一種海洋多肽-硒螯合物的制備方法與應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種海洋多肽?硒螯合物的制備方法與應(yīng)用，其先利用堿溶酸沉法提取海洋動(dòng)植物及其下腳料中的蛋白，或?qū)⒑Ｑ髣?dòng)植物及其下腳料粉碎、磨漿后，在所得蛋白或漿液中加入蛋白酶進(jìn)行酶解，滅酶，制備海洋多肽復(fù)合物溶液；然后利用無(wú)機(jī)亞硒酸鈉中的硒與海洋多肽螯合獲得海洋多肽?硒螯合物，所獲得的海洋多肽?硒螯合物可進(jìn)一步制備成休閑食品、營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品。本發(fā)明制備工藝簡(jiǎn)單；所制備的海洋多肽?硒螯合物及其產(chǎn)品具有獨(dú)特的螯合體制和轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，安全無(wú)毒、易被吸收、可同時(shí)補(bǔ)充氨基酸和硒，必將成為硒補(bǔ)充劑的首選，為海洋動(dòng)植物及其下腳料的應(yīng)用提供了一條新思路。
【專利說(shuō)明】
一種海洋多肽-砸螯合物的制備方法與應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種海洋多肽-砸螯合物的制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]砸(Se)是人體必需的一種重要礦質(zhì)元素，具有重要的生理功能。已有的大量研究表明，很多疾病都與砸營(yíng)養(yǎng)狀況密切相關(guān)。人體主要是通過(guò)飲食獲得砸，人工補(bǔ)砸的方法是口服含砸制劑?，F(xiàn)有含砸制劑一般是用無(wú)機(jī)砸化合物(亞砸酸鈉和砸酸鈉)制成口服制劑。但是，無(wú)機(jī)砸強(qiáng)化劑吸收和利用的效果不理想，生物有效性低，而且具有較強(qiáng)的毒副作用，最低致死量相對(duì)較小，中毒量與需要量之間范圍小，存在較大的安全隱患，因而被嚴(yán)格限制其使用。研究顯示，無(wú)機(jī)砸經(jīng)生物轉(zhuǎn)化后的有機(jī)砸化合物毒性低，吸收率更高，生物利用率和生物活性也更高，在激發(fā)免疫反應(yīng)上比無(wú)機(jī)砸顯著。
[0003]海藻、魚、蝦蟹、鮑魚、海蠣、蛤等海洋動(dòng)植物及其下腳料中含有大量的蛋白質(zhì)，是制備各種活性多肽和氨基酸的優(yōu)良原料。本發(fā)明利用生物技術(shù)對(duì)海藻、魚、蝦蟹、鮑魚、海蠣、蛤等海洋動(dòng)植物及其下腳料進(jìn)行蛋白質(zhì)資源的深加工，進(jìn)行生物活性肽的篩選和提取分離，然后利用無(wú)機(jī)砸進(jìn)行螯合，制備海洋多肽-砸螯合物，將無(wú)機(jī)砸轉(zhuǎn)變成有機(jī)砸。這種海洋生物活性多肽-砸螯合物在不同酸堿條件下穩(wěn)定性好，能顯著提高砸元素的吸收率和利用率，而且還具有抗氧化、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、降血脂和降血糖等活性，有很高的開(kāi)發(fā)價(jià)值和應(yīng)用前景，同時(shí)能提高海藻、魚、蝦蟹、鮑魚、海蠣等海洋動(dòng)植物及其下腳料的附加值，為海藻、魚、蝦蟹、鮑魚、海蠣、蛤等海洋動(dòng)植物及其下腳料資源的利用開(kāi)辟了新的途徑，具有廣闊的市場(chǎng)前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種海洋多肽-砸螯合物的制備方法與應(yīng)用，其具有工藝操作簡(jiǎn)便、安全性高的優(yōu)點(diǎn)。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
一種海洋多肽-砸螯合物，其制備方法包括如下步驟:
