用于減輕疼痛、壓力和失眠的組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于減輕一種或多種疼痛、壓力和失眠癥狀的組合物，包括蕓苔(Brassica campestris)、蜂蠟和龍腦樟(Dryobalanops camphora)。本發(fā)明還提供一種包含本發(fā)明組合物的制劑，及其制備方法，其用途和治療一種或多種疼痛、壓力和失眠癥狀的方法。
【專利說(shuō)明】
用于減輕疼痛、壓力和失眠的組合物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及用于減輕至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀的組合物，用于制備所述組 合物的方法，其用途及其治療方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 對(duì)于治療疼痛、壓力和睡眠障礙有各種可用的藥物和制劑。疼痛是許多身體狀況 中主要的癥狀，并會(huì)顯著影響人的生活質(zhì)量和一般功能。疼痛的范圍從輕度的不適或隱約 的痛苦至急性的常難以忍受的痛苦，并且可以是泛發(fā)性的或局部的。NSAID(非留體抗炎藥） 例如阿司匹林、布洛芬和萘普生，是其中最頻繁使用的處方，和在急性和慢性炎性病狀導(dǎo)致 的疼痛中用于緩解癥狀的非處方藥。但是患者仍面臨它們嚴(yán)重并發(fā)癥(如胃腸道(GI)和腎 的副作用）的重大挑戰(zhàn)。
[0003] 壓力正在急劇增長(zhǎng)，特別是在城市人口中，導(dǎo)致各種類型的與壓力相關(guān)的障礙。大 量治療被用于克服壓力，范圍從芳香療法至施用治療藥物。芳香療法涉及吸入精油。然而， 據(jù)觀察吸入可能或可能不適用于所有人，因?yàn)樗鼤?huì)對(duì)敏感的黏膜產(chǎn)生刺激，并損壞鼻內(nèi)的 嗅覺感受體。長(zhǎng)期吸入濃縮的精油會(huì)導(dǎo)致頭痛、眩暈、頭暈，惡心和嗜睡。因此，這種用于減 輕壓力的治療反而可能加重壓力或引起其他不良效果。經(jīng)口或靜脈途徑施用治療藥物需要 醫(yī)生的監(jiān)督與干預(yù)，造成對(duì)它們應(yīng)用的限制。此外，它們具有延時(shí)的作用時(shí)間和不利的副作 用，例如苯并二氮罩，其可被用于治療壓力，對(duì)患者具有潛在的上癮作用。
[0004] 失眠或睡不著，由壓力或其他病因?qū)е碌乃哒系K是普遍流行的，并影響大約 30%的普通人群。現(xiàn)今長(zhǎng)期受限的睡眠已變?yōu)槲覀兩鐣?huì)廣泛而嚴(yán)重的問題。失眠損害認(rèn)知 和身體功能，并與范圍廣泛的受損日間功能相關(guān)，跨越許多情感、社會(huì)和身體領(lǐng)域，并可導(dǎo) 致其他障礙和健康風(fēng)險(xiǎn)。目前，對(duì)于失眠的一線治療為抗組胺劑，苯并二氮罩和非苯并二 氮罩類。這些藥物具有各種有害影響，例如用于失眠的藥物是上癮性的，因此對(duì)患者有害。 更新的睡眠誘導(dǎo)藥物包括唑吡坦(Zolpidem)，其也顯示許多副作用，最嚴(yán)重的為轉(zhuǎn)天的嗜 睡、反彈性失眠、依賴和濫用。
[0005] 此外，持續(xù)使用藥物導(dǎo)致患者對(duì)這樣的藥物發(fā)展出抗性，減少其對(duì)進(jìn)一步治療的 響應(yīng)。
[0006] 對(duì)于治療疼痛、壓力和失眠可用的局部制劑也不能避免任何不利的副作用。例如， 用于治療疼痛的基于水楊酸鹽和辣椒素的局部制劑對(duì)皮膚有刺激，這二者即使是微量的也 優(yōu)選避免使用。用于治療壓力的圣約翰草局部制劑可增加皮膚對(duì)陽(yáng)光的敏感性并導(dǎo)致皮 疹。治療失眠的局部制劑不很常見，為數(shù)不多的嘗試普遍也未發(fā)現(xiàn)非常有效。
[0007] 因此，可用的局部制劑對(duì)于減輕疼痛、壓力或失眠不是非常有效。相反，可用的局 部制劑要么具有副作用，要么不能有效減輕個(gè)體的疼痛、壓力和失眠。
[0008] 因此，對(duì)更安全的能被配制為局部遞送并能減輕一種或多種選自疼痛、壓力和失 眠的癥狀的組合物存在需求。
[0009] 發(fā)明概述
[0010] 因此，一方面，本發(fā)明提供用于減輕一種或多種疼痛、壓力和失眠癥狀的組合物。
[0011] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含蕓苔(Brassica campestris)、蜂錯(cuò)和龍腦樟 (Dryobalanops camphora)的組合物。
[0012] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包含蕓苔油、蜂蠟和龍腦樟油。
