專利名稱：有害生物防治組合物和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及與防治昆蟲有關(guān)的組合物和方法。本發(fā)明還涉及改變和/或破壞G蛋 白偶合受體信號傳導(dǎo)和循環(huán)從而破壞無脊椎動物的正常生物學(xué)或行為的組合物和方法。
背景技術(shù)：
雖然使用化學(xué)品防治有害生物的最早記錄可追溯到公元前2500年，但僅在最近 60年才廣泛使用化學(xué)防治。早期農(nóng)藥包括防治體虱的嚏根草苷(hellebore)、防治蚜蟲的 煙堿和防治各種昆蟲的除蟲菊素(pyrithrin)。在1892年，首次將砷酸鉛用作果樹噴霧，同 時發(fā)現(xiàn)石灰與硫酸銅的混合物(波爾多混合物(Bordeaux mixture))可防治霜霉病，一種葡萄真菌疾病。
化學(xué)有害生物防治的現(xiàn)代時期開始于第二次世界大戰(zhàn)期間。舉例來說，DDT在保 持士兵的健康和安寧方面起重要作用，士兵可使用DDT防治體虱和蚊子。隨后農(nóng)藥得到進 一步發(fā)展，且因為其相對較低的成本、易于使用和有效性，使其成為有害生物防治的主要方 法。長時期保護作物、農(nóng)產(chǎn)品、動物和人類變得有可能，從而相應(yīng)增加食品產(chǎn)量并改良生活 水平。
一些現(xiàn)代農(nóng)藥是經(jīng)過仔細研究以確保針對目標生物體有效、一般對于環(huán)境安全并 且可在對于使用者或消費者無過度危害的情況下使用的完善化合物。這些化合物中有許多 已開發(fā)用于靶向目標生物體內(nèi)的特定生物化學(xué)反應(yīng)，例如植物體內(nèi)光合作用所必需的酶或 昆蟲正常發(fā)育所需的激素。因此，一些現(xiàn)代化學(xué)品是安全的，更具特異性，并且比其已替代 的較老產(chǎn)品更環(huán)保。
此外，G蛋白偶合受體(GPCR)形成整合膜受體的最大家族之一。GPCR經(jīng)由其偶合 于雜三聚G蛋白且隨后調(diào)節(jié)各種效應(yīng)系統(tǒng)將由細胞外刺激提供的信息轉(zhuǎn)導(dǎo)至細胞內(nèi)第二 信使中。治療劑由于其以高特異性結(jié)合配體、激素和藥物的能力而常常靶向GPCR。GPCR的 激動劑活化還引發(fā)使GPCR反應(yīng)性和其內(nèi)化脫敏的過程。
大部分GPCR共有信號傳導(dǎo)、脫敏、內(nèi)化、復(fù)敏和再循環(huán)至質(zhì)膜的循環(huán)過程。這一循 環(huán)防止細胞經(jīng)受過量受體刺激或長時間無活性。GPCR的脫敏機制包括受體磷酸化和隨后的 內(nèi)吞作用，其從細胞表面去除受體-配體復(fù)合物。由于這一脫敏過程，靶向GPCR的組合物 的共同局限性是目標生物體耐受性或抗性，因為受體脫敏可削減所述組合物的有效性。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及用于防治目標有害生物的組合物的實施例，所述組合物包含第一藥 劑和第二藥劑，其中所述第一藥劑具有針對所述目標有害生物的第一活性，所述第二藥劑 具有針對所述目標有害生物的第二活性，所述組合物具有針對所述目標有害生物的第三活 性，并且所述第三活性反映第一藥劑與第二藥劑的協(xié)同相互作用。
另一方面，第一藥劑包含一種或一種以上選自由以下組成的群組的化合物丁酸 戊酯、反式大茴香腦(trans-anethole)、八角茴香油、黑籽油(black seed oil)、檸檬醛、對7異丙基甲苯、染料木素、香葉醇、乙酸香葉酯、肉豆蔻酸異丙酯、d-檸檬烯、沉香醇、乙酸沉香 酯、丁香花油、水楊酸甲酯、a_菔烯、胡椒醛、胡椒基醇、四氫沉香醇、百里香油、白百里香油、 百里酚、檸檬酸三乙酯、香蘭素和冬青油。
另一方面，第一藥劑能夠與目標有害生物體內(nèi)的受體相互作用。
另一方面，所述受體為G蛋白偶合受體。
另一方面，第二藥劑是選自由農(nóng)藥、殺真菌劑、除草劑、殺線蟲劑、殺昆蟲劑、殺螨 劑和殺細菌劑組成的群組。
另一方面，第二藥劑作用于除受體外的分子標靶上。
另一方面，第一藥劑能夠與受體相互作用以引發(fā)、改變或破壞與受體結(jié)合第一藥 劑有關(guān)的生物學(xué)功能，且第二藥劑能夠與和受體循環(huán)相關(guān)的非受體分子或步驟相互作用， 以破壞受體循環(huán)。
另一方面，第一活性持續(xù)第一時段，第二活性持續(xù)第二時段，第三活性持續(xù)第三時 段，且所述第三時段比所述第一時段或所述第二時段長。
另一方面，第一活性和第二活性中的至少一者基本上為零。
另一方面，所述目標有害生物是屬于選自由以下組成的群組的動物目的物種蜱 蟲薄目(Acari)、H 目(Anoplura)、■蟲朱目(Araneae)、！目(Blattaria/Blattodea)、 翅目(Coleoptera)、彈尾目(Collembola)、雙翅目(Diptera)、g蟀目(Grylloptera)、半 翅目(Hemiptera)、異翅目(Heteroptera)、同翅目(Homoptera)、膜翅目(Hymenoptera)、 等足目(Isopoda)、等翅目(Isoptera)、鱗翅目(L印idoptera)、螳螂目(Mantodea)、食毛 目(Mallophaga)、脈翅目(Neuroptera)、蜻蜓目(Odonata)、直翅目(Orthoptera)JSSg (Psocoptera)、小桿目(Rhabditida)、蚤目(Siphonaptera)、綜合綱(Symphyla)、纓尾目 (Thysanura)禾口纓翅目(Thysanoptera)。
另一方面，第二藥劑是二酰胺化合物。
另一方面，第二藥劑是經(jīng)螺環(huán)苯基取代的特窗酸(tetronic acid)農(nóng)藥。
另一方面，第二藥劑是選自由氟蟲腈(fipronil)、可尼丁(clothianidin)、吡蟲 啉(imidacloprid)、阿維菌素(abamectin)、毛喉素(forskolin)、染料木素(genistein)、 育亨賓(yohimbine)、氟嘧菌酯(f luoxastrobin)、氟蟲酰胺(f lubendiamide)和螺甲螨酯 (spiromesifen)組成的群組。
在另一實施例中，第二藥劑包含氟蟲腈。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含丁酸戊酯和八角茴香油。
在這一實施例的另一方面，丁酸戊酯所占范圍為20% _30%，且八角茴香油所占 范圍為40% -60%。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含香葉醇、肉豆蔻酸異丙酯和白百里香油。
在這一實施例的另一方面，香葉醇所占范圍為25% -35%,肉豆蔻酸異丙酯所占 范圍為35% -45%，且白百里香油所占范圍為25% -35%。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含對異丙基甲苯、沉香醇、a_菔烯和百里 酚。
在這一實施例的另一方面，對異丙基甲苯所占范圍為25% -35%，沉香醇所占范 圍為5% -10%, a-菔烯所占范圍為2% _5%，且百里酚所占范圍為30% -45%。8
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含肉豆蔻酸異丙酯、d-檸檬烯、沉香醇、胡 椒醛、胡椒基醇、四氫沉香醇和香蘭素。
在這一實施例的另一方面，肉豆蔻酸異丙酯所占范圍為15% -25%, d-檸檬烯 所占范圍為5% -15%，沉香醇所占范圍為10% -20%，胡椒醛所占范圍為15% -25%，胡 椒基醇所占范圍為5% -15%,四氫沉香醇所占范圍為15% -25%，且香蘭素所占范圍為 0. 5% -5%。
在另一實施例中，第二藥劑包含吡蟲啉。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含香葉醇、肉豆蔻酸異丙酯和白百里香油。
在這一實施例的另一方面，香葉醇所占范圍為15% _35%，肉豆蔻酸異丙酯所占 范圍為35% -45%，且白百里香油所占范圍為25% -45%。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含冬青油、肉豆蔻酸異丙酯和白百里香油。
在這一實施例的另一方面，冬青油所占范圍為20% -60%,肉豆蔻酸異丙酯所占 范圍為30% -40%，且白百里香油所占范圍為2% -45%。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含對異丙基甲苯、沉香醇、a_菔烯和百里 酚。
在這一實施例的另一方面，對異丙基甲苯所占范圍為25% -35%，沉香醇所占范 圍為5% -10%, a-菔烯所占范圍為2% _5%，且百里酚所占范圍為30% -45%。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含d-檸檬烯和白百里香油。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑另外包含丁香花油。
在這一實施例的另一方面，d-檸檬烯所占范圍為25% -35%，白百里香油所占范 圍為25% -35%，且丁香花油所占范圍為35% -50%。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑另外包含冬青油。
在這一實施例的另一方面，d-檸檬烯所占范圍為50% -60%,白百里香油所占范 圍為10% -20%，且冬青油所占范圍為25% -40%。
在另一實施例中，第二藥劑包含阿維菌素。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含肉豆蔻酸異丙酯、白百里香油和冬青油。
在這一實施例的另一方面，肉豆蔻酸異丙酯所占范圍為30% -40%,白百里香油 所占范圍為15% -25%，且冬青油所占范圍為40% -50%。
在另一實施例中，第二藥劑包含可尼丁。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含d-檸檬烯、白百里香油和丁香花油。
在這一實施例的另一方面，d-檸檬烯所占范圍為25% -35%，白百里香油所占范 圍為25% -35%，且丁香花油所占范圍為35% -50%。
在另一實施例中，第二藥劑包含育亨賓、毛喉素或染料木素。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含肉豆蔻酸異丙酯和白百里香油。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑另外包含香葉醇。
在這一實施例的另一方面，香葉醇所占范圍為25% -35%,肉豆蔻酸異丙酯所占 范圍為35% -45%，且白百里香油所占范圍為25% -35%。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑另外包含冬青油。
在這一實施例的另一方面，冬青油所占范圍為40% _50%，肉豆蔻酸異丙酯所占9范圍為30% -40%，且白百里香油所占范圍為15% -25%。
在另一實施例中，第二藥劑包含毛喉素或染料木素，且第一藥劑包含反式大茴香 腦、對異丙基甲苯、沉香醇、a-菔烯和百里酚。
