專利名稱：苧麻總酚酸浸膏及其生產(chǎn)方法與它們的用途的制作方法
苧麻總酚酸浸膏及其生產(chǎn)方法與它們的用途
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及由苧麻葉生產(chǎn)苧麻總酚酸浸膏的方法，還涉及采用該生產(chǎn)方法得到的苧麻總酚酸浸膏與它們的用途。
背景技術(shù)：
苧麻作為我國(guó)麻紡織業(yè)的主要原材料和水土保持的重要植物品種受到各方高度關(guān)注，已培育出具有優(yōu)良品質(zhì)的“華苧4號(hào)”、“華苧5號(hào)”和“湘苧2號(hào)”等苧麻新品種，它在麻區(qū)農(nóng)民致富、種植業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整、增加就業(yè)率以及生態(tài)調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮了重要的作用。芒麻(Boehm erianivea或Ramie)屬于蕁麻科芒麻屬，是中國(guó)特有的以紡織為主要用途的農(nóng)作物，是我國(guó)國(guó)寶，我國(guó)的苧麻產(chǎn)量約占全世界苧麻產(chǎn)量的90%以上，在國(guó)際上稱為”中國(guó)草”。苧麻適宜種植在溫帶及亞熱帶地區(qū)，土壤以土層深厚、疏松、有機(jī)質(zhì)含量高、 保水、保肥、排水性好，pH值在5. 5飛.5為宜。我國(guó)主要產(chǎn)地分布在北緯19度至39度之間，南起海南省，北至陜西省均有種植苧麻的歷史，一般劃分為長(zhǎng)江流域麻區(qū)(包括湖南、四川、湖北、江西、安徽等省)、華南麻區(qū)(包括廣西、廣東、福建、云南、臺(tái)灣等省、自治區(qū))、黃河流域麻區(qū)(包括陜西、河南等省及山東省的南部)。其中長(zhǎng)江流域麻區(qū)是我國(guó)的主要產(chǎn)麻區(qū)，其栽培面積及產(chǎn)量占全國(guó)總栽培面積入總產(chǎn)量的90%以上。苧麻是重要的纖維作物，同時(shí)也是我國(guó)重要的傳統(tǒng)民間藥用植物。明朝李時(shí)珍在著名的醫(yī)學(xué)著作《本草綱目》中，對(duì)苧麻的部分藥用功能作了詳細(xì)的記載和闡述?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究對(duì)苧麻藥用成分的研究證實(shí)了其相應(yīng)的藥用功能依據(jù)，發(fā)現(xiàn)苧麻含有豐富的藥用和保健成分。我國(guó)科技工作者已經(jīng)使用苧麻根、葉等制備各種疾病，例如CN02133498公開(kāi)了一種使用蔓苧麻、蛇床子、牛蒡子等多位中藥材治療皮膚病的中藥擦劑；CN 200510029026公開(kāi)了使用苧麻等原材料配制成的外用藥，用于治療骨質(zhì)增生，有效率達(dá)98%，治愈率達(dá)90%。CN 200510119606公開(kāi)了一種由茅莓、苧麻根2種中藥材與白酒經(jīng)傳統(tǒng)浸泡的用于跌打損傷的治療藥酒，它具有明顯的治療跌打損傷的效果。CN 200610048385公開(kāi)了一種使用苧麻根等藥材配制成的用于治療糖尿病的藥物；CN200610079760公開(kāi)了一種使用苧麻根等藥材配制成的用于治療先兆性流產(chǎn)的中藥；CN 200610005279公開(kāi)了一種使用苧麻皮等藥材配制成的苧麻口服液；CN200710120905公開(kāi)了一種使用苧麻根等藥材配制成的用于治療習(xí)慣性流產(chǎn)的中藥制劑；CN200810016794公開(kāi)了一種使用苧麻根等藥材配制成的用于治療跌打損傷的中藥組合物，它具有止血活血化瘀、清熱利濕解毒、行氣消腫止痛的功效。盡管目前有一些專利申請(qǐng)或?qū)＠婕笆褂闷r麻根等一些苧麻植株部位作為生產(chǎn)中藥的原料，但是，目前還未見(jiàn)到有關(guān)從苧麻中提取有用成分，并將其配制成藥物的報(bào)道。因此，本發(fā)明人經(jīng)過(guò)大量試驗(yàn)研究，終于作出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容[要解決的技術(shù)問(wèn)題]