[0013] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含蕓苔油、蜂蠟和龍腦樟的組合物，用于減輕至 少一種或多種或所有疼痛、壓力和失眠癥狀。
[0014] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種組合物，其包含40-75重量份的蕓苔油、15-50 重量份的蜂蠟和1-20重量份的龍腦樟。
[0015] 另一方面，本發(fā)明提供用于制備減輕一種或多種疼痛、壓力和失眠癥狀的組合物 的方法。
[0016] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于制備減輕至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀的 制劑的方法，包括:在60°C-225°C的溫度下將40-75重量份的蕓苔油加熱特定的時(shí)間段；向 熱蕓苔油中混合15-50重量份的蜂蠟，至少直至蜂蠟溶解;并向蕓苔油和蜂蠟的混合物中混 合1-20重量份的龍腦樟。
[0017] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于制備減輕至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀 的制劑的方法，其包括:在60 °C -225 °C的溫度下將40-75重量份的蕓苔油加熱特定的時(shí)間 段；向熱蕓苔油中混合15-50重量份的蜂蠟，至少直至蜂蠟溶解;將混合物從熱源移除，并混 合入1-20重量份的龍腦樟。
[0018] 在一個(gè)實(shí)施方案中，用于加熱蕓苔油的時(shí)間段為足以使溫度達(dá)到60°C-225°C的時(shí) 間段。
[0019] 在一個(gè)實(shí)施方案中，加熱蕓苔油在60°C_100°C的溫度下進(jìn)行。在這樣的實(shí)施方案 中，用于加熱蕓苔油的時(shí)間段為足以使溫度達(dá)到60°C-100°C的時(shí)間段。
[0020] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含蕓苔油、蜂蠟和龍腦樟油的組合物在減輕至 少一種或多種或全部疼痛、壓力和失眠癥狀中的用途。
[0021] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀的方法，包括 在受影響區(qū)域、發(fā)炎區(qū)域、頭部或全部身體應(yīng)用本發(fā)明的組合物。
【附圖說(shuō)明】
[0022] 當(dāng)參考附圖閱讀以下說(shuō)明書時(shí)，本發(fā)明的其他目的、特征和優(yōu)勢(shì)將是明顯的。
[0023]圖1說(shuō)明匪-2 (本發(fā)明的制劑)與其單個(gè)成分相比，對(duì)卡拉膠(Carrageenan)誘導(dǎo)的 大鼠爪水腫(odema)的功效，所述NM-2的單個(gè)成分為芥末油、樟腦、蜂蠟和可商購(gòu)的制劑雙 氯芬酸。
[0024]圖2說(shuō)明雙氯芬酸、匪_2(本發(fā)明的制劑)與其單個(gè)成分相比，對(duì)卡拉膠誘導(dǎo)的爪水 腫體積百分?jǐn)?shù)改變的功效，所述單個(gè)成分為芥末油、樟腦、蜂蠟和可商購(gòu)的制劑雙氯芬酸。 [0025]圖3說(shuō)明雙氯芬酸、匪-2(本發(fā)明的制劑）與其單個(gè)成分相比，對(duì)在REM睡眠剝奪誘 導(dǎo)的痛覺過(guò)敏中爪回縮時(shí)間的功效，所述單個(gè)成分為芥末油、樟腦、蜂蠟和可商購(gòu)的制劑雙 氯芬酸。
[0026]圖4說(shuō)明雙氯芬酸、匪-2(本發(fā)明的制劑）與其單個(gè)成分相比，對(duì)在REM睡眠剝奪誘 導(dǎo)的痛覺過(guò)敏中爪回縮時(shí)間增加的功效，所述單個(gè)成分為芥末油、樟腦、蜂蠟和可商購(gòu)的制 劑雙氯芬酸。
[0027] 發(fā)明詳述
[0028] 當(dāng)介紹本公開或其優(yōu)選的實(shí)施方案的要素時(shí)，冠詞"一個(gè)/一種(a、an、theVlP"m 述"意在表示一個(gè)/一種或多個(gè)/多種要素。術(shù)語(yǔ)"包含"、"包括"和"具有"（comprising、 including和having)意為包含的，指在所列要素外會(huì)有額外的要素。
[0029] 本發(fā)明公開了可減輕至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀的組合物。
[0030] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含蕓苔、蜂蠟和龍腦樟的組合物。
[0031] 本發(fā)明的組合物中可包含晶體形式或油形式的龍腦樟。龍腦樟油和晶體形式的龍 腦樟在本發(fā)明的組合物中可替換使用。