(1)海洋多肽的制備:利用堿溶酸沉法提取海洋動(dòng)植物及其下腳料中的蛋白，或直接將海洋動(dòng)植物及其下腳料粉碎、磨漿后，在所得蛋白或漿液中加入蛋白酶進(jìn)行酶解，滅酶，制成海洋多肽復(fù)合物溶液；
(2)海洋多肽-砸螯合物的制備:應(yīng)用液體螯合法將所得海洋多肽復(fù)合物溶液制備成海洋多肽-砸螯合物，并將所得海洋多肽-砸螯合物進(jìn)行冷凍干燥或低溫干燥。
[0006]所述海洋動(dòng)植物包括海藻、魚、蝦蟹、鮑魚、海蠣、蛤。
[0007]步驟(I)中堿溶酸沉法提取海洋動(dòng)植物及其下腳料中蛋白的具體操作為:先將海洋動(dòng)植物及其下腳料超微粉碎，然后將粉碎后的海洋動(dòng)植物及其下腳料與水按質(zhì)量體積比1:10-50混合，利用0.5-2wt%的堿溶液調(diào)節(jié)pH至8.0-11.0，超聲提取10_60min后，50-100°C水浴提取60-120min，過(guò)濾，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.5-4.0進(jìn)行蛋白沉淀，3000-6000r/min離心5-10min得沉淀蛋白，水洗至中性后再次離心，所得沉淀冷凍干燥即得海洋動(dòng)植物及其下腳料中的蛋白；所述堿溶液為NaOH溶液或KOH溶液。
[0008]步驟(I)中所述酶解是用水調(diào)節(jié)所得蛋白或漿液的蛋白濃度，使蛋白濃度達(dá)1.0-5.0wt%，并調(diào)節(jié)溶液pH至7.0-11.0，然后使溫度保持在40-60°C，加入I.0-5.0wt%的蛋白酶，水解30-240min。所述蛋白酶為堿性蛋白酶、中性蛋白酶或復(fù)合蛋白酶。
[0009]步驟(2)中所述液體螯合法制備海洋多肽-砸螯合物的具體操作為:將步驟(I)所得海洋多肽復(fù)合物溶液按體積比1-6:6加入0.5-2mol/L亞砸酸鈉溶液，攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH為
3.0-9.0,在30-80°C條件下持續(xù)反應(yīng)1.0-3.0h后冷卻，離心分離去除雜質(zhì)，然后加入上清液體積3-5倍、75-95wt%的乙醇，靜置12-24h，離心去除上清液，獲得海洋多肽-砸螯合物。
[0010]步驟(2)中所述低溫干燥的溫度為<65°C。
[0011]所得海洋多肽-砸螯合物可按常規(guī)工藝進(jìn)一步制作成各種休閑食品、營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品；
所述營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品為醫(yī)藥上可接受的劑型，包括顆粒劑、膠囊、片劑。
[0012]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點(diǎn):
(I)堿溶酸沉法可提取海洋動(dòng)植物及其下腳料中的蛋白，其提取率高，而目前較少關(guān)于海洋動(dòng)植物蛋白提取的文獻(xiàn)報(bào)道。
[0013](2)本發(fā)明通過(guò)控制蛋白酶解時(shí)間，可有效控制蛋白的降解程度，得到具有高砸螯合活性的生物活性肽。
[0014](3)本發(fā)明通過(guò)將所得海洋多肽與無(wú)機(jī)亞砸酸鈉中的砸進(jìn)行螯合，制備出的有機(jī)海洋生物活性肽-砸螯合物及其產(chǎn)品具有獨(dú)特的螯合體制和轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，安全無(wú)毒、易被吸收、可同時(shí)補(bǔ)充氨基酸和砸離子。
[0015](4)本發(fā)明為海藻、魚、蝦蟹、鮑魚、海蠣、蛤等海洋動(dòng)植物及其下腳料的應(yīng)用提供了一條新思路，為開(kāi)發(fā)有機(jī)砸營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑與功能性食品提供了理論依據(jù)和技術(shù)支持。
