專利名稱：一種具有抗感染和抗炎作用的藥物組合物的制作方法
專利說明一種具有抗感染和抗炎作用的藥物組合物 本發(fā)明涉及一種抗感染和抗炎的藥物組合物，具體說是含有射干總黃酮和穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物的藥物組合物。近年來，天然藥物的抗炎作用已受到人們廣泛的關(guān)注，臨床及實驗證明，很多天然藥物具有很好的抗炎作用。實驗研究證實，天然藥物的抗炎作用機制表現(xiàn)為多途徑，與現(xiàn)代藥理學相對應(yīng)，一般主要影響丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸(HPAA)的功能，干擾花生四烯酸代謝，抑制炎性介質(zhì)，抗血栓生成等，隨著對炎癥研究的不斷深入，天然藥物抗炎作用與一氧化氮(NO)的生成也有密切關(guān)系。且天然藥物具有得天獨厚的自然資源優(yōu)勢，毒副作用小，具有十分廣闊的研發(fā)前景。
天然藥物除了抗炎作用，很多天然藥物還具有抗感染作用。早在上世紀30年代，人們就開始了天然藥物抗感染作用的研究，70年代時，這一研究達到了高潮。近年來源于單純解決藥物與微生物關(guān)系的不足，西醫(yī)界人士已經(jīng)注意到綜合治療在抗感染治療中的意義和作用。目前，細菌耐藥性的普遍產(chǎn)生和耐藥感染已經(jīng)成為西醫(yī)界的一大難題，醫(yī)學界期望通過合理用藥來減少耐藥菌的產(chǎn)生并通過新藥的開發(fā)來對付不斷產(chǎn)生的耐藥菌。然而，在人類與細菌的競爭中處于被動地位的往往是人類，耐藥菌感染是當前醫(yī)學界急待解決、但一時又缺乏從機體根本上解決的有效手段。一方面，化學藥物治療耐藥菌近乎無奈；另一方面，化療藥物開發(fā)中的新化合物機會減少，投資過大，風險過高，化學合成藥物過多的毒副作用，使得西藥新藥研制的難度越來越大，而這恰好為天然藥物抗感染研究提供了機會。
本發(fā)明正是基于以上需要，提供了一種抗菌抗病毒感染和抗炎的藥物組合物，具體說是含有射干總黃酮和穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物的藥物組合物制劑。
射干總黃酮最初來源于中草藥射干，其為鳶尾科射干屬植物射干Belam candachnensis(L.)DC.的干燥根莖，為常用中藥材。射干始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，性味苦寒，入肝、肺經(jīng)。具有清熱解毒、利咽消炎的功效，主要用于咽喉肺癰，痰咳氣喘等癥，為治療喉痹咽痛之要藥。主治咽喉患之方劑，大多數(shù)以射干為君藥組方。射干中的主要成分為黃酮，異黃酮及其衍生物為主，含有鳶尾苷(tectoridin)及其苷元鳶尾黃素(tectorigenin)，野鳶尾黃素(irisflorentin)，野鳶尾苷(iridin)，白射干素(dichotomin)，德鳶尾素(irilone)、次野鳶尾黃素(Irisflorentin)，野鳶尾苷元(Irigenin)等?，F(xiàn)代藥理學研究，射干的70％乙醇提取液無論是對炎性早期，還是炎性晚期均有明顯的抑制作用，且具有一定的解熱作用。射干能顯著抑制組織胺所致的小鼠皮膚毛細血管通透性的增高，能明顯抑制大鼠透明質(zhì)酸酶性足浮腫發(fā)展。此外還能明顯抑制巴豆油所致的炎性滲出和增生，對醋酸所致的腹腔毛細血管通透性的增高和大鼠棉球肉芽組織增生均有抑制作用。射干煎劑或浸劑在體外對常見的致病性皮膚真菌有抑制作用。射干水煎劑或注射液在雞胚中抑制流感病毒，在組織培養(yǎng)中抑制或延緩流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、性病毒、柯薩奇病毒、?？刹《竞桶捳畈《镜闹录毎∽冏饔谩Ｒ傍S尾黃素在組織培養(yǎng)中抗流感病毒、延遲柯薩奇病毒、?？刹《疽鸬募毎∽兒途哂锌狗窝浊蚓钚浴１酒放R床用于治療病毒引起的咽喉疾病，療效顯著，總有效率為91％，治愈率、顯著率達93％(李曉蘭等，中藥射干的研究概況，海峽藥學，2003，15(5)72-74)。
