一種半乳糖胺和聚多巴胺修飾的肝癌靶向納米粒及制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種半乳糖胺和聚多巴胺修飾的肝癌靶向納米粒及其制備方法與應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 肝臟是人體最為關(guān)鍵的器官之一，參與體內(nèi)消化、排泄、解毒和免疫調(diào)節(jié)等多個(gè)過(guò) 程，因此肝臟也是人體最易受損的器官之一。然而，肝癌等疾病導(dǎo)致了大量的死亡，嚴(yán)重威 脅人類的健康。肝癌治療的方法迄今已經(jīng)發(fā)展了有十幾種之多，例如：化學(xué)治療、放射療法、 外科手術(shù)、生物療法、基因治療、光動(dòng)力學(xué)治療、癌癥疫苗等。發(fā)展比較早且使用廣泛的治療 方法是化學(xué)治療和放射療法，其主要缺點(diǎn)在于：治療手段對(duì)癌細(xì)胞的靶向性不高，不能有效 區(qū)分癌細(xì)胞和正常細(xì)胞，特別是化療及一些蛋白質(zhì)藥物具有很高的細(xì)胞毒性，在治療的同 時(shí)也對(duì)正常機(jī)體器官造成很大損傷。按照傳統(tǒng)的給藥方式，小分子藥物在體內(nèi)隨機(jī)分布，真 正蓄積到病患部位進(jìn)而發(fā)揮藥效的只是少部分藥物，多數(shù)都被代謝排出體外，生物利用度 很低。
[0003] 靶向性藥納米物傳遞是一種既可以提高治療靶向性又比較容易實(shí)現(xiàn)的治療途徑， 主要依靠藥物分子通過(guò)靶向特異性到達(dá)病變部位，殺滅致病病毒、修復(fù)受損組織或消除疾 病癥狀。概括而言，靶向性藥物輸送體系具有如下主要優(yōu)點(diǎn)：高度靶向性，減少毒副作用； 增加非水溶性藥物在體內(nèi)的分散量，穩(wěn)定藥物在體內(nèi)的存在；濃集藥物并能夠調(diào)節(jié)藥物的 釋放速度；改變藥物給藥途徑，如將需要靜脈注射的藥物制成方便的口服藥物。目前關(guān)于體 內(nèi)靶向功能的藥物載體成功用于臨床報(bào)道極其少見(jiàn)，導(dǎo)致靶向藥物的臨床應(yīng)用進(jìn)展緩慢。
[0004] 聚合物納米粒子（NPs)由于其靶向緩釋、控釋的特點(diǎn)，被公認(rèn)為是一種優(yōu)良的抗 癌藥物載體系統(tǒng)。聚乳酸（PLA)、聚乙醇酸（PGA)、聚乳酸-乙醇酸（PLGA)、聚己內(nèi)酯（PCL)、 聚乙二醇-聚（乳酸-乙醇酸）（PEG-PLGA)等生物可降解的藥物載體，具有良好的生物相 容性、生物可降解性及抗張強(qiáng)度，在人體無(wú)毒，無(wú)積累，因此它在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有很誘人 的應(yīng)用前景和極高的商業(yè)價(jià)值，廣泛應(yīng)用于負(fù)載抗癌藥的納米藥物。但是這種納米藥物不 具有主動(dòng)靶向的功能。肝癌靶向治療已經(jīng)成為癌癥納米技術(shù)領(lǐng)域非常重要的研宄方向。與 正常細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞表面常會(huì)出現(xiàn)一些受體的表達(dá)異常，這為靶向治療提供了基礎(chǔ)。
[0005] 肝腫瘤細(xì)胞表面存在特異的去唾液酸糖蛋白受體（Asialoglycoprotein Receptor，ASGPR)，可專一 ,性識(shí)別端基含有半乳糖的載體（如半乳糖胺），并與之特異性結(jié) 合，通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)入肝癌細(xì)胞并釋放藥物。靶向配體的導(dǎo)入要求納米粒子表面有可 鏈接的反應(yīng)官能團(tuán)，在納米藥物表面修飾一層聚多巴胺（polydopamine，pD)被認(rèn)為是一種 在納米藥物表面引入化學(xué)反應(yīng)官能團(tuán)較簡(jiǎn)單的方法，多巴胺的分子結(jié)構(gòu)如下：
