一種飼料添加劑及其制備方法和應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明一種飼料添加劑，含有30?40重量份的植物乳桿菌，40?50重量份的納豆芽孢桿菌，3~7重量份的抗菌肽，1~5重量份的乳糖，7~15重量份的葡萄糖，0.2~1.0重量份的氯化鈉，0.5~3.0重量份的檸檬酸鈉。本發(fā)明還提供了上述飼料添加劑的制備方法，先制備植物乳桿菌菌粉；再制備納豆芽胞桿菌菌粉；然后按照重量份數(shù)，將所得菌粉與抗菌肽，乳糖，葡萄糖，氯化鈉和檸檬酸鈉混合均勻后備用。本發(fā)明還提供了上述飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖、觀賞魚(yú)類養(yǎng)殖中的應(yīng)用。本發(fā)明使用后，在水產(chǎn)養(yǎng)殖和觀賞魚(yú)養(yǎng)殖中可降低殘餌造成的氨氮和亞硝酸鹽增加，為養(yǎng)殖動(dòng)物營(yíng)造良好的棲息環(huán)境；抑制有害菌的生長(zhǎng)，維持養(yǎng)殖動(dòng)物腸道菌群的平衡。
【專利說(shuō)明】
_種詞料添加劑及其制備方法和應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，涉及一種飼料添加劑，具體來(lái)說(shuō)是一種飼料添加劑及其制 備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 水產(chǎn)養(yǎng)殖是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)業(yè)。近年來(lái)，隨著我國(guó)漁業(yè)捕撈產(chǎn)量的停滯不前，水 產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)得到迅猛的發(fā)展，產(chǎn)業(yè)規(guī)模也得到不斷的擴(kuò)大，為我國(guó)創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。但 在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中，由于不合理的養(yǎng)殖操作、不科學(xué)的養(yǎng)殖規(guī)范和片面的追求產(chǎn)量，常造成 養(yǎng)殖水體中殘餌和排泄物的大量增加，破壞水質(zhì)，造成水體富營(yíng)養(yǎng)化，影響水產(chǎn)品質(zhì)量，限 制了我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。減少殘餌對(duì)水質(zhì)的影響，提高養(yǎng)殖產(chǎn)品的抵抗力，是減輕養(yǎng)殖 用水污染和提高養(yǎng)殖產(chǎn)量質(zhì)量的重要途徑。
[0003] 通常，殘餌在養(yǎng)殖水環(huán)境中常產(chǎn)生一些氨氮、亞硝酸鹽等有害物質(zhì)，常造成水體富 營(yíng)養(yǎng)化，養(yǎng)殖生態(tài)失衡，有害微生物過(guò)分增殖，水體變老缺氧，影響魚(yú)類健康。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種飼料添加劑及其制備方法和 應(yīng)用，所述的這種飼料添加劑及其制備方法和應(yīng)用要解決現(xiàn)有技術(shù)中養(yǎng)殖水體中的殘餌和 排泄物造成水體富營(yíng)養(yǎng)化、影響水產(chǎn)品質(zhì)量的技術(shù)問(wèn)題。
[0005] 本發(fā)明一種飼料添加劑，含有如下重量份的組分： 植物乳桿菌 30-40重量份， 納豆芽孢桿菌 40-50重量份， 抗菌肽 3~7重量份，
[0006] 乳糖 1~5重量份， 葡萄糖 7~15重量份， 氯化鈉 0.2~1.0重量份， 檸檬酸鈉 0.5~3.0重量份。
[0007] 進(jìn)一步的，本發(fā)明的一種飼料添加劑，含有如下重量份的組分：
[0008] 植物乳桿菌 35重量份， 納豆芽孢桿菌 45重量份， 抗菌肽 5重量份， 乳糖 3重量份，
[0009] 葡萄糖 10重量份， 氯化鈉 0.5重量份， 檸檬酸鈉 1.5重量份。
[0010] 本發(fā)明還提供了一種飼料，含有上述的添加劑，所述的添加劑在飼料中的質(zhì)量百 分比為0.005~0.02%。優(yōu)選的，為0.01 %。
[0011] 本發(fā)明還提供了上述飼料添加劑的制備方法，包括如下步驟：
[0012] 1)-個(gè)制備植物乳桿菌菌粉的步驟，將植物乳桿菌菌株接種至ijMRS培養(yǎng)基中，活化 后進(jìn)行發(fā)酵，干燥獲取菌粉；
[0013] 2)-個(gè)制備納豆芽胞桿菌菌粉的步驟，將納豆芽胞桿菌菌株接種到LB培養(yǎng)基中， 活化后進(jìn)行發(fā)酵，獲取菌粉；
