專利名稱：：肺活素的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種從動(dòng)物肺臟中提取出生物活性成分用于預(yù)防和治療呼吸系統(tǒng)疾病的組合物，原名肺細(xì)胞活化素，簡(jiǎn)稱肺活素，其英文名稱PulmonaryCellActiveFartor(簡(jiǎn)稱PCAF)。在治療哮喘等呼吸系統(tǒng)疾病中，以往單獨(dú)使用支氣管舒張藥物進(jìn)行治療是不夠全面的，對(duì)于中、重度哮喘，僅依靠規(guī)律地使用支氣管舒張劑(如β2激動(dòng)劑)甚至是有害的，因?yàn)棣?激動(dòng)劑無(wú)抗炎作用，單純對(duì)癥治療會(huì)掩蓋炎癥發(fā)展，使AHR加重，因而必須聯(lián)合應(yīng)用抗炎藥物治療。在應(yīng)用抗炎藥物治療后，雖然哮喘得到緩解或預(yù)防措施得以暫時(shí)控制，但大多數(shù)患者存在輕重度或間隔長(zhǎng)短不等的復(fù)發(fā)，這主要是由于抗菌素對(duì)肺組織沒(méi)有修復(fù)和促再生作用，所以復(fù)發(fā)率居高不下，出現(xiàn)停藥犯病現(xiàn)象，專家普遍認(rèn)為哮喘病人的療效與巨噬細(xì)胞對(duì)各種藥物的易感程度有關(guān)。針對(duì)以上提出的問(wèn)題，本發(fā)明提供一種能夠激活巨噬細(xì)胞的物質(zhì)，其目的在于調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，改善肺功能指標(biāo)。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的用于預(yù)防和治療呼吸系統(tǒng)疾病的肺活素，含有分子量小于20KDa的組合物，并且具有下列特性1.1可從哺乳動(dòng)物肺臟組織提取；1.2組合物的主要成份多肽、核酸；1.3生物活性特征1.3.1能夠在體內(nèi)外刺激單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞吞噬功能；1.3.2能夠調(diào)節(jié)IL-1和IL-2等淋巴因子產(chǎn)生。此外，肺活素的技術(shù)特征還有2.1大分子蛋白質(zhì)試驗(yàn)—磺柳酸法測(cè)試其蛋白定性為陰性。2.2本組合物的水溶液經(jīng)190-400nm紫外分光掃描可見兩個(gè)峰，即205±10nm，260±10nm處，兩峰中間的谷位在235±10nm處。2.3本組合物的水溶液經(jīng)高效液相色譜法分析，有三、四個(gè)主要吸收峰，其主峰的相對(duì)面積百分比在40％以上。肺活素能夠保護(hù)動(dòng)物和人的肺與支氣管；能夠修復(fù)動(dòng)物和人的肺與支氣管的損傷；促進(jìn)人肺和支氣管組織細(xì)胞的再生，從而增強(qiáng)抗菌素療效；能在體外促進(jìn)組織細(xì)胞生長(zhǎng)。肺活素從新生小牛的肺臟組織中提取，并能預(yù)防和治療慢性支氣管炎、哮喘、肺癌、肺氣腫、肺結(jié)核、肺炎、呼衰、支氣管擴(kuò)張、肺膿腫等呼吸系統(tǒng)疾病。制備肺活素的方法，其特征在于1.清洗新鮮或冰凍保存的哺乳動(dòng)物肺臟；2.將肺臟組織細(xì)胞進(jìn)行破碎；3.然后加入肺重量0.5-3.0倍的蒸餾水；4.分離及澄清；5.將分離及澄清后的產(chǎn)物提?。?.除菌、分裝；7.將肺活素制成水針或凍干粉針。制備方法采用高速組織搗碎機(jī)、膠體磨等機(jī)械和超聲方法進(jìn)行肺臟組織破碎。制備方法在破碎后加入蒸餾水的產(chǎn)物可反復(fù)凍融。制備方法采用超濾方法將分離及澄清后的產(chǎn)物提取，超濾分子量截留20KDa以下的物質(zhì)。制備方法的成品標(biāo)示量采用多肽含量標(biāo)示法、核酸含量標(biāo)示法和生物活性單位標(biāo)示法。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是1、肺活素作為肺細(xì)胞生長(zhǎng)因子成份的一部分，補(bǔ)充了哮喘病人生長(zhǎng)細(xì)胞因子的缺如，中醫(yī)學(xué)理論以臟補(bǔ)臟；現(xiàn)在醫(yī)學(xué)觀點(diǎn)以某種動(dòng)物臟內(nèi)的細(xì)胞因子可以補(bǔ)充人該種臟器內(nèi)的細(xì)胞因子是十分理想的，因?yàn)樗亟思?xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的完整，這是現(xiàn)有技術(shù)所達(dá)不到的。