本發(fā)明的目的是提供一種苧麻總酚酸浸膏。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供所述苧麻總酚酸浸膏的制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供所述苧麻總酚酸浸膏的用途。[技術(shù)方案]本發(fā)明是通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明涉及一種由苧麻葉生產(chǎn)苧麻總酚酸浸膏的方法。該方法的步驟如下a)乙醇提取稱取8(Γ120重量份干苧麻葉，往其中加入為干苧麻葉重量8 12倍的以重量計(jì)·65 95%乙醇水溶液，然后加熱回流提取2 4次，分離其乙醇提取液，棄去提余渣，合并乙醇提取液，接著在溫度5(T55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮成浸膏，同時(shí)回收乙醇再循環(huán)使用；b)第一次乙酸乙酯萃取往步驟a)得到的浸膏中加入12(Γ180重量份蒸餾水，使所述浸膏懸浮成膠體溶液，所述的膠體溶液再用乙酸乙酯萃取2 4次，每次8(Γ120重量份，合并乙酸乙酯萃取液，棄去萃余液；c)堿溶液反萃取步驟b)得到的乙酸乙酯萃取液用pH值1(Γ12的無(wú)機(jī)堿水溶液進(jìn)行反萃取2 4次，所述無(wú)機(jī)堿水溶液與所述乙酸乙酯萃取液的重量比為1.0 :1. 8 2. 2,在反萃取后,將乙酸乙酯相與反萃取堿液分離，合并乙酸乙酯相，再進(jìn)行減壓濃縮，回收的乙酸乙酯再循環(huán)使用，而所述的反萃取堿液用無(wú)機(jī)酸調(diào)節(jié)至其PH值5飛，得到一種酸性溶液；d)第二次乙酸乙酯萃取步驟c)得到的酸性溶液與乙酸乙酯進(jìn)行萃取2 4次，所述酸性溶液與所述乙酸乙酯的重量比為3 4 然后分離乙酸乙酯萃取液,棄去萃余水相；e)濃縮與干燥步驟d)得到的乙酸乙酯萃取液在溫度5(T60°C下旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)濃縮成干浸膏，然后在溫度35 45°C下真空干燥1(Γ14小時(shí)，得到所述的苧麻總酚酸浸膏。本發(fā)明涉及另一種由苧麻葉生產(chǎn)苧麻總酚酸浸膏的方法。該方法包括下述步驟a)乙醇提取稱取8(Γ120重量份干苧麻葉，往其中加入為干苧麻葉重量8 12倍的以重量計(jì)65 95%乙醇水溶液，然后加熱回流提取2 4次，分離其乙醇提取液，棄去提余渣，合并乙醇提取液，接著在溫度5(T55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮成浸膏，同時(shí)回收乙醇再循環(huán)使用；b)第一次乙酸乙酯萃取往步驟a)得到的浸膏中加入30(Γ700重量份蒸餾水，使所述浸膏懸浮成膠體溶液，再用無(wú)機(jī)堿將其PH值調(diào)節(jié)到擴(kuò)11，然后進(jìn)行離心分離，得到一種上清液與一種沉淀；所述的上清液用于測(cè)定總酚酸含量；c)乙醇溶解步驟b)得到的的沉淀用以重量計(jì)7515%乙醇水溶液進(jìn)行溶解，再在減壓下濃縮得到浸膏；然后在溫度35 45°C下真空干燥1(Γ14小時(shí)，得到所述的苧麻總酚酸浸膏。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述無(wú)機(jī)堿水溶液的濃度是8 12重量％。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述無(wú)機(jī)酸水溶液的濃度是15 30重量％。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述的無(wú)機(jī)堿選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀或氫氧化鉀。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述的無(wú)機(jī)酸選自鹽酸、硫酸、磷酸或硝酸。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述的減壓濃縮或真空干燥是在壓力