[0032] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包括蕓苔油、蜂蠟和龍腦樟油。
[0033] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含蕓苔油、蜂蠟和龍腦樟的組合物，用于減輕至 少一種或多種或全部疼痛、壓力和失眠癥狀。
[0034] 組合物的活性成分可通過(guò)任意數(shù)目的方式組合，以最優(yōu)化預(yù)期效果。根據(jù)一些實(shí) 施方案，本發(fā)明的組合物包含40-75重量份的蕓苔油、15-50重量份的蜂蠟和1-20重量份的 龍腦樟。
[0035]根據(jù)還進(jìn)一步的實(shí)施方案，本發(fā)明的組合物包含55-65重量份的蕓苔油、25-35重 量份的蜂蠟和3-13重量份的龍腦樟。
[0036] 在一個(gè)實(shí)施方案中，蕓苔油、蜂蠟和龍腦樟的比例大約為約1:0.5:0.1。
[0037] 然而，基于本文的教導(dǎo)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可知曉，可以任何方式變化確切的組 成及變化活性成分的相對(duì)比例，以提供特定功效的增加或降低。
[0038] 以上實(shí)施方案的組合物可任選包含一種或多種其他成分，以提供額外的減輕或其 他益處。例如，組合物可進(jìn)一步包含一種或多種其他的活性成分，例如天然活性成分，例如 提取物、酊、精油、浸泡油或任意其他油。優(yōu)選地，這樣的天然活性成分選自丁香油、生姜提 取物或油、芝麻油、蓖麻油、印度香膠(guggul)、天然香料或其組合。其他的活性成分可以是 合成的活性的成分。這樣的可包含入本發(fā)明組合物的天然或合成的活性試劑選自但不限于 由以下組成的組:循環(huán)增加劑、關(guān)節(jié)或肌肉舒緩劑和肌膜穩(wěn)定劑。
[0039] 在其他的實(shí)施方案中，組合物可任選地包括一種或多種藥學(xué)可接受的賦形劑。這 種任選的藥學(xué)可接受的賦形劑的實(shí)例包括:載體;基礎(chǔ)組分例如水、丙二醇、甘油、聚乙二 醇、聚硅氧烷(si I icone)和/或油，例如植物油、花生油、蓖麻油和可可油和液體石蠟;表明 活性劑;增稠劑例如硬脂酸鋁和氫羊毛脂(hydrogen Iano I in);凝膠劑;穩(wěn)定劑;乳化劑;分 散劑;懸浮劑;保濕劑;潤(rùn)膚劑;冷卻組分、循環(huán)增加組分、酸性或堿性物質(zhì)；緩沖劑;抗結(jié)晶 劑;潤(rùn)滑劑;著色劑;香水或香精;發(fā)泡劑;稀釋劑;填料;結(jié)合劑或防腐劑。
[0040]在還進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含以上實(shí)施方案中組合物的制劑。在一 些實(shí)施方案中，制劑可包含可接受的賦形劑，以將組合物配制為局部制劑，所述局部制劑選 自一個(gè)或多個(gè)由以下組成的組:基于水的制劑、基于聚硅氧烷的制劑、基于石油的制劑和基 于天然油的制劑。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，制劑包括用于基于天然油制劑的賦形劑。
[0041] 根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，可向制劑中加入額外的添加劑以增強(qiáng)穩(wěn)定性、質(zhì)地、顏色、 氣味和其他性質(zhì)。
[0042] 在一些實(shí)施方案中，包含以上實(shí)施方案的組合物的制劑可以配制為油、凝膠、乳 霜、洗液、香膏或噴霧的形式。
[0043] 在另一方面，本發(fā)明提供用于制備減輕一種或多種疼痛、壓力和失眠癥狀的組合 物的方法。
[0044] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于制備減輕至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀的 制劑的方法，所述方法包括:在60 °C_225°C的溫度下將40-75重量份的蕓苔油加熱特定的時(shí) 間段；向熱蕓苔油中混合15-50重量份的蜂蠟，至少直至蜂蠟溶解;并混合入1-20重量份的 龍腦樟。
[0045] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于制備減輕至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀的 制劑的方法，所述方法包括:在60 °C_225°C的溫度下將40-75重量份的蕓苔油加熱特定的時(shí) 間段；向熱蕓苔油中混合15-50重量份的蜂蠟，至少直至蜂蠟溶解;將混合物從熱源移開，并 混合入1-20重量份的龍腦樟。