在這一實施例的另一方面，反式大茴香腦所占范圍為15% -25%，對異丙基甲苯 所占范圍為0. 5% -10%，沉香醇所占范圍為30% -45%,a-菔烯所占范圍為2% -10%，且 百里酚所占范圍為30% -45%。
在另一實施例中，第二藥劑包含染料木素。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑包含八角茴香油。
在這一實施例的另一方面，第一藥劑另外包含丁酸戊酯。
在這一實施例的另一方面，丁酸戊酯所占范圍為20% _30%，且八角茴香油所占 范圍為40% -60%。
在另一實施例中，第二藥劑是生物堿。
在這一實施例的另一方面，第二藥劑是選自由咖啡堿、可可堿和茶堿組成的群組。
在另一實施例中，第二藥劑是類黃酮。
在這一實施例的另一方面，第二藥劑是選自由表兒茶素、橙皮苷、堪非醇、柚皮苷、 川皮苷、原花青素、槲皮素、白藜蘆醇、蕓香苷和桔皮素組成的群組。
在另一實施例中，第二藥劑是異黃酮。
在這一實施例的另一方面，第二藥劑是選自由大豆異黃酮(daidzein)、鷹嘴豆 芽素(biochanin)A、香豆雌酚(coumesterol)、芒柄花黃素(formononetin)和葛根素 (puerarin)組成的群組。
在另一實施例中，第二藥劑是黃酮、黃酮醇、黃烷酮、3-羥基黃烷酮、黃烷-3-醇或 花青素。
在這一實施例的另一方面，第二藥劑是選自由芹菜素(apigenin)、木犀草素 (Iuteolin)、香葉木甙(diosmin)、黃酮哌酯(f lavoxate)、漆樹黃酮(fisetin)、異鼠 李素(isorhamnetin)、楊梅黃酮(myricetin)、藿香黃酮醇(pachypodol)、甲基鼠李素 (rhamnazin)、桑色素(morin)、圣草酚(eriodictyol)、橙皮素(hesperetin)、高圣草素 (homoeriodictyol)、柚皮素(naringenin)、二氫堪非醇、二氫槲皮素、兒茶素、表兒茶素、表 焙兒茶素、矢車菊色素(cyanidin)、飛燕草色素(delphinidin)、錦葵色素(malvidin)、天 竺葵色素(pelargonidin)、甲基花青素(peonidin)和矮牽牛素(petunidin)組成的群組。
在另一實施例中，第二藥劑是有機硫化物。
在這一實施例的另一方面，第二藥劑是選自由蒜素、谷胱甘肽、吲哚-3-甲醇、異 硫氰酸酯和蘿卜硫素(sulforaphane)組成的群組。
在另一實施例中，第二藥劑是酚酸。
在這一實施例的另一方面，第二藥劑是選自由辣椒素(capsaicin)、鞣花酸、沒食 子酸、迷迭香酸和鞣酸組成的群組。
在另一實施例中，第二藥劑是植物甾醇。
在這一實施例的另一方面，第二藥劑是選自由谷留醇和皂苷組成的群組。
在另一實施例中，第二藥劑是選自由虎刺素(damnacanthal)、地高辛(digoxin) 和植酸組成的群組。
在另一實施例中，目標有害生物是屬于小桿目的物種。
在另一實施例中，目標有害生物是蛔蟲。
在另一實施例中，目標有害生物是屬于雙翅目的物種。
在另一實施例中，目標有害生物是屬于選自由蜱螨目、雙翅目、半翅目和纓翅目組 成的群組的動物目的物種。
在另一實施例中，目標有害生物是屬于選自由蜚蠊目和纓翅目組成的群組的動物 目的物種。
另一實施例提供一種防治目標有害生物的方法，其包含向目標有害生物或與所述 目標有害生物相關(guān)的基質(zhì)投與有效量的上述實施例之一的組合物，由此協(xié)同防治有害生 物。
在這一實施例的另一方面，所述基質(zhì)是選自由作物、植物、表面和脊椎動物組成的 群組。
一種防治目標有害生物的方法，其包含將包含第一藥劑和第二藥劑的組合物施用 于所述目標有害生物或與目標有害生物相關(guān)的基質(zhì)，其中所述第一藥劑具有針對目標有害 生物的第一活性，所述第二藥劑具有針對目標有害生物的第二活性，所述組合物具有針對 目標有害生物的第三活性，且所述第三活性反映第一藥劑與第二藥劑的協(xié)同相互作用，由 此協(xié)同防治有害生物。
另一實施例提供一種有害生物防治方法，其包含將組合物施用于目標有害生物或 與目標有害生物相關(guān)的基質(zhì)，其中所述組合物包含含有至少一種受體配體的第一藥劑和含 有農(nóng)藥的第二藥劑，且其中所述有害生物防治包含影響與農(nóng)藥功能相關(guān)的有害生物的生理 狀況，同時還影響與所述受體配體相關(guān)的受體功能，由此協(xié)同防治有害生物。
另一實施例提供一種有害生物防治方法，其包含以下步驟提供具有至少一種標 靶GPCR受體的目標有害生物；使所述目標有害生物與包含至少第一藥劑和第二藥劑的組 合物接觸，其中所述第一藥劑能夠與所述標靶受體相互作用以引發(fā)、破壞或改變與標靶受 體結(jié)合第一藥劑有關(guān)的生物學(xué)功能，且其中所述第二藥劑能夠與和標靶受體循環(huán)相關(guān)的非 受體分子或步驟相互作用，以破壞標靶受體循環(huán)；其中組合中的第一和第二藥劑協(xié)作擴大 所破壞或改變的功能，使得第一藥劑結(jié)合標靶受體，從而協(xié)同防治有害生物。
本發(fā)明的其它實施例提供用于防治目標有害生物的組合物，其包括有害生物防治 產(chǎn)品和至少一種活性劑，其中所述活性劑能夠與所述目標有害生物體內(nèi)的受體相互作用； 所述有害生物防治產(chǎn)品可在無活性劑情況下施用時具有針對目標有害生物的第一活性且 所述組合物可具有針對目標有害生物的第二活性；并且所述第二活性可大于所述第一活 性。第一和第二活性可通過測量有效防治目標有害生物的有害生物防治產(chǎn)品的濃度來定 量，且對應(yīng)于第一活性的濃度高于對應(yīng)于第二活性的濃度。第一和第二活性可通過測量在 標準濃度的有害生物防治產(chǎn)品下對目標有害生物的傷殘效應(yīng)來定量，且相較于在無活性劑 情況下施用的有害生物防治產(chǎn)品，組合物展現(xiàn)更大傷殘效應(yīng)。第一活性可持續(xù)第一時段，第 二活性可持續(xù)第二時段，且第二時段可比第一時段長?；钚詣┛砂ㄖ辽賰煞N受體配體的 協(xié)同組合。第二活性可反映活性劑與有害生物防治產(chǎn)品的協(xié)同相互作用。
目標有害生物可選自由真菌、植物、動物、原核生物和原生生物組成的群組。目標 有害生物可為節(jié)肢動物物種，例如昆蟲、蜘蛛或類蜘蛛。目標有害生物可為屬于選自以下動物目的物種蝶螨目、虱目、蜘蛛目、蜚蠊目、鞘翅目、彈尾目、雙翅目、蟋蟀目、異翅目、同 翅目、膜翅目、等足目、等翅目、鱗翅目、螳螂目、食毛目、脈翅目、蜻蜒目、直翅目、哨蟲目、蚤 目、綜合綱、纓尾目和纓翅目。
有害生物防治產(chǎn)品可為氯苯氧基化合物，例如2，4_D胺和/或2，4D IBE0同 樣，有害生物防治產(chǎn)品可為氨基甲酸酯，例如滅多威(methomyl)、克百威(carbofuran)、 西維因(carbaryl)、BPMC、多菌靈(carbendazim)、丁硫克百威(carbosulfan)、克菌丹鹽 酸鹽(captan hydrochloride)和/或殺螟丹(cartap)。有害生物防治產(chǎn)品可為有機磷 酸酯，例如乙酰甲胺磷(ac印hate)、馬拉硫磷(malathion)、二嗪農(nóng)(diazinon)、毒死蜱 (chlorpyfiros)、苯醚威(fenoxycab)、敵瘟磷(edifenphos)、腈苯唑(febuconazole)、溴 蟲清(chlorphenapyr)、磷化鎂、甲胺磷(metamidophos)和 / 或殺螟硫磷(fenitrothion)。 有害生物防治產(chǎn)品可為有機氯，例如DDT、DDE和/或環(huán)氧七氯。有害生物防治產(chǎn)品可為 擬除蟲菊酯，例如氯氰菊酯(cypermethrin)、環(huán)庚草醚(cynmethylin) +2,4-D IBE、高效 氯氟氰菊酉旨(Iambdacyhalothrin)、棉隆(dazomet)、氟氯氰菊酉旨(cyfluthrin)、高效氯氰 菊酉旨(betacypermethrin)、二甲戊樂靈(pendimethlin)、氣菊酉旨(permethrin)、夕臭氛菊酉旨 (deltamethrin)、聯(lián)苯菊酉旨(bifenethrin)、J頓式氣氛菊酉旨(alphacypermethrin)、氛戊菊 酯(fenvalerate)、敵稗(propanil)和/或順式氰戊菊酯(esfenvalerate)。有害生物防 治產(chǎn)品可為新煙堿類，例如噻蟲嗪(thiomethoxam)、氟蟲腈、可尼丁和/或吡蟲啉。有害生 物防治產(chǎn)品可包括除蟲菌素(avermectin)、阿維菌素、多殺菌素(spinosad)、氟嘧菌酯和 /或茚蟲威(indoxacarb)中的至少一者。有害生物防治產(chǎn)品可為植物產(chǎn)品，例如魚藤酮 (rotenone)、煙堿、咖啡堿、除蟲菊粉(pyrethrum)、精油和/或不揮發(fā)性油。有害生物防治 產(chǎn)品可為殺真菌劑、殺線蟲劑、殺昆蟲劑、殺螨劑和/或殺細菌劑。
受體可為G蛋白偶合受體(GPCR)，諸如昆蟲嗅覺級聯(lián)的GPCR，例如酪胺受體、嗅覺 受體0r43a、嗅覺受體OrSIBb和/或章魚胺受體。組合物的成分結(jié)合受體會導(dǎo)致cAMP和/ 或鈣的細胞內(nèi)水平發(fā)生變化，其中所述變化足以允許防治目標有害生物。
防治可包括以下情況，例如殺滅、擊倒、驅(qū)除目標有害生物、干擾其繁殖、干擾其進 食和干擾其生命周期的階段。
本發(fā)明的實施例還包括由本文所揭示的組合物保護的作物。
另外，本發(fā)明的實施例可包括用于防治目標有害生物的組合物，其包括有害生物 防治產(chǎn)品和至少一種活性劑，其中所述活性劑可包括目標有害生物的GPCR的配體，其中 所述配體結(jié)合于所述GPCR可引起cAMP或鈣水平的變化，所述變化可允許防治所述目標有 害生物；所述有害生物防治產(chǎn)品可具有針對目標有害生物的第一活性，活性劑可具有針對 目標有害生物的第二活性，且所述組合物可具有針對目標有害生物的第三活性；并且所述 第三活性可大于所述第一活性或所述第二活性?；钚詣┛砂ㄖ辽賰煞NGPCR配體的協(xié)同 組合。第三活性可指示活性劑與有害生物防治產(chǎn)品之間的協(xié)同作用。在一些實施例中，組合 物可包括至少兩種活性成分，其中至少一種活性成分與有害生物的G蛋白偶合受體(GPCR) 相互作用且其中至少一種活性成分不與所述GPCR相互作用，且其中組合中的至少兩種活 性成分具有協(xié)同有害生物防治活性。有害生物可為昆蟲且GPCR可與嗅覺相關(guān)，并且此外， GPCR優(yōu)選地可不存在于脊椎動物中。協(xié)同有害生物防治活性可具有超過1. 5的協(xié)同作用 系數(shù)。協(xié)同有害生物防治活性可超過各活性成分的累加效應(yīng)，如通過協(xié)同作用的科爾比計算(Colby calculation)所測量。在目標生物體中GPCR對于活性成分可具有高親和力且 在非目標生物體中GPCR可不存在或?qū)τ诨钚猿煞挚删哂械陀H和力。非目標生物體可為脊 椎動物。在一些實施例中，目標生物體可為植物、動物、真菌、原生生物或原核生物，且非目 標生物體可選自作物、脊椎動物和非有害生物的無脊椎動物。