O.Γο. 5MPa下進(jìn)行的。本發(fā)明還涉及采用上述本發(fā)明方法所得到的苧麻總酚酸浸膏。該苧麻總酚酸浸膏含有以苧麻總酚酸浸膏總重量計(jì)I. (Γ12. 0%總酚酸。本發(fā)明還涉及所述的苧麻總酚酸浸膏在治療急性軟組織損傷中的用途，所述的急性軟組織損傷是人體皮膚、皮下淺深筋膜、肌肉、肌腱、腱鞘、韌帶、關(guān)節(jié)囊、滑膜囊、椎間盤、周圍神經(jīng)及血管軟組織損傷?！は旅鎸⒏敿?xì)地描述本發(fā)明。本發(fā)明涉及一種由苧麻葉生產(chǎn)苧麻總酚酸浸膏的方法。該方法的步驟分別詳細(xì)描述如下。a)用乙醇提取苧麻葉含粗蛋白、脂肪、粗纖維，還含有賴氨酸、蛋氨酸、類胡蘿卜素、維生素、鈣、磷等，苧麻葉中含有綠原酸，加熱生成咖啡酸和奎尼酸，對(duì)金色葡萄球菌有抑制作用。從市場(chǎng)上獲得的苧麻葉一般需要除雜，按照藥材處理標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)，采用常規(guī)的方法除去其中的雜物，例如清除莖干等；再使用在中藥技術(shù)領(lǐng)域中通常使用的干燥設(shè)備進(jìn)行干燥，一般而言，所述的苧麻葉的水含量控制在以重量計(jì)1.0%以下。稱取8(Tl20重量份干苧麻葉，往其中加入為干苧麻葉重量8 12倍的65 95重量％乙醇水溶液，然后加熱回流提取2 4次，分離其乙醇提取液，棄去提余渣，合并乙醇提取液，接著在溫度5(T55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮成浸膏，同時(shí)回收乙醇再循環(huán)使用。在用乙醇提取時(shí)，優(yōu)選地，9(Γ110重量份干苧麻葉使用其干苧麻葉重量 Γ Ο倍的75 95重量％乙醇水溶液。更優(yōu)選地，100重量份干苧麻葉使用其干苧麻葉重量10倍的85 95重量％乙醇水溶液。在乙醇提取液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮時(shí)，所述的乙醇提取液優(yōu)選地在壓力O. Γ0. 5MPa下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，更優(yōu)選地在壓力O. 2^0. 4MPa下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。在本發(fā)明中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮時(shí)所使用的設(shè)備是目前市場(chǎng)上銷售的化工技術(shù)領(lǐng)域通常使用的設(shè)備，例如鞏義市科華儀器設(shè)備有限公司銷售的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。b)第一次乙酸乙酯萃取往步驟a)得到的浸膏中加入12(Γ180重量份蒸餾水，使所述浸膏懸浮成膠體溶液，優(yōu)選地，步驟a)得到的浸膏用14(Γ160重量份蒸餾水制成膠體溶液。所述膠體溶液用乙酸乙酯萃取2 4次，每次8(Γ120重量份，優(yōu)選地，所述膠體溶液用乙酸乙酯萃取3次，每次100重量份。將所有乙酸乙酯萃取液合并得到一種乙酸乙酯萃取液，棄去萃余液。在本發(fā)明中，萃取使用的設(shè)備是化工技術(shù)領(lǐng)域里通常使用的、目前市場(chǎng)上銷售的各種萃取設(shè)備，例如混合澄清器、萃取塔等。c)堿溶液反萃取步驟b)得到的乙酸乙酯萃取液用pH值1(Γ12的無(wú)機(jī)堿水溶液進(jìn)行反萃取2 4次，所述無(wú)機(jī)堿水溶液與所述乙酸乙酯萃取液的重量比為I. O :1. 8^2. 