別克參多糖的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種別克參多糖的制備方法，是將別克參藥材粉末醇提脫脂后，水提醇沉得到別克參多糖。本發(fā)明還提供別克參多糖在制備消炎、鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。經(jīng)試驗，別克參多糖有很好的消炎和鎮(zhèn)痛的作用，能夠用于制備消炎、鎮(zhèn)痛的藥物。
【專利說明】別克參多糖的制備方法及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及別克參多糖的制備方法及其應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]別克參，為百合科豬牙花屬植物新疆豬牙花(又名西伯利亞豬牙花、阿爾泰山豬牙花)的干燥肉質(zhì)鱗莖。產(chǎn)自新疆北部(天山地區(qū)至阿爾泰、福海)，生于陰坡、葉緣草叢、林下、灌木叢下和亞高山草地上,海拔1100-2500m。西伯利亞至中亞地區(qū)亦有分布。6月份在莖葉尚未枯萎時采挖，開水稍煮后曬干。性干、微苦，滋補、強身、壯體，主治體虛多病，腰膝酸軟、無力，是新疆哈薩克民族歷史悠久的藥食兩用植物之一。
[0003]炎癥是指具有血管系統(tǒng)的活體組織對各種致炎因子引起的損傷所發(fā)生的以防御反應(yīng)為主的病理過程?；静±碜兓癁樽冑|(zhì)、滲出和增生。局部表現(xiàn)是紅、腫、熱、痛和功能障礙，全身反應(yīng)有發(fā)熱、血中白細(xì)胞變化等。炎癥可見于多種疾病的病理過程?？寡姿幬锸侵笇ρ装Y反應(yīng)有抑制作用或調(diào)解作用的一類藥物。研究藥物的抗炎作用，尋求安全、有效的抗炎物質(zhì)是眾多醫(yī)藥學(xué)者共同關(guān)注的問題。研究藥物的抗炎作用，須先復(fù)制炎癥動物模型，選取多種模型進(jìn)行抗炎篩選，以達(dá)到對藥效進(jìn)行綜合評價的目的。
[0004]二甲苯致小鼠耳腫脹實驗?zāi)Ｐ褪堑湫偷募毙匝装Y模型。主要機理是二甲苯涂抹于小鼠耳廓后，致使某些炎癥介質(zhì)如組胺、激肽和纖維蛋白溶解釋放，引起局部血管擴張，毛細(xì)管通透性增加，炎癥細(xì)胞浸潤，造成耳部急性滲出性炎癥水腫。比較實驗組和對照組二甲苯作用后耳腫脹度的差異，以確定受試樣品是否具有干預(yù)急性炎癥(小鼠耳腫脹)的作用。
[0005]小鼠棉球肉芽腫實驗?zāi)Ｐ褪堑湫偷膩喖毙匝装Y模型。病理學(xué)特點以淋巴細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞浸潤為主，有較明顯的纖維結(jié)締組織、血管及上皮細(xì)胞等實質(zhì)細(xì)胞的增生，即肉芽。通過比較實驗組與對照組生成肉芽組織質(zhì)量的差異，以確定受試樣品是否具有干預(yù)亞急性炎癥(小鼠棉球肉芽腫)的作用。
[0006]冰醋酸致小鼠扭體實驗?zāi)Ｐ褪球炞C藥物鎮(zhèn)痛效果的方法之一。主要機理是將一定容積和濃度的化學(xué)刺激物質(zhì)注入小鼠腹腔內(nèi)，刺激臟層和壁層腹膜，引起較大面積、較長時間的炎性疼痛，致使小鼠出現(xiàn)腹部內(nèi)凹、軀干與后肢伸張，臀部高起等行為反應(yīng)，稱為扭體反應(yīng)。該反應(yīng)在注射后15min內(nèi)頻率較高，故以注射后15min內(nèi)發(fā)生的扭體次數(shù)做為疼痛定量指標(biāo)。通過比較實驗組與對照組扭體次數(shù)的差異，以確定受試樣品是否具有鎮(zhèn)痛的作用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明提供了別克參多糖的制備方法及其在制備抗炎鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。
[0008]本發(fā)明提供一種別克參多糖的制備方法，是將別克參藥材粉末醇提脫脂后，水提醇沉得到別克參多糖。
[0009]優(yōu)選地，所述醇提為乙醇。
[0010]優(yōu)選地，所述方法為:稱取別克參藥材粉末，加入6-12倍體積70-100%乙醇，加熱回流提取1-5次，提取時間l_4h，收集藥渣晾干，在干燥后的藥渣中加入6-30倍體積水60-100°C提取1-5次，提取時間為l_4h，合并水提濾液，減壓干燥至粘稠狀，加入2-6倍體積的無水乙醇，冷藏靜置，有白色多糖析出，減壓過濾，醇沉物用乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，減壓干燥至衡重，即得。