在一些實施例中，本發(fā)明提供低抗性有害生物防治組合物，其包括至少第一活性 成分和第二活性成分，其中所述第一活性成分在所選有害生物體內(nèi)的遺傳控制下與第一分 子標靶相互作用，且其中所述第二活性成分在所選有害生物體內(nèi)的遺傳控制下與第二分子 標靶相互作用，且其中所述組合物中的成分以互補方式共同作用于目標有害生物，且其中 個別目標有害生物對組合物的抗性需要偏離有害生物的非抗性群體的兩種各別遺傳病變。 第一和第二分子標靶可包括由各別遺傳元件編碼或控制的兩種各別分子。所述互補方式可 包括分開起作用的各藥劑的累加效應(yīng)，或所述互補方式可包括與分別起作用的各藥劑相比 的協(xié)同效應(yīng)。第一分子標靶可為GPCR，且第二分子標靶優(yōu)選地不與第一分子標靶相同。
在一些實施例中還提供展現(xiàn)針對無脊椎目標有害生物的高效力和針對脊椎動物 的低毒性的有害生物防治組合物，所述組合物包括活性劑的協(xié)同組合，其中各活性劑在目 標有害生物體內(nèi)以高親和力與分子標靶相互作用且所述分子標靶可不存在于脊椎動物體 內(nèi)或以低親和力存在。至少一種活性劑可為所選GPCR的配體，且至少一種活性劑優(yōu)選地不 為所選GPCR的配體。高目標效力和低脊椎動物毒性可以LD50(目標)相對于LD50(脊椎 動物)的比率表示，且其中所述比率可小于100 1。
在一些實施例中，本發(fā)明提供有害生物防治的方法，其包括使目標有害生物與如 本文所述的組合物接觸，從而防治所述有害生物。所述方法可包括將組合物施用于目標有 害生物或與目標有害生物相關(guān)的基質(zhì)，其中所述組合物可包括農(nóng)藥和含有至少一種受體配 體的活性劑，且其中所述有害生物防治可包括影響與農(nóng)藥功能相關(guān)的有害生物的生理狀 況，同時還影響與所述受體配體相關(guān)的受體功能。組合物的成分結(jié)合受體會導(dǎo)致cAMP和/ 或鈣的細胞內(nèi)水平發(fā)生變化，且其中所述變化足以允許防治目標有害生物。所述農(nóng)藥可選 自氯苯氧基化合物、氨基甲酸酯、有機磷酸酯、有機氯、擬除蟲菊酯、新煙堿類、植物產(chǎn)品、殺 真菌劑、殺線蟲劑、和農(nóng)藥、和殺螨劑、殺細菌劑、和除蟲菌素。所述基質(zhì)可為例如作物和/ 或土壤。所述目標有害生物可為例如真菌、植物、動物、原核生物或原生生物。與單獨使用農(nóng) 藥或單獨使用活性劑相比，使用組合物可允許改良有害生物的防治。所述改良可包括有害 生物防治產(chǎn)品與活性劑的協(xié)同相互作用。改良可包括使用實質(zhì)上類似量的有害生物防治產(chǎn) 品的改良結(jié)果。所述改良結(jié)果可為以下至少一者增加目標有害生物的殺滅；對目標有害 生物繁殖的干擾增加；和有害生物防治產(chǎn)品的長期有效性。改良可包括與使用實質(zhì)上較低 量的有害生物防治產(chǎn)品和/或活性劑實質(zhì)上類似的結(jié)果。使用組合物允許農(nóng)業(yè)改良，例如 增加作物產(chǎn)量；降低施用有害生物防治產(chǎn)品的頻率；降低與農(nóng)藥相關(guān)的植物毒性；和降低 成本或增加與至少一種環(huán)境因素相關(guān)的價值。所述環(huán)境因素可包括例如空氣質(zhì)量、水質(zhì)、土 壤質(zhì)量、可檢測的農(nóng)藥殘留物、工作者的安全性或舒適性；和對非目標生物體的并行效應(yīng)。
還提供開發(fā)用于有害生物防治的組合物的方法，其包括提供表達以下至少一者 的細胞系酪胺受體、嗅覺受體0r43a或嗅覺受體0r83b，其中配體結(jié)合于任一受體可引起 細胞內(nèi)cAMP或鈣水平的變化，且所述變化可指示用于無脊椎有害生物防治的潛力；使細胞 與候選配體接觸；檢測細胞內(nèi)cAMP和/或鈣水平的變化；鑒別候選配體作為用于防治無脊椎有害生物的活性化合物；和將所述活性化合物與農(nóng)藥組合形成用于有害生物防治的組合 物，其中所述農(nóng)藥不結(jié)合于由活性化合物結(jié)合的受體，且其中活性化合物與農(nóng)藥的組合效 應(yīng)可包括針對目標有害生物的效應(yīng)，所述效應(yīng)可大于單獨活性化合物或單獨農(nóng)藥的效應(yīng)。 組合物進一步可包括能夠結(jié)合至少一種受體的第二活性化合物?；钚曰衔锟蓞f(xié)作引起細 胞系內(nèi)和/或目標有害生物體內(nèi)cAMP和/或鈣水平的協(xié)同變化?；钚曰衔锱c農(nóng)藥的組 合效應(yīng)可為協(xié)同效應(yīng)。組合效應(yīng)可通過至少一種選自由以下組成的群組的情況來確定殺 滅、擊倒、驅(qū)除目標有害生物、干擾其繁殖、干擾其進食和干擾其生命周期的階段。
進一步還提供有害生物防治方法，其包括提供包括第一和第二活性成分的組合 物，其中所述第一活性成分與目標有害生物的受體相互作用，且其中所述第二活性成分可 為不與所述第一活性成分的受體相互作用的農(nóng)藥；和使所述有害生物與所述組合物接觸， 其中所述接觸產(chǎn)生協(xié)同有害生物防治。組合物進一步可包括第三活性成分，其中所述第三 活性成分與目標有害生物的受體相互作用，且其中組合中的至少第一和第三活性成分協(xié)同 相互作用以允許防治目標有害生物。第一和第三活性成分可任選地結(jié)合相同受體；在其它 實施例中，第一和第三活性成分不結(jié)合相同受體。組合中的第一、第二和第三活性成分可具 有協(xié)同效應(yīng)，所述效應(yīng)大于任何單一成分的效應(yīng)且也可大于組合中的第一與第三成分的協(xié) 同效應(yīng)。所述受體可為GPCR，例如酪胺受體、嗅覺受體0r43a和嗅覺受體0r83b。有害生物 防治可與有害生物體內(nèi)經(jīng)受體活化的cAMP和/或鈣水平的變化相關(guān)。所述變化可持續(xù)至 少約60秒。
還提供其它有害生物防治方法，其包括提供包括至少兩種活性成分的組合物，其 中至少一種活性成分與目標有害生物的GPCR相互作用，在接觸表達所述GPCR的細胞后在 所述細胞內(nèi)所述組合物產(chǎn)生第一水平的細胞內(nèi)鈣和環(huán)狀A(yù)MP中的至少一者，且所述第一水 平可高于細胞與任何單一活性成分接觸時所產(chǎn)生的第二水平；和使所述有害生物與所述組 合物接觸，其中所述接觸產(chǎn)生協(xié)同有害生物防治。其它實施例提供防治目標有害生物的方 法，其包括使用有害生物防治組合物，所述組合物包括有害生物防治產(chǎn)品和至少一種活性 劑，其中所述活性劑可包括目標有害生物的GPCR的配體，其中所述配體結(jié)合于所述GPCR 可引起cAMP或鈣水平的變化，所述變化允許防治目標有害生物；所述有害生物防治產(chǎn)品可 具有針對所述目標有害生物的第一活性，活性劑可具有針對目標有害生物的第二活性，且 所述組合物可具有針對目標有害生物的第三活性；并且所述第三活性可大于所述第一活性 或所述第二活性。另一種有害生物防治方法可包括使用有害生物防治組合物，其中所述組 合物可包括至少兩種活性成分，其中至少一種活性成分與所述有害生物的G蛋白偶合受體 (GPCR)相互作用且其中至少一種活性成分不與所述GPCR相互作用，且其中組合中的至少 兩種活性成分具有協(xié)同有害生物防治活性。其它有害生物防治方法可允許在目標有害生物 體內(nèi)的低抗性，其包括投與有害生物防治組合物，所述組合物包括至少第一活性成分和第 二活性成分，其中所述第一活性成分在所選有害生物體內(nèi)的遺傳控制下與第一分子標靶相 互作用，且其中所述第二活性成分在所選有害生物體內(nèi)的遺傳控制下與第二分子標靶相互 作用，且其中所述組合物中的成分以互補方式共同作用于目標有害生物，且其中個別目標 有害生物對組合物的抗性需要偏離有害生物的非抗性群體的兩種各別遺傳病變。
其它實施例提供由以下示范的有害生物防治組合物呈組合形式的丁香花油 (LFO)、d_檸檬烯、百里香油和進一步包括農(nóng)藥的摻合物。所述農(nóng)藥可為例如可尼丁。所述摻合物可包括10-80% LF0,5-60% d_檸檬烯和10-80%百里香油。在其它實施例中，摻合 物可包括20-60% LFOUO-45% d_檸檬烯和20-60%百里香油。在其它實施例中，摻合物可 包括42. 6% w/w LF0,27. 35% w/w d_檸檬烯和30. 08% w/w白百里香油。
在某些實施例中，本發(fā)明可包括一種有害生物防治方法，其包括以下步驟；提供具 有至少一種標靶GPCR受體的目標有害生物；使所述目標有害生物與包含至少第一活性劑 和第二活性劑的組合物接觸，其中所述第一活性劑能夠與所述標靶受體相互作用以引發(fā)、 破壞或改變與標靶受體結(jié)合第一活性劑有關(guān)的生物學(xué)功能，且其中所述第二活性劑能夠與 和標靶受體循環(huán)相關(guān)的非受體分子或步驟相互作用，以破壞標靶受體的信號級聯(lián)。在一些 實施例中，組合中的活性劑可協(xié)作擴大所破壞或改變的功能，使得第一活性劑結(jié)合標靶受 體，從而防治有害生物。在本發(fā)明的一些實施例中，組合物可包括第三活性劑，且所述第三 活性劑能夠與目標有害生物體內(nèi)的GPCR受體相互作用，且所述相互作用可與第一活性劑 的作用互補。
在一些實施例中，第一和第三活性劑可與相同受體或不同受體相互作用。在一些 實施例中，與各活性劑分開的效應(yīng)相比，第一和第三活性劑的互補性可引起活性劑合起來 的累加效應(yīng)。在一些實施例中，與各活性劑分開的效應(yīng)相比，第一和第三活性劑的互補性可 引起活性劑合起來的協(xié)同效應(yīng)。在一些實施例中，受體循環(huán)可包括受體敏化、受體脫敏、受 體再循環(huán)、配體釋放、受體磷酸化和受體脫磷酸中的至少一者。
本發(fā)明的實施例可包括有害生物防治組合物，其具有能夠破壞或改變目標有害生 物體內(nèi)的受體功能的第一活性劑，和能夠破壞所述受體循環(huán)的第二活性劑，且所述第二活 性劑可用于擴大所述第一活性劑的效應(yīng)。
本發(fā)明的實施例可包括一種通過以下步驟制備有害生物防治組合物的方法提供 具有至少一種標靶受體的目標有害生物；使所述目標有害生物與包括至少第一活性劑和第 二活性劑的組合物接觸，其中所述第一活性劑能夠與所述標靶受體相互作用以破壞或改變 與標靶受體的正常活性有關(guān)的功能，且其中所述第二活性劑能夠與和標靶受體循環(huán)相關(guān)的 非受體分子或步驟相互作用，以破壞標靶受體循環(huán)。一些實施例可包括測量組合物對目標 有害生物的效應(yīng)和基于組合物的所需性質(zhì)選擇至少第一活性劑。本發(fā)明的一些實施例可包 括第三活性劑，其中所述第三活性劑能夠與目標有害生物體內(nèi)的受體相互作用，且其中所 述相互作用可與第一活性劑的作用互補。在一些實施例中，第一和第三活性劑可與相同受 體或與不同受體相互作用。在一些實施例中，與各活性劑分開的效應(yīng)相比，第一和第三活性 劑的互補性可引起活性劑合起來的累加效應(yīng)。同樣，與各活性劑分開的效應(yīng)相比，第一和第 三活性劑的互補性可引起活性劑合起來的協(xié)同效應(yīng)。