2,反萃取后將乙酸乙酯相與反萃取堿液分離，所述的乙酸乙酯相合并后再進(jìn)行減壓濃縮，回收乙酸乙酯循環(huán)再使用，而所述的反萃取堿液用無(wú)機(jī)酸調(diào)節(jié)至其PH值5飛，得到一種酸性溶液。優(yōu)選地，步驟b)得到的乙酸乙酯萃取液用pH值1(Γ12的無(wú)機(jī)堿水溶液進(jìn)行反萃取3次,所述無(wú)機(jī)堿水溶液與所述乙酸乙酯萃取液的重量比為I. O :2. O。更優(yōu)選地,使用pH值10的無(wú)機(jī)堿水溶液進(jìn)行反萃取。所述的無(wú)機(jī)堿選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀或氫氧化鉀。優(yōu)選地，所述的無(wú)機(jī)堿選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鉀或氫氧化鉀。更優(yōu)選地，所述的無(wú)機(jī)堿選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉或氫氧化鉀。所述無(wú)機(jī)堿水溶液的濃度一般地是以重量計(jì)8 12%。 在所述的反萃取堿液用無(wú)機(jī)酸調(diào)節(jié)其酸度時(shí)，使用的無(wú)機(jī)酸選自鹽酸、硫酸、磷酸或硝酸。優(yōu)選地，所述的無(wú)機(jī)酸選自鹽酸、硫酸或硝酸。所述無(wú)機(jī)酸水溶液的濃度是以重量計(jì)15 30%，優(yōu)選地以重量計(jì)18-24%。在本發(fā)明中，反萃取使用的設(shè)備與萃取時(shí)所使用的設(shè)備相同。在這個(gè)步驟中，合并乙酸乙酯相的減壓濃縮是在壓力O. Γ0. 5MPa下進(jìn)行的。減壓濃縮所使用的設(shè)備是目前市場(chǎng)上銷售的化工技術(shù)領(lǐng)域通常使用的設(shè)備，例如杭州圣亞機(jī)械有限公司生產(chǎn)的設(shè)備。d)第二次乙酸乙酯萃取步驟c)得到的酸性溶液用乙酸乙酯按照重量比3 :1至4 :1萃取2 4次，然后分離乙酸乙酯萃取液，棄去萃余水相。優(yōu)選地，步驟c)得到的酸性溶液用乙酸乙酯按照重量比3 :1萃取3次。在本發(fā)明中，萃取使用的設(shè)備是化工技術(shù)領(lǐng)域里通常使用的、目前市場(chǎng)上銷售的各種萃取設(shè)備，例如混合澄清器、萃取塔等。e)濃縮與干燥步驟d)得到的乙酸乙酯萃取液在溫度5(T60°C下旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)濃縮成干浸膏，然后在35 45°C下真空干燥1(Γ14小時(shí)，得到所述的苧麻總酚酸浸膏。優(yōu)選地，在40°C下真空干燥12小時(shí)。在本發(fā)明中，所述的旋轉(zhuǎn)減壓濃縮是在壓力O. Γ0. 5MPa下進(jìn)行的。這個(gè)步驟進(jìn)行旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)濃縮所使用的設(shè)備與步驟a)使用的設(shè)備相同。本發(fā)明涉及由苧麻葉生產(chǎn)苧麻總酚酸浸膏的另一種方法。該方法的步驟如下a)乙醇提取稱取8(Γ120重量份干苧麻葉，往其中加入為干苧麻葉重量8 12倍的以重量計(jì)65 95%乙醇水溶液，然后加熱回流提取2 4次，分離其乙醇提取液，棄去提余渣，合并乙醇提取液，接著在溫度5(T55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮成浸膏，同時(shí)回收乙醇再循環(huán)使用；b)第一次乙酸乙酯萃取往步驟a)得到的浸膏中加入30(Γ700重量份蒸餾水，使所述浸膏懸浮成膠體溶液，再用無(wú)機(jī)堿將其PH值調(diào)節(jié)到擴(kuò)11，然后進(jìn)行離心分離，得到一種上清液與一種沉淀；所述的上清液用于測(cè)定總酚酸含量；c)乙醇溶解步驟b)得到的的沉淀用以重量計(jì)7515%乙醇水溶液進(jìn)行溶解，再在減壓下濃縮得到浸膏；然后在溫度35 45°C下真空干燥1(Γ14小時(shí)，得到所述的苧麻總酚酸浸膏。 本發(fā)明還涉及采用本發(fā)明方法得到的苧麻總酚酸浸膏。