2、肺活素可增強(qiáng)肺內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬功能和分泌功能—這是肺內(nèi)最重要的防御和保護(hù)體系，如此促進(jìn)吞噬和消滅引起肺部疾病的致敏原和致炎細(xì)菌及病毒，既控制了I型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生，減輕了氣道慢性炎癥的發(fā)展，又減少了支氣管平滑肌的收縮與痙攣。3、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用未見任何毒副反應(yīng)。下面通過(guò)實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明加以具體描述肺活素為新生小牛的肺臟提取液，新鮮的胎肺經(jīng)清洗、破碎，破碎采用高速組織搗碎機(jī)、膠體磨等機(jī)械或超聲方法進(jìn)行肺臟組織破碎，然后加入肺重量0.5-3.0倍的蒸餾水，可反復(fù)凍融，然后進(jìn)行分離及澄清；分離的方法可采用布過(guò)濾、篩網(wǎng)過(guò)濾、濾紙過(guò)濾、濾斗過(guò)濾、濾板過(guò)濾；澄清采用離心、甩干等方法。將分離及澄清后的產(chǎn)物提??；提取采用超濾方法和其它物理及化學(xué)方法，超濾分子量截留20KDa以下的物質(zhì)。然后進(jìn)行除菌、分裝；將肺活素制成水針或凍干粉針。成品標(biāo)示量方法采用多肽含量標(biāo)示法、核酸含量標(biāo)示法和生物活性單位標(biāo)示法。所得的肺活素，具有以下技術(shù)特征1.大分子蛋白質(zhì)試驗(yàn)—磺柳酸法測(cè)試其蛋白定性為陰性。2.本組合物的水溶液經(jīng)190-400nm紫外分光掃描可見兩個(gè)峰，即205±10nm，260±10nm處，兩峰中間的谷位在235±10nm處。3.本組合物的水溶液經(jīng)高效液相色譜法分析，有三個(gè)主要吸收峰，其主峰的相對(duì)面積百分比在40％以上。下面通過(guò)各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述一、藥理、藥效、毒理研究1、一般藥理本品對(duì)貓進(jìn)行了一般藥理試驗(yàn)，試驗(yàn)表明肺活素對(duì)動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)(心率、心電圖、血壓等)和呼吸系統(tǒng)(頻率、深度等)均無(wú)明顯影響。2、藥效學(xué)試驗(yàn)肺活素增強(qiáng)大白鼠肺支氣管灌洗液中巨噬細(xì)胞吞噬功能。肺活素有促進(jìn)小白鼠IL-1生成的功能。肺活素有促進(jìn)小白鼠IL-2生成的功能。3、毒理研究熱原質(zhì)試驗(yàn)嚴(yán)格按《中華人民共和國(guó)藥典》二部進(jìn)行，合格。異常毒性試驗(yàn)小白鼠尾靜脈注射本品0.5ml，無(wú)異常，合格。安全性試驗(yàn)豚鼠腹腔注射本品5ml，健康增重，合格。過(guò)敏試驗(yàn)按《中華人民共和國(guó)藥典》二部細(xì)胞色素C溶液過(guò)敏試驗(yàn)方法進(jìn)行試驗(yàn)，合格。延長(zhǎng)一倍時(shí)間攻擊試驗(yàn)亦合格。降壓物質(zhì)檢查嚴(yán)格按《中華人民共和國(guó)藥典》二部進(jìn)行的，不含降壓物質(zhì)。急性毒性試驗(yàn)兩種動(dòng)物(小白鼠、大白鼠)進(jìn)行三種途徑(即肌注、靜注、腹腔注)給藥，證明625以上倍于人體用量，無(wú)任何毒性反應(yīng)，安全可靠。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)80只大白鼠、12只狗，分別以三種劑量，兩種途徑給藥十二周，觀察一般體征、體重、外觀、行為、尿常規(guī)、血常規(guī)、肝腎功能，肉眼觀察和病理檢查，未發(fā)現(xiàn)毒性反應(yīng)，證明長(zhǎng)期用本品無(wú)毒性反應(yīng)，安全可靠。局部刺激性觀察大白鼠局部刺激試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)注射部位皮膚異常。