本發(fā)明的實施例可包括有害生物防治組合物，其具有能夠破壞或改變目標有害生 物體內(nèi)的GPCR循環(huán)的活性劑，其中所述活性劑用于擴大配體結(jié)合所述GPCR的效應(yīng)。此外， 與當在活性劑不存在下結(jié)合受體時發(fā)生的Ca2+級聯(lián)相比，所述擴大會導(dǎo)致長期的細胞內(nèi) Ca2+級聯(lián)。在一些實施例中，與當在活性劑不存在下結(jié)合受體時發(fā)生的cAMP水平干擾相 比，擴大會導(dǎo)致長期的細胞內(nèi)cAMP水平干擾。
本發(fā)明的實施例可包括有害生物防治組合物，其具有能夠破壞或改變目標有害生 物體內(nèi)的GPCR循環(huán)的活性劑，其中所述活性劑用于削弱配體結(jié)合所述GPCR的效應(yīng)。
本發(fā)明的某些實施例可包括一種有害生物防治方法，其包括以下步驟提供具有15至少一種標靶GPCR受體的目標有害生物；使所述目標有害生物與包括至少第一活性劑和 第二活性劑的組合物接觸，其中所述第一活性劑能夠與所述標靶受體相互作用以引發(fā)、破 壞或改變與標靶受體結(jié)合第一活性劑有關(guān)的生物學(xué)功能，且其中所述第二活性劑能夠與和 由第一活性劑與標靶受體的相互作用所引發(fā)、破壞或改變的生物學(xué)路徑相關(guān)的非受體分子 或步驟相互作用；其中組合中的活性劑可協(xié)作擴大所破壞或改變的功能，使得第一活性劑 結(jié)合標靶受體，從而防治有害生物。
在各種實施例中，組合物可進一步包括第三活性劑，其中所述第三活性劑能夠與 目標有害生物體內(nèi)的GPCR受體相互作用，其中所述相互作用可與第一活性劑的作用互補。 同樣，第一和第三活性劑可與相同受體或與不同受體相互作用。另外，與各活性劑分開的效 應(yīng)相比，第一和第三活性劑的互補性可引起活性劑合起來的累加效應(yīng)。


圖1展示使用表達所關(guān)注受體(例如生物胺受體，諸如TyR或章魚胺受體)的經(jīng) 轉(zhuǎn)染細胞系的篩選方法；
圖2展示配體結(jié)合于生物胺受體，導(dǎo)致下游信號傳導(dǎo)，從而影響某些生理反應(yīng)；
圖3展示影響下游信號傳導(dǎo)的昆蟲防治化學(xué)品，溴氰菊酯ΦΜ)；
圖4A展示由以下引起的針對埃及伊蚊(Aedes aegypti)的殺有害生物效應(yīng)1)測 試組合物；幻可尼丁 ；和幻測試組合物與可尼丁的組合；
圖4B展示由以下引起的針對埃及伊蚊的殺有害生物效應(yīng)1)測試組合物；2)可 尼丁 ；和幻測試組合物與可尼丁的組合；
圖4C展示由以下引起的針對埃及伊蚊的殺有害生物效應(yīng)1)測試組合物；2)吡 蟲啉；和3)測試組合物與吡蟲啉的組合；
圖4D展示由以下引起的針對果蠅屬(Drosophila sp.)的殺有害生物效應(yīng)1)測 試組合物；2)吡蟲啉；和3)測試組合物與吡蟲啉的組合；
圖5展示由以下引起的針對埃及伊蚊的殺有害生物效應(yīng)1)測試組合物；2)吡蟲 啉；和3)測試組合物與吡蟲啉的組合；
圖6A展示由以下引起的針對美洲大蠊(Periplaneta americana)的殺有害生物 效應(yīng)1)測試組合物；幻可尼丁 ；和幻測試組合物與可尼丁的組合；
圖6B展示由以下引起的針對美洲大蠊的殺有害生物效應(yīng)1)測試組合物；2)吡 蟲啉；和3)測試組合物與吡蟲啉的組合；
圖7展示由以下引起的針對床虱的殺有害生物效應(yīng)1)測試組合物；2)除蟲菊 粉；和幻測試組合物與除蟲菊粉的組合；
圖8A展示酪胺受體的核酸序列和肽序列；
圖8B展示酪胺受體的核酸序列和肽序列；
圖9展示吡蟲啉隨時間對薊馬的劑量依賴性殺有害生物效應(yīng)(擊倒和死亡)。
圖IOA展示由摻合物11引起的對薊馬的劑量依賴性殺有害生物效應(yīng)(擊倒)；
圖IOB展示由摻合物11引起的對薊馬的劑量依賴性殺有害生物效應(yīng)(死亡)；
圖IOC展示由摻合物8引起的對薊馬的劑量依賴性殺有害生物效應(yīng)(擊倒)；
圖IOD展示由摻合物8引起的對薊馬的劑量依賴性殺有害生物效應(yīng)(死亡)。
圖IlA展示展示由含有摻合物11與吡蟲啉混合物的組合物引起的對薊馬的劑量 依賴性殺有害生物效應(yīng)(擊倒)；
圖IlB展示展示由含有摻合物11與吡蟲啉混合物的組合物引起的對薊馬的劑量 依賴性殺有害生物效應(yīng)(死亡)；
圖IlC展示展示由含有摻合物8與吡蟲啉混合物的組合物引起的對薊馬的劑量依 賴性殺有害生物效應(yīng)(擊倒)；
圖IlD展示展示由含有摻合物8與吡蟲啉混合物的組合物引起的對薊馬的劑量依 賴性殺有害生物效應(yīng)(死亡)；
圖12展示吡蟲啉隨時間對薊馬的劑量依賴性殺有害生物效應(yīng)(擊倒和死亡)。
圖13展示摻合物38 (標記為“B5049”)隨時間對薊馬的劑量依賴性殺有害生物效 應(yīng)(擊倒和死亡)。
圖14展示由含有吡蟲啉與摻合物38 (標記為“B5049”和“TT 1A”)混合物的組合 物引起的隨時間對薊馬的劑量依賴性殺有害生物效應(yīng)(擊倒和死亡)。
圖15展示由以下引起的隨時間對薊馬的劑量依賴性殺有害生物效應(yīng)1)水對照 組或用水稀釋的吡蟲啉；2)測試組合物；和3)測試組合物與吡蟲啉的組合。所述測試組合 物是摻合物38 (標記為“B5049，，和"TT 1A”)和摻合物39 (標記為“B5053，，和“TT3C”)。
圖16A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨摻合物19、和3)吡蟲啉與摻合物19的混合物；
圖16B展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨摻合物27、和3)吡蟲啉與摻合物27的混合物；
圖16C展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨摻合物75、和3)吡蟲啉與摻合物75的混合物。
圖17A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨摻合物7、和3)吡蟲啉與摻合物7的混合物；
圖17B展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨摻合物15、和3)吡蟲啉與摻合物15的混合物；
圖17C展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨摻合物11、和3)吡蟲啉與摻合物11的混合物；
圖17D展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨摻合物11、和3)吡蟲啉與摻合物11的混合物。
圖18A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨摻合物38、和3)吡蟲啉與摻合物38的混合物。摻合物38標為 “B5049，，。
圖18B展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨摻合物39、和3)吡蟲啉與摻合物39的混合物。摻合物39標為 “B5053，，。
圖19展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨氟蟲腈、幻單獨測試組合物、和幻氟蟲腈與所述測試組合物的混合物。 測試組合物是摻合物19。
圖20展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨氟蟲腈、幻單獨測試組合物、和幻氟蟲腈與所述測試組合物的混合物。 測試組合物是摻合物42，且標為“AAT”。
圖21展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨氟蟲腈、幻單獨測試組合物、和幻氟蟲腈與所述測試組合物的混合物。 測試組合物是摻合物39，且標為“B5053”。
圖22展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨可尼丁、幻單獨測試組合物、和幻可尼丁與所述測試組合物的混合物。 測試組合物是摻合物19?？赡岫藶锳MP藥劑。
圖23A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨阿維菌素、幻單獨測試組合物、和幻阿維菌素與所述測試組合物的混合 物。測試組合物是摻合物7。
圖2 展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨吡蟲啉、2)單獨測試組合物、和3)吡蟲啉與所述測試組合物的混合物。 測試組合物是摻合物7。
圖24A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨育亨賓、幻單獨毛喉素、和幻單獨染料木素。
圖24B展示育亨賓、毛喉素和染料木素的示意性分子結(jié)構(gòu)。
圖25A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻育亨賓與所述測試組合物的混合物。測試組合物是摻 合物2，且標為150 ”。
圖25B展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻毛喉素與所述測試組合物的混合物。測試組合物是摻 合物2，且標為150 ”。
圖25C展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻染料木素與所述測試組合物的混合物。測試組合物是 摻合物2，且標為150 ”。
圖26A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻育亨賓與所述測試組合物的混合物。測試組合物是摻 合物39，且標為“B5053”。
圖26B展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻毛喉素與所述測試組合物的混合物。測試組合物是摻 合物39，且標為“B5053”。
圖26C展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻染料木素與所述測試組合物的混合物。測試組合物是 摻合物39，且標為“B5053”。
圖27A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻染料木素與所述測試組合物的混合物。測試組合物是 摻合物41，且標為“AAL”。
圖27B展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻染料木素與所述測試組合物的混合物。測試組合物是 摻合物42，且標為“AAT ”。
圖28A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻育亨賓與所述測試組合物的混合物。測試組合物是摻 合物27，且標為17001”。
圖28B展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和2、毛喉素(標記為“ΠΓ)與所述測試組合物的混合物。 測試組合物是摻合物27，且標為“B7001”。
圖28C展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻染料木素與所述測試組合物的混合物。測試組合物是 摻合物27，且標為“B7001”。
圖29A展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻育亨賓與所述測試組合物的混合物。測試組合物是摻 合物58，且標為“B7002”。