穿心蓮內(nèi)酯(Andrographolide)最初來源于爵床科植物穿心蓮Andrographispaniculata(Burm.f.)Nees中提取得到的二萜內(nèi)酯類化合物，是中藥穿心蓮的主要有效成分之一，具有清熱解毒、涼血消腫等功能?，F(xiàn)代藥理學研究表明，穿心蓮內(nèi)酯及其衍生物(如脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯、穿琥寧注射液、蓮必治注射液、病毒凈滴眼液、復方穿琥寧涂膜劑等)具有消炎抗菌、抗病毒感染、抗腫瘤、抗心血管疾病、免疫刺激、保肝利膽及抗生育等功能。在對其抗炎和抗感染的藥理實驗中，用穿心蓮內(nèi)酯1g/kg灌服，對二甲苯、組織胺、醋酸等所致的小鼠皮膚或腹腔毛細血管通透性增高、大鼠蛋清性足腫及巴豆油性肉芽囊滲液均有顯著抑制作用，顯示其抗炎活性。穿心蓮內(nèi)酯還具有抑制和延緩肺炎雙球菌和溶血性乙型鏈球菌所引起的體溫升高的作用。穿心蓮內(nèi)酯碘化注射劑靜脈注射對膿炎球菌局部感染的兔眼病變，能顯著縮短病程，加速炎癥的吸收。含0.5％精制穿心蓮內(nèi)酯的病毒凈滴眼液對單純皰疹病毒I型、腺病毒7型有滅活作用。在穿心蓮內(nèi)酯藥物治療HIV感染的臨床I期實驗中發(fā)現(xiàn)，10mg/kg藥物注射HIV-1感染者，可抑制HIV-1所致的細胞周期失調(diào)，使HIV-1感染者的淋巴細胞CD4+水平上升。臨床研究也表明，穿心蓮內(nèi)酯治療呼吸道病毒感染疾病效果顯著，是一種理想的標本兼治的抗病毒感染的藥物(劉建新等，穿心蓮內(nèi)酯及其衍生物的藥理研究進展，中藥材，2003，26(2)135-138)。
查閱已有專利文獻，未有兩者進行組方制備制劑的報道，本發(fā)明人通過動物實驗驗證，找到該組合物在抗感染和抗炎方面具有更顯著作用，從而完成本發(fā)明。本發(fā)明具有抗感染和抗炎作用的藥物組合物，即含有射干總黃酮和穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物，按照重量份為1∶20至20∶1(含端點)的比例組成。
制備本發(fā)明兩種藥物的優(yōu)選重量配比范圍為1∶3至3∶1(含端點)。
本發(fā)明兩種藥物的最佳重量配比為1∶1射干總黃酮混合物和穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物如穿琥寧、炎琥寧等是本發(fā)明藥物中的兩種活性成分。除了可以使用其單一的化合物形式外，根據(jù)其來源、方式和/或在不同制劑及其過程中的不同需要，可以允許還含有其它無法避免的雜質(zhì)和輔料，及不會對該有效成分的藥效作用造成不良影響的干擾成分。
上述成分中所說的射干總黃酮來源于鳶尾科射干屬植物射干(Belam candachnensis(L.)DC.)的干燥根莖中提取的總黃酮混合物。該成分具有清熱解毒、利咽消炎的功效，主要用于咽喉肺癰，痰咳氣喘等癥，為治療喉痹咽痛之要藥。該總黃酮可以從作為天然原料的射干中經(jīng)乙醇等提取分離而得到(文獻有詳細的制備方法可參考)。當直接使用其乙醇提取物的時候，該提取物通常包括射干總黃酮在內(nèi)的總提取物，只要含有的其他成分不會對該有效成分的藥效作用造成不良影響，并根據(jù)不同制劑要求和允許范圍，也不必一定要求將其分離除去，允許其以適當比例存在。例如，由藥用原料射干得到的醇提物中，除了作為主要成分的射干黃酮類、異黃酮類和其衍生物(如鳶尾苷(tectoridin)及其苷元鳶尾黃素(tectorigen in)、野鳶尾黃素(irisflorentin)、野鳶尾苷(iridin)、白射干素(dichotomin))外，還含有苯醌類、酚類、酮類及二環(huán)三萜類等化合物(如4-苯醌衍生物ardisianone A、belamcandols A和B)等不可避免的存在。這些成分一般不會干擾射干總黃酮的藥效作用，因而在保證上述射干總黃酮用量比例的前提下，根據(jù)具體制藥工藝要求，允許其以適當比例存在。