毒理結(jié)論經(jīng)各種毒理試驗(yàn)證明，肺活素安全范圍極大，短、長(zhǎng)期應(yīng)用不會(huì)有明顯毒性反應(yīng)?？偨Y(jié)肺活素安全性</tables>二、肌注肺活素對(duì)小白鼠慢性支氣管炎療效的實(shí)驗(yàn)研究(摘要)目的本研究以小白鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，經(jīng)肌肉注射給藥，研究了肺活素對(duì)小白鼠慢性支氣管炎的療效。1、慢性氣管炎模型小白鼠吸入SO2300-400ppm，每天2小時(shí)，每周5天，共6周，用病理方法確定氣管炎的形成。2、給藥方法分預(yù)防性給藥和治療性給藥。預(yù)防性給藥染毒開始即肌肉注肺活素，設(shè)2個(gè)劑量組，即高劑量組和低劑量組，每周5天，給藥共6周。治療性給藥動(dòng)物染毒6周后，氣管炎模型已經(jīng)建立，給予肺活素治療，亦分為高劑量組和低劑量組，每周5天，共給藥4周。此時(shí)SO2濃度降至100-200ppm的維持量。另設(shè)中毒對(duì)照(染毒不給治療)和空白對(duì)照組(不作任何處理在同樣條件下飼養(yǎng))。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)論是預(yù)防性給藥還是治療性給藥。給藥組動(dòng)物在體重增長(zhǎng)、平均咳嗽次數(shù)和肺臟器系數(shù)等項(xiàng)指標(biāo)均比中毒對(duì)照組有明顯改善；用光學(xué)顯微鏡對(duì)肺組織作病理檢查，治療組肺組織炎癥病程度較輕；對(duì)氣管作透射電鏡和掃描電鏡觀察顯示，治療組氣管粘膜上皮纖毛細(xì)胞的損傷亦較輕。綜上所述，肺活素對(duì)小白鼠吸入SO2所致的氣管炎均有較好的預(yù)防和治療作用1、氣管的掃描電鏡觀察正常小鼠氣管掃描電鏡觀察結(jié)果如圖1所示，可見細(xì)胞飽滿，纖毛清晰自然。而中毒對(duì)照組氣管的掃描電鏡如圖2所示，見細(xì)胞收縮、纖毛脫落且纖毛少而短。圖3、4、5、6為給藥組小鼠氣管掃描電鏡圖，與圖2比較，纖毛生長(zhǎng)情況比中毒對(duì)照組好。采用每個(gè)視野內(nèi)纖毛所占面積的大小來(lái)表示氣管病損的程度以示肺活素的療效，纖毛在視野內(nèi)所占比例大，氣管受損輕。反之，受損重，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表。從表可以看出，無(wú)論是預(yù)防性給藥組或是治療性給藥組，視野內(nèi)纖毛平均所占面積均大于中毒對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P(0.05)，說(shuō)明治療后纖毛受損大大減輕。2、氣管的透射電鏡觀察給藥組的透射電鏡如圖9、10、11、12所示，從預(yù)防和治療性給藥組氣管透射電鏡可以看出纖毛的生長(zhǎng)和線粒體的數(shù)量均無(wú)明顯改變，說(shuō)明肺活素對(duì)SO2所致氣管的損傷具有一定的保護(hù)和治療作用。3、肺臟病理檢查備組動(dòng)物肺組織均有不同程度的炎癥反應(yīng)，見表2，從表2可見，給藥組肺組織炎癥發(fā)現(xiàn)明顯低于中毒對(duì)照組。表1肺活素實(shí)驗(yàn)性治療各組氣管掃描電鏡每個(gè)視野平均纖毛所占面積統(tǒng)計(jì)(X±SD)組別動(dòng)物數(shù)(n)每個(gè)視野纖毛面積比例(％)空白對(duì)照591.5±10.0中毒對(duì)照914.0±7.6預(yù)防性給藥高劑量851.5±11.9預(yù)防性鉿藥低劑量740.0±7.8治療性給藥高劑量668.5±8.7治療性給藥低劑量745.1±7.1表2肺活素實(shí)驗(yàn)性治療組肺炎的發(fā)生率預(yù)防性給藥組治療性給藥組組別動(dòng)物數(shù)肺炎動(dòng)物數(shù)發(fā)生率動(dòng)物數(shù)肺炎數(shù)發(fā)生率(只)(只)(％)(只)(只)(％)空白對(duì)照組1011010220中毒對(duì)照組1044012866高劑量給藥組911114642低劑量給藥組711410550肺活素對(duì)小鼠白介素II水平的影響1.藥品肺活素，胸腺肽，氯化鈉注射液。2.實(shí)驗(yàn)方法2.1IL-2的產(chǎn)生抗凝血加入培養(yǎng)板各孔，再加TPA和PHA，培養(yǎng)24小時(shí)，每孔吸出20ul上清液作IL-2活性測(cè)定。