圖^B展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和2、毛喉素(標記為“ΠΓ)與所述測試組合物的混合物。 測試組合物是摻合物58，且標為“B7002”。
圖29C展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有以下 的組合物1)單獨測試組合物、和幻染料木素與所述測試組合物的混合物。測試組合物是 摻合物58，且標為“B7002”。
圖30A展示展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有 以下的組合物1)單獨測試組合物、和幻育亨賓與所述測試組合物的混合物。測試組合物 是茴香油。
圖30B展示展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有 以下的組合物1)單獨測試組合物、和2)毛喉素(標記為“ΠΓ)與所述測試組合物的混合 物。測試組合物是茴香油。
圖30C展示展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，所述曲線對應(yīng)于含有 以下的組合物1)單獨測試組合物、和幻染料木素與所述測試組合物的混合物。測試組合 物是茴香油。
圖31展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，其中對應(yīng)于含有吡蟲啉與 百里香油混合物的組合物的曲線由三角形指示，對應(yīng)于含有單獨百里香油的組合物的曲線 由圓圈指示，且對應(yīng)于含有單獨吡蟲啉的組合物的曲線由正方形指示。
圖32展示對應(yīng)于細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光強度曲線，其中對應(yīng)于含有氟嘧菌酯 與百里香油混合物的組合物的曲線由三角形指示，對應(yīng)于含有單獨百里香油的組合物的曲 線由正方形指示，且對應(yīng)于含有單獨氟嘧菌酯的組合物的曲線由圓圈指示。
具體實施方式
許多先前已知且商業(yè)化的具有足夠適用的殺有害生物活性的產(chǎn)品對哺乳動19物、魚、家禽或其它非目標物種也具有毒性或有害效應(yīng)。舉例來說，諸如有機磷化合物 和氨基甲酸酯的常見殺蟲劑抑制各種動物體內(nèi)的乙酰膽堿酯酶的活性。已知殺蟲脒 (chlordimeform)和有關(guān)甲脒作用于昆蟲章魚胺受體，但由于脊椎動物心臟中毒潛在性和 動物致癌性以及對不同昆蟲的不同效應(yīng)，已從市場上退出。
然而，許多農(nóng)藥的有害效應(yīng)可通過減少施用于特定區(qū)域來達到所需結(jié)果的農(nóng)藥量 來減輕。這一減少可通過組合殺有害生物化合物或產(chǎn)品與所選活性成分來達到。這些活性 成分可包含例如植物精油等。所選活性成分與所選殺有害生物化合物或產(chǎn)品的組合可降低 達到凈效率所需的農(nóng)藥濃度，且延長現(xiàn)有合成農(nóng)藥的有效期。
提供本發(fā)明的一個或一個以上實施例的詳情。所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員在研究這一文 獻中所提供的信息后將顯而易見對這一文獻中所述的實施例和其它實施例的修改。主要為 了清楚地了解而提供這一文獻中所提供的信息和尤其所述示范性實施例的特定詳情，且應(yīng) 從其中了解到無不必要的限制。
本發(fā)明的實施例是針對篩選具有有害生物防治潛力的組合物的方法，用于防治有 害生物的組合物，和使用這些組合物的方法。
如本文中所使用，“有害生物”意為可能需要控制存在的任何生物體。有害生物可 包括例如細菌、絳蟲、真菌、昆蟲、線蟲、寄生蟲、植物等。
如本文中所使用，“殺有害生物”意為例如抗細菌、抗真菌、抗寄生蟲、除草、殺昆蟲寸。
此外，應(yīng)答第二信使依賴性蛋白激酶與G蛋白偶合受體激酶(GRK)的磷酸化的G 蛋白解偶合導(dǎo)致GPCR脫敏。GRK介導(dǎo)的受體磷酸化促進β-抑制蛋白的結(jié)合，所述β-抑 制蛋白除了使受體與雜三聚G蛋白解偶合外，也靶向許多GPCR以在網(wǎng)格蛋白包被的小泡中 內(nèi)化。β -抑制蛋白通過促進受體脫敏與內(nèi)化而在調(diào)節(jié)GPCR反應(yīng)性中起雙重作用。
在脫敏后，可使GPCR復(fù)敏。認為GPCR與內(nèi)涵體螯合是使經(jīng)GRK磷酸化的受體脫 磷酸和復(fù)敏的機制。證實β-抑制蛋白為GPCR轉(zhuǎn)運分子(trafficking molecule)表明 β-抑制蛋白可為用于GPCR復(fù)敏的決定因素。然而，其它細胞組分在脫敏和復(fù)敏(D/R)過 程中也起關(guān)鍵作用，包括例如GRK、N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感性因子(NSF)、網(wǎng)格蛋白銜 接蛋白(ΑΡ-2蛋白)、蛋白磷酸酶、網(wǎng)格蛋白等。除了這些分子，例如內(nèi)涵體、溶酶體等其它 部分也影響D/R過程。D/R循環(huán)的這些各種組分提供機會破壞或改變GPCR對于細胞外刺激 的“可用性”，且因此減弱或增強那些細胞外刺激對目標生物體的效應(yīng)。例如通過抑制復(fù)敏 過程等所實現(xiàn)的減弱可限制細胞外刺激(例如UV暴露、毒素等)對GPCR信號傳導(dǎo)過程的 效應(yīng)。例如通過抑制脫敏過程等所實現(xiàn)的增強信號級聯(lián)可增加細胞外刺激(例如藥物、殺 昆蟲劑等)對GPCR信號傳導(dǎo)過程的效應(yīng)。
GPCR信號傳導(dǎo)過程的組分已成為重要研究目標；破壞本發(fā)明的信號傳導(dǎo)過程 的機會和標靶有很多。G蛋白信號傳導(dǎo)的組分的論述在以下文獻中提供余(Yu) (2006) 構(gòu)巢曲霉的雜三聚G蛋白信號傳導(dǎo)和RGS (Heterotrimeric G protein signaling and RGSs in Aspergillus nidulans)，微生物雜志(J Microbiol) 44 :145-154 ；董(Dong) Q007)調(diào)節(jié) G 蛋白偶合受體出 口轉(zhuǎn)運(Regulation of G protein-coupled receptor export trafficking)，生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(Biochim Biophys Acta) 1768 :853-870; 火田(NakahataM2007)通過結(jié)合蛋白來調(diào)節(jié)G蛋白偶合受體功能(Regulation of GProtein-coupled Receptor Function by Its Binding Proteins),藥學(xué)雜志(Yakugaku Zasshi)127 :3-14 ；楊(Yang) O006)G蛋白偶合受體激酶的調(diào)節(jié)和功能的機制(Mechanisms of regulation and function of G-protein-coupled receptor kinases)，世界胃腸病 學(xué)雜志(World J Gastroenterol) 12 :7753-7757 ；馬(MaM2007) β -抑制蛋白信號傳導(dǎo) 禾口(Beta-arrestin signaling and regulation of transcription) ；Ifi^4^ 雜志(J Cell ki) 120 :213-218 ；紐(New) (2007)介導(dǎo)細胞周期進程的G蛋白偶合受體 調(diào)節(jié)的分子機制(Molecular mechanisms mediating the G protein-coupled receptor regulation of cell cycle progression)，分子f言號傳導(dǎo)雜志(J Mol Signaling) 2 :2-16 ； 克拉斯(Klasse) (2008)腺苷受體的內(nèi)化和脫敏(Internalization and desensitization of adenosine receptors)，嘌呤信號傳導(dǎo)(Purinergic Signalling) 4 :21-37 ；斯圖爾特 (Stewart) (2007)作為假定蛋白激酶C的磷酸酶C_eta酶和神經(jīng)元與神經(jīng)內(nèi)分泌組織中 的 Ca2+信號傳導(dǎo)組分(Phospholipase C_eta Enzymes as Putative Protein Kinase C and Ca2+Signalling Components in Neuronal and Neuroendocrine Tissues),神 經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)(Neuroendocrinology) 86 :243-248 ；徐(Xu) (2007)G蛋白偶合受體轉(zhuǎn)運的 調(diào)節(jié)(Regulation of G protein-coupled receptor trafficking),生理學(xué)報(Acta Physiol) 190 :39-45 ；沃爾夫(Wolfe) (2007)G蛋白偶合受體內(nèi)吞的網(wǎng)格蛋白依賴性機制 (Clathrin-Dependent Mechanisms of G Protein-coupled Receptor Endocytosis)， 運輸(Traffic) 8 :462-470 ；舒爾特(khulte) (2007) G蛋白偶合受體信號傳導(dǎo)的新 穎方面實現(xiàn)特異性的不同方式(Novel aspects of G-protein-coupled receptor signalling-different ways to achieve specificity),生理學(xué)報(Acta Physiol) 190 33-38 ；德加麥羅斯(Torrecilla) ^)06)G蛋白偶合受體的合作共價修飾(Co-ordinated covalent modification of G-protein coupled receptors)，當代藥物設(shè)計(Curr Pharm Des) 12 :1797-1808 ；奈澤(Neitzel) (2006)決定G蛋白偶合受體信號傳導(dǎo)的選擇性RGS SSiITiW^fflM/lfj5!j (Cellular mechanisms that determine selective RGS protein regulation of G protein-coupled receptor signaling)，宵明細胞生物學(xué)發(fā)展(Semin Cell Dev Biol) 17 :383-389 ；佐藤(Sato) O006)G蛋白的輔助蛋白信號傳導(dǎo)中的搭配物 (Accessory proteins for G proteins ；partners in signaling)，藥理學(xué)與毒理學(xué)年i平 (Annu Rev Pharmacol Toxicol) 46 :151-187 ；阿帕特-庫林(Appert_CollinM2006)通 過a-激酶錨定蛋白調(diào)節(jié)g蛋白偶合受體信號傳導(dǎo)(Regulation of g protein-coupled receptor signaling by a-kinase anchoring proteins)，受體/[言號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究(Recept Signal Transduct Res) 26 :631-46 ；普雷蒙(PremontM2007)G 蛋白偶合受體激酶和抑制 蛋白的生理學(xué)作用(Physiological roles of G protein-coupled receptor kinases and arrestins)，生理學(xué)年評(Annu Rev Physiol)69 :511-534 ；斯馬克(SmrckaM2008)G 蛋 白β Y亞單位G蛋白偶合受體信號傳導(dǎo)的中樞介體(G protein beta gamma subunits Central mediators of G protein-coupled receptor signaling)，細胞分子生命禾斗 學(xué)(Cell Mol Life Sci)65 :2191-2214 ；格蘭迪(Grandy) (2007)微量胺相關(guān)受體 1 家 方矣原型還是反傳統(tǒng)？ (Trace amine-associated receptor I-Family archetype or iconoclast ？)，藥物治療(Pharmacol Ther) 116 :355-390 ；吉耳克里斯特(Gilchrist) Q007)G蛋白偶合受體藥理學(xué)檢驗理論與證據(jù)之間的邊緣(G-protein-coupled receptorpharmacology :examining the edges between theory and proof)，藥物發(fā)現(xiàn)與發(fā)展新見 (Curr Opin Drug Discov Devel) 10 :446-451 ；武石(Takeishi) (2007) 二?；视图っ冈?細胞調(diào)節(jié)過程中的作用用于心肌肥大的新調(diào)節(jié)劑(Role of diacylglycerol kinase in cellular regulatory processes -.a new regulator for cariomyocyte hypertrophy), 藥物治療(Pharmacol Ther) 115 :352-359 ；道爾林普(Dalrymple) (2008) G 蛋白偶合 受體二聚體功能性結(jié)果、病況和藥物標靶(G protein-coupled receptor dimers functional consequences, disease states and drug targets), i^^j^iuff (Pharmacol Ther) 118 :359-371 ；尤拉多-普優(yōu)(Jurado-Pueyo) (2008) G 蛋白下游的 GRK2 依賴性脫 敏(GRK2_dependent desensitization downstream of G proteins),信號轉(zhuǎn)導(dǎo)石if究進展 (Recept Signal Transduct Res)沘59-70 ；米里根(Milligan) (1998) g 蛋白偶合受體信 號傳導(dǎo)禾口調(diào)節(jié)的新方面(New aspects of g-protein-coupled receptor signalling and regulation)，內(nèi)分泌學(xué)和新陳代謝趨勢(Trends Endocrinol Metab) 9 :13-19。關(guān)于 GPCR 信號傳導(dǎo)、循環(huán)、調(diào)節(jié)等的機制和組分的揭示內(nèi)容，上述每一文獻都以全文引用的方式并入 本文中。
本發(fā)明的實施例可包括一種通過改變或破壞由GPCR作用引發(fā)的各種信號級聯(lián)來 破壞或改變GPCR D/R的方法。某些實施例可以多種方式破壞或改變GPCR D/R，包括例如施 用含有活性劑(例如精油等)的組合物。
組合物的篩選
在本發(fā)明的一些實施例中，篩選有害生物防治潛力的方法可靶向昆蟲嗅覺受體蛋 白分子。在本發(fā)明的一些實施例中，篩選有害生物防治潛力的方法可靶向昆蟲嗅覺受體蛋 白。昆蟲嗅覺系統(tǒng)包括超過60種已鑒別出的嗅覺受體。這些受體一般是G蛋白偶合受體 (GPCR)大家族的成員。
如本文中所使用，“受體”是細胞膜上或細胞、細胞質(zhì)或細胞核內(nèi)的實體，其可結(jié)合 于特異性分子(配體)，例如神經(jīng)遞質(zhì)、激素等，并且引發(fā)對所述配體的細胞反應(yīng)。受體蛋白 行為的配體誘導(dǎo)性變化會導(dǎo)致構(gòu)成配體生物作用的生理變化。
根據(jù)本發(fā)明，諸如G蛋白偶合受體的受體可基于受體與活性成分的結(jié)合親和力來 分類。這也可以活性成分對于受體的結(jié)合親和力表示?；钚猿煞謱τ谑荏w的結(jié)合親和力或 受體對于活性成分的結(jié)合親和力可根據(jù)本文所揭示的方法或所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的 方法來測量。如本發(fā)明中所使用，“低”親和力指示需要相對于受體為高濃度的活性成分以 最大限度地占據(jù)受體的結(jié)合位點并引發(fā)生理反應(yīng)，而“高”親和力指示相對于受體為低濃度 的活性成分足以最大限度地占據(jù)受體的結(jié)合位點并引發(fā)生理反應(yīng)?！案摺庇H和力可相當于例 如比有效引發(fā)生理反應(yīng)的受體濃度小兩個或兩個以上數(shù)量級的活性成分濃度，而“低”親和 力可相當于比有效引發(fā)生理反應(yīng)的受體濃度大一個或一個以上數(shù)量級的活性成分濃度。
在黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)體內(nèi)，嗅覺受體位于蠅頭部的兩對附肢 中。果蠅(Drosophila)化學(xué)受體的家族包括約62種氣味受體(Or)和68種味覺受體(Gr) 蛋白，其由通過替代性拼接的約60種Or和60種Gr基因的家族編碼。這些受體蛋白中的 一些蛋白已在功能上進行表征，同時其它蛋白已通過與其它序列的序列同源性來鑒別，但 尚未充分表征。其它昆蟲具有類似嗅覺受體蛋白。
在某些實施例中，本發(fā)明的篩選或昆蟲防治方法靶向的昆蟲嗅覺受體蛋白是酪胺受體(TyR)。在其它實施例中，昆蟲嗅覺受體蛋白是昆蟲嗅覺受體蛋白OrSIBb或0r43a。在 其它實施例中，靶向蛋白可為任一種昆蟲嗅覺蛋白受體。
另外，可使用本發(fā)明的方法靶向昆蟲嗅覺受體級聯(lián)的其它組分以鑒別有用的昆蟲 防治化合物?？赏ㄟ^本發(fā)明的方法靶向的示范性昆蟲嗅覺級聯(lián)組分包括(但不限于)血清 素受體、0r22a、0r22b、Gr5a, Gr21a、Gr61a、β -抑制蛋白受體、GRK2受體和酪胺β -羥化酶受體等。
參考圖1，鑒別有效有害生物防治組合物的示范性篩選方法可使用一種或一種以 上表達所關(guān)注受體(例如生物胺受體，諸如TyR或章魚胺受體)的經(jīng)轉(zhuǎn)染細胞系。
在本發(fā)明的一些實施例中，分離的表達所關(guān)注受體的細胞膜可用于競爭性結(jié)合測 定中。可使用全細胞研究應(yīng)答用測試組合物處理的受體下游的信號傳導(dǎo)變化。
本發(fā)明的實施例可使用原核和真核細胞，包括例如細菌細胞、酵母細胞、真菌細 胞、昆蟲細胞、線蟲細胞、植物細胞、動物細胞等。合適的動物細胞可包括例如HEK細胞、海 拉細胞(HeLa cell)、COS細胞、U20S細胞、CHO-Kl細胞、各種主要哺乳動物細胞等。可使 用表達一種或一種以上含有抑制蛋白與標記分子(例如在整個組織中、特定器官或組織類 型中等)的結(jié)合物的動物模型。
昆蟲防治活性的潛力可通過測量測試組合物對于表達TyrR、0r83b和/或0r43a 的細胞系內(nèi)受體的親和力來鑒別。昆蟲防治活性的潛力也可通過在用測試組合物處理后測 量表達TyrR、Or8;3b和/或0r43a的細胞系內(nèi)的細胞內(nèi)cAMP和/或Ca2+變化來鑒別。TyrR、 Or 8 受體和Or 43a受體的基因序列在各種昆蟲物種之間具有實質(zhì)相似性。因此，可使用 表達這些受體的果蠅施奈德(Drosophila Schneider)細胞系來篩選在各種昆蟲物種中具 有昆蟲防治活性的組合物。
在一些實施例中，選擇用于殺有害生物用途的組合物的方法可包括如下。提供表 達TyR的細胞且使其與測試化合物接觸。測量所述化合物的受體結(jié)合親和力。測量至少一 種選自以下參數(shù)的參數(shù)細胞內(nèi)cAMP水平和細胞內(nèi)Ca2+水平。鑒別用于組合物的第一化合 物，其能夠改變至少一種參數(shù)，且對于TyR具有高受體結(jié)合親和力；和鑒別用于組合物的第 二化合物，其能夠改變至少一種參數(shù)，且對于TyR具有低受體結(jié)合親和力。選擇包括第一和 第二化合物的組合物。在一些實施例中，選擇包括第一和第二化合物且顯示抗寄生蟲效應(yīng) 超過任一種化合物單獨使用時的抗寄生蟲效應(yīng)的組合物。
在本發(fā)明的一些實施例中，所用的細胞可為能夠用TyR轉(zhuǎn)染并表達TyR的任何細 胞。細胞的實例包括(但不限于)昆蟲細胞，諸如果蠅施奈德細胞、果蠅施奈德2細胞(S2 細胞)和草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)細胞(例如Sf9或Sf21)；或哺乳動物細胞， 諸如人類胚腎細胞(HEK-293細胞)、非洲綠猴腎成纖維細胞(C0S-7細胞)、海拉細胞和人 類角化細胞(HaCaT細胞)。
TyrR可為全長TyrR、TyrR的功能性片段或TyrR的功能性變異體。TyrR的功能性 片段是與參照多肽(即全長TyrIO相比缺失氨基酸殘基、但其余氨基酸序列保留參照多肽 對于酪胺的結(jié)合親和力的TyrR。TyrR的功能性變異體是保留參照多肽對于酪胺的結(jié)合親 和力的具有氨基酸插入、氨基酸缺失或保守性氨基酸取代的TyrR?！氨Ｊ匦园被崛〈笔?用功能上類似的殘基取代氨基酸殘基。保守性取代的實例可包括例如用一個非極性(疏水 性)殘基(諸如異亮氨酸、纈氨酸、亮氨酸或甲硫氨酸)取代另一個非極性(疏水性)殘基；用一個極性(親水性)殘基取代另一個極性(親水性)殘基，諸如精氨酸與賴氨酸之間、谷 氨酰胺與天冬酰胺之間、甘氨酸與絲氨酸之間；用一個堿性殘基(諸如賴氨酸、精氨酸或組 氨酸)取代另一個堿性殘基；用一個酸性殘基(諸如天冬氨酸或谷氨酸)取代另一個酸性 殘基等。保守性氨基酸取代也可包括用以化學(xué)方式衍生的殘基置換殘基，但是所得多肽保 留參照多肽對于酪胺的結(jié)合親和力。TyrR的實例可包括例如TyrR，諸如黑腹果蠅TyrR(基 因庫(GENBANK .)登錄號(GAN)CAA38565)、東亞飛幢(Locusta migratoria) TyrR(GAN Q25321)、其它無脊椎動物的TyrR、線蟲的TyrR等。
