專利名稱：中藥薤白新成分的鑒定及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從中藥薤白中提取的新甾體皂甙成分。
中藥薤白為百合科蔥屬小根蒜(Allium macrostemon Bunge)或薤(A.chinense G.Don)的干燥鱗莖，具有理氣寬胸、通陽散結(jié)之功效，中醫(yī)主治胸痹、心痛徹背等，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的心絞痛、心肌梗塞、動脈硬化等有一定關(guān)系。其同屬植物的揮發(fā)油中含硫化合物具有與薤白功效一致的藥理作用，如預(yù)防動脈硬化、降膽固醇及抑制血小板聚集等。
前人對于小根蒜和薤的成分研究報道甚少，小根蒜僅見文獻(xiàn)稱其揮發(fā)油中可能含有甲基烯丙基三硫醚類化合物(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所中藥志(Ⅰ)，北京人民衛(wèi)生出版社，1982，564)，但其主要有效成分尚不清楚。
本發(fā)明的目的是系統(tǒng)研究薤白的基源植物小根蒜和薤的化學(xué)成分，尋找防治心血管疾病的有效單體。
發(fā)明是這樣實現(xiàn)的首先用GC-MS(氣相色譜-質(zhì)譜)技術(shù)分別對新鮮小根蒜和薤的揮發(fā)油進行了分析，從前者中鑒定了19種含硫化合物，其中包括文獻(xiàn)報道過的甲基烯丙基三硫(MATs)。從后者鑒定了16種含硫化合物，其中甲基烯丙基三硫(MATs)為主成分。為了確認(rèn)上述分析結(jié)果進一步研究有關(guān)單體含硫化合物抗凝血的構(gòu)效關(guān)系，又合成了15種鏈狀含硫化合物，其中有二烯丙基三硫(為同屬植物大蒜揮發(fā)油的主要成分)、5種小根蒜揮發(fā)油主成分(占總油70%以上)、兩種新化合物?？谷搜“寰奂钚詼y試表明，對稱三硫醚活性最強，其IC50(半數(shù)抑制濃度)比阿斯匹林高出一個數(shù)量級。
鑒于中醫(yī)臨床所用薤白是經(jīng)過炮制的小根蒜和薤的干燥鱗莖，其中所含揮發(fā)油甚少，因而利用多種分離手段，包括大孔樹脂柱層析、硅膠柱層析、Sephadex柱層析及中低壓反相Lobar柱、制備型高效液相層析等，深入研究了小根蒜和薤中的非揮發(fā)性成分。從前者中分離出37種單體成分，用光譜分析及化學(xué)衍生化等手段鑒定了其中26種化合物，其中12種為新的甾體皂甙類化合物(作者已將其中4個化合物發(fā)表，見藥學(xué)學(xué)報1992，27(12)918;1993，28(7)526)。從后者中分離出22種水溶性化合物，鑒定了其中14種化合物，其中4種為新的甾體皂甙類化合物(表1-11)。
活性測試結(jié)果表明，這些甾體皂甙類化合物也有很強的抗人血小板聚集的活性(表12)，如薤白甙甲(macrostemonoside A)的IC50為0.065mM，薤白甙已(macrostemonoside F)的IC50為0.020mM，同樣條件下陽性對照阿斯匹林IC50為1.230mM。
實施例以化合物1和化合物3的提取分離為例1、提取分離小根蒜干燥鱗莖36公斤的75%乙醇提取物2500克，依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。將萃取物270克經(jīng)大孔樹脂柱層析、甲醇洗脫得總甙60克，再經(jīng)硅膠(200-300目)柱層析，氯仿-甲醇-水(80∶20∶5，下相及65∶35∶10，下相)和氯仿-甲醇梯度洗脫，得5個組分。組分3經(jīng)大孔樹脂柱層析，依次用水、甲醇-水(8∶2)和甲醇洗脫，將甲醇-水(8∶2)和甲醇洗脫物22.5g再行硅膠柱層析，氯仿-甲醇-水(80∶20∶5，下相)洗脫，得組分5(11.8g)，將組分5通過大孔樹脂柱、用80%甲醇洗脫，洗脫物再行硅膠柱層析，氯仿-甲醇-水(80∶20∶8，下相)洗脫，得到的第二號流分用反相中低壓Lobar柱(Rp-8)分離，流動相為甲醇-水(7∶3)，最后經(jīng)Rp-18柱純化，得化合物1(1.5克)。組分4(26克)經(jīng)大孔樹脂柱，依次用水和20%甲醇洗脫后，洗脫物再行硅膠柱層析，氯仿-甲醇-水(80∶35∶10，下相)洗脫，得到的第二號流分用反相中低壓Lobar柱(Rp-8)分離，流動相為甲醇-水(7∶3)，再經(jīng)Rp-18柱純化，得化合物3(2.3克)。