[0046] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在60°C_225°C的溫度下的蕓苔油的加熱進(jìn)行約一分鐘至約十 五分鐘的時(shí)間段。這樣的時(shí)間段可以依賴于在其下制備制劑的量和規(guī)模而變化，以實(shí)現(xiàn)60 。(:-225 °C 的溫度。
[0047]在一個(gè)實(shí)施方案中，加熱蕓苔油在60°C-100°C的溫度下進(jìn)行。在這樣的實(shí)施方案 中，用于加熱蕓苔油的時(shí)間段是足以使溫度達(dá)到60°C-100°C的時(shí)間段。
[0048]在一個(gè)實(shí)施方案中，蕓苔油為制劑的55-65重量份。
[0049] 在一個(gè)實(shí)施方案中，蜂蠟為制劑的25-35重量份。
[0050] 在一個(gè)實(shí)施方案中，晶體形式的龍腦樟或龍腦樟油為制劑的3-13重量份。
[0051]根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，方法進(jìn)一步涉及加入防腐劑、乳化劑、其他添加劑和藥學(xué)可 接受的試劑和/或賦形劑。
[0052] 在實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含蕓苔油、蜂蠟和龍腦樟的組合物在減輕至少一種 或多種或全部疼痛、壓力和失眠癥狀中的用途。
[0053] 在實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀的方法，包括根據(jù) 個(gè)體的需要，以足以覆蓋受影響區(qū)域、發(fā)炎區(qū)域、頭部或全部身體的量應(yīng)用本發(fā)明的組合 物。將根據(jù)醫(yī)師、藥劑師、助理醫(yī)師、醫(yī)學(xué)草藥醫(yī)師、自然療法醫(yī)師或獸醫(yī)的需要、期望或建 議向個(gè)體施用所述組合物。
[0054]將理解，給藥劑量、給藥時(shí)期和一般給藥方式在個(gè)體間會(huì)不同，取決于變量例如癥 狀的嚴(yán)重程度以及個(gè)體的年齡和/或一般健康狀況。通常，當(dāng)組合物轉(zhuǎn)化為適用于局部給藥 的制劑時(shí)，局部治療的給藥方案為一天或數(shù)天中，向受影響區(qū)域每天應(yīng)用1次或2次或3-4次 或多于4次，取決有疼痛、壓力和失眠的嚴(yán)重程度。
[0055] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在個(gè)體具有疼痛的情況下，將制劑在受影響區(qū)域上或附近輕 柔地按摩約2分鐘至10分鐘或直至受影響區(qū)域感覺到溫暖的時(shí)間。
[0056] 在一個(gè)實(shí)施方案中，為了減輕壓力，將制劑在額頭上輕柔按摩10秒至1分鐘和/或 進(jìn)行約5分鐘至20分鐘的膝蓋以下的腿部，特別是腳底的按摩。
[0057]在一個(gè)實(shí)施方案中，在個(gè)體失眠的情況下，進(jìn)行約5分鐘至20分鐘的制劑于膝蓋以 下的腿部，特別是腳底的按摩，同樣發(fā)現(xiàn)在個(gè)體中誘導(dǎo)睡眠。
[0058]在一些實(shí)施方案中，在睡覺前應(yīng)用制劑或組合物。
[0059]所述制劑或組合物使身體和思維從壓力中放松，并幫助獲得酣睡。已發(fā)現(xiàn)制劑或 組合物在減輕疼痛和炎癥中有效。本發(fā)明的組合物或制劑可被用于治療炎性區(qū)域減少疼 痛，以及和肌肉拉傷、扭傷、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、粘液囊炎、神經(jīng)痛、肌炎、腕管綜合癥、 內(nèi)傷和其他造成疼痛的癥狀相關(guān)的腫脹。其在運(yùn)動(dòng)、其他任何活動(dòng)或事故中的肌肉損傷中 也是有用的。
[0060] 根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，在進(jìn)行劇烈的身體活動(dòng)前應(yīng)用所述組合物，所述身體活動(dòng) 例如為可引起疼痛或壓力或?qū)е率叩鸟R拉松比賽、賽車、長(zhǎng)距離散步或駕車、劇烈的工作 或任何其他劇烈活動(dòng)。因此，組合物可被用于預(yù)防與這樣的疼痛或壓力或失眠相關(guān)的疼痛、 壓力和失眠。
[0061] 本發(fā)明的組合物在減輕疼痛、壓力和失眠中是有效的，所述組合物包括非常少的 組分，也就是說(shuō)在一個(gè)是實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物僅含有三種成分。同時(shí)，用于制備制 劑的方法不需要復(fù)雜的步驟、設(shè)備、機(jī)械裝備、裝置或非常高的能量。因此，本發(fā)明的組合物 和方法是非常有優(yōu)勢(shì)的，是因?yàn)樗鼈儗?duì)于治療多于一種的疼痛、壓力和失眠癥狀是非常簡(jiǎn) 單、經(jīng)濟(jì)和有效的。