示范性篩選方法可包括“陽性”篩選，其中例如選擇結(jié)合所關(guān)注受體的組合物。示 范性篩選方法可包括“陰性”篩選，其中例如丟棄結(jié)合所關(guān)注受體的組合物。一種示范性方 法可包括選擇結(jié)合TyR的組合物。另一種示范性方法可包括選擇結(jié)合TyR但不結(jié)合章魚 胺受體的組合物。
在本發(fā)明的一些實施例中，測試組合物的功效可通過利用昆蟲進行研究來確定。 舉例來說，用于驅(qū)除昆蟲的測試組合物的功效可使用使昆蟲接觸測試組合物的控制實驗來 研究。在一些實施例中，測試組合物對昆蟲的毒性可使用使昆蟲接觸測試組合物的控制實 驗來研究。
篩選組合物昆蟲防治活性的方法在以下申請案中闡述，所述申請案每一者都以 全文引用的方式并入本文中美國申請案10/832，022，名為用于防治昆蟲的組合物和方 法(COMPOSITIONS AND METHODS FOR CONTROLLING INSECTS)；美國申請案 11/086，615，名 為與章魚胺受體有關(guān)的用于防治昆蟲的組合物和方法(COMPOSITIONS AND METHODS FOR CONTROLLING INSECTS RELATED TO THE 0CT0PAMINE RECEPTOR)；美國申請案 11/365，似6， 名為涉及酪胺受體的用于防治昆蟲的組合物和方法(COMPOSITIONS AND METHODS FOR CONTROLLING INSECTS INVOLVING THE TYRAMINE RECEPTOR)；和美國申請案 11/870，385， 名為用于防治昆蟲的組合物和方法(COMPOSITIONS AND METHODS FOR CONTROLLING INSECTS)。
用于有害生物防治的組合物
本發(fā)明的實施例可包括一種用于防治有害生物的組合物。本發(fā)明的包括用于防治 有害生物的組合物的實施例可包括有害生物防治化學(xué)品或產(chǎn)品。本發(fā)明的包括用于防治有 害生物的組合物的實施例可包括活性劑。
在本發(fā)明的包括活性劑的實施例中，所述活性劑可為例如可對昆蟲具有生物學(xué)影 響的藥劑，例如化學(xué)品、化合物等。在本發(fā)明的包括活性劑的實施例中，所述活性劑可為例 如一種或一種以上植物精油等。所述植物精油在組合時可具有協(xié)同效應(yīng)。實施例也可包括 不揮發(fā)性油，其通常是非揮發(fā)性、無香味植物油。另外，在一些實施例中，這些組合物可由通 常認為安全的(GRAS)化合物構(gòu)成。
在本發(fā)明的包括至少一種有害生物防治化學(xué)品的實施例中，所述至少一種有害生 物防治化學(xué)品可選自例如表1中所示的有害生物防治化學(xué)品等。
權(quán)利要求
1.一種用于防治目標有害生物的組合物，其包含第一藥劑和第二藥劑，其中所述第一 藥劑具有針對所述目標有害生物的第一活性，所述第二藥劑具有針對所述目標有害生物的 第二活性，所述組合物具有針對所述目標有害生物的第三活性，并且所述第三活性反映所 述第一藥劑與所述第二藥劑的協(xié)同相互作用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第一藥劑包含一種或一種以上選自由以下 組成的群組的化合物丁酸戊酯、反式大茴香腦、八角茴香油、黑籽油、檸檬醛、對異丙基甲 苯、染料木素(genistein)、香葉醇、乙酸香葉酯、肉豆蔻酸異丙酯、d_檸檬烯、沉香醇、乙酸 沉香酯、丁香花油、水楊酸甲酯、a-菔烯、胡椒醛、胡椒基醇、四氫沉香醇、百里香油、白百里 香油、百里酚、檸檬酸三乙酯、香蘭素和冬青油。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第一藥劑能夠與所述目標有害生物體內(nèi)的 受體相互作用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其中所述受體是G蛋白偶合受體。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由農(nóng)藥、殺真菌劑、除草 劑、殺線蟲劑、殺昆蟲劑、殺螨劑和殺細菌劑組成的群組。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其中所述第二藥劑作用于除所述受體外的分子標靶上。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其中所述第一藥劑能夠與所述受體相互作用以引 發(fā)、改變或破壞與所述受體結(jié)合所述第一藥劑有關(guān)的生物學(xué)功能，且其中所述第二藥劑能 夠與和所述受體循環(huán)相關(guān)的非受體分子或步驟相互作用，以破壞所述受體循環(huán)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第一活性持續(xù)第一時段，所述第二活性持 續(xù)第二時段，所述第三活性持續(xù)第三時段，且所述第三時段比所述第一時段或所述第二時 段長。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第一活性和所述第二活性中的至少一者基 本上為零。
10.根據(jù)權(quán)利要求1到9中任一權(quán)利要求所述的組合物，其中所述目標害蟲是屬 于選自由以下組成的群組的動物目的物種蜱螨目(Acari)、虱目(Anoplura)、蜘蛛目 (Araneae)、蜚蠊目(Blattaria/Blattodea)、鞘翅目(Coleoptera)、彈尾目(Collembola)、 雙翅目(Diptera)、蟋蟀目(Grylloptera)、半翅目(Hemiptera)、異翅目(Heteroptera)、 同翅目(Homoptera)、膜翅目(Hymenoptera)、等足目(Isopoda)、等翅目(Isoptera)、鱗翅 目(L印idoptera)、螳螂目(Mantodea)、食毛目(Mallophaga)、脈翅目(Neuroptera)、蜻蜒 目(Odonata)、直翅目(Orthoptera)JtSSg (Psocoptera)JjIzFg (Rhabditida)、蚤目 (Siphonaptera)、綜合綱(Symphyla)Jfjlg (Thysanura)和纓翅目(Thysanoptera)。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是二酰胺化合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是經(jīng)螺環(huán)苯基取代的特窗酸 (tetronic acid)農(nóng)藥。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由氟蟲腈(fipronil)、 可尼丁 (clothianidin)、吡蟲啉(imidacloprid)、阿維菌素(abamectin)、毛喉素 (forskolin)、染料木素、育亨賓(yohimbine)、氟嘧菌酯(f luoxastrobin)、氟蟲酰胺 (flubendiamide)和螺甲螨酯(spiromesifen)組成的群組。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述第二藥劑包含氟蟲腈。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的組合物，其中所述第一藥劑包含丁酸戊酯和八角茴香油。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的組合物，其中丁酸戊酯所占范圍為20%-30%，且八角茴香 油所占范圍為40% -60%。
17.根據(jù)權(quán)利要求14所述的組合物，其中所述第一藥劑包含香葉醇、肉豆蔻酸異丙酯 和白百里香油。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的組合物，其中香葉醇所占范圍為25%-35%，肉豆蔻酸異丙 酯所占范圍為35% -45%，且白百里香油所占范圍為25% -35%。
19.根據(jù)權(quán)利要求14所述的組合物，其中所述第一藥劑包含對異丙基甲苯、沉香醇、 a-菔烯和百里酚。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中對異丙基甲苯所占范圍為25%-35%，沉香醇 所占范圍為5% -10%, a-菔烯所占范圍為2% _5%，且百里酚所占范圍為30% -45%。
21.根據(jù)權(quán)利要求14所述的組合物，其中所述第一藥劑包含肉豆蔻酸異丙酯、d-檸檬 烯、沉香醇、胡椒醛、胡椒基醇、四氫沉香醇和香蘭素。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的組合物，其中肉豆蔻酸異丙酯所占范圍為15%-25%, d-檸檬烯所占范圍為5% -15%，沉香醇所占范圍為10% -20%，胡椒醛所占范圍為 15% -25%，胡椒基醇所占范圍為5% -15%，四氫沉香醇所占范圍為15% -25%，且香蘭素 所占范圍為0. 5% -5%。
23.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述第二藥劑包含吡蟲啉。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的組合物，其中所述第一藥劑包含香葉醇、肉豆蔻酸異丙酯 和白百里香油。
25.根據(jù)權(quán)利要求M所述的組合物，其中香葉醇所占范圍為15%-35%，肉豆蔻酸異丙 酯所占范圍為35% -45%，且白百里香油所占范圍為25% -45%。
26.根據(jù)權(quán)利要求23所述的組合物，其中所述第一藥劑包含冬青油、肉豆蔻酸異丙酯 和白百里香油。
27.根據(jù)權(quán)利要求沈所述的組合物，其中冬青油所占范圍為20%-60%，肉豆蔻酸異丙 酯所占范圍為30% -40%，且白百里香油所占范圍為2% -45%。
28.根據(jù)權(quán)利要求23所述的組合物，其中所述第一藥劑包含對異丙基甲苯、沉香醇、 a-菔烯和百里酚。
29.根據(jù)權(quán)利要求觀所述的組合物，其中對異丙基甲苯所占范圍為25%-35%，沉香醇 所占范圍為5% -10%, a-菔烯所占范圍為2% _5%，且百里酚所占范圍為30% -45%。
30.根據(jù)權(quán)利要求23所述的組合物，其中所述第一藥劑包含d-檸檬烯和白百里香油。
31.根據(jù)權(quán)利要求30所述的組合物，其中所述第一藥劑另外包含丁香花油。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的組合物，其中d-檸檬烯所占范圍為25%-35%,白百里香 油所占范圍為25% -35%，且丁香花油所占范圍為35% -50%。
33.根據(jù)權(quán)利要求30所述的組合物，其中所述第一藥劑另外包含冬青油。