該苧麻總酚酸浸膏含有以苧麻總酚酸浸膏總重量計(jì)I. (Γ12. 0%總酚酸。總酚酸浸膏中總酚酸含量是采用Folin-Ciocaileu分光光度法測(cè)定的，其方法描 述如下。目前植物多酚的測(cè)定方法有多種，如高錳酸鉀法、酒石酸亞鐵比色法、原子吸收法、紫外分光光度法等。主要是利用酒石酸亞鐵比色法和Folin-Ciocalteu比色法，但酒石酸亞鐵比色法在實(shí)際應(yīng)用中存在操作繁瑣、重復(fù)性差等缺點(diǎn)。一些資料顯示，F(xiàn)olin-Ciocalteu比色法在測(cè)定多酚化合物時(shí)能在很大程度上克服上述缺陷。Folin-Ciocalteu比色法的原理是基于Folin-Ciocalteu試劑中的鶴鑰酸可以將多酹化合物定量氧化，自身則被還原(使W6+變?yōu)閃5+)成藍(lán)色的化合物，顏色的深淺跟多酚含量呈正相關(guān)，因此可以采用該比色方法對(duì)多酚進(jìn)行定量分析。但是，目前關(guān)于Folin-Ciocalteu比色法條件的研究較少，不同文獻(xiàn)中比色條件的選擇差異較大，測(cè)定波長(zhǎng)有680、725、750、760nm和780nm不等,Folin-Ciocalteu顯色劑與堿液含量及比例各不相同，有I: I、1: 2、1:3及1:5等，顯色時(shí)間和溫度也有很大差別，范圍在3(Tl20min及2(T60°C不等。本發(fā)明以芒麻葉為原料和沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品，采用Folin-Ciocalteu比色法測(cè)定苧麻葉中的多酚含量，探討最適顯色條件，同時(shí)對(duì)該方法的穩(wěn)定性、精密度、重現(xiàn)性、回收率等效能指標(biāo)進(jìn)行研究，建立測(cè)定苧麻葉中多酚含量的分析方法，并測(cè)定苧麻浸膏中總酚酸含量。福林試劑的配制稱取8g鎢酸鈉和2g鑰酸鈉于圓底燒瓶中，用56mL蒸餾水溶解，加入85%的磷酸溶液4mL和8mL濃鹽酸，文火回流10h，然后加入I. 2g硫酸鋰及6mL雙氧水，加熱沸騰15min至亮黃色，不得帶微藍(lán)和綠色。冷卻，移入IOOmL容量瓶中，定容，貯于棕色瓶中。標(biāo)準(zhǔn)液的配制精確稱取IOmg沒(méi)食子酸，加蒸餾水適量，超聲溶解，放冷，蒸餾水定容至lOOmL。該標(biāo)準(zhǔn)液濃度為O. lmg/mL。樣品溶液的制備取本發(fā)明制備的苧麻總酚酸浸膏樣品，加入以重量計(jì)70%乙醇水溶液溶解，定容。制成每毫升含約總酚酸O. 2^0. 5mg的溶液，待測(cè)。Folin-Ciocalteu比色法條件研究測(cè)定波長(zhǎng)的詵擇準(zhǔn)確量取上述標(biāo)準(zhǔn)液O. 5mL和樣品溶液O. 5mL于IOmL容量瓶中，各加6mL水，搖勻，再加O. 5mL福林試劑，充分搖勻。Imin之后，加入20%碳酸鈉溶液I. 5mL，混勻定容。在水浴中在溫度40°C下進(jìn)行反應(yīng)2h,使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)在20(Tl000nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。酹類成分與Folin-Ciocalteu試劑反應(yīng)后生成藍(lán)色的化合物,測(cè)定藍(lán)色化合物的吸收光譜，選擇最大吸收波長(zhǎng)作為比色法測(cè)定的波長(zhǎng)。附圖