2、結(jié)構(gòu)鑒定主要利用光譜，包括紫外、紅外、質(zhì)譜、核磁共振譜(1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR)和FAB-MS分析，鑒定其結(jié)構(gòu)。
運用糖醇醋酸酯GS-MS分析技術(shù)解決了含糖較多的皂甙中糖的連接順序和連接位置;利用2D-NMR技術(shù)，尤其是HMBC譜解決了皂甙元上取代基的位置和糖的連接順序、連接位置，并對它們的全部氫信號和碳信號進行了確切的歸屬。
3、抗人血小板聚集活性測試取健康人靜脈血20ml，離心(800r/分)5分鐘，取上清液為PRP(富血小板血漿)，剩余部分經(jīng)離心(2000r/分)30分鐘，取上清液為PPP(貧血小板血漿)。用取樣器取不同體積的待測樣品水溶液置入直徑為6mm比色杯中，放入自動比色槽中，取定量PRP及PPP，將血小板數(shù)調(diào)至20萬/mm3，于37℃培養(yǎng)，加ADP(0.05ml)誘導(dǎo)，比濁法測定血小板聚集性，計算抑制率及IC50。
所用儀器為美國CHRONO-LOG公司全血聚集儀。
表1 分離出的已知化合物來源 中文名 英文名小根蒜 21-甲基-二十三烷酸 21-methyl tricosanoic acid小根蒜 β-谷甾醇 β-sitosterol小根蒜 胡蘿卜甙 daucosterine小根蒜 丁香甙 syringin小根蒜 琥珀酸 succinic acid小根蒜 胸苷 thymidine小根蒜 2,3,4,9-四氫-1H-吡啶 2,3,4,9-tetra-hydro-[3,4-b]吲哚-3-羧酸 1H-pyrido[3,4-b]indole-3-carboxylic acid小根蒜 smilagenin-3-O-β-D-glucopyranosyl(1→2)-β-D-galactopyranoside
小根蒜 kitigenin小根蒜 ramongenin A小根蒜 異撥契皂甙元 smilagenin小根蒜 替告皂甙元 tigogenin薤小根蒜 2,3,4,9-四氫-1-甲基- 2,3,4,9-tetra-hydro-1-meth薤 1H-吡啶-[3,4-b]吲哚- yl-1H-pyrido[3,4-b]indole-3-羧酸 3-carboxylic acid小根蒜 腺苷 adenosine薤薤 色氨酸 tryptophan薤 拉克索皂甙元 laxogenin薤 拉克索皂甙元-3-O-α-阿 laxogenin 3-O-α-arabinopy-拉伯吡喃糖基(1→6)-β- ranosyl(1→6)-β-glucopyra-葡萄吡喃糖甙 noside薤 拉克索皂甙元-3-O-α-阿 laxogenin 3-O-α-arabinopy拉伯吡喃糖基(1→6)-[β- ranosyl(1→6)-[β-xylopyra-木糖吡喃糖基(1→4)]-β- nosyl(1→4)]-β-glucopyrano-葡萄吡喃糖甙 side
化合物3 R1＝-β-Gal2-β-Glc R2＝-β-Glc R3＝-H化合物4 R1＝-β-Gal2-β-Glc R2＝-β-Glc R3＝-CH3


表3 化合物1-12的理化常數(shù)及主要光譜數(shù)據(jù)化合物1 為白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.255～260℃.1H-NMR(500MHz，δppm，in C5D5N)0.65(3H，s)，0.89(3H，s)，0.99(3H，d，J＝6.7Hz)，1.34(3H，d，J＝6.6Hz);4.83(1H，d，J＝7.8Hz)，4.89(1H，d，J＝7.5Hz)，5.16(1H，d，J＝7.9Hz)，5.32(1H，d.J＝7.8Hz)，5.59(1H，d，J＝7.7Hz).FAB-MS(negative)m/z1243(M-H)-，1081(M-H-Glc)-，919(M-H-Glc×2)-，757(M-H-Glc×3)-，595(M-H-Glc×4)-.
