專利名稱：一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種 從真菌或藻類中提取有效成分的方法，特別是涉及一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法。
背景技術(shù)：
多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid, PUFA) 一般是指含兩個或兩個以上雙鍵，碳鏈長度16-22的直鏈脂肪酸，根據(jù)雙鍵所在碳原子的位置不同又分為 ω-3系列不飽和脂肪酸和ω-6系列不飽和脂肪酸，其中亞麻酸(GLA)、二十碳五烯酸( EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)屬于ω-3系列，亞油酸、花生四烯酸(ARA)屬于ω-6系列。 PUFA具有許多重要的生理活性，它可以調(diào)節(jié)人體內(nèi)血脂和脂蛋白的正常代謝，降低血液黏度和血液中膽固醇含量，保護(hù)血管壁，防止腦血栓的形成，具有預(yù)防心肌梗塞，高血壓、心臟病的功能；同時它在人體內(nèi)能夠被轉(zhuǎn)化成前列腺素類化合物從而起到免疫應(yīng)答的作用，對提高機(jī)體免疫等方面都具有積極的作用；此外不飽和脂肪酸中的某些成分還是大腦和神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)，如多不飽和脂肪酸中的DHA可以促進(jìn)胎兒腦部神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，顯著提高嬰幼兒智力發(fā)育水平，同時，DHA對維持腦部功能，延緩腦部衰老起著重要的作用。人體自身不能合成多不飽和脂肪酸，但它又是人體不可缺少的重要物質(zhì)之一，因此只能通過從外界攝取來滿足人體需要。傳統(tǒng)的不飽和脂肪酸的主要來源是魚油，但魚油本身具有許多缺點，如難聞的魚腥味、口感不佳、含膽固醇及令人生畏的芥酸等，極大影響產(chǎn)品的品質(zhì)；而且魚油中不飽和脂肪酸含量容易受到季節(jié)、地區(qū)、種類及魚類資源限制等影響；此外，由于受到環(huán)境污染的影響，某些地區(qū)的魚類可能含有較高含量的重金屬及其他污染物，這會額外增加提取成本。研究發(fā)現(xiàn)，許多真菌和藻類細(xì)胞中含有大量的不飽和脂肪酸。從真菌或藻類中提取不飽和脂肪酸可以克服從魚油中提取不飽和脂肪酸所存在的上述問題，而且真菌和藻類可進(jìn)行大規(guī)模人工培養(yǎng)，產(chǎn)量高，周期短，因此利用真菌和藻類作為魚油的替代資源提取不飽和脂肪酸具有深遠(yuǎn)意義。由于真菌和藻類自身細(xì)胞壁的原因，從真菌或藻類細(xì)胞中提取不飽和脂肪酸的最大的問題是細(xì)胞破壁。從真菌或藻類細(xì)胞中提取不飽和脂肪酸的常用方法是有機(jī)溶劑法、 酸熱法、酶法等。有機(jī)溶劑法具有操作簡單的優(yōu)點，但費時，提取效率低，同時存在產(chǎn)品殘留有機(jī)溶劑及生產(chǎn)安全隱患等問題。采用酸熱法能快速、有效的破壞真菌或藻類的細(xì)胞壁，但反應(yīng)條件劇烈，容易破壞細(xì)胞內(nèi)所需產(chǎn)品成分，并存在酸殘留等問題。采用酶法破壁，雖然反應(yīng)條件溫和，設(shè)備簡單，但由于不同微生物間細(xì)胞壁組成成分的差異，不同微生物細(xì)胞間破壁效果差異顯著，同時由于酶解條件較其他方法苛刻，因此酶解成本較高，不適用于工業(yè)化生產(chǎn)
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種無需任何有機(jī)溶劑的輔助，采用物理的方法對真菌或是藻類細(xì)胞進(jìn)行破壁并提取胞內(nèi)油脂，適合于低成本的大規(guī)模生產(chǎn)。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明所提出的技術(shù)方案為一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于包括如下步驟
步驟1 將發(fā)酵結(jié)束后的真菌或藻類發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)收集細(xì)胞，保持真菌或是藻細(xì)胞泥含水量在70-90% ；
步驟2 控制細(xì)胞泥溫度在15_40°C ； 步驟3 使用酸或堿調(diào)節(jié)細(xì)胞泥PH為0-5或8-14 ； 步驟4 在細(xì)胞泥中加入細(xì)胞泥質(zhì)量1-3%的抗氧化劑； 步驟5 將細(xì)胞泥泵入膠體磨或高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行破壁，控制溫度在30-95°C ； 步驟6 膠體磨或高壓均質(zhì)機(jī)出來的細(xì)胞泥通過球磨機(jī)進(jìn)行二次破壁和破乳，控制溫度在 30-95 0C ；
步驟7 破壁后的細(xì)胞泥在20-150rpm的攪拌條件下升溫至30_95°C，并維持0. 5-5小
時；