I為沒(méi)食子酸和苧麻葉總酚酸提取液經(jīng)顯色反應(yīng)后的吸收光譜。從附圖I可知，沒(méi)食子酸和苧麻提取液與Folin-Ciocalteu試劑反應(yīng)顯色后均在70(T800nm范圍內(nèi)有一個(gè)明顯的吸收峰。其中，沒(méi)食子酸和苧麻葉總酚酸提取液在750nm處吸收最強(qiáng)。因此選擇以沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品，以755nm作為比色測(cè)定的波長(zhǎng)。顯色時(shí)間的確定準(zhǔn)確量取上述標(biāo)準(zhǔn)液0、0. 3mL于IOmL容量瓶中，各加6mL水，搖勻，再加O. 5mL福林試劑，充分搖勻。Imin之后，加入以重量計(jì)20%碳酸鈉溶液I. 5mL，混勻定容。在水浴中在溫度40°C下反應(yīng)20、30、40、50、60、90和120min，然后用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定在755nm處的吸光度。酚類化合物與顯色劑反應(yīng)需要一個(gè)過(guò)程，從附圖2可知，40min內(nèi)吸光值增大，顯 色反應(yīng)迅速，反應(yīng)液顏色變藍(lán)，且藍(lán)色逐漸加深。在40min后吸光值降低，因此,將40min確定為Folin-Ciocalteu比色法的反應(yīng)時(shí)間。顯色溫度的確定準(zhǔn)確量取上述標(biāo)準(zhǔn)液O. 3mL于IOmL容量瓶中，各加6mL水，搖勻，再加O. 5mL福林試劑，充分搖勻。Imin之后，加入以重量計(jì)20%碳酸鈉溶液I. 5mL,混勻定容。在水浴中分別在溫度30、40、50和60°C下反應(yīng)40min，用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定在755nm處的吸光度。顯色反應(yīng)溫度對(duì)顯色效果也有一定的影響，過(guò)低和過(guò)高均不利于多酚顯色，見(jiàn)附圖3。在低溫條件下，顯色反應(yīng)緩慢，吸光值較低。隨著溫度提高，反應(yīng)速度加快，吸光值也逐漸增大，至40°C時(shí)達(dá)到最大值。而在5(T60°C高溫條件下，反應(yīng)顏色相對(duì)較淺，吸光值降低。這表明生成的藍(lán)色物質(zhì)在高溫下不穩(wěn)定，容易褪色，所以本發(fā)明確定顯色反應(yīng)溫度為40。。。碳酸鈉含量的確定準(zhǔn)確量取上述標(biāo)準(zhǔn)液0、0. 3mL于IOmL容量瓶中，各加6mL水，搖勻，再加O. 5mL福林試劑，充分搖勻。Imin之后，加入以重量計(jì)20%碳酸鈉水溶液0、0. 25,0. 5,0. 75、I、I. 25、
I.5,1. 75和2mL，混勻定容。在水浴中分別在溫度40°C下反應(yīng)40min，用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定在755nm處的吸光度。顯色劑與酚類化合物反應(yīng)后必須在堿性條件下才可以顯色，比色體系中Na2CO3溶液是顯色的支持介質(zhì)。Folin-Ciocalteu試劑與Na2CO3溶液的比例會(huì)影響體系的比色效果，結(jié)果見(jiàn)附圖4。顯色反應(yīng)對(duì)Na2CO3溶液的用量具有相當(dāng)?shù)囊蕾囆?，?dāng)堿加入量達(dá)到0. 75mL以后體系顯色反應(yīng)較為完全，當(dāng)堿加入量大于0. 75mL后，吸光值明顯下降，所以顯色劑與飽和Na2CO3溶液的體積比為1:1.5較合適。顯色劑含量的確定準(zhǔn)確量取上述標(biāo)準(zhǔn)液O、0. 3mL于IOmL容量瓶中，各加6mL /K，搖勻，分別加0、0. I、0. 3,0. 5,0. 7,0. 9、I. 2和I. 5mL福林試劑，充分搖勻。Imin之后，按福林試劑:20%碳酸鈉溶液為I :1. 5比例加入20%碳酸鈉溶液，混勻定容。分別在40°C下水浴反應(yīng)40min，用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定在755nm處的吸光度。Folin-Ciocalteu試劑的用量也會(huì)影響體系的比色效果，結(jié)果見(jiàn)圖5。當(dāng)Folin-Ciocalteu試劑添加量大于O. 5mL后吸光值達(dá)到最大且趨于穩(wěn)定，所以確定Folin-Ciocalteu比色法顯色劑用量為O. 5mL，相應(yīng)飽和Na2CO3溶液用量為O. 75mL。