化合物2 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.268～270℃.1H-NMR(400MHz，δppm，in C5D5N)0.77(3H，)，0.89(3H，s)，1.01(3H，d，J＝6.6Hz)，1.19(3H，d，J＝6.8Hz);4.74(1H，d，J＝7.7Hz)，4.78(1H，d，J＝7.6Hz)，5.04(1H，d，J＝7.8Hz)，5.18(1H，d，J＝7.8Hz)，5.45(1H，d，J＝7.8Hz).FAB-MS(negative)m/z1257(M-H)-，1095(M-H-Glc)-，933(M-H-Glc×2)-，772(M-H-Glc×3)-，609(M-H-Glc×4)-.
化合物3 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.198～200℃.FAB-MS(pos.)m/z917(M+H-H2O)+，575(M+H-H2O×2-Glc×2)+.1H-NMR(500MHz，δppm，in C5D5N)和13C-NMR(125MHz，δppm，in C5D5N)，以及1H-1H COSY，1H-13CCOSY和HMBC光譜數(shù)據(jù)見表5、表6化合物4 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.187～190℃.FAB-MS(pos.)m/z947(M-H)+，917(M+H-MeOH)+，575(M+H-MeOH)+，575(M+H-MeOH-H2O-Glc×2)+.1H-NMR(500Mhz，δppm，in C5D5N)和13C-NMR(125MHz，δppm，in C5D5N)，以及1H-1H COSY，1H-13C COSY光譜數(shù)據(jù)見表5、表6
化合物5 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.224～227℃.FAB-MS(pos.)m/z915(M+H-H2O)+，753(M+H-H2O-Glc)+，591(M+H-H2O-Glc×2)+，429(M+H-H2O-Glc×2-Gal)+，391，377，309，155，135，119，103，85，77，57.23+Na955(M+K-H2O)+，915，309，177，155，135，119，103，85，77，73，57.1H-NMR(400MHz，δppm，in C5D5N)1.00(3H，s)，1，13(3H，s)，1.56(3H，d，J＝6.8Hz)，4.90(1H，d，J＝6.8Hz)，4.92(1H，d，J＝7.2Hz)，5.31(1H，d，J＝7.8Hz)，5.07(1H，s，H-27a)，5.35(1H，s，H-27b).13C-NMR(100.4MHz，δppm，in C5D5N)和DEPT光譜數(shù)據(jù)見表5、表6化合物6 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.230～232℃.FAB-MS(pos.)m/z919(M+H-H2O)+，595(M+H-H2O-Glc×2)+，433(M+H-H2O-Glc×2-Gal)+，415(aglycone-H2O)+，287，271，253，212，185，145，115，93，73，60，53.24+Na959(M+K-H2O)+，941(M+Na-H2O)+，919(M+H-H2O)+，595，331，309，177，155，135，119，103，85，77，73，57.1H-NMR(400MHz，δppm，in C5D5N)0.87(3H，s)，0.97(3H，s)，0.99(3H，d，J＝6.6Hz)，1.34(3H，d，J＝6.8Hz)，4.84(1h，d，J＝7.8Hz)，5.02(1H，d，J＝7.6Hz)，5.30(1H，d，J＝7.6Hz).13C-NMR(100.4MHz，δppm，in C5D5N)和DEPT見表7、表8化合物7 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.219～221℃.FAB-MS(neg.)m/z949(M-H)-;FAB-MS(pos.)m/z973(M+Na)+，919(M+H-MeOH)+，595(M+H-MeOH-Glc×2)+，453.1H-NMR(400MHz，δppm，in