[0011]最優(yōu)選地，所述方法為:稱取別克參藥材粉末，加入12倍體積95%乙醇，加熱回流提取5次，提取時間4h，收集藥渣晾干，在干燥后的藥渣中加入30倍體積水100°C提取5次，提取時間為4h，合并水提濾液，減壓干燥至粘稠狀，加入6倍體積的無水乙醇，冷藏靜置，有白色多糖析出，減壓過濾，醇沉物用乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，50°C減壓干燥至衡重，即得。
[0012]本發(fā)明還提供應(yīng)用上述的方法制備得到的別克參多糖。
[0013]本發(fā)明的第三個目的是提供別克參多糖在制備消炎、鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。
[0014]本發(fā)明的第四個目的是提供一種消炎、鎮(zhèn)痛藥物，其有效成分為別克參多糖。
[0015]經(jīng)試驗，別克參多糖對消炎、鎮(zhèn)痛有良好的效果，能夠用于制備消炎、鎮(zhèn)痛類的藥物。

【具體實施方式】
[0016]以下的實施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為自常規(guī)生化試劑商店購買得到的。
[0017]I 材料 1.1藥材
別克參藥材采自于新疆阿勒泰，經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院鑒定為百合科植物Erythronium sibiricum (Fisch.et.Mey.) Kryl 新疆豬牙花的鱗莖。
[0018]1.2 動物
昆明小鼠、體重18-22g、雄性，由新疆醫(yī)科大學(xué)試驗動物中心提供，正常飼養(yǎng)3d后開始試驗。
[0019]1.3 試劑
無水乙醇、丙酮、阿司匹林泡騰片(阿斯利康制藥有限公司，產(chǎn)品批號1208042)、阿莫西林膠囊(廣州白云山制藥總廠，產(chǎn)品批號4190047)、二甲苯、冰醋酸、乙醚。
[0020]1.4 器材
水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、真空干燥箱、分析天平、打孔器。
[0021]實施例1
本發(fā)明的別克參多糖的提取制備方法如下:
稱取別克參藥材粉末，加入6倍體積70%乙醇，加熱回流提取I次，提取時間lh，收集藥渣置于通風(fēng)處晾干，干燥后的藥渣置于圓底燒瓶中，加入6倍體積水60°C提取I次，提取時間為lh，合并水提濾液，減壓干燥至粘稠狀，加入2倍體積的無水乙醇，放入4°C冰箱中靜置24h，有白色多糖析出，減壓過濾，醇沉物用乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，50°C減壓干燥至衡重，SP得。經(jīng)測定，別克參多糖得率:3.12%。
[0022]實施例2
本發(fā)明的別克參多糖的提取制備方法如下:稱取別克參藥材粉末，加入7倍體積80%乙醇，加熱回流提取2次，提取時間2h，收集藥渣置于通風(fēng)處晾干，干燥后的藥渣置于圓底燒瓶中，加入12倍體積水70°C提取2次，提取時間為2h，合并水提濾液，減壓干燥至粘稠狀，加入3倍體積的無水乙醇，放入4°C冰箱中靜置24h，有白色多糖析出，減壓過濾，醇沉物用乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，50°C減壓干燥至衡重，SP得。經(jīng)測定，別克參多糖得率:6.24%。
[0023]實施例3 本發(fā)明的別克參多糖的提取制備方法如下:
稱取別克參藥材粉末，加入8倍體積80%乙醇，加熱回流提取3次，提取時間3h，收集藥渣置于通風(fēng)處晾干，干燥后的藥渣置于圓底燒瓶中，加入18倍體積水80°C提取3次，提取時間為3h，合并水提濾液，減壓干燥至粘稠狀，加入4倍體積的無水乙醇，放入4°C冰箱中靜置24h，有白色多糖析出，減壓過濾，醇沉物用乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，50°C減壓干燥至衡重，SP得。經(jīng)測定，別克參多糖得率:9.38%。
[0024]實施例4
本發(fā)明的別克參多糖的提取制備方法如下:
