽提液過濾除去殘渣，真空 濃縮后噴霧干燥，得貽貝蛋白-多糖復(fù)合物； 3) 貽貝蛋白-多糖復(fù)合物的納米硒化:將步驟2)所得貽貝蛋白-多糖復(fù)合物配成0.2%水 溶液，加熱至60°C，然后加入亞硒酸鈉和Vc，維持在60°C下繼續(xù)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液 真空濃縮、噴霧干燥后即得納米硒貽貝粉。
[0006] 所述步驟1)中萃取溫度為50°C，萃取時間為6h，95%乙醇用量為漿液體積的4倍。 [0007] 所述步驟2)中酶解的料液比為1:40, 3000U/g，pH為10.0。
[0008] 所述步驟3 )中亞硒酸鈉的終濃度為2mM，Vc的終濃度為1 OmM。
[0009] 所述步驟3)中反應(yīng)時間為3h。
[0010] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：1、充分利用貽貝中的蛋白質(zhì)和多糖，避免浪費(fèi)，二者協(xié)同作 用，體外抗氧化活性大大增加。2、利用貽貝中的蛋白質(zhì)和多糖作為混合模板，對單質(zhì)硒微粒 的形成和聚集調(diào)控能力增強(qiáng)，有效減少了粒子間的團(tuán)聚作用，納米硒粒徑約為20_40nm，穩(wěn) 定而均勻地分散于溶液中，體外抗氧化活性大大增加且反應(yīng)體系中模板的濃度高達(dá)0.2%， 比現(xiàn)有文獻(xiàn)報道中僅用多糖做模板的濃度高10倍左右，提高了后續(xù)濃縮、干燥的生產(chǎn)效率。
【附圖說明】
[0011] 圖1是本發(fā)明實(shí)施例1制備的納米硒貽貝粉產(chǎn)品透射電鏡圖。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0013] 實(shí)施例1 納米硒貽貝粉的制備 1.貽貝前處理： 貽貝取肉后，用清水清洗，去除足絲、雜質(zhì)等，控干水分，置于組織搗碎機(jī)中勻漿，漿液 用95%乙醇(4倍體積)在50 °C萃取6 h，重復(fù)2次，過濾除去脂肪，濾餅用少量乙醇沖洗后，真 空干燥后粉碎過100目篩，即得脫脂貽貝粉。
[0014]
貽貝脫脂的目的是為了進(jìn)一步富集蛋白質(zhì)、多糖類物質(zhì)，同時防止貽貝粉的氧化。本例 采用4倍體積的95%乙醇對貽貝進(jìn)行脫脂，脫脂率達(dá)98%，有效消除脂肪對后續(xù)實(shí)驗(yàn)及制品的 不利影響。
[0015] 2.貽貝蛋白多糖同提： 將上述制備的脫脂貽貝粉用堿性蛋白酶在料液比1:40、pH10.0，總活性為3000U/g，60 °C條件下酶解180min，加熱到95 °C保持lOmin，降溫至70 °C下抽提45min。抽提液過濾除去殘 渣，真空濃縮后噴霧干燥，即得貽貝蛋白-多糖復(fù)合物。
[0016] 本步驟總得率、多糖回收率、蛋白質(zhì)回收率分別為81.06%、93.59%和92.01%。本步 驟得到的貽貝蛋白-多糖復(fù)合物中蛋白質(zhì)含量為62.46%，多糖含量31.64%，水分5.08%。
[0017] 3.貽貝蛋白-多糖復(fù)合物的納米硒化 將上述制得的貽貝蛋白-多糖復(fù)合物配成0.2%水溶液，加熱至60°C，加入亞硒酸鈉使其 濃度為2mM，加入Vc使其濃度為10mM，維持在60°C下反應(yīng)3h，然后真空濃縮、噴霧干燥后即得 納米硒貽貝粉。
[0018] 本步驟所制的產(chǎn)品硒粒徑在20-40M1，分散性PDI為0.22，透射電鏡圖如圖1所示。 本發(fā)明樣品含硒量達(dá)到2.07%，蛋白質(zhì)含量為60.36%，多糖含量為31.65%。
[0019] 對比例 按照常規(guī)方法制備貽貝粉:貽貝取肉后，用清水清洗，去除足絲、雜質(zhì)等，控干水分，置 于組織搗碎機(jī)中勻漿，加水適量，過濾去渣，濾液采用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)后噴霧干燥即得貽貝粉。