標(biāo)準(zhǔn)曲線的律立準(zhǔn)確量取上述標(biāo)準(zhǔn)液O. 0,0. 1,0. 2,0. 3,0. 4,0. 5,0. 6,0. 7,0. 8mL 于 IOmL 容量瓶中，各加6mL水，搖勻，再加O. 5mL福林試劑，充分搖勻。Imin之后，加入O. 75mL以重量計(jì)20%碳酸鈉溶液，混勻定容。分別在水浴中在溫度40°C下反應(yīng)40min，用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定在755nm處的吸光度。根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)液與測(cè)定的吸光度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(附圖6)，由其標(biāo)準(zhǔn)曲線得到回歸方程y=17. 2068x+0. 0323，相關(guān)系數(shù)R為O. 9999，y為吸光度，x為標(biāo)準(zhǔn)液濃度，其結(jié)果表明，沒(méi)食子酸質(zhì)量濃度在O. Γ0. 7mg/mL范圍內(nèi)與其吸光值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，符合朗伯比爾定律，該方程可用于苧麻中多酚的定量測(cè)定。Fo I i n—C i O Ca 11 eu比角方法效倉(cāng)R豐旨 示i平價(jià)穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)每毫升含總酚酸0. 25mg的苧麻葉總酚酸樣品溶液在顯色反應(yīng)完全后在溫度40°C下避光放置0、2、4、6和8h，分別測(cè)定其吸光度，其結(jié)果見(jiàn)下表I。這些結(jié)果表明，隨著在溫度40°C下避光放置時(shí)間的延長(zhǎng)，這些苧麻葉總酚酸樣品溶液的吸光值呈下降趨勢(shì)，但幅度不大，RSD為I. 32%，表明在40°C下避光放置8h內(nèi)，其苧麻葉總酚酸樣品溶液穩(wěn)定性良好。表I :本發(fā)明苧麻葉總酚酸樣品溶液的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種由苧麻葉生產(chǎn)苧麻總酚酸浸膏的方法，其特征在于該方法包括下述步驟 a)乙醇提取 稱取8(Γ120重量份干苧麻葉，往其中加入為干苧麻葉重量8 12倍的以重量計(jì)65、5%乙醇水溶液，然后加熱回流提取2 4次，分離其乙醇提取液，棄去提余渣，合并乙醇提取液，接著在溫度5(T55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮成浸膏，同時(shí)回收乙醇再循環(huán)使用； b)第一次乙酸乙酯萃取 往步驟a)得到的浸膏中加入12(Γ180重量份蒸餾水，使所述浸膏懸浮成膠體溶液，所述的膠體溶液再用乙酸乙酯萃取2 4次，每次8(Γ120重量份，合并乙酸乙酯萃取液，棄去萃余液； c)堿溶液反萃取 步驟b)得到的乙酸乙酯萃取液用pH值1(Γ12的無(wú)機(jī)堿水溶液進(jìn)行反萃取2 4次，所述無(wú)機(jī)堿水溶液與所述乙酸乙酯萃取液的重量比為I. O :1. 8^2. 2,在反萃取后，將乙酸乙酯相與反萃取堿液分離，合并乙酸乙酯相，再進(jìn)行減壓濃縮，回收的乙酸乙酯再循環(huán)使用，而所述的反萃取堿液用無(wú)機(jī)酸調(diào)節(jié)至其PH值5飛得到一種酸性溶液； d)第二次乙酸乙酯萃取 步驟c)得到的酸性溶液與乙酸乙酯進(jìn)行萃取2 4次，所述酸性溶液與所述乙酸乙酯的重量比為3 4 :1，然后分離乙酸乙酯萃取液，棄去萃余水相； e)濃縮與干燥 步驟d)得到的乙酸乙酯萃取液在溫度5(T60°C下旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)濃縮成干浸膏，然后在溫度35 45°C下真空干燥1(Γ14小時(shí)，得到所述的苧麻總酚酸浸膏。