步驟8 按重量比細(xì)胞泥水=1 2. 5-6. 5從細(xì)胞泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制溫?0-95°C，在250-350rpm攪拌50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到油脂。進(jìn)一步，步驟4中所述的的抗氧化劑為維生素E、天然迷迭香、抗壞血性酸棕櫚酸酯中的一種或它們的混合物。進(jìn)一步，步驟6中所述的高壓均質(zhì)機(jī)的工作壓力為120_130Mpa。進(jìn)一步，步驟6中膠體磨的工作轉(zhuǎn)速為HOOOrpm以下。進(jìn)一步，所述的酸為鹽酸、硫酸、檸檬酸或乳酸。進(jìn)一步，所述的堿為氫氧化鈉。進(jìn)一步，所述的球磨機(jī)為砂磨機(jī)或珠磨機(jī)等，其工作壓力為20_30Mpa。進(jìn)一步，所述的藻類為裂壺藻或雙鞭甲藻，油脂為DHA油脂。進(jìn)一步，所述的真菌為高山被孢霉，油脂為ARA油脂。進(jìn)一步，所述的真菌為深黃被孢霉，油脂為EPA油脂。進(jìn)一步，所述的真菌為小克銀漢，油脂為GLA和ALA油脂。本發(fā)明克服了傳統(tǒng)上必須進(jìn)行干燥制成粉末才進(jìn)行粉碎，以及難以破碎真菌或藻類堅硬的細(xì)胞壁的技術(shù)屏障，實現(xiàn)了低成本而高效率的破碎藻類和真菌的細(xì)胞壁。其具體特征如下(1)為避免真菌和藻類細(xì)胞泥在高速碰撞或是高壓擠壓條件下，容易產(chǎn)生熱量， 而破壞胞內(nèi)產(chǎn)物的生物活性，本發(fā)明采用預(yù)先降溫的手段將真菌和藻類細(xì)胞泥的溫度降低到15-40°C，同時調(diào)整pH更有利于料液的儲存有效地控制了真菌和藻類細(xì)胞泥特別是胞內(nèi)多不飽和脂肪酸油脂暴露在高溫中，避免了因高溫造成的有效成分分解或是失活，同時調(diào)整PH更有利于料液的儲存和提高破壁率；(2)預(yù)先添加了保護(hù)劑，在高壓均質(zhì)機(jī)或是膠體磨破壁過程中，保護(hù)劑能均勻有效的將破壁后的油脂或顆粒包埋，形成有效的保護(hù)屏障，從而大大降低胞內(nèi)多不飽和脂肪酸的與空氣的接觸，降低多不飽和脂肪酸油脂被氧化分解的可能性。(3)采用物理的提取方法，克服傳統(tǒng)上有機(jī)溶劑帶來的殘留和爆炸隱患，提供一種安全綠色無毒無殘留的產(chǎn)品；(4)采用膠體磨或高壓均質(zhì)機(jī)出來的細(xì)胞泥通過球磨機(jī)進(jìn)行二次破壁和破乳，提高了產(chǎn)率。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明做進(jìn)一步說明。實施例1
1)將發(fā)酵結(jié)束后的裂壺藻發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)分離收集藻細(xì)胞，保持藻泥含水量在 70%-90% ；將藻泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等藻泥的溫度降至 15-40°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在攪拌情況下，利用酸調(diào)節(jié)pH，使得藻泥pH在0.0-5. 0之間；
4)在攪拌情況下，按照藻泥重量比加入3%抗氧化劑混合物(維生素E1%，天然迷迭香 0. 5%，抗壞血性酸棕櫚酸酯1. 5%)，混合均勻；
5)將藻泥泵入高壓均質(zhì)機(jī)的桐體中，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)的工作壓力為120-130Mpa，保持高壓均質(zhì)機(jī)的溫度在30-95°C，將藻泥進(jìn)行高壓均質(zhì)破壁，破壁后的料液直接打入球磨機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為30Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的裂壺藻藻泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小時；
8)按重量比藻泥水=1 2. 5-6. 5的比例從藻泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制料?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到DHA油脂，提取率為93%。實施例2
1)將發(fā)酵結(jié)束后的雙鞭甲藻發(fā)酵液利用分離系統(tǒng)分離收集雙鞭甲藻細(xì)胞，保持藻泥含水量在70%-90% ；將藻泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，；
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等藻泥的溫度降至20°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在高速攪拌情況下，利用酸調(diào)節(jié)pH，使得藻泥pH0.0-5.0之間；
4)在高速攪拌情況下，按照藻泥重量比加入1%抗氧化劑混合物(維生素E0. 3%，天然迷迭香0. 5%，抗壞血性酸棕櫚酸酯0. 2%),混合均勻；
5)將藻泥泵入膠體磨的中，調(diào)節(jié)膠體磨的工作轉(zhuǎn)速為HOOOrpm以下，控制溫度在 30-950C，將藻泥進(jìn)行破壁，破壁后的料液直接打入球磨機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為20Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的雙鞭甲藻藻泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小
時；
8)按重量比藻泥水=1 2. 5-6. 5的比例從藻泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制料?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到DHA油脂，提取率為88%。實施例3