[0062] 現(xiàn)將詳細(xì)參考本發(fā)明的某些實(shí)施方案。雖然本發(fā)明將結(jié)合所列舉的實(shí)施例加以描 述，但應(yīng)理解，它們只用于說(shuō)明本發(fā)明而其并非意欲將本發(fā)明限制于那些實(shí)施方案。相反， 本發(fā)明意在涵蓋所有替代方式、修改及等價(jià)物，其可被包含在如由權(quán)利要求所限定的本發(fā) 明范圍內(nèi)。因?yàn)楸绢I(lǐng)域普通技術(shù)人員可發(fā)現(xiàn)能被用于本發(fā)明實(shí)踐的，包含本發(fā)明的精神和 主旨的，公開的實(shí)施方案的變化，類似于或等同于本文中所描述的那些的公開的實(shí)施方案 的許多方法和材料，因此本發(fā)明應(yīng)解釋為涵蓋公開范圍內(nèi)的所有。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將 認(rèn)識(shí)到本發(fā)明絕非受限于所述的方法與物質(zhì)。
【具體實(shí)施方式】
[0063]實(shí)施例1-局部油制劑的制備
[0064]按如下制備作為示例性實(shí)施方案的局部油制劑。
[0065]將62.50ml蕓苔油在100°C的溫度下加熱約3-10分鐘。將31.25gm的蜂蠟混合入熱 蕓苔油中以完全溶解蜂蠟。將混合物從熱源移走，加入6.25gm的龍腦樟并混合。使混合物冷 卻至室溫。然后將其裝瓶。
[0066] 實(shí)施例2-對(duì)于局部油制劑與其單個(gè)成分相比，抗炎和鎮(zhèn)痛效果的評(píng)估：
[0067] 本研究的目的是評(píng)估用于減輕疼痛和相關(guān)炎癥的根據(jù)實(shí)施例1制備的局部油性制 劑(在此稱為NM-2)和其單個(gè)成分。
[0068] 材料和方法：
[0069] 使用卡拉膠誘導(dǎo)的爪水腫以檢測(cè)NM-2及其單個(gè)成分的急性抗炎和鎮(zhèn)痛性能。
[0070] 基本原理：
[0071] 該模型檢測(cè)了藥物抑制炎性試劑(刺激劑）（例如卡拉膠)注射后大鼠后爪中產(chǎn)生 的水腫的能力。在應(yīng)用刺激劑之前和之后測(cè)量注射爪的體積，并將治療的動(dòng)物的爪體積與 疾病對(duì)照組的那些比較。
[0072] 步驟：
[0073]研究中使用重150_200g的雄性白化Wistar大鼠。將動(dòng)物養(yǎng)護(hù)于具有谷殼墊和不銹 鋼蓋的聚丙烯籠內(nèi)。使用商購(gòu)的大鼠飼料、Aquaguard水隨意喂養(yǎng)大鼠。在經(jīng)孟買T N醫(yī)學(xué)院 (T N Medical College)和BYL耐爾醫(yī)院（BYL Nair Hospital)的機(jī)構(gòu)動(dòng)物倫理委員會(huì) (Institutional Animal Ethical Committee)批準(zhǔn)后，根據(jù)由印度政府的社會(huì)公平和賦權(quán) 部(Ministry of Social Justices and Empowerment)批準(zhǔn)的動(dòng)物倫理規(guī)范設(shè)計(jì)和進(jìn)行試 驗(yàn)。
[0074]在氯胺酮-甲苯噻嗪麻醉下，使用無(wú)菌剃刀移除大鼠背部的毛發(fā)。然后隨機(jī)將動(dòng)物 分成6個(gè)不同的組，每組含有6只動(dòng)物，如下表1所示。評(píng)估局部油制劑NM-2與單個(gè)成分蕓苔 油(芥末油）、蜂錯(cuò)、龍腦樟(樟腦)和可商購(gòu)制劑Vo veran乳膠劑相比的功效。
[0075]表1:用于研究的動(dòng)物分組
[0077]將研究藥物連續(xù)7天局部應(yīng)用于動(dòng)物
的剃除毛發(fā)的后背上。在第8天，如常應(yīng)用試 驗(yàn)藥物，30分鐘后，將卡拉膠溶液(0.1ml的l%w/v溶液)皮下注射至所有組的動(dòng)物的右后爪 的足底面。將爪用墨水在外踝的水平標(biāo)記，并將爪浸入水銀中，直至該標(biāo)記。在緊隨注射卡 拉膠之前(0小時(shí)），及隨后在1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)、4小時(shí)、5小時(shí)和24小時(shí)體積描記測(cè)量爪體 積?？寡谆钚缘闹当硎緸槿缦滤镜淖w積百分?jǐn)?shù)變化：
[0078] 爪體積百分?jǐn)?shù)變化=((Vt_Vo)/Vo) X 100
[0079]其中Vt =卡拉膠注射5小時(shí)后的爪體積 [0080] Vo = O小時(shí)的爪體積