上述成分中所說的穿心蓮內(nèi)酯為無色方形、長方形或棱柱狀結(jié)晶，無臭、味苦，熔點為224-230℃，不溶于水而溶于沸乙醇，略溶于甲醇和乙醇，結(jié)構(gòu)見

圖1。該成分可以通過化學全合成方式獲得，或是由其他相關(guān)化合物經(jīng)化學修飾改造而獲得，或是從作為天然原料的穿心蓮中經(jīng)乙醇等提取分離而得到(文獻有詳細的制備方法可參考)。該成分具有消炎抗菌、抗病毒感染、抗腫瘤、抗心血管疾病、免疫刺激、保肝利膽及抗生育等功能。當直接使用其乙醇提取物的時候，該提取物通常包括穿心蓮內(nèi)酯在內(nèi)的總內(nèi)酯，只要含有的其他成分不會對該有效成分的藥效作用造成不良影響，并根據(jù)不同制劑要求和允許范圍，也不必一定要求將其分離除去，允許其以適當比例存在。
上述成分中所說的穿心蓮內(nèi)酯衍生物為以穿心蓮內(nèi)酯為母核而經(jīng)過化學或者生物改造而來的所有化合物，例如在需要制成水溶性制劑的時候，可以采用穿心蓮內(nèi)酯的水溶性衍生物，如穿琥寧、炎琥寧、亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯(蓮必治)、穿心蓮內(nèi)酯磺化物(喜炎平)；口服制劑可以用脫水穿心蓮內(nèi)酯。
本發(fā)明藥物的制備將上述藥用成分按照所述的比例混合后，根據(jù)所需劑型，分別按照不同劑型的制劑要求，標準及處理、檢測等方法規(guī)定，制成相應(yīng)劑型的藥物?？商砑舆m當?shù)妮o料或使用適當?shù)妮d體制成相應(yīng)的片劑、丸劑、膠囊劑等固體口服劑型，或是沖劑、糖漿劑、浸膏劑等液體、半固體口服劑型，也可按照注射劑常規(guī)要求和方法，可制成相應(yīng)的注射劑及粉針劑型。本品制劑的優(yōu)選劑型為注射液、輸液、粉針劑、合劑、片劑、膠囊劑、口服液、茶劑、滴丸、散劑、顆粒劑；最佳劑型為膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、注射液、粉針劑。本品的使用量可參考口服，一次0.1-0.15g，一日3-4次。肌注1次0.1～0.2g，1日2次。靜滴1日0.4～0.75g，加于5％～10％葡萄糖液或等滲鹽水輸液中滴注。以下通過實施例的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明，但不應(yīng)就此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。在不脫離本發(fā)明上述技術(shù)思想情況下，凡根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識和慣用手段做出的各種修改、替換或變更，均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
(一)制備實施例實驗例1實施例1 膠囊劑 每粒膠囊含
膠囊劑制備工藝按照上述處方中的配比將穿心蓮內(nèi)酯和/或其衍生物粉末、射干總黃酮粉末按照前面所說的方法將其混合均勻，過篩后，在60℃下干燥后加入羥丙基纖維素和0.5％硬脂酸鎂，再用50％乙醇按常規(guī)方法制粒后填充空心膠囊制成膠囊劑。
實施例2 片劑 每片含
按照上述處方中的配比將穿心蓮內(nèi)酯、射干總黃酮粉末按照前面所說的方法將其混合均勻，在60℃下干燥后加入羥丙基纖維素和0.5％硬脂酸鎂，再用50％乙醇按常規(guī)方法制粒后壓片制成片劑。
實施例3 注射劑 每支(瓶)含
注射液制備工藝1按照上述處方中的配比，稱取藥物后，混合均勻，按常規(guī)方法進行配液，調(diào)節(jié)pH值，活性炭過濾，收集濾液后灌封，滅菌，制成小容量注射液和大容量注射液，大容量注射液用適量氯化鈉進行等滲調(diào)節(jié)?；虿捎贸瑸V后直接分裝于無菌容器中制得小容量注射液和大容量注射液。
注射液制備工藝2按照上述處方中的配比，稱取藥物后，混合均勻，按常規(guī)方法進行配液，調(diào)節(jié)pH值，超濾，收集超濾液后灌封，凍干，制成凍干粉針劑。