[0014] 3)按照重量份數(shù)，將步驟1)和步驟2)所得菌粉與抗菌肽，乳糖，葡萄糖，氯化鈉和 檸檬酸鈉混合均勻后備用。
[0015] 進(jìn)一步的，上述LB培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，由胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl和水組成， 胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl和水的物料比為10g: 5g: 10g: 950ml。
[0016] 進(jìn)一步的，上述MRS液體培養(yǎng)基由蛋白胨、牛肉粉、酵母粉、葡萄糖、乙酸鈉、檸檬酸 三銨、吐溫80、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、硫酸錳和水組成，蛋白胨、牛肉粉、酵母粉、葡萄糖、乙酸 鈉、檸檬酸三銨、吐溫80、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、硫酸錳和水的物料比為10g: 10g: 5g: 20g，： 5g：2g：1.0ml：2.0g：0.2g：0.05g：1000ml〇
[0017]優(yōu)選地，上述發(fā)酵為二級(jí)發(fā)酵。
[0018] 優(yōu)選地，步驟1)中的活化時(shí)間為24h。
[0019] 優(yōu)選地，步驟1)中發(fā)酵是按照5 %接種量進(jìn)行發(fā)酵。
[0020] 優(yōu)選地，步驟1)中的發(fā)酵是在30°C發(fā)酵36h。
[0021 ]優(yōu)選地，步驟1)中發(fā)酵后，用檸檬酸將液體發(fā)酵物的pH值調(diào)至4-4.5。
[0022]優(yōu)選地，步驟2)中的活化時(shí)間為24h。
[0023]優(yōu)選地，步驟2)中發(fā)酵是按照5 %接種量進(jìn)行發(fā)酵。
[0024]優(yōu)選地，步驟2)中的發(fā)酵是在37 °C下發(fā)酵24h。
[0025] 優(yōu)選地，步驟1)和步驟2)中獲取菌粉的具體操作為:菌種發(fā)酵結(jié)束后，進(jìn)行冷凍干 燥。
[0026] 本發(fā)明的還提供了上述飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖、觀賞魚(yú)類養(yǎng)殖中的應(yīng)用。
[0027] 芽孢桿菌，Bacillus，是能夠形成芽孢的桿菌或球菌。大多數(shù)芽孢桿菌為有益菌， 能夠抑制有害菌和病原菌的生長(zhǎng)繁殖，分解產(chǎn)生惡臭氣體的有機(jī)物質(zhì)、有機(jī)硫化物和有機(jī) 氮，促進(jìn)微藻的生長(zhǎng)與繁殖，可大大提高水體光合作用的生態(tài)產(chǎn)氧能力，改善養(yǎng)殖動(dòng)物生存 場(chǎng)所的環(huán)境。納豆芽孢桿菌，為芽孢桿菌有益菌的一種。納豆芽孢桿菌不僅具有較強(qiáng)的病原 菌抑制作用，作為飼料添加劑，可以調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)養(yǎng)殖動(dòng)物的免疫力，還可以降 解飼料中的某些復(fù)雜碳水化合物，提高飼料中的轉(zhuǎn)化率。更佳地，納豆芽孢桿菌作為飼料添 加劑，當(dāng)特殊情況下出現(xiàn)殘餌時(shí)，納豆芽孢桿菌可以通過(guò)分解殘餌，降低氨氮、亞硝酸鹽等 有害物質(zhì)的產(chǎn)生，保持良好的水質(zhì)條件。
[0028]植物乳桿菌是乳酸菌的一種，亦為一種有益菌。植物乳桿菌亦對(duì)致病菌有一定的 抑制作用。作為飼料添加劑添加到水產(chǎn)飼料中，植物乳桿菌可以維持腸道菌群的平衡，促進(jìn) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。更佳地，植物乳桿菌通過(guò)大量的產(chǎn)酸來(lái)維持水中pH的穩(wěn)定，降低殘餌中產(chǎn) 生的氨氮和亞硝酸鹽，凈化水質(zhì)，提高養(yǎng)殖水產(chǎn)品的性能，市場(chǎng)前景廣闊。
[0029]另外，抗菌肽為一種具有抗菌活性的多肽，具有抗病原菌，免疫調(diào)節(jié)和損傷修復(fù)的 功能。在水產(chǎn)飼料中添加一定量的抗菌肽，可提高養(yǎng)殖動(dòng)物的抗病能力。
[0030] 本發(fā)明的飼料添加劑可有效去除殘餌中的氨氮和亞硝酸鹽，凈化水質(zhì)，為養(yǎng)殖動(dòng) 物營(yíng)造良好的棲息環(huán)境;抑制有害菌的生長(zhǎng)，維持養(yǎng)殖動(dòng)物腸道菌群的平衡，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 的吸收，提尚抗病能力。