[0081] 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：
[0082] 所有值被表不為平均值土 SD。使用Graph pad PRISM 5軟件（Graph pad Software lnc，圣地亞哥，加州）應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。為了確定爪體積百分?jǐn)?shù)改變，進(jìn)行單向方差分析 (ANOVA)，隨后是圖基事后檢驗(yàn)(Tukey's post-hoc test)，以確定組間的顯著差異。
[0083]表2雙氯芬酸、NM-2和單個(gè)成分對(duì)卡拉膠誘導(dǎo)的大鼠爪水腫的功效：
[0085] 值被表示為平均值土SD(每組n = 6)。當(dāng)與疾病對(duì)照組比較時(shí)，*P〈0.05、#P〈0.01 和*#P〈0.001。當(dāng)與匪-2組比較時(shí)，###p〈〇. 001。當(dāng)與雙氯芬酸組比較時(shí)，@ρ〈〇. 〇5、_P〈 0.01和_粑〈0.001。
[0086] 上表2以及圖1顯示動(dòng)物爪中最大炎癥見于卡拉膠注射后2小時(shí)。與疾病對(duì)照（P〈 0.05)、雙氯芬酸和NM-2制劑中的單個(gè)成分相比，用NM-2治療后大鼠的爪體積顯著下降。
[0087] 表 3
[0088] 雙氳芬酸、NM-2和單個(gè)成分對(duì)卡枋胺諉導(dǎo)的女鼠爪7tC腫功效的百分?jǐn)?shù)改奪：
[0090] 值被表示為平均值土SD(每組n = 6)。當(dāng)與疾病對(duì)照組比較時(shí)，*P〈0.05、#P〈0.01 和*#P〈0 · 001。當(dāng)與NM-2組比較時(shí)，##p〈0 · 01。當(dāng)與雙氯芬酸組比較時(shí)，@ρ〈0 · 05、_P〈0 · 01 和_粑〈0.001。
[0091] 上表3以及圖2顯示當(dāng)與疾病對(duì)照、雙氯芬酸組(P〈0.05)和單個(gè)成分組相比時(shí)，匪_ 2組(P〈0.001)中爪體積的百分減少是顯著的。同樣，最大和最早的益處見于NM-2制劑中。
[0092] 總結(jié)：
[0093]匪_2制劑顯示爪體積的顯著減少，從而表示炎癥的減輕，其表明為鎮(zhèn)痛功效。在 NM-2的三種成分中，僅有芥末油顯示出統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的抗炎功效。然而該功效，以及結(jié)合所有 為芥末油、蜂蠟和樟腦的三種成分的功效比匪-2制劑所見的要小很多。因此匪-2的抗炎和 鎮(zhèn)痛活性源于其單個(gè)成分的協(xié)同作用。總之，NM-2制劑已在緩解炎癥和疼痛上顯示出重大 的希望。
[0094]實(shí)施例3-對(duì)于局部油制劑與其單獨(dú)成分相比，在REM睡眠剝奪誘導(dǎo)的痛覺過(guò)敏中 的功效的評(píng)估
[0095] 現(xiàn)今長(zhǎng)期受限的睡眠已變?yōu)槲覀兩鐣?huì)廣泛而嚴(yán)重的問題。睡眠剝奪經(jīng)常被認(rèn)為是 緊張性刺激，因?yàn)楦鞣N研究已顯示經(jīng)典壓力系統(tǒng)的活化和提高的壓力激素(例如腎上腺素 和皮質(zhì)醇）的血漿水平。睡眠本身似乎對(duì)壓力系統(tǒng)具有抑制作用，因此，睡眠剝奪將這些系 統(tǒng)的活性保持在清醒時(shí)出現(xiàn)的更高的水平。壓力可對(duì)疼痛相關(guān)的癥狀具有雙邊作用。雖然 急性壓力可在動(dòng)物和人中產(chǎn)生疼痛;但慢性和反復(fù)的壓力也已被報(bào)道產(chǎn)生痛覺過(guò)敏(對(duì)疼 痛刺激增加的敏感性)和痛覺超敏（由無(wú)害刺激引起的疼痛）?？焖傺蹌?dòng)(REM)睡眠剝奪大鼠 模型是一種已顯示出睡眠剝奪導(dǎo)致對(duì)疼痛電刺激的疼痛響應(yīng)增加的模型，其是壓力的間接 指示。
[0096]因此，該實(shí)驗(yàn)研究旨在評(píng)估匪-2制劑及其單獨(dú)成分改善或減輕REM睡眠剝奪（失 目民)相關(guān)的壓力誘導(dǎo)的痛覺過(guò)敏的潛質(zhì)。
[0097]材料和方法：
[0098]研究中使用兩種技術(shù);改進(jìn)的花盆技術(shù)和熱板法。
[0099]改進(jìn)的花盆技術(shù)的基本原理：
[0100]使用改進(jìn)的花盆技術(shù)誘導(dǎo)REM睡眠剝奪。在該方法中，將大鼠置于水箱中的高平臺(tái) 上96個(gè)小時(shí)。在REM睡眠期間出現(xiàn)肌肉松弛，作為其結(jié)果當(dāng)動(dòng)物進(jìn)入REM睡眠時(shí)其從平臺(tái)落 入水中。因此，動(dòng)物醒來(lái)，并再次爬上平臺(tái)。該方法防止REM睡眠并允許其他的睡眠階段。當(dāng) 使這樣睡眠剝奪的動(dòng)物經(jīng)受有害刺激例如熱板時(shí)，與未剝奪睡眠的動(dòng)物相比，它們對(duì)于疼 痛顯示出降低的疼痛閾限，和增加的敏感性。