C5D5N)0.79(3H，s)，0.96(3H，s)，1.01(3H，d，J＝6.6Hz)，1.19(3H，d，J＝7.0Hz)，3.28(3H，s，OCH3)，4.88(1H，d，J＝7.8Hz)，5.02(1H，d，J＝7.6Hz)，5.30(1H，d，J＝7.6Hz).13C-NMR(100.4MHz，δppm，in C5D5N)和DEPT光譜數(shù)據(jù)見表7、表8化合物8 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.206～208℃.1H-NMR(500MHz，δppm，in C5D5N)0.68(3H，s)，0.95(3H，s)，1.02(3H，d，J＝6.7Hz)，1.61(3H，s)，4.81(1H，d，J＝7.8Hz)，4.96(1H，d，J＝7.7Hz)，5.23(1H，d，J＝7.7Hz).13C-NMR(DEPT)(125MHz，δppm，in C5D5N)光譜數(shù)據(jù)見表7、表8
化合物9 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.256～258℃.Anal.Calcd for C49H78O22·3H2OC，54.85;H，7.84.FoundC，54.67;H，7.91.IRυmax(cm-1)3400(OH)，2920，2850，1700(C＝O)，1000～1100(glycosyl C-O).1H-和13C-NMR(100.4MHz，δppm，in C5D5N)，以及DEPT，1H-1H，1H-13C，1H-13C Long-range COSY和HMBC光譜數(shù)據(jù)見表9、表10化合物10 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)IRυmax(cm-1)3400(OH)，2920，2850，1700(C＝O)，1000～1100(glycosyl C-O).1H-NMR(400.0MHz，δppm，in C5D5N)0.65(6H，s，H3-18，H3-19)，1.02(3H，d，J＝7.1Hz，H3-27)，1.64(3H，s，H3-21);4.81(1H，d，J＝7.6Hz)，4.95(1H，d，J＝6.7Hz)，4.96(1H，d，J＝7.6Hz).13C-NMR光譜數(shù)據(jù)見表9、表10化合物11 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.210-212℃，F(xiàn)AB-ms(pos)m/z1049(M+H)+化合物12 白色無定形粉末，對Ehrlich試劑呈陽性反應(yīng)mp.233-235.5℃，F(xiàn)AB-ms(pos)m/z917(M+H)+
表4 化合物1、2的13C-NMR化學(xué)位移值(δppm，溶劑為C5D5N)碳原子 化合物 化合物 碳原子 化合物 化合物 碳原子 化合物 化合物1 2 1 2 1 21 37.3 37.3 24 28.4 28.3 6 62.4 62.42 30.0 30.0 25 34.3 34.33 77.6 77.6 26 73.8 73.9 Glc-1 104.9 105.14 34.9 34.9 27 17.5 17.4 2 75.2 75.35 44.8 44.8 OCH3 47.3 3 78.7 78.56 29.0 29.0 Gal-1 102.5 102.4 4 71.8 71.77 32.4 32.5 2 73.2 73.2 5 78.5 78.48 35.3 35.2 3 75.6 75.6 6 62.9 62.99 54.5 54.6 4 80.2 80.210 35.6 35.7 5 76.2 76.5 C-26 sugar11 21.3 21.4 6 60.7 60.5 Glc-1 105.1 105.212 40.3 40.2 2 75.3 75.213 41.2 41.2 Glc-1 104.9 104.9 3 78.7 78.614 56.4 56.4 (內(nèi))2 81.5 81.5 4 71.6 71.615 32.5 32.4 3 88.5 88.6 5 78.5 78.516 81.2 81.4 4 70.9 70.8 6 63.1 63.117 64.0 64.3 5 77.9 77.918 16.8 16.6 6 61.8 61.819 12.4 12.4 Glc-1 104.6 104.520 40.7 40.6 2 75.2 75.321 16.5 16.3 3 78.7 78.622 110.7 112.7 4 71.0 70.923 34.9 30.8 5 77.5 77.4