注射液制備工藝3按照上述處方中的配比，稱取藥物后，混合均勻，按常規(guī)方法進行配液，調(diào)節(jié)pH值，超濾，收集超濾液后，凍干，粉碎后再分裝成無菌粉針劑。
實施例4 滴丸劑 每5丸含
制備工藝稱取上述處方中各原輔料，按滴丸劑常規(guī)制作方法制成滴丸。
實施例5 分散片 每片含
制備工藝稱取上述處方中各原輔料，按分散片常規(guī)制作方法制成分散片。
實施例6 顆粒劑 每袋含
制備工藝稱取上述處方中各原輔料，按顆粒劑常規(guī)制作方法制成顆粒劑。
(二)藥效學實驗例將本發(fā)明上述藥物按照射干總黃酮∶穿心蓮內(nèi)酯兩者比例為1∶2(樣品1)，1∶1(樣品2)，2∶1(樣品3)制成三種不同比例形式的試驗樣品藥物。
1.抗炎作用1.1對試驗性腹膜炎的抗炎作用實驗方法試驗性腹膜炎小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，其中1組為空白對照組，為蒸餾水等量灌服。2-4組為試驗組，用本發(fā)明上述試驗樣品1、2、3比例制成口服液，每日劑量按照如下表1中的劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)3天。5組為氫化可的松(濃度15mg/kg)，為陽性對照組，按照表1劑量灌胃給藥，給藥1天。以上5組均于末次給藥后30min腹腔注射0.3％的醋酸溶液0.4ml/只，處死小鼠，收集腹腔液在60nm處測定吸收度，結(jié)果如下表1。
表1 本發(fā)明藥物對小鼠腹膜炎的抑制作用
結(jié)果可以看出和空白對照組比較，三個試驗組均有較好的效果(與空白對照比較P＜0.05)，且當試驗組兩種藥品比例為1∶1時，對小鼠的腹腔毛細血管通透性有更好的抑制作用，更接近于陽性對照組。
1.2.對大鼠角叉菜足腫脹的作用實驗方法SD大鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組。其中1組為空白對照組，為蒸餾水等量灌服。2-4組為試驗組，用本發(fā)明上述試驗樣品1、2、3比例制成口服液，每日劑量按照如下表1中的劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)3天。5組為吲哚美辛組(10mg/kg)，為陽性對照組，，灌胃方式給藥，給藥劑量為0.01g/kg，給藥1天。給大鼠后足皮下注射1％角叉菜膠0.1ml致炎，測定最后次給藥后1、2、3、4小時的足直徑，按以下公式計算腫脹度，結(jié)果見表2。
足腫脹度＝給藥后足直徑-給藥前足直徑表2 本發(fā)明藥物對大鼠足腫脹的影響
結(jié)果表明本發(fā)明三組和對照組比較，對大鼠的角叉菜膠足腫脹有明顯的抑制作用(P＜0.05)，且當試驗組兩種藥品比例為1∶1時，對大鼠的角叉菜膠足腫脹有更明顯的抑制作用，更接近于陽性對照組。
2.抗病毒感染作用2.1.體外抗菌活性將本發(fā)明試驗樣品1、2、3的注射液(其中穿心蓮內(nèi)酯采用其水溶性衍生物炎琥寧)與常規(guī)抗菌藥物環(huán)丙沙星注射液進行了體外抗菌活性對比試驗研究，其最小抑菌濃度(MIC)見表3表3 本發(fā)明的體外抗菌活性試驗
試驗表明，本發(fā)明藥物以不同比例形式組合后，對臨床常見的格蘭氏陽性和陰性致病菌均顯示出一定的抑菌活性。試驗中除大腸桿菌效果不明顯外，本發(fā)明對其他病菌均表現(xiàn)出較好的抗菌活性。其中試驗樣品2組的效果稍稍強于其他兩組，提示該種藥物比例為優(yōu)選比例。
2.2.動物體內(nèi)本發(fā)明對流感病毒導致肺炎的抑制作用實驗方法健康試驗小鼠60只，雌雄各半，隨機分成6組，其中1組為正常對照組，2組為模型對照組，3組為病毒唑(規(guī)格100mg/mL)陽性對照組，4-6組為試驗組，用本發(fā)明上述試驗樣品1、2、3比例制成注射液給藥(其中穿心蓮內(nèi)酯采用其水溶性衍生物炎琥寧)。以上各組均按照表4所列劑量于感染前一天開始給小鼠注射給藥，連續(xù)5天。