【具體實(shí)施方式】
[0016]—種海洋多肽-砸螯合物的制備方法，包括如下步驟:
(1)海洋多肽的制備:先將海藻、魚、蝦蟹、鮑魚、海蠣、蛤等海洋動(dòng)植物及其下腳料進(jìn)行超微粉碎，然后將粉碎后的海洋動(dòng)植物及其下腳料與水按質(zhì)量體積比1:10-50(g/mL)混合，利用0.5-2wt°/c^Na0H溶液或KOH溶液調(diào)節(jié)pH至8.0-11.0，超聲提取10_60min后，50-100 °C水浴提取60-120min，過(guò)濾，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.5-4.0進(jìn)行蛋白沉淀，3000-6000r/min離心5-10min得沉淀蛋白，水洗至中性后再次離心，所得沉淀冷凍干燥即得海洋動(dòng)植物及其下腳料中的蛋白；然后將所得蛋白加水溶解，使蛋白濃度達(dá)1.0-5.0wt%，并調(diào)節(jié)溶液pH至7.0-
11.0，然后使溫度保持在40-600C，加入1.0-5.0的％的堿性蛋白酶、中性蛋白酶或復(fù)合蛋白酶，水解30-240min，再經(jīng)滅酶，制成海洋多肽復(fù)合物溶液；
或直接將海藻、魚、蝦蟹、鮑魚、海蠣、蛤等海洋動(dòng)植物及其下腳料粉碎、磨漿后，使其蛋白濃度達(dá)1.0-5.0wt%，并調(diào)節(jié)溶液pH至7.0-11.0，然后使溫度保持在40-60 °C，加入1.0-5.0wt%的堿性蛋白酶、中性蛋白酶或復(fù)合蛋白酶，水解30-240min，再經(jīng)滅酶，制成海洋多肽復(fù)合物溶液；
(2)海洋多肽-砸螯合物的制備:將步驟(I)所得海洋多肽復(fù)合物溶液按體積比1-6:6加入0.5-2mol/L亞砸酸鈉溶液，攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH為3.0-9.0，在30-80°C條件下持續(xù)反應(yīng)1.0-
3.0h后冷卻，離心分離去除雜質(zhì)，然后加入上清液體積3-5倍、75-95wt%的乙醇，靜置12-24h，離心去除上清液，所得沉淀經(jīng)冷凍干燥或65°C以下低溫干燥，獲得海洋多肽-砸螯合物。
[0017]所得海洋多肽-砸螯合物可按常規(guī)工藝進(jìn)一步制作成休閑食品、營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品;所述營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品為醫(yī)藥上可接受的劑型，包括顆粒劑、膠囊、片劑。
[0018]為了使本發(fā)明所述的內(nèi)容更加便于理解，下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明所述的技術(shù)方案做進(jìn)一步的說(shuō)明，但是本發(fā)明不僅限于此。
[0019]實(shí)施例1
(1)先將滸苔超微粉碎后，與水按質(zhì)量體積比1:30(g/mL)混合，利用2wt°/c^Na0H溶液調(diào)節(jié)pH至9.0，超聲提取1min后，60 °C水浴提取10min，過(guò)濾，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至3.0進(jìn)行蛋白沉淀，4000r/min離心1min得沉淀蛋白，水洗至中性后再次離心，所得沉淀冷凍干燥即得滸苔蛋白，其提取率達(dá)74.16%;
(2 )將所得滸苔蛋白加水溶解，使蛋白濃度達(dá)3.0wt%，并用NaOH溶液調(diào)節(jié)溶液pH至9.0，然后使溫度保持在500C，加入3.0的％的中性蛋白酶，水解90min，再經(jīng)滅酶，制成滸苔多肽復(fù)合物溶液；