表5 化合物3、4、5的1H和13C-NMR化學(xué)位移值(甙元部分)3 4 5PositionH C H C C1 1.44,1.79(O)b31.0 1.43,1.80(O) 30.9 30.72 1.44,1.90(O) 26.6 1.43,1.90(O) 26.7 26.63 4.28(O) 75.4 4.25(O) 75.4 75.34 1.44,1.82(O) 31.0 1.43,1.79(O) 30.9 30.85 2.16(O) 36.7 2.15(O) 36.7 36.66 1.21,1.76(O) 27.0 1.20,1.77(O) 27.0 26.87 0.91,1.24(O) 26.6 0.90,1.25(O) 26.7 26.58 1.49(O) 34.5 1.47(O) 34.6 34.79 1.41(O) 39.4 1.41(O) 39.3 42.010 35.2 35.2 35.811 1.51,1.72(O) 31.4 1.45,1.72(O) 31.4 37.812 3.53(dd,9.2,3.2) 79.5 3.49(dd,9.0,3.1) 79.4 213.213 46.5 46.9 56.014 1.08(O) 55.1 1.05(O) 55.1 56.015 1.55,2.05(O) 32.1 1.50,2.00(O) 31.7 31.716 5.04(O) 81.4 4.58(O) 81.6 79.917 2.33(O) 63.7 2.13(O) 64.2 55.118 1.10(s) 11.3 1.04(s) 11.2 16.219 0.97(s) 23.9 0.96(s) 23.9 23.220 2.49(m) 41.6 2.49(m) 41.4 41.321 1.59(d,6.7) 15.6 1.44(d,6.7) 15.5 15.222 110.5 112.6 110.523 2.27(O) 38.0 2.06,2.16(O) 31.7 37.924 2.70(m) 28.4 2.39(m) 28.2 28.425 147.2 146.8 147.226 4.29,4.59(O) 72.0 4.34,4.60(O) 72.0 72.127 5.02(s),5.32(s) 110.6 5.03(s),5.34(s) 110.8 110.8OCH33.28(s) 47.3
表6 化合物3、4、5的1H和13C-NMR化學(xué)位移值(糖部分)3 4 5PositionH C H C CGal-1 4.89(d,7.6) 102.5 4.89(d,7.6) 102.6 102.52 4.64(t,8.0) 81.8 4.63(t,8.0) 81.9 81.93 4.24(O) 75.2 4.23(O) 75.2 75.24 4.55(O) 69.8 4.55(O) 69.8 69.95 4.00(m) 76.5 4.00(m) 76.6 76.66 4.38,4.42(O) 62.1 4.37,4.42(O) 62.1 62.2Glc-1 5.26(d,7.8) 106.1 5.26(d,7.6) 106.1 106.22 4.06(O) 76.9 4.07(O) 76.9 76.93 4.17(O) 78.0 4.17(O) 78.0 78.14 4.31(O) 71.7 4.29(O) 71.6 71.75 3.82(m) 78.4 3.83(m) 78.4 78.46 4.37,4.40(O) 62.7 4.4,4.47(O) 62.7 62.8C-26sugarGlc-1 4.87(d,7.6) 103.9 4.91(d,7.8) 103.8 103.92 4.04(O) 75.2 4.05(O) 75.2 75.23 4.21(O) 78.5 4.22(O) 78.5 78.54 4.23(O) 71.6 4.19(O) 71.6 71.95 3.91(m) 78.5 3.94(m) 78.5 78.66 4.33,4.52(O) 62.7 4.34,4.57(O) 62.7 62.9