34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的組合物，其中d-檸檬烯所占范圍為50%-60%,白百里香 油所占范圍為10% -20%，且冬青油所占范圍為25% -40%。
35.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述第二藥劑包含阿維菌素。
36.根據(jù)權(quán)利要求35所述的組合物，其中所述第一藥劑包含肉豆蔻酸異丙酯、白百里 香油和冬青油。
37.根據(jù)權(quán)利要求36所述的組合物，其中肉豆蔻酸異丙酯所占范圍為30%-40%，白百 里香油所占范圍為15% _25%，且冬青油所占范圍為40% -50%。
38.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述第二藥劑包含可尼丁。
39.根據(jù)權(quán)利要求38所述的組合物，其中所述第一藥劑包含d-檸檬烯、白百里香油和 丁香花油。
40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的組合物，其中d-檸檬烯所占范圍為25%-35%,白百里香 油所占范圍為25% -35%，且丁香花油所占范圍為35% -50%。
41.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述第二藥劑包含育亨賓、毛喉素或染料木ο
42.根據(jù)權(quán)利要求41所述的組合物，其中所述第一藥劑包含肉豆蔻酸異丙酯和白百里香油。
43.根據(jù)權(quán)利要求42所述的組合物，其中所述第一藥劑另外包含香葉醇。
44.根據(jù)權(quán)利要求43所述的組合物，其中香葉醇所占范圍為25%-35%，肉豆蔻酸異丙 酯所占范圍為35% -45%，且白百里香油所占范圍為25% -35%。
45.根據(jù)權(quán)利要求42所述的組合物，其中所述第一藥劑另外包含冬青油。
46.根據(jù)權(quán)利要求43所述的組合物，其中冬青油所占范圍為40%-50%，肉豆蔻酸異丙 酯所占范圍為30% -40%，且白百里香油所占范圍為15% -25%。
47.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述第二藥劑包含毛喉素或染料木素，且所 述第一藥劑包含反式大茴香腦、對異丙基甲苯、沉香醇、a-菔烯和百里酚。
48.根據(jù)權(quán)利要求47所述的組合物，其中反式大茴香腦所占范圍為15%-25%，對 異丙基甲苯所占范圍為0. 5% -10%，沉香醇所占范圍為30% -45%, a-菔烯所占范圍為 2% -10%，且百里酚所占范圍為30% -45%。
49.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述第二藥劑包含染料木素。
50.根據(jù)權(quán)利要求49所述的組合物，其中所述第一藥劑包含八角茴香油。
51.根據(jù)權(quán)利要求49所述的組合物，其中所述第一藥劑另外包含丁酸戊酯。
52.根據(jù)權(quán)利要求51所述的組合物，其中丁酸戊酯所占范圍為20%-30%，且八角茴香 油所占范圍為40% -60%。
53.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是生物堿。
54.根據(jù)權(quán)利要求53所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由咖啡堿、可可堿和茶 堿組成的群組。
55.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是類黃酮。
56.根據(jù)權(quán)利要求55所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由表兒茶素 (epicatechin)、橙皮苷(hesperidin)、堪非酉享(kaempferol)、柚皮苷(naringin)、川 皮苷(nobiletin)、原花色素(proanthocyanidins)、槲皮素(quercetin)、白藜蘆醇 (resveratrol)、蕓香苷(rutin)和桔皮素(tangeretin)組成的群組。
57.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是異黃酮。
58.根據(jù)權(quán)利要求57所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由大豆黃酮(daidzein)、鷹嘴豆芽素(biochanin) A、香豆雌酚(coumesterol)、芒柄花黃素 (formononetin)和葛根素(puerarin)組成的群組。
59.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是黃酮、黃酮醇、黃烷酮、3-羥基 黃烷酮、黃烷-3-醇和花青素。
60.根據(jù)權(quán)利要求59所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由芹菜素(apigenin)、 木犀草素(Iuteolin)、香葉木甙(diosmin)、黃酮哌酯(flavoxate)、漆樹黃酮(fisetin)、 異鼠李素(isorhamnetin)、楊梅黃酮(myricetin)、藿香黃酮醇(pachypodol)、甲基鼠李 素(rhamnazin)、桑色素(morin)、圣草酚(eriodictyol)、橙皮素(hesperetin)、高圣草素 (homoeriodictyol)、柚皮素(naringenin)、二氫堪非醇、二氫槲皮素、兒茶素、表兒茶素、表 焙兒茶素、矢車菊色素(cyanidin)、飛燕草色素(delphinidin)、錦葵色素(malvidin)、天 竺葵色素(pelargonidin)、甲基花青素(peonidin)和矮牽牛素(petunidin)組成的群組。
61.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是有機硫化物。
62.根據(jù)權(quán)利要求61所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由蒜素、谷胱甘肽、吲 哚-3-甲醇、異硫氰酸酯和蘿卜硫素(sulforaphane)組成的群組。
63.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是酚酸。
64.根據(jù)權(quán)利要求63所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由辣椒素(capsaicin)、 鞣花酸、沒食子酸、迷迭香酸和鞣酸組成的群組。
65.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是植物甾醇。
66.根據(jù)權(quán)利要求65所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由β-谷留醇和皂苷組 成的群組。
67.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述第二藥劑是選自由虎刺素 (damnacanthal)、地高辛(digoxin)和植酸組成的群組。
68.根據(jù)權(quán)利要求14所述的組合物，其中所述目標有害生物是屬于小桿目的物種。
69.根據(jù)權(quán)利要求14所述的組合物，其中所述目標有害生物是蛔蟲。
70.根據(jù)權(quán)利要求14所述的組合物，其中所述目標有害生物是屬于雙翅目的物種。
71.根據(jù)權(quán)利要求14或23所述的組合物，其中所述目標有害生物是屬于選自由蜱螨 目、雙翅目、半翅目和纓翅目組成的群組的動物目的物種。
72.根據(jù)權(quán)利要求14、23、35或38所述的組合物，其中所述目標有害生物是屬于選自由 蜚蠊目和纓翅目組成的群組的動物目的物種。
73.一種防治目標有害生物的方法，其包含向所述目標有害生物或與所述目標有害生 物相關(guān)的基質(zhì)投與有效量的根據(jù)權(quán)利要求1到70中任一權(quán)利要求所述的組合物，由此協(xié)同 防治有害生物。
74.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中所述基質(zhì)是選自由作物、植物、表面和脊椎動物 組成的群組。
75.一種防治目標有害生物的方法，其包含向所述目標有害生物或與所述目標有害生 物相關(guān)的基質(zhì)施用包含第一藥劑和第二藥劑的組合物，其中所述第一藥劑具有針對所述目 標有害生物的第一活性，所述第二藥劑具有針對所述目標有害生物的第二活性，所述組合 物具有針對所述目標有害生物的第三活性，且所述第三活性反映所述第一藥劑與所述第二 藥劑的協(xié)同相互作用，由此協(xié)同防治有害生物。
76.一種有害生物防治方法，其包含向目標有害生物或與目標有害生物相關(guān)的基質(zhì)施 用組合物，其中所述組合物包含含有至少一種受體配體的第一藥劑和含有農(nóng)藥的第二藥 劑，且其中所述有害生物防治包含影響與所述農(nóng)藥功能相關(guān)的所述有害生物的生理狀況， 同時還影響與所述受體配體相關(guān)的所述受體功能，由此協(xié)同防治有害生物。
77.一種有害生物防治方法，其包含以下步驟提供具有至少一種標靶GPCR受體的目 標有害生物；使所述目標有害生物與包含至少第一藥劑和第二藥劑的組合物接觸，其中所 述第一藥劑能夠與所述標靶受體相互作用以引發(fā)、破壞或改變與所述標靶受體結(jié)合所述第 一藥劑有關(guān)的生物學(xué)功能，且其中所述第二藥劑能夠與和所述標靶受體循環(huán)相關(guān)的非受體 分子或步驟相互作用，以破壞所述標靶受體循環(huán)；其中組合中的所述第一和第二藥劑協(xié)作 擴大由所述第一藥劑結(jié)合所述標靶受體所引起的破壞的或改變的功能，從而協(xié)同防治有害 生物。
全文摘要
本發(fā)明的實施例提供一種用于防治目標有害生物的組合物，所述組合物包括包含有害生物防治產(chǎn)品或信號級聯(lián)調(diào)節(jié)劑的第一藥劑和第二藥劑，其中所述第一藥劑和所述第二藥劑協(xié)同用于防治所述目標有害生物。所述第一藥劑能夠與所述目標有害生物體內(nèi)的受體相互作用。所述有害生物防治產(chǎn)品可在無活性劑情況下施用時具有針對所述目標有害生物的第一活性且所述組合物可具有針對所述目標有害生物的第二活性；并且所述第二活性可大于所述第一活性。本發(fā)明的實施例可包括調(diào)節(jié)配體結(jié)合于例如細胞表面受體所引發(fā)的信號級聯(lián)的組合物。本發(fā)明還揭示篩選所述組合物的方法。
文檔編號A61K31/535GK102036668SQ200980118165
公開日2011年4月27日 申請日期2009年3月19日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月19日
發(fā)明者埃薩姆·埃南 申請人:蒂拉德克公司