[0031] 本發(fā)明和已有技術(shù)相比，其技術(shù)進(jìn)步是顯著的。在水產(chǎn)養(yǎng)殖和觀賞魚(yú)類養(yǎng)殖中，本 發(fā)明可以有效去除殘餌對(duì)水質(zhì)的影響，降低氨氮和亞硝酸鹽的產(chǎn)生，凈化水質(zhì)，為水產(chǎn)養(yǎng)殖 動(dòng)物營(yíng)造良好的生活環(huán)境;抑制水體和腸道中的有害菌的生長(zhǎng)，增強(qiáng)魚(yú)、蝦、蟹等水產(chǎn)養(yǎng)殖 動(dòng)物的抗病能力，提高水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的產(chǎn)量和質(zhì)量。此外，本發(fā)明提供的飼料添加劑制備工 藝簡(jiǎn)單，對(duì)環(huán)境友好，具有一定的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0032] 實(shí)施例1飼料添加劑制備步驟如下：
[0033] a.納豆芽胞桿菌在無(wú)菌條件下，接種到LB液體培養(yǎng)基中，置于30°C恒溫?fù)u床中活 化24h，隨后將活化后的納豆芽孢桿菌放入發(fā)酵罐中，在30°C下按照5 %接種量發(fā)酵36h，使 用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至4，冷凍干燥，粉碎，得到菌粉。
[0034] b.植物乳桿菌在無(wú)菌條件下，接種到含MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中37°C恒溫活化 24h，隨后將活化后的植物乳桿菌放入發(fā)酵罐中，在37°C下按照5%接種量發(fā)酵24h，將發(fā)酵 產(chǎn)物冷凍干燥，粉碎，得到菌粉。
[0035]將35重量份的植物乳桿菌，45重量份的納豆芽孢桿菌，5重量份的抗菌肽，3重量份 的乳糖，10重量份的葡萄糖，0.5重量份的氯化鈉，1.5重量份的檸檬酸鈉混合均勻后作為本 發(fā)明提供的飼料添加劑。
[0036]實(shí)施例2飼料添加劑制備步驟如下：
[0037] a.納豆芽胞桿菌在無(wú)菌條件下，接種到LB液體培養(yǎng)基中，置于30°C恒溫?fù)u床中活 化24h，隨后將活化后的納豆芽孢桿菌放入發(fā)酵罐中，在30°C下按照5 %接種量發(fā)酵36h，使 用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至4，冷凍干燥，粉碎，得到菌粉。
[0038] b.植物乳桿菌在無(wú)菌條件下，接種到含MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中37°C恒溫活化 24h，隨后將活化后的植物乳桿菌放入發(fā)酵罐中，在37°C下按照5%接種量發(fā)酵24h，將發(fā)酵 產(chǎn)物冷凍干燥，粉碎，得到菌粉。
[0039]將30重量份的植物乳桿菌，40重量份的納豆芽孢桿菌，3重量份的抗菌肽，1重量份 的乳糖，7重量份的葡萄糖，0.2重量份的氯化鈉，0.5重量份的檸檬酸鈉混合均勻后作為本 發(fā)明提供的飼料添加劑。
[0040] 實(shí)施例3飼料添加劑制備步驟如下：
[0041] a.納豆芽胞桿菌在無(wú)菌條件下，接種到LB液體培養(yǎng)基中，置于30°C恒溫?fù)u床中活 化24h，隨后將活化后的納豆芽孢桿菌放入發(fā)酵罐中，在30°C下按照5 %接種量發(fā)酵36h，使 用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至4，冷凍干燥，粉碎，得到菌粉。
[0042] b.植物乳桿菌在無(wú)菌條件下，接種到含MRS液體培養(yǎng)基的厭氧管中37°C恒溫活化 24h，隨后將活化后的植物乳桿菌放入發(fā)酵罐中，在37°C下按照5%接種量發(fā)酵24h，將發(fā)酵 產(chǎn)物冷凍干燥，粉碎，得到菌粉。
[0043]將40重量份的植物乳桿菌，50重量份的納豆芽孢桿菌，7重量份的抗菌肽，5重量份 的乳糖，15重量份的葡萄糖，1.0重量份的氯化鈉，3.0重量份的檸檬酸鈉混合均勻后作為本 發(fā)明提供的飼料添加劑。
[0044] 實(shí)施例4飼料:1噸飼料添加100g實(shí)施例1的添加劑。
[0045] 實(shí)施例5飼料添加劑的水體凈化效果實(shí)驗(yàn)
[0046] 實(shí)驗(yàn)時(shí)間：2015年7月~8月
[0047]實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):江蘇某養(yǎng)殖基地 [0048] 養(yǎng)殖品種:河豚
[0049] 實(shí)驗(yàn)池塘大?。?00m3 [0050] 氣溫:每日氣溫在2(TC以上
[0051]采用實(shí)施例4的飼料，實(shí)驗(yàn)組投喂該飼料，對(duì)照組投喂不添加飼料添加劑的飼料。 正常投喂，分別在連續(xù)投喂的第1天，第3天和第5天，測(cè)定實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組水泥池中氨氮含 量和亞硝酸鹽含量，檢測(cè)數(shù)據(jù)見(jiàn)表1和2。