表7 化合物6、7、8的13C-NMR化學(xué)位移值(一)(δppm,溶劑為C5D5N)沙莫皂甙元* 24a*碳原子 5β,25R 5β,25R 6 7 82β,3β(OH)22β,3β(OH)21 39.2 40.5 40.4 40.1 40.12 70.2 67.2 67.3 67.3 67.33 67.5 81.7 82.1 82.0 82.14 33.5 31.9 32.0 32.0 31.95 36.1 36.5 36.7 36.7 36.66 26.3 26.3 26.3 26.3 26.37 26.8 26.8 26.8 26.8 26.98 35.7 35.6 35.6 35.6 35.39 41.5 41.4 40.7 40.6 41.410 37.0 37.1 37.2 37.1 37.111 21.3 21.3 21.4 21.3 21.512 40.4 40.3 40.7 40.6 40.613 40.9 40.8 41.2 41.2 43.914 56.5 56.4 56.3 56.3 54.715 32.1 32.1 32.4 32.1 31.516 81.1 81.2 81.2 81.5 84.617 63.1 63.2 64.1 64.5 64.718 16.6 16.5 16.7 16.5 14.519 24.1 23.9 23.9 23.9 23.920 42.0 42.0 41.5 41.4 103.721 14.9 15.0 16.5 16.3 11.922 109.1 109.1 110.7 112.7 152.423 31.8 31.9 37.2 30.9 34.424 29.2 29.3 28.4 28.3 23.725 30.6 30.6 34.3 34.3 33.526 66.8 66.9 75.3 75.2 75.027 17.3 17.3 17.5 17.2 17.4OCH347.3*標(biāo)準(zhǔn)對照品表8 化合物6、7、8的13C-NMR化學(xué)位移值(二)(δppm,溶劑為C5D5N)沙莫皂甙元* 24a*碳原子 5β,25R 5β,25R 6 7 82β,3β(OH)22β,3β(OH)2Gal-1 103.2 103.5 103.4 103.52 81.8 81.9 81.9 81.73 76.8 75.2 75.2 75.24 69.7 69.8 69.8 69.75 76.8 77.0 77.0 77.06 62.0 62.0 62.0 62.0Glc-1 106.1 106.3 106.3 106.32 75.1 77.0 77.0 77.03 78.3 78.1 78.1 78.04 71.7 71.8 71.8 71.85 78.0 78.5 78.5 78.56 62.9 62.9 63.0 62.9C-26 sugarGlc-1 105.0 105.0 104.92 75.2 75.2 75.23 78.7 78.7 78.64 71.8 71.8 71.85 78.5 78.5 78.56 62.9 62.9 62.9*標(biāo)準(zhǔn)對照品表9 化合物9、10的1H和13C-NMR化學(xué)位移值(甙元部分,δppm,溶劑為C5D5N)9Position H C H coupled with C 10(HMBC and Long-range1H-13C COSY) C1 1.10,1.54(O) 36.5 H3-19 36.82 1.58,2.04(O) 29.2 29.53 3.90(O) 76.8 H-1(Glc) 76.64 1.68,2.30(O) 26.7 26.95 2.17(O) 56.3 H3-19,H-1a 56.46 209.4 H-5,H-4b, 209.5H-7a,H-7b7 2.03,2.32(O) 46.7 46.98 1.79(O) 37.0 37.19 1.13(O) 53.4 H3-19 53.610 40.7 H3-19 40.911 1.23,1.50(O) 21.5 21.612 1.17,1.71(O) 39.2 H3-18 39.313 43.8 H3-18 43.914 1.03(O) 54.6 H3-18 54.715 1.37,1.97(O) 33.9 34.016 4.37(O) 84.0 84.117 2.45(d,10.4) 64.2 H3-18,H3-21 64.318 0.64(s) 14.1 14.319 0.63(s) 12.9 13.020 103.2 H-17,H3-21 103.421 1.63(s) 11.6 11.722 152.4 H3-21,H-23a, 152.5H-23b23 2.19(O) 23.4 23.624 1.43,1.78(O) 31.2 H3-27 31.425 1.91(m) 33.2 H3-27 33.426 3.57,3.90(O) 74.7 H-1(Glc') 74.927 1.01(d,6,4) 17.2 17.4
