Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2-甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物在抗急性腎衰藥 ...的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物在抗急性腎衰藥物中的應用，本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及一種Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物、制備方法及其在制備抗急性腎衰藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有抗急性腎衰的作用，具有開發(fā)抗急性腎衰藥物的價值。
【專利說明】
Sa I v i sk i none A的苯并咪唑基和二(2-甲硫基乙基)胺基衍生 物的組合物在抗急性腎衰藥物中的應用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 急性腎功能衰竭(Acute Renal Failure，ARF)是由多種原因引起的臨床綜合征， 可見于臨床各科病人，發(fā)病率高且往往帶來嚴重后果，其特點為短期內(nèi)（數(shù)小時至數(shù)天）腎 功能急劇下降，臨床表現(xiàn)為急性少尿(尿量<400mLPd)或無尿(尿量〈lOOmLPd)，體內(nèi)氮質(zhì)代 謝產(chǎn)物排出產(chǎn)生障礙，迅速出現(xiàn)氮質(zhì)血癥，水及電解質(zhì)、酸堿平衡紊亂，并引起全身各系統(tǒng) 相應功能失調(diào)。引起急性腎衰的主要因素是腎血流量的急劇減少，以及由于腎組織缺血引 起的氧化應激和細胞損傷，最終導致腎臟組織結(jié)構(gòu)的破壞和功能的惡化。目前臨床上尚無 公認的治療急性腎衰有效的藥物，僅能通過糾正水電解質(zhì)平衡，糾正酸中毒等對癥治療措 施改善癥狀，后期還需要通過血液透析維持機體機能。在改善腎臟血流灌注障礙和減輕腎 組織損傷方面有明顯療效的臨床藥物少見。
[0003] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導化合物并進行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個2011年發(fā)表（Ayumi Ohsaki et al.， 20 11 ·Sa 1 viskinone A，a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalskii .Tetrahedron Letters 52(2011)1375-1377)的化合物，我們對化合物I進行 了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV 制備了組合物并對該組合物抗急性腎衰活性進行了評價，其具有抗急性腎衰活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為50%和50%。
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物用于治療急性腎衰的用途，即用于制備治療急性腎衰 藥物的用途。
[0009] 本發(fā)明的組合物對急性腎衰疾病有明顯的治療作用。
[0010]通過我們的研究發(fā)現(xiàn)組合物能夠改善腎臟的功能。
[0011]以下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實施方式】
[0012] 實施例1化合物Salviskinone A的制備
[0013] 化合物Salviskinone A(I)的制備方法參照Ayumi Ohsaki等人發(fā)表的文獻(Ayumi Ohsaki et al.,2011.Salviskinone A,a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalskii .Tetrahedron Letters 52(2011)1375-1377)的方法。
[0014]
[0015] 實施例2 Salviskinone A的o-溴乙基衍生物（II)的合成
[0016] 將化合物I(312mg，1.00mmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙烷(3.76(^，20.00111111〇1)和61^的50%氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?5攝氏 度攪拌12Κ12?!之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機相溶液。然 后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌4次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除 溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮=100:1.5，v/v)， 收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(327mg，78% )。
[0017] 4 MMR(500MHz，DMS0-d6)S6.63(s，lH)，6.37(s，lH)，5.81(s，lH)，4.51(s，2H)， 3.84(s，1H)，3.79(s，2H)，2.15(s，1H)，2.04(s，1H)，1.91(s，1H)，1.65(s，1H)，1.39(s，3H)， 1.08(s,6H),0.99(s,6H).
[0018] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)Sl88.07(s),183.70(s),154.38(s),147.57(s),140.21 (s),136.40(s),134.71(s),131.25(s),128.40(s),118.83(s),72.12(s),45.49(s),37.54 (s),33.58(s),31.78(s),26.17(s),25.12(s),24.66(s),23.51(s),23.17(s),22.65(s).
[0019] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for C22H28Br03:419.1222；found 419.1220.