(3)將所得滸苔多肽復(fù)合物溶液按體積比1:6加入lmol/L亞砸酸鈉溶液，攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH為8.0，在40°C條件下持續(xù)反應(yīng)2.0h后冷卻，離心分離去除雜質(zhì)，然后加入上清液體積3倍、95wt%的乙醇，靜置12h，離心去除上清液，所得沉淀經(jīng)低溫干燥，獲得滸苔多肽-砸螯合物；
(4)將制得的滸苔多肽-砸螯合物按現(xiàn)有常規(guī)工藝進(jìn)一步制作成各種休閑食品，或顆粒劑、膠囊、片劑(咀嚼片)等形式的營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品。
[0020]實(shí)施例2
(I )先將鯽魚粉碎后，與水按質(zhì)量體積比1: 2 O (g / m L )混合磨漿，使其蛋白濃度達(dá)
1.0wt%，并調(diào)節(jié)溶液pH至7.0，然后使溫度保持在40 0C，加入1.0#%的復(fù)合蛋白酶，水解60min，再經(jīng)滅酶，制成鯽魚多肽復(fù)合物溶液；
(2)將步驟(I)所得鯽魚多肽復(fù)合物溶液按體積比2:6加入0.5mol/L亞砸酸鈉溶液，攪拌均勻，調(diào)節(jié)PH為7.0，在60 °(:條件下持續(xù)反應(yīng)3.0h后冷卻，離心分離去除雜質(zhì)，然后加入上清液體積4倍、80wt%的乙醇，靜置16h，離心去除上清液，所得沉淀經(jīng)低溫干燥，獲得鯽魚多肽-砸螯合物；
(3)將制得的鯽魚多肽-砸螯合物按現(xiàn)有常規(guī)工藝進(jìn)一步制作成各種休閑食品，或顆粒劑、膠囊、片劑(咀嚼片)等形式的營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品。
[0021]實(shí)施例3
(1)先將小魚蝦超微粉碎后，與水按質(zhì)量體積比1:50(g/mL)混合，利用0.5wt°/c^Na0H溶液調(diào)節(jié)pH至11.0，超聲提取60min后，100 °C水浴提取60min，過(guò)濾，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至4.0進(jìn)行蛋白沉淀，6000r/min離心5min得沉淀蛋白，水洗至中性后再次離心，所得沉淀冷凍干燥即得小魚蝦蛋白，其提取率達(dá)76.43%;
(2)將所得小魚蝦蛋白加水溶解，使蛋白濃度達(dá)5.0wt%，并用NaOH溶液調(diào)節(jié)溶液pH至
I1.0，然后使溫度保持在600C，加入5.0的％的中性蛋白酶，水解240min，再經(jīng)滅酶，制成小魚蝦多肽復(fù)合物溶液；
(3)將所得小魚蝦多肽復(fù)合物溶液按體積比1:1加入2mol/L亞砸酸鈉溶液，攪拌均勻，調(diào)節(jié)PH為9.0，在80°C條件下持續(xù)反應(yīng)1.0h后冷卻，離心分離去除雜質(zhì)，然后加入上清液體積5倍、75wt%的乙醇，靜置24h，離心去除上清液，所得沉淀經(jīng)低溫干燥，獲得小魚蝦多肽-砸螯合物；
(4)將制得的小魚蝦多肽-砸螯合物按現(xiàn)有常規(guī)工藝進(jìn)一步制作成各種休閑食品、或顆粒劑、膠囊、片劑(咀嚼片)等形式的營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品。
[0022]本發(fā)明所得海洋多肽-砸螯合物及其產(chǎn)品具有獨(dú)特的螯合體制和轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，安全無(wú)毒、易被吸收、可同時(shí)補(bǔ)充氨基酸和砸，可砸補(bǔ)充劑的首選，為海洋動(dòng)植物及其下腳料的應(yīng)用提供了一條新思路。