表10 化合物9、10的1H和13C-NMR化學(xué)位移值(糖部分,δppm,溶劑為C5D5N)9 10Position H C H coupled with C C(HMBC and Long-range1H-13C COSY)Glc-1 4.86(d,7.6) 101.8 H-2(Glc) 102.02 3.79(t,8.0) 74.5 75.13 4.11(O) 75.9 78.54 4.32(O) 79.6 H-1(Xyl) 72.35 3.86(O) 78.1 77.06 4.60(dd,7.7,2.5), 67.8 H-1(Ara) 69.74.72(dd,7.7,3.2)Xyl-1 5.34(d,7.6) 104.8 H-4(Glc),H-2(Xyl),H-5a(Xyl)2 3.93(O) 74.83 4.21(O) 78.14 4.12(O) 70.75 3.85,4.13(O) 66.9Ara-1 4.96(d,7.3) 105.3 H-2(Ara),H-5a(Ara), 105.4H-5b(Ara)2 4.35(O) 72.2 71.83 3.97(O) 74.2 74.44 4.17(O) 69.5 69.15 3.66(d,11.3), 66.9 66.54.22(O)C-26Glc'-1 4.75(d,7.9) 104.5 H-26a,H-26b, 104.8H-2(Glc')2 3.93(O) 74.6 75.13 4.35(O) 78.2 78.54 4.13(O) 71.4 71.75 3.87(O) 78.1 78.46 4.30(O), 62.6 62.84.47(dd,9.5,2.1)
表11 化合物1-7的質(zhì)譜碎片1 1243 1081 919 757 595(M-H)-(M-H-Glc)-(M-H-Glc×2)-(M-H-Glc×3)-(M-H-Glc×4)-2 1257 1095 933 772 609(M-H)-(M-H-Glc)-(M-H-Glc×2)-(M-H-Glc×3)-(M-H-Glc×4)-3 917 575(M+H-H2O)+(M+H-H2O×2-Glc×2)+4 917 575(M+H-H2O)+(M+H-H2O-MeOH-Glc×2)+5 915 753 591 429(M+H-H2O)+(M+H-H2O (M+H-H2O (Aglycone+H)+-Glc)+-Glc×2)+6 919 595 433 415(M+H-H2O)+(M+H-H2O (Aglycone+H)+(Aglycone-Glc×2)++H-H2O)+7 973 919 595 453(M+Na)+(M+H-MeOH)+(M+H-MeOH-Glc×2)+
表12 分離出的新化合物IC50值來源化合物 IC50(mM)小根蒜 1 2.884小根蒜 2 0.871小根蒜 3 0.147小根蒜 4 0.155小根蒜 5 0.162小根蒜 6 0.398小根蒜 7 1.318小根蒜 8 0.188薤 9 1.000薤 10 0.186薤 11 0.298薤 12 0.085小根蒜 薤白甙A 0.065小根蒜 薤白甙D -小根蒜 薤白甙E 0.417小根蒜 薤白甙F 0.020阿斯匹林(陽性對照) 1.230
權(quán)利要求
1.12個甾體皂甙類化合物，其結(jié)構(gòu)為 化合物3 R1=-β-Gal2-β-Glc R2=-β-Glc R3=-H化合物4 R1=-β-Gal2-β-Glc R2=-β-Glc R3=-CH3 化合物6 R1=-β-Gal 2/() β-Glc R2=-β-Glc R3=H化合物7 R1=-β-Gal 2/() β-Glc R2=-β-Glc R3=CH3化合物8
2.如權(quán)利要求1所述的化合物在抗血小板聚集方面的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及從中藥薤白中提取的新甾體皂甙成分。本發(fā)明用各種分離手段，從薤白的基源植物小根蒜和薤中分離出59種單體成分，利用光譜分析及化學(xué)衍生化等方法，鑒定了其中40種化學(xué)成分，包括十多種新化學(xué)成分。生物活性測試結(jié)果表明，這些新成分具有不同程度的抗人血小板聚集的活性。
文檔編號A61K31/58GK1102186SQ9311945
公開日1995年5月3日 申請日期1993年10月29日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月29日
發(fā)明者姚新生, 彭軍鵬 申請人:沈陽醫(yī)學(xué)院