2.2ConA誘導(dǎo)IL-2反應(yīng)細(xì)胞制備C57BL/6小鼠脾臟磨碎后配成細(xì)胞懸液，加入ConA，培養(yǎng)48小時(shí)。分層取界面層細(xì)胞即為IL-2反應(yīng)細(xì)胞(淋巴母細(xì)胞)。2.3檢測(cè)方法反應(yīng)細(xì)胞加入各孔，再加待測(cè)血清，培養(yǎng)。每孔再加入3H-TdR繼續(xù)培養(yǎng)。收獲細(xì)胞，液體閃爍記數(shù)儀測(cè)定cpm值。3.結(jié)果肺活素各組的IL-2結(jié)果均明顯增加(p＜0.001)。附表肺活素對(duì)IL-2的影響分組動(dòng)物數(shù)IL-2P只(X±SD)空白對(duì)照組1446.14±9.42＜0.001胸腺肽組1495.04±23.96＜0.001肺活素1組14114.51±21.09＜0.001肺活素2組14274.01±48.55＜0.001肺活素3組14493.49±63.42＜0.0014.結(jié)論(1)肺活素能促進(jìn)小白鼠白細(xì)胞介素II的產(chǎn)生(P＜0.001)，即肺活素可以提高小白鼠的免疫功能。(2)小白鼠白細(xì)胞介素II的產(chǎn)生隨注射肺活素的劑量增多而提高。肺活素對(duì)大鼠肺巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響1、藥品空白對(duì)照品—氯化鈉注射液。陽(yáng)性對(duì)照品—(小牛)注射用胸腺肽。實(shí)驗(yàn)藥品—注射用肺活素。2、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組空白胸腺肽肺活素1組肺活素2組肺活素3組肌肉組6只6只6只6只6只靜脈組6只6只6只6只6只3、誘導(dǎo)動(dòng)物注射藥品后，放塑料桶中吸粉筆灰塵3分鐘，以誘導(dǎo)單核細(xì)胞滲出，每日一次，連續(xù)七天。4、肺灌注—收集肺巨噬細(xì)胞第八天分別用10％苯巴比妥鈉1ml腹腔注射麻醉，解剖分離出完整的肺和氣管，行氣管插管，以氯化鈉注射液洗去表面血漬，以20毫升HANK′S液灌洗支氣管三次，吸出肺灌洗液，2000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，棄上清，其沉淀為肺巨噬細(xì)胞。5、孵育時(shí)間向反應(yīng)板孔中加入肺巨噬細(xì)胞0.5ml，2％雞紅細(xì)胞0.5ml，HANK′S液0.5ml混合，于37℃水浴30分鐘，其間再吹打勻兩次。計(jì)數(shù)在倒置鏡下100計(jì)數(shù)個(gè)巨噬細(xì)胞，計(jì)算巨噬細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)。6、結(jié)果附表大鼠肺巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞率和指數(shù)表中p值為各組與空白對(duì)照組比較值。7、從表中結(jié)果可以看出(1)肺活素各組的大鼠肺巨噬細(xì)胞吞噬功能均增強(qiáng)，其吞噬指數(shù)和吞噬率比空白對(duì)照組和胸腺肽組均明顯增多(p＜0.001)。(2)大鼠肺巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和吞噬率隨注射肺活素的劑量增多而提高，注射途徑對(duì)其影響不明顯。8、結(jié)論肺活素可以促進(jìn)大鼠肺巨噬細(xì)胞吞噬功能，即肺活素可以使巨噬細(xì)胞呈激活狀態(tài)，對(duì)異物顆粒的吞噬作用增強(qiáng)。在炎性組織內(nèi)，如果活化肺泡巨噬細(xì)胞選擇性分泌物的質(zhì)量強(qiáng)勁有效，則在遏制肺炎發(fā)展、增進(jìn)病變吸收和防止組織纖維化，以及增進(jìn)肺臟防御功能等方面，皆具有重要作用。9、巨噬細(xì)胞的主要功能(1)吞噬作用，是機(jī)體內(nèi)吞噬能力最強(qiáng)的細(xì)胞。(2)加工、傳遞抗原給T細(xì)胞及B細(xì)胞，調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，參與特異性免疫。(3)是細(xì)胞免疫中的重要效應(yīng)細(xì)胞，致敏T細(xì)胞釋放淋巴因子作用于巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)其殺傷能力。