[0020]
[0021] 實施例3 Salviskinone A的0-(苯并咪唑基）乙基衍生物（III)的合成
[0022] 將化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于20mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmol)，鵬化鉀(84mg，0 · 5mmol)和苯并咪唑（1180mg，lOmmol)，混合物加熱回流5h。反應 結(jié)束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100:1.5，v/v)，收集棕色集中洗脫帶，濃縮 即得到化合物ΠI的棕色固體(215mg，43 % )。
[0023] 咕匪R(500MHz，DMS0-d6)S8.15(s，1H)，7.54((1, J = 25.0Hz，2H)，7· 15(s，lH)， 7.06(s，lH)，6.33(d，J = 84.1Hz，lH)，6.26(s，lH)，5.66(s，lH)，4.38(d，J=15.8Hz，4H)， 3.57(s，1H)，1.96(s，1H)，1.90(s，1H)，1.77(s，1H)，1.51(s，1H)，1.20(s，3H)，0.99(s，6H)， 0.81(s,6H).
[0024] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)Sl87.90(s),183.51(s),154.17(s),147.37(s),146.27 (s),139.98(s),139.63(s),136.22(s),134.51(s),133.48(s),131.05(s),128.18(s), 123.93(s),123.35(s),118.56(d,J=9.6Hz),110.85(s),68.55(s),45.29(s),44.74(s), 37.34(s),33.36(s),25.96(s),24.94(s),24.46(s),23.32(s),22.96(s),22.42(s).
[0025] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C29H33N2〇3:457.2491;found:457.2493〇
[0026]
[0027] 實施例4 Salviskinone A的0-(二輕乙胺基）乙基衍生物的合成 [0028] 將化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于30mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(690mg， 5.0mmol)，碘化鉀（252mg，1.5mmol)和二乙醇胺（1051mg，lOmmol)，混合物加熱回流9h。反應 結(jié)束后將反應液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機相。依次用水和飽和 食鹽水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn) 物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100:0.5，v/v)，收集黃色集中洗脫帶 并揮去溶劑即得到Salviskinone A的0-(二輕乙胺基）乙基衍生物的淡黃色固體（159.5mg, 72%)。
[0029] 4 MMR(500MHz，DMS0-d6)S6.52(s，lH)，6.40(s，lH)，5.71(s，lH)，4.15(s，2H)， 3.70(s，1H)，3.37(s，4H)，3.00(s，2H)，2.50(s，4H)，2.07(s，1H)，1.96(s，1H)，1.83(s，1H)， 1.57(d ,J = 1.4Hz,3H),1.30(s,3H),0.99(s,6H),0.90(s,6H).
[0030] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)Sl88.01(s),183.52(s),154.08(s),147.15(s),140.11 (s),136.23(s),134.42(s),130.84(s),128.31(s),118.62(s),68.93(s),58.73(s),56.61 (s),53.94(s),45.20(s),37.13(s),33.49(s),25.96(s),24.84(s),24.26(s),23.43(s), 22.97(s),22.33(s).
[0031] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C26H38N〇5:444.2750;found:444.2746〇
[0032] SalviskinoneA的0-(二羥乙胺基)乙基衍生物 [0033] 實施例5 Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物的合成 [0034] 將實施例4制備的Salviskinone A的0-(二羥乙胺基）乙基衍生物（0.222g， 0 · 5mmol)溶于6mL氯仿，逐滴加入氯化亞砜(0 · 238g，2mmol)，反應物加熱回流lh。將反應物 冷卻至室溫，滴加甲醇分解過量的氯化亞砜，減壓濃縮除去溶劑。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化 (石油醚/丙酮100:0.3，v/v)，得到Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物的淡黃色 固體（170.0mg，71%)。
[0035] 咕 NMR(500MHz，Chloroform-dl)S6.51(s，lH)，6.22(s，lH)，5.72(s，lH)，4.16(s， 1H)，3.66(s，1H)，3.44(s，4H)，3.01(s，2H)，2.80(s，2H)，2.64(s，2H)，2.04(s，1H)，1.98(s， 1H)，1.85(s，1H)，1.59(s，1H)，1.28(s，3H)，0.97(s，6H)，0.93(s，6H).
[0036] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl87.90(s),183.41(s),153.97(s),147.04(s),140.00 (s),136.12(s),134.31(s),130.73(s),128.20(s),118.51(s),68.82(s),55.57(s),53.94 (s),45.20(s),39.10(s),37.02(s),33.39(s),25.87(s),24.76(s),24.19(s),23.33(s), 22.88(s),22.25(s).