[0101]熱板法的基本原理：
[0102] 大鼠的爪對(duì)于不會(huì)損傷皮膚的溫度下的熱是非常敏感的。置于熱板上的大鼠顯示 的反應(yīng)為跳躍、爪回縮和舔爪。因此，該試驗(yàn)被用于評(píng)估疼痛閾限，以及動(dòng)物對(duì)于溫和疼痛 刺激的響應(yīng)。
[0103] 研究步驟：
[0104] 研究使用重150-200g的雄性白化Wistar大鼠。將動(dòng)物養(yǎng)護(hù)于具有谷殼墊和不銹鋼 蓋的聚丙烯籠內(nèi)。使用商購(gòu)的大鼠飼料、Aquaguard水隨意喂養(yǎng)大鼠。將動(dòng)物房設(shè)施的溫度 條件保持在25±2°C，相對(duì)濕度保持在65±5%。在經(jīng)孟買T N醫(yī)學(xué)院（T N Medical Co liege)和BYL耐爾醫(yī)院（BYL Nair Hospital)的機(jī)構(gòu)動(dòng)物倫理委員會(huì)（Institutional Animal Ethical Committee)批準(zhǔn)后，根據(jù)由印度政府的社會(huì)公平和賦權(quán)部(Ministry of Social Justices and Empowerment)批準(zhǔn)的動(dòng)物倫理規(guī)范設(shè)計(jì)和進(jìn)行試驗(yàn)。
[0105] 在氯胺酮-甲苯噻嗪麻醉下，使用無(wú)菌剃刀移除大鼠背部的毛發(fā)。然后隨機(jī)將動(dòng)物 分成6個(gè)不同的組，每組含有6只動(dòng)物，如下表4所示。使用非留體抗炎劑(NSAID)二氯芬酸作 為陽(yáng)性對(duì)照有兩個(gè)原因：第一，沒有已知可用的局部抗壓或失眠試劑，第二，評(píng)估的參數(shù)對(duì) 傷害性刺激有響應(yīng)。
[0106] 進(jìn)行研究，以評(píng)估匪-2制劑與其單個(gè)成分芥末油、蜂蠟和樟腦以及可商購(gòu)制劑二 氯芬酸相比的功效。
[0107] 表4用于研究的動(dòng)物分組
[0110] 使用具有高9cm、直徑為6cm平臺(tái)的有機(jī)玻璃盒子(24cmX18cmX 18cm)誘導(dǎo)睡眠剝 奪。將水充填于盒中至平臺(tái)以下Icm的水平。將6只動(dòng)物于每個(gè)平臺(tái)放置96小時(shí)。將一個(gè)平臺(tái) 保持為空的以減少束縛應(yīng)激。在96小時(shí)的終點(diǎn)，將動(dòng)物從盒中移出，并使其經(jīng)歷熱板試驗(yàn)。 將熱板的溫度設(shè)置為50±2°C。觀察動(dòng)物對(duì)疼痛刺激的反應(yīng)(舔爪、跳躍、爪回縮），并記錄動(dòng) 物可在熱板上保持的持續(xù)時(shí)間。然后將試驗(yàn)物質(zhì)應(yīng)用于各動(dòng)物的背部。在應(yīng)用試驗(yàn)物質(zhì)一 小時(shí)后，又使動(dòng)物經(jīng)歷熱板，并評(píng)估響應(yīng)。截止時(shí)間設(shè)定為60s。結(jié)果報(bào)道為應(yīng)用試驗(yàn)物質(zhì)之 前和之后的爪回縮時(shí)間，并按如下計(jì)算疼痛閾限的百分?jǐn)?shù)變化：
[0111] 疼痛閾限的％變化=Rt~Roxl0° Ro
[0112] 其中Rt =應(yīng)用試驗(yàn)物質(zhì)后的爪回縮時(shí)間 [0113] R0 =應(yīng)用試驗(yàn)物質(zhì)前的爪回縮時(shí)間 [0114]統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：
[0115] 所有值被表不為平均值土 SD。使用Graph pad PRISM 5軟件（Graph pad Software lnc，圣地亞哥，加州）應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。為了確定疼痛閾限百分?jǐn)?shù)變化，進(jìn)行單向方差分析 (ANOVA)，隨后是圖基事后檢驗(yàn)，以確定組間的顯著差異。為了確定爪回縮時(shí)間，使用雙向 AN0VA，隨后是邦費(fèi)羅尼事后分析(Bonferroni post-hoc analysis)，其中以治療和時(shí)間為 兩個(gè)變量。P〈〇. 05的值被認(rèn)為是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的。
[0116]結(jié)果：