[0052]表1添加飼料添加劑后水體的氨氮濃度數(shù)據(jù)表
[0054]表2添加飼料添加劑后水體的亞硝酸鹽濃度數(shù)據(jù)表
[0056] 實(shí)施例6飼料添加劑的水體凈化效果實(shí)驗(yàn) 1 本實(shí)施例與實(shí)施例5的差別在于在小水體觀賞魚(yú)中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，在投餌后的第1天， 第3天和第5天檢測(cè)水體中氨氮和亞硝酸含量(表3、表4)。從檢測(cè)結(jié)果可觀察到該飼料添加 劑效果明顯。
[0058]表3添加飼料添加劑后水體的氨氮濃度數(shù)據(jù)表
[0061]表4添加飼料添加劑后水體的亞硝酸鹽濃度數(shù)據(jù)表
[0063]本發(fā)明以飼料添加劑的形式添加到飼料中使用，而不是作為水質(zhì)凈化劑使用，在 達(dá)到凈化水質(zhì)目的的同時(shí)，可明顯減少使用量，減少成本。且該飼料添加劑操作簡(jiǎn)單，環(huán)境 友好，直接減少殘餌對(duì)水質(zhì)影響的同時(shí)，可改善養(yǎng)殖動(dòng)物腸道菌群結(jié)構(gòu)，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸 收，具有顯著的進(jìn)步性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種飼料添加劑，其特征在于含有如下重量份的組分： 植物乳桿菌 30-40重量份， 納豆芽孢桿菌 40-50重量份， 抗菌肽 3~7重量份， 乳糖 1~5重量份， 葡萄糖 7~15重量份， 氯化鈉 0.2~1.0重量份， 朽1檬酸鈉 0.5~3.0重量份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種飼料添加劑，其特征在于含有如下重量份的組分： 植物乳桿菌 35重量份， 納豆芽孢桿菌 45重量份， 抗菌肽 5重量份， 乳糖 3重量份， 葡萄糖 10重量份， 氯化鈉 0.5重量份， 朽1檬酸鈉 1.5重量份。3. 權(quán)利要求1所述的一種飼料添加劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟： 1) 一個(gè)制備植物乳桿菌菌粉的步驟，將植物乳桿菌菌株接種到MRS培養(yǎng)基中，活化后進(jìn) 行發(fā)酵，干燥獲取菌粉； 2) -個(gè)制備納豆芽胞桿菌菌粉的步驟，將納豆芽胞桿菌菌株接種到LB培養(yǎng)基中，活化 后進(jìn)行發(fā)酵，獲取菌粉； 3) 按照重量份數(shù)，將步驟1)和步驟2)所得菌粉與抗菌肽，乳糖，葡萄糖，氯化鈉和檸檬 酸鈉混合均勻后備用。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種飼料添加劑的制備方法，其特征在于:所述的LB培養(yǎng)基為 液體培養(yǎng)基，由胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl和水組成，胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl和水的 物料比為 l〇g:5g: 10g :950ml。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種飼料添加劑的制備方法，其特征在于:所述的MRS液體培 養(yǎng)基由蛋白胨、牛肉粉、酵母粉、葡萄糖、乙酸鈉、檸檬酸三銨、吐溫80、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、 硫酸錳和水組成，蛋白胨、牛肉粉、酵母粉、葡萄糖、乙酸鈉、檸檬酸三銨、吐溫80、磷酸氫二 鉀、硫酸鎂、硫酸錳和水的物料比為1(^:1(^ :58:2(^，：58:28:1.01111 :2.(^:0.28:0.058: 1000ml〇6. -種飼料，其特征在于:含有權(quán)利要求1所述的添加劑，所述的添加劑在飼料中的質(zhì) 量百分比為0.005~0.02%。7. 權(quán)利要求1所述的飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖、觀賞魚(yú)類養(yǎng)殖中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A23K50/80GK105851676SQ201610211397
【公開(kāi)日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年4月7日
【發(fā)明人】馬榮榮, 胡鯤, 劉騰飛, 董亞萍, 楊先樂(lè)
【申請(qǐng)人】上海海洋大學(xué)