[0023]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請(qǐng)專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種海洋多肽-砸螯合物的制備方法，其特征在于:包括如下步驟: (1)海洋多肽的制備:利用堿溶酸沉法提取海洋動(dòng)植物及其下腳料中的蛋白，或直接將海洋動(dòng)植物及其下腳料經(jīng)粉碎、磨漿后，在所得蛋白或漿液中加入蛋白酶進(jìn)行酶解，滅酶，制成海洋多肽復(fù)合物溶液； (2)海洋多肽-砸螯合物的制備:應(yīng)用液體螯合法將所得海洋多肽復(fù)合物溶液制備成海洋多肽-砸螯合物，并將所得海洋多肽-砸螯合物進(jìn)行冷凍干燥或低溫干燥。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述海洋多肽-砸螯合物的制備方法，其特征在于:所述海洋動(dòng)植物包括海藻、魚、蝦蟹、鮑魚、海蠣、蛤。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述海洋多肽-砸螯合物的制備方法，其特征在于:步驟(I)中堿溶酸沉法提取海洋動(dòng)植物及其下腳料中蛋白的具體操作為:先將海洋動(dòng)植物及其下腳料超微粉碎，然后將粉碎后的海洋動(dòng)植物及其下腳料與水按質(zhì)量體積比1:10-50混合，利用0.5-2wt%的堿溶液調(diào)節(jié)pH至8.0-11.0，超聲提取10-60min后，50_100°C水浴提取60_120min，過(guò)濾，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.5-4.0進(jìn)行蛋白沉淀，3000-60001'/111；[11離心5-10111；[11得沉淀蛋白，水洗至中性后再次離心，所得沉淀冷凍干燥即得海洋動(dòng)植物及其下腳料中的蛋白； 所述堿溶液為NaOH溶液或KOH溶液。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述海洋多肽-砸螯合物的制備方法，其特征在于:步驟(I)中所述酶解是用水調(diào)節(jié)所得蛋白或漿液中蛋白濃度，使蛋白濃度達(dá)1.0-5.0wt%，并調(diào)節(jié)溶液pH至7.0-11.0，然后使溫度保持在40-60 0C，加入1.0-5.0wt%的蛋白酶，水解30_240min。5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述海洋多肽-砸螯合物的制備方法，其特征在于:所述蛋白酶為堿性蛋白酶、中性蛋白酶或復(fù)合蛋白酶。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述海洋多肽-砸螯合物的制備方法，其特征在于:步驟(2)中所述液體螯合法制備海洋多肽-砸螯合物的具體操作為:將步驟(I)所得海洋多肽復(fù)合物溶液按體積比1-6:6加入0.5-2mol/L亞砸酸鈉溶液，攪拌均勻，調(diào)節(jié)溶液pH為3.0-9.0，在30-80 °(:條件下持續(xù)反應(yīng)1.0-3.0h后冷卻，離心分離去除雜質(zhì)，然后加入上清液體積3-5倍、75-95wt%的乙醇，靜置12-24h，離心去除上清液，獲得海洋多肽-砸螯合物。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述海洋多肽-砸螯合物的制備方法，其特征在于:步驟(2)中所述低溫干燥的溫度為<65°C。8.一種如權(quán)利要求1所述方法制得的海洋多肽-砸螯合物。9.一種如權(quán)利要求8所述海洋多肽-砸螯合物的應(yīng)用，其特征在于:將所述海洋多肽-砸螯合物按常規(guī)工藝進(jìn)一步制作成各種休閑食品、營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品； 所述營(yíng)養(yǎng)保健品或藥品為醫(yī)藥上可接受的劑型，包括顆粒劑、膠囊、片劑。
【文檔編號(hào)】A23L33/18GK105876809SQ201610234613
【公開(kāi)日】2016年8月24日
【申請(qǐng)日】2016年4月18日
【發(fā)明人】劉斌, 張鳳萍, 劉青
【申請(qǐng)人】廈門三九生物科技有限公司, 廈門一三九生物科技有限公司