(4)參與IV型變態(tài)反應(yīng)的炎癥過(guò)程。(5)能夠產(chǎn)生多種因子如白細(xì)胞介素III，彈力蛋白酶、膠原酶、溶菌酶、前列腺素、中性粒細(xì)胞趨化因子、熱原質(zhì)、干擾素、補(bǔ)體等。臨床療效初步觀察對(duì)兩組60例支氣管哮喘病人進(jìn)行臨床觀察，治療方法是1、常規(guī)治療組采用抗炎、解痙進(jìn)行常規(guī)治療；解痙采用口服2、肺活素輔助治療組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，每日給肺活素3mg(50kg)。觀察指標(biāo)結(jié)果1、肺活素對(duì)支氣管哮喘患者T淋巴細(xì)胞亞群的影響組別CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+常規(guī)治療前50.22±13.446.40±12.024.22±9.131.54±0.31常規(guī)治療后48.69±11.8243.34±8.4925.90±7.261.48±5.26肺活素治療前49.36±9.6049.70±10.022.92±7.61.47±0.86肺活素治療后45.47±12.533.56±8.4523.43±4.561.21±0.46常規(guī)治療支氣管哮喘患者前后外周血CD3、CD4、CD8、CD4/CD8無(wú)明顯改變(P＞0.05)。肺活素治療后的患者外周血CD4、均明顯降低(P＜0.05)，CD8無(wú)明顯改變(P＞0.5)。肺活素對(duì)支氣管哮喘患者白細(xì)胞介素II及受體的影響表肺活素對(duì)哮喘IL-2和IL-2R的影響組別IL-2(％)IL-2R(u/L)常規(guī)治療前36.81±7.2525±270常規(guī)治療后41.23±8.7497±342肺活素治療前35.92±6.9532±324肺活素治療后52.45±9.7321±167常規(guī)治療前后支氣管哮喘患者IL-2無(wú)明顯改變(P＞0.05)，IL-2R亦無(wú)明顯改變(P＞0.05)，肺活素治療后IL-2明顯增高(p＜0.01)，IL-2R明顯降低(p＜0.01)。肺活素對(duì)支氣管哮喘患者癥狀體征的影響組別咳嗽痰量喘息哮鳴音呼吸困難常規(guī)治療前+++++++++++++常規(guī)治療后+++++肺活素治療前+++++++++++++肺活素治療后＿＿＿＿＿肺活素治療支氣管哮喘患者前后FEV1、PEER改變情況組別例數(shù)FEV1PEER常規(guī)治療前6052±7.634±5.6常規(guī)治療后6078±5.426±3.4肺活素治療前6054±6.632±4.8肺活素治療后6088±4.816±5.2肺活素輔助治療支氣管哮喘療效對(duì)比表肺活素治療與常規(guī)治療的療效對(duì)比組別例數(shù)療效顯效及以上者臨床控制顯效好轉(zhuǎn)無(wú)效常規(guī)治療組6082619734/60(56.7％)肺活素治療組608328250/60(83.3％)臨床療效結(jié)論1、肺活素具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能作用，在支氣管哮喘時(shí)T細(xì)胞功能受影響，而肺活素作為免疫調(diào)節(jié)劑，有助于T細(xì)胞功能的提高。2、肺活素具有調(diào)節(jié)機(jī)體細(xì)胞因子平衡的作用，在支氣管哮喘細(xì)胞因子之間的平衡失調(diào)，肺活素可以促進(jìn)IL-2產(chǎn)生，調(diào)節(jié)體內(nèi)細(xì)胞因子平衡。3、肺活素具有增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬功能的作用，在支氣管哮喘時(shí)能激活巨噬細(xì)胞吞噬功能，使其膜活性增強(qiáng)，溶酶體及溶菌酶含量增高。提高抗炎效果，并能減少反復(fù)呼吸道感染而誘發(fā)哮喘發(fā)作的因素。我們采用肺活素輔助治療60例支氣管哮喘，達(dá)臨床控制及顯效者的50例中有23例已連續(xù)隨訪3年以上，仍處于較穩(wěn)定狀態(tài)。說(shuō)明肺活素對(duì)減少和預(yù)防呼吸道感染，減少哮喘發(fā)作的感染誘因有一定作用。4、研究結(jié)果表明，采用肺活素輔助治療支氣管哮喘對(duì)改善病人的癥狀，體征和肺功能狀態(tài)均優(yōu)于常規(guī)治療，在支氣管哮喘綜合療效中起到輔助治療作用，提高了支氣管哮喘的綜合治療效果。