2.一種由苧麻葉生產(chǎn)苧麻總酚酸浸膏的方法，其特征在于該方法包括下述步驟 a)乙醇提取 稱取8(Γ120重量份干苧麻葉，往其中加入為干苧麻葉重量8 12倍的以重量計(jì)65、5%乙醇水溶液，然后加熱回流提取2 4次，分離其乙醇提取液，棄去提余渣，合并乙醇提取液，接著在溫度5(T55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮成浸膏，同時(shí)回收乙醇再循環(huán)使用； b)第一次乙酸乙酯萃取 往步驟a)得到的浸膏中加入30(Γ700重量份蒸餾水，使所述浸膏懸浮成膠體溶液，再用無(wú)機(jī)堿將其PH值調(diào)節(jié)到9 11，然后進(jìn)行離心分離，得到一種上清液與一種沉淀；所述的上清液用于測(cè)定總酚酸含量； c)乙醇溶解 步驟b)得到的的沉淀用以重量計(jì)7515%乙醇水溶液進(jìn)行溶解，再在減壓下濃縮得到浸膏；然后在溫度35 45°C下真空干燥1(Γ14小時(shí)，得到所述的苧麻總酚酸浸膏。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的方法，其特征在于所述無(wú)機(jī)堿水溶液的濃度是8 12重量％。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于所述無(wú)機(jī)酸水溶液的濃度是15 30重量％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其特征在于所述的無(wú)機(jī)堿選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀或氫氧化鉀。
6.根據(jù)權(quán)利要求I或4所述的方法，其特征在于所述的無(wú)機(jī)酸選自鹽酸、硫酸、磷酸或硝酸。
7.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的方法，其特征在于所述的減壓濃縮或真空干燥是在壓力O.Γ0. 5MPa下進(jìn)行的。
8.根據(jù)權(quán)利要求f7中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述方法得到的苧麻總酚酸浸膏。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的苧麻總酚酸浸膏，其特征在于它含有以苧麻總酚酸浸膏總重量計(jì)1.(Γ12. 0%總酚酸。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的苧麻總酚酸浸膏在治療急性軟組織損傷中的用途，其特征在于所述的急性軟組織損傷是人體皮膚、皮下淺深筋膜、肌肉、肌腱、腱鞘、韌帶、關(guān)節(jié)囊、滑膜囊、椎間盤、周圍神經(jīng)及血管軟組織損傷。
全文摘要
本發(fā)明涉及由苧麻葉生產(chǎn)苧麻總酚酸浸膏的方法，還涉及采用該生產(chǎn)方法得到的苧麻總酚酸浸膏與它們的用途。本發(fā)明的由苧麻葉生產(chǎn)苧麻總酚酸浸膏的方法包括乙醇提取、第一次乙酸乙酯萃取、堿溶液反萃取、第二次乙酸乙酯萃取與濃縮與干燥等步驟。本發(fā)明苧麻葉浸膏工藝簡(jiǎn)便有效，適合工業(yè)化生產(chǎn)，總酚酸粗膏得率達(dá)到19.0%以上，多酚含量為0.21重量%以上。本發(fā)明苧麻總酚酸浸膏具有抗炎、鎮(zhèn)痛、改善微循環(huán)和血液流變學(xué)等多種作用，對(duì)急性軟組織損傷具有良好的修復(fù)作用。
文檔編號(hào)A61K36/185GK102895273SQ201210355749
公開(kāi)日2013年1月30日 申請(qǐng)日期2012年9月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月21日
發(fā)明者邰源臨, 鄒坤, 胡建忠, 汪鋆植, 李蓉, 周媛, 夏靜芳, 楊進(jìn), 土小寧, 郭志勇, 蔡建勤, 陳劍鋒, 閆培華, 溫秀鳳, 郭海, 殷麗強(qiáng), 徐楠, 王丹, 劉朝奇, 程凡 申請(qǐng)人:北京青山綠水苧麻制品有限公司, 三峽大學(xué), 水利部水土保持植物開(kāi)發(fā)管理中心