稱取別克參藥材粉末，加入10倍體積90%乙醇，加熱回流提取4次，提取時間3h，收集藥渣置于通風(fēng)處晾干，干燥后的藥渣置于圓底燒瓶中，加入24倍體積水90°C提取4次，提取時間為3h，合并水提濾液，減壓干燥至粘稠狀，加入5倍體積的無水乙醇，放入4°C冰箱中靜置24h，有白色多糖析出，減壓過濾，醇沉物用乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，50°C減壓干燥至衡重，SP得。經(jīng)測定，別克參多糖得率:11.45%。
[0025]實施例5
本發(fā)明的別克參多糖的提取制備方法如下:
稱取別克參藥材粉末，加入12倍體積95%乙醇，加熱回流提取5次，提取時間4h，收集藥渣置于通風(fēng)處晾干，干燥后的藥渣置于圓底燒瓶中，加入30倍體積水100°C提取5次，提取時間為4h，合并水提濾液，減壓干燥至粘稠狀，加入6倍體積的無水乙醇，放入4°C冰箱中靜置24h，有白色多糖析出，減壓過濾，醇沉物用乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，50°C減壓干燥至衡重，即得。經(jīng)測定，別克參多糖得率:12.23%。
[0026]實施例6
別克參多糖的抗炎鎮(zhèn)痛試驗如下:
1、二甲苯致小鼠耳廓腫脹試驗
取50只小鼠隨機分為5組，每組10只，雄性，即生理鹽水組，阿莫西林陽性對照組(0.20 g/kg)，別克參多糖低、中、高劑量組，劑量分別為0.6、1.2,2.4g/kg，適應(yīng)性飼養(yǎng)3d。各組小鼠連續(xù)灌胃給藥7d，給藥量為0.lmL/10g, I次/d，末次給藥30min后，與小鼠右耳正反面均勻涂抹二甲苯50 μ L致炎，左耳做對照，30min后將小鼠勁椎脫臼處死，用直徑8mm的打孔器沿左右耳片同一部位打下圓耳片，精確稱量。結(jié)果參見表1。
[0027]腫脹率(％)=((腫脹耳重量-對照耳重量)/對照耳重量)X 100% ；
腫脹抑制率(％)=((生理鹽水組平均腫脹率-給藥組平均腫脹率)/生理鹽水組平均腫脹率)X 100%。
[0028]表1別克參多糖對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響

【權(quán)利要求】
1.一種別克參多糖的制備方法，其特征在于:是將別克參藥材粉末醇提脫脂后，水提醇沉得到別克參多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述醇提為乙醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述方法為:稱取別克參藥材粉末，加入6-12倍體積70-100%乙醇，加熱回流提取1-5次，提取時間l_4h，收集藥渣晾干，在干燥后的藥渣中加入6-30倍體積水60-100°C提取1-5次，提取時間為l_4h，合并水提濾液，減壓干燥至粘稠狀，加入2-6倍體積的無水乙醇，冷藏靜置，有白色多糖析出，減壓過濾，醇沉物用乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，減壓干燥至衡重，即得。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述方法為:稱取別克參藥材粉末，加入12倍體積95%乙醇，加熱回流提取5次，提取時間4h，收集藥渣晾干，在干燥后的藥渣中加入30倍體積水100°C提取5次，提取時間為4h，合并水提濾液，減壓干燥至粘稠狀，加入6倍體積的無水乙醇，冷藏靜置，有白色多糖析出，減壓過濾，醇沉物用乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，50°C減壓干燥至衡重，即得。
5.應(yīng)用權(quán)利要求1-4任一所述的方法制備得到的別克參多糖。
6.別克參多糖在制備消炎、鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。
7.一種消炎、鎮(zhèn)痛藥物，其有效成分為別克參多糖。
【文檔編號】A61K31/715GK104130338SQ201410382303
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2014年8月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月6日
【發(fā)明者】熱娜·卡斯木, 陳春麗, 李新霞 申請人:新疆醫(yī)科大學(xué)