除正常對照組外，其余各組小鼠乙醚淺麻醉下滴鼻感染流感病毒FM1株10LD50，感染后96h處死動物，取肺稱質(zhì)量，計算肺指數(shù)和抑制率(計算方法見如下公式)，進行t檢驗。結(jié)果見表4。
肺指數(shù)＝肺質(zhì)量/體重×100％肺指數(shù)抑制率＝(模型組平均肺指數(shù)-實驗組平均肺指數(shù))/模型組平均肺指數(shù)×100％表4.本發(fā)明藥物對對小鼠流感病毒性肺炎的作用
結(jié)果表明本發(fā)明試驗三組肺指數(shù)明顯低于模型對照組(P＜0.01)，肺指數(shù)抑制率接近于17.00％，且高于病毒唑陽性對照組，表明本發(fā)明藥物對小鼠流感病毒所致感染性肺炎具有抑制作用。
2.3.體外試驗對三種病毒致細胞病變的作用將本發(fā)明試驗樣品2的注射液(其中穿心蓮內(nèi)酯采用其水溶性衍生物炎琥寧)與常規(guī)抗病毒藥物病毒唑進行了體外抗病毒活性對比試驗，在培養(yǎng)板上已培養(yǎng)成單層的Heb-2傳代細胞和FL細胞內(nèi)分別加入試驗樣品2和病毒唑藥液及30TC ID50的病毒，37℃孵育培養(yǎng)后于顯微鏡下觀察細胞病變，結(jié)果見表5。
表5 本發(fā)明藥品對三種病毒致細胞病變的作用
注結(jié)果中“+”表示對細胞病變有抑制作用，“-”表示對細胞病變無抑制作用，“±”表示對細胞病變有延遲作用。
結(jié)果表明，本發(fā)明藥物對流感病毒FM 1株、腺病毒A型致細胞病變有抑制作用，對皰疹病毒有一定延遲作用。
權(quán)利要求
1.一種具有抗感染和抗炎作用的藥物組合物，其特征為含有射干總黃酮和穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物，其重量比為1∶20至20∶1(含端點)。
2.一種具有抗感染和抗炎作用的藥物組合物，其特征為含有射干總黃酮和穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物，其重量比為1∶3至3∶1(含端點)。
3.一種具有抗感染和抗炎作用的藥物組合物，其特征為含有射干總黃酮和穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物，其重量比為1∶1。
4.根據(jù)權(quán)力要求1、2、3所述的藥物組合物，其特征在于穿心蓮內(nèi)酯的衍生物為穿琥寧、炎琥寧、亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯(蓮必治)、穿心蓮內(nèi)酯磺化物(喜炎平)、脫水穿心蓮內(nèi)酯。
5.根據(jù)權(quán)力要求1、2、3所述的藥物組合物，其特征在于可以與藥學上可接受的輔料或賦形劑制成口服藥物制劑。
6.根據(jù)權(quán)力要求1、2、3所述的藥物組合物，其特征在于可以與藥學上可接受的輔料或賦形劑制成注射藥物制劑。
7.根據(jù)權(quán)力要求1、2、3、5所述的藥物組合物，其優(yōu)選劑型為膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑。
8.根據(jù)權(quán)力要求1、2、3、6所述的藥物組合物，其優(yōu)選劑型為注射液、粉針劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有抗感染和抗炎作用的藥物組合物。本發(fā)明所述的藥物組合物含有射干總黃酮和穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物，其重量比為1∶20至20∶1(含端點)，與藥學上可接受的輔料或賦形劑制成各種制劑，具有抗感染和抗炎的藥理作用，用于治療感染性疾病。
文檔編號A61P31/00GK101073625SQ200610080719
公開日2007年11月21日 申請日期2006年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月15日
發(fā)明者楊春瑋, 孔慶文 申請人:廣東奇方藥業(yè)有限公司