[0037] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C26H36Ci2N03:480.2072;found:480.2070〇
[0038]
[0039] 實施例6 Salviskinone A的0-(二(2-甲硫基乙基)胺基）乙基衍生物的合成 [0040] 將實施例5制備的Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物（0.240g， 0 · 5mmo 1)溶于15mL乙醇，室溫下加入甲硫醇鈉(0 · 2lg，3mmo 1)，反應物加熱回流lh。減壓濃 縮除去溶劑，所得產(chǎn)物用硅膠柱層析進行純化(石油醚/丙酮100:0.5，v/v)，得到黃色固體 物，即化合物 IV(0.169g，67%)。
[0041] 咕 NMR(500MHz，Chloroform-dl)S6.48(s，lH)，6.41(s，lH)，5.65(s，lH)，4.12(s， 2H)，3.99(s，lH)，2.94(s，2H)，2.53(d，J=15.4Hz，8H)，1.99(s，lH)，1.94(s，6H)，1.90(s， 1H)，1.77(s，lH),1.51(s，lH)，1.23(s，3H)，0.92(s，6H)，0.83(s，6H).
[0042] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)5l87.81(s),183.42(s),154.08(s),147.28(s),139.90 (s),136.12(s),134.44(s),130.96(s),128.09(s),118.53(s),68.94(s),53.83(s),52.15 (s),45.21(s),37.24(s),33.29(s),31.87(s),25.85(s),24.86(s),24.38(s),23.21(s), 22.88(s),22.34(s),14.38(s).
[0043] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C28H42N03S2:504.2606;found:504.2603〇
[0044]
[0045] 實施例7組合物對急性腎衰大鼠的治療作用
[0046] ( - )實驗方法
[0047] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的50mg化合物III的粉末和研磨之后過200 目網(wǎng)的50mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組合物， 使用時用水溶解這l〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0048]采用肌肉注射甘油致急性腎功能衰竭大鼠動物模型。選用180~220g健康雄性SD 大鼠30只，隨機分為5組:假手術(shù)組(肌肉注射生理鹽水）；模型組(肌肉注射甘油）；給藥干預 組(組合物、化合物III或者化合物IV 0.6mg/Kg，肌肉注射甘油），各組大鼠在甘油造模后立 即尾靜脈注射生理鹽水或待試藥物，12和24小時后再給藥一次。
[0049] (二)觀察指標
[0050] 大鼠末次給藥或生理鹽水后放入代謝籠收集24小時尿，留尿后6小時用4%水合氯 醛腹腔注射麻醉，采用激光多普勒血流儀測定造模后及治療后雙側(cè)腎臟血流量，取平均值 作為單只動物腎血流量;取血制備血清，測定血BUN和Cre(均按試劑盒說明書操作）。
[0051] (三)實驗結(jié)果
[0052] 1.組合物可增加急性腎衰小鼠腎血流量
[0053]組合物可顯著增加急性腎衰小鼠腎血流量，而化合物III和化合物IV無此作用。
[0054] 表1組合物對急性腎衰小鼠腎血流量的影響
[0055]
[0056] *P〈0.05vs急性腎衰模型組
[0057] 2.組合物對急性腎衰小鼠腎功能具保護作用
[0058]急性腎衰大鼠靜脈注射生理鹽水24小時后，血清BUN和Cre見表2。急性腎衰模型組 明顯高于假手術(shù)組，說明模型組動物腎功能損害嚴重。組合物能改善急性腎衰大鼠的腎功 能(P〈0.05)，而化合物III和化合物IV無此作用。見表2。
[0059]表2各試驗組大鼠腎功能指標比較
[0060]
[0061 ] *P〈0.05vs急性腎衰模型組
[0062] 結(jié)論:組合物能夠保護腎臟的功能，可以用來制備抗急性腎衰藥物。而化合物III 和化合物IV不能夠保護腎臟，不可用來制備抗急性腎衰藥物。
[0063] 實施例9本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0064] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0065] 實施例10本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0066] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為50%和50%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分數(shù)分別為50 %和50 %充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰所引起的腎臟血流量的降低。5. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應用，其特征為:所述組合物改
【文檔編號】C07C319/14GK105998002SQ201610256270
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年4月22日
【發(fā)明人】王卓婷
【申請人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司