[0006]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種半乳糖胺和聚多巴胺修飾的肝癌靶向納米粒的制備方法，其特征是包括如下步 驟： (1) 按比例，稱取IOOmg聚合物和2-20mg的疏水性藥物，溶于8-10ml有機(jī)溶劑中，在攪 拌條件下，滴加到100mL的0. 3-10mg/L的聚乙二醇1000維生素 E琥珀酸酯水溶液中，攪拌 6~24小時(shí)，減壓揮發(fā)除去有機(jī)溶劑，10000~20000rpm離心15-30min，棄上清液，用去離 子水洗滌，沉淀為載疏水性藥物的聚合物初始納米粒； (2) 按lmg-lOmg: ImL的比例將所述初始納米粒重懸于10mM，pH = 8. 5的Tris緩沖液 中，加入多巴胺鹽酸鹽使?jié)舛葹?. 2~1.0 mg/mL，反應(yīng)3~12小時(shí)，10000~20000rpm離 心15-30min，收集沉淀，用去離子水洗絳，獲得載疏水性藥物的被聚多巴胺包裹的納米粒； (3) 按lmg-lOmg: ImL的比例將載疏水性藥物的被聚多巴胺包裹的納米粒分散在pH為 8. 5~12的弱堿水溶液中，加入肝癌革El向配體半乳糖胺使?jié)舛葹?. 1-lOmg/mL，反應(yīng)1~3 小時(shí)，10000~20000rpm離心15-30min，收集納米粒子，用去離子水洗滌，冷凍干燥得半乳 糖胺和聚多巴胺修飾的肝癌靶向納米粒。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述聚合物為聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳 酸-乙醇酸、聚己內(nèi)酯、聚乙二醇-聚（乳酸-乙醇酸）或聚乙二醇1000維生素 E琥珀酸 酯-聚乳酸。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述疏水性藥物為紫杉醇、多烯紫杉醇、阿 霉素、香豆素-6、順鉑、5-氟尿嘧啶、喜樹(shù)堿、布洛芬或10-羥基喜樹(shù)堿。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑為丙酮、二氧六環(huán)、二甲基亞 砜、二氯甲烷、乙腈、四氫呋喃或N，N-二甲基甲酰胺。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述弱堿水溶液為PBS緩沖溶液、Tris緩 沖溶液、碳酸鈉水溶液、碳酸氫納水溶液或氫氧化鈉水溶液。
6. 權(quán)利要求1-5之一的方法制備的半乳糖胺和聚多巴胺修飾的肝癌靶向納米粒。
7. 權(quán)利要求6的半乳糖胺和聚多巴胺修飾的肝癌靶向納米粒在制備惡性肝癌治療藥 物的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種半乳糖胺和聚多巴胺修飾的肝癌靶向納米粒及制備方法與應(yīng)用，制備為：取聚合物和疏水性藥物，溶于有機(jī)溶劑中，攪拌，滴加到TPGS水溶液中，攪拌，減壓揮發(fā)，離心，棄上清液，得載疏水性藥物的聚合物初始納米粒；將初始納米粒重懸于Tris緩沖液中，加多巴胺鹽酸鹽反應(yīng)，離心，得載疏水性藥物的被聚多巴胺包裹的納米粒；將載疏水性藥物的被聚多巴胺包裹的納米粒分散在弱堿水溶液中，加入肝癌靶向配體半乳糖胺，反應(yīng)，離心，冷凍干燥得半乳糖胺和聚多巴胺修飾的肝癌靶向納米粒。本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，無(wú)污染。半乳糖胺和聚多巴胺修飾的肝癌靶向納米粒具有良好肝臟靶向性、生物相容性以及生物可降解性，可靶向肝癌并有治療作用。
【IPC分類】A61K9-19, A61P35-00, A61K47-34, A61K31-337, A61K47-26
【公開(kāi)號(hào)】CN104666251
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510088949
【發(fā)明人】梅林 , 曾小偉, 劉贛, 張明明
【申請(qǐng)人】深圳市百諾康泰生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2015年6月3日
【申請(qǐng)日】2015年2月26日