5、肺活素安全、無(wú)局部刺激作用、不產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)，無(wú)全身毒副作用，是治療支氣管哮喘較為理想的輔助治療藥物。權(quán)利要求1.一種用于預(yù)防和治療呼吸系統(tǒng)疾病的肺活素，含有分子量小于20KDa的組合物，并且具有下列特性1.1可從哺乳動(dòng)物肺臟組織提?。?.2組合物的主要成份多肽、核酸；1.3生物活性特征1.3.1能夠在體內(nèi)外刺激單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞吞噬功能；1.3.2能夠調(diào)節(jié)IL-1和IL-2等淋巴因子產(chǎn)生。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肺活素，具有以下技術(shù)特征2.1大分子蛋白質(zhì)試驗(yàn)—磺柳酸法測(cè)試其蛋白定性為陰性。2.2本組合物的水溶液經(jīng)190-400nm紫外分光掃描可見兩個(gè)峰，即205±10nm，260±10nm處，兩峰中間的谷位在235±10nm處。2.3本組合物的水溶液經(jīng)高效液相色譜法分析，有三、四個(gè)主要吸收峰，其主峰的相對(duì)面積百分比在40％以上。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肺活素，具有以下技術(shù)特征3.1能夠保護(hù)動(dòng)物和人的肺與支氣管；3.2能夠修復(fù)動(dòng)物和人的肺與支氣管的損傷；3.3促進(jìn)人肺和支氣管組織細(xì)胞的再生，從而增強(qiáng)抗菌素療效；3.4能在體外促進(jìn)組織細(xì)胞生長(zhǎng)。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肺活素，其特征在于可從牛的肺臟組織中提取，并能預(yù)防和治療慢性支氣管炎、哮喘、肺癌、肺氣腫、肺結(jié)核、肺炎、呼衰、支氣管擴(kuò)張、肺膿腫等呼吸系統(tǒng)疾病。5.制備如權(quán)利要求1所述組合物的方法，其特征在于5.1清洗新鮮或冰凍保存的哺乳動(dòng)物肺臟；5.2將肺臟組織細(xì)胞進(jìn)行破碎；5.3然后加入肺重量0.5-3.0倍的蒸餾水；5.4分離及澄清；5.5將分離及澄清后的產(chǎn)物提??；5.6除菌、分裝；5.7將肺活素制成水針或凍干粉針。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于采用高速組織搗碎機(jī)、膠體磨等機(jī)械和超聲方法進(jìn)行肺臟組織破碎。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于破碎后加入蒸餾水的產(chǎn)物可反復(fù)凍融。8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于采用超濾方法將分離及澄清后的產(chǎn)物提取，超濾分子量截留20KDa以下的物質(zhì)。9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于成品標(biāo)示量方法如下4.1采用多肽含量標(biāo)示法；4.2采用核酸含量標(biāo)示法；4.3采用生物活性單位標(biāo)示法。全文摘要本發(fā)明涉及一種從動(dòng)物肺臟中提取出生物活性成分用于預(yù)防和治療呼吸系統(tǒng)疾病的組合物。含有分子量小于20KDa的組合物,主要成分為多肽、核酸,生物活性特征能夠在內(nèi)外刺激單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞吞噬功能;能夠調(diào)節(jié)IL－1和IL－2等淋巴因子產(chǎn)生。本發(fā)明提供一種能夠激活巨噬細(xì)胞的物質(zhì),其目的在于調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,改善肺功能指標(biāo)。文檔編號(hào)A61K35/42GK1194833SQ9711973公開日1998年10月7日申請(qǐng)日期1997年10月8日優(yōu)先權(quán)日1997年10月8日發(fā)明者劉柏宏,杜群君,皮建新申請(qǐng)人:劉柏宏