[0117]雙氯芬酸、匪-2制劑與其單個(gè)成分對(duì)REM睡眠剝奪誘導(dǎo)的痛覺過(guò)敏中爪回縮時(shí)間 的影響。
[0118]表5
[0120] 值被表示為平均值土SD(每組n = 6)。當(dāng)與疾病對(duì)照組比較時(shí)，*P〈0.05、#P〈0.01 和*#P〈0.001。當(dāng)與雙氯芬酸組比較時(shí)，@P〈0.05、_p〈0.01和_粑〈0.001。當(dāng)與匪2組比較 時(shí)，#Ρ〈0 · 05、##P〈0 · 01 和###P〈0 · 001。
[0121] 上表5以及圖3和4顯示:與對(duì)照組、雙氯芬酸(P〈0.05)和單個(gè)成分組(見表5和圖3) 相比，匪-2組(P〈0.001)中大鼠疼痛閾限顯著增加;此外，表現(xiàn)為爪回縮時(shí)間增加的匪-2組 的疼痛閾限增加百分?jǐn)?shù)，與雙氯芬酸和單個(gè)成分組(見表5和圖4)相比，在匪-2組中是顯著 最尚的。
[0122] 總結(jié)：
[0123]當(dāng)與疾病對(duì)照組比較時(shí)，用匪-2制劑治療顯示出爪回縮時(shí)間的顯著增加，從而是 疼痛閾限百分?jǐn)?shù)的顯著增加。看出NM-2制劑的功效大于其每個(gè)單個(gè)的成分，表明NM-2克服 REM睡眠剝奪誘導(dǎo)的痛覺過(guò)敏的活性源于其單個(gè)成分的協(xié)同效果。因此，匪-2制劑在緩解睡 眠剝奪誘導(dǎo)的痛覺過(guò)敏中的功效表明其可具有壓力減輕性能。
[0124] 鑒于以上結(jié)果，看出本發(fā)明制劑取得的多種功效源于其單個(gè)成分的協(xié)同活性。
[0125] 已詳細(xì)描述了本公開，將明顯的是，在不偏離所附權(quán)利要求中限定的公開范圍的 情況下，對(duì)于以上組合物、產(chǎn)品和方法的修改和變化是可能的。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 用于減輕一種或多種疼痛、壓力和失眠癥狀的組合物，包括蕓苔、蜂蠟和龍腦樟。2. 如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述龍腦樟處于晶體形式或油形式。3. 如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述蕓苔油為所述組合物的40-75重量份，蜂蠟為 所述組合物的15-50重量份，以及龍腦樟為所述組合物的1 -20重量份。4. 如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述蕓苔油為所述組合物的55-65重量份，蜂蠟為 所述組合物的25-35重量份，以及龍腦樟為所述組合物的3-13重量份。5. 如權(quán)利要求1所述的組合物，進(jìn)一步包括一種或多種其他天然的或合成的活性成分 和/或藥學(xué)可接受的賦形劑。6. -種局部制劑，包含如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的組合物。7. -種用于制備減輕至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀的制劑的方法，包括:在60°C_225 °C的溫度下將40-75重量份的蕓苔油加熱特定的時(shí)間段；向所述熱蕓苔油中混合15-50重量 份的蜂蠟直至所述蜂蠟溶解;將所述混合物從熱源移開；向所述混合物中加入1-20重量份 的龍腦樟并混合。8. 權(quán)利要求7的方法，其中所述用于加熱蕓苔油的時(shí)間段為足以使溫度達(dá)到60°C-225 °C的時(shí)間段。9. 權(quán)利要求7的方法，其中將所述蕓苔油在60°C-100°C的溫度下加熱足以使溫度達(dá)到 60°C_100°C的時(shí)間段。10. 權(quán)利要求7的方法，其中所述蜂蠟為所述制劑的25-35重量份。11. 權(quán)利要求7的方法，其中所述龍腦樟為所述制劑的3-13重量份。12. 權(quán)利要求7的方法，其中所述方法進(jìn)一步包括加入一種或多種其他天然的或合成的 活性成分和/或藥學(xué)可接受的賦形劑。13. 包含蕓苔油、蜂蠟和龍腦樟的組合物在減輕至少一種或多種或全部疼痛、壓力和失 眠癥狀中的用途。14. 治療至少一種疼痛、壓力和失眠癥狀的方法，包括根據(jù)個(gè)體的需要，應(yīng)用足以覆蓋 受影響區(qū)域、炎性區(qū)域、頭部或全部身體的量的如權(quán)利要求6所述的制劑。
【文檔編號(hào)】A61K35/644GK105979953SQ201580007127
【公開日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2015年2月4日
【發(fā)明人】阿什瓦尼·庫(kù)馬爾·邦薩
【申請(qǐng)人】阿什瓦尼·庫(kù)馬爾·邦薩