[0020] 將實(shí)施例中制得的納米硒貽貝粉和貽貝蛋白-多糖復(fù)合物以及對比例所得的貽貝 粉進(jìn)行抗氧化試驗(yàn)研究，分別研究三種產(chǎn)品對DPPH自由基、超氧自由基、羥基自由基三種自 由基的半數(shù)清除濃度(清除率為50%所需的濃度），實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表1所示。
通過上述結(jié)果可以看出，本發(fā)明制備的納米硒貽貝粉對DPPH自由基、超氧自由基、羥基 自由基三種自由基的半數(shù)清除濃度要明顯低于不含硒的貽貝蛋白-多糖復(fù)合物，以及常規(guī) 方法制備的貽貝粉。這是由于本發(fā)明的納米硒貽貝粉利用貽貝中的蛋白質(zhì)和多糖作為混合 模板，二者協(xié)同作用，對單質(zhì)硒微粒的形成和聚集調(diào)控能力增強(qiáng)，有效減少了粒子間的團(tuán)聚 作用，納米硒粒徑約為20_40nm，穩(wěn)定而均勻地分散于溶液中，體外抗氧化活性大大增加。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種納米硒貽貝粉的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟： 1) 貽貝前處理：貽貝取肉后，用清水清洗，去除足絲、雜質(zhì)等，控干水分，置于組織搗碎 機(jī)中勻漿，漿液用95%乙醇萃取，重復(fù)萃取2次，過濾除去脂肪，濾餅用少量乙醇沖洗，真空干 燥、粉碎過100目篩，得脫脂貽貝粉； 2) 貽貝蛋白多糖同提：將步驟1)所制的脫脂貽貝粉用堿性蛋白酶60°C條件下酶解 180min，然后加熱到95°C保持lOmin，降溫至70°C下抽提45min;抽提液過濾除去殘渣，真空 濃縮后噴霧干燥，得貽貝蛋白-多糖復(fù)合物； 3) 貽貝蛋白-多糖復(fù)合物的納米硒化:將步驟2)所得貽貝蛋白-多糖復(fù)合物配成0.2%水 溶液，加熱至60°C，然后加入亞硒酸鈉和Vc，維持在60°C下繼續(xù)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液 真空濃縮、噴霧干燥后即得納米硒貽貝粉。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟1)中萃取溫度為50°C，萃取 時間為6h，95%乙醇用量為漿液體積的4倍。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中酶解的料液比為1:40， 3000U/g， pH為10.0。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟3)中亞硒酸鈉的終濃度為 2mM，Vc的終濃度為1 OmM。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟3)中反應(yīng)時間為3h。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種納米硒貽貝粉的制備方法，屬于水產(chǎn)品加工技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括以下步驟：1）貽貝前處理、2）貽貝蛋白多糖同提、3）貽貝蛋白-多糖復(fù)合物的納米硒化。本發(fā)明采用蛋白多糖同提技術(shù)，得到貽貝蛋白-多糖復(fù)合提取物，二種成分的協(xié)同作用大大增加體外抗氧化活性。貽貝多糖和蛋白肽協(xié)同作用，共同作為模板調(diào)控單質(zhì)硒的聚集，調(diào)控能力增強(qiáng)，硒的粒徑更小更均勻，體外抗氧化活性大大增加，反應(yīng)體系模板的濃度更高，提高后續(xù)濃縮、干燥的生產(chǎn)效率。
【IPC分類】A23L17/50
【公開號】CN105614759
【申請?zhí)枴緾N201511002681
【發(fā)明人】郭曉華, 黃海, 李玉環(huán), 孫愛華
【申請人】山東美佳集團(tuán)有限公司
【公開日】2016年6月1日
【申請日】2015年12月29日