1)將發(fā)酵結(jié)束后的高山被孢霉發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)分離收集真菌細(xì)胞，保持細(xì)胞泥含水量在70%_90% ；將細(xì)胞泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等細(xì)胞泥的溫度降至 15-40°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在攪拌情況下，利用酸調(diào)節(jié)pH，使得細(xì)胞泥pH0.0-5.0之間；
4)在攪拌情況下，按照細(xì)胞泥重量比加入洲抗氧化劑混合物(維生素E0. 5%，天然迷迭香0. 5%，抗壞血性酸棕櫚酸酯1%)，混合均勻；
5)將細(xì)胞泥泵入高壓均質(zhì)機(jī)的桐體中，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)的工作壓力為120-130Mpa，保持高壓均質(zhì)機(jī)的溫度在30-95°C，將細(xì)胞泥進(jìn)行高壓均質(zhì)破壁，破壁后的料液直接打入球磨機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為25Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的細(xì)胞泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小時；
8)按重量比細(xì)胞泥水=1 2. 5-6. 5的比例從細(xì)胞泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制料?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到多不飽和脂肪酸ARA油脂，提取率為83%。實施例4
1)將發(fā)酵結(jié)束后的深黃被孢霉發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)分離收集真菌細(xì)胞，保持細(xì)胞泥含水量在70%-90% ；將細(xì)胞泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等細(xì)胞泥的溫度降至 15-40°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在攪拌情況下，利用酸進(jìn)行pH的調(diào)配，使得細(xì)胞泥pH0. 0-5. 0之間；
4)在攪拌情況下，按照細(xì)胞泥重量比加入1%抗氧化劑維生素E，混合均勻；
5)將細(xì)胞泥泵入膠體磨的中，調(diào)節(jié)膠體磨的工作轉(zhuǎn)速為HOOOrpm以下，控制溫度在 30-95°C，將細(xì)胞泥進(jìn)行高壓均質(zhì)破壁，破壁后的料液直接打入球磨機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為30Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的細(xì)胞泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小時；
8)按重量比細(xì)胞泥水=1 2. 5-6. 5的比例從細(xì)胞泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制料?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到多不飽和脂肪酸EPA油脂，提取率為85%。實施例5
1)將發(fā)酵結(jié)束后的小克銀漢發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)分離收集真菌細(xì)胞，保持細(xì)胞泥含水量在70%-90% ；將細(xì)胞泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等細(xì)胞泥的溫度降至 15-40°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在攪拌情況下，利用酸調(diào)節(jié)pH，使得細(xì)胞泥pH0.0-5.0之間；
4)在攪拌情況下，按照細(xì)胞泥重量比加入m抗氧化劑天然迷迭香，混合均勻；
5)將細(xì)胞泥泵入高壓均質(zhì)機(jī)的桐體中，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)的工作壓力為120-130Mpa，保持高壓均質(zhì)機(jī)的溫度在30-95°C，將細(xì)胞泥進(jìn)行高壓均質(zhì)破壁，破壁后的料液直接打入球磨
6機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為20Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的細(xì)胞泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小時；
8)按重量比細(xì)胞泥水=1 2. 5-6. 5的比例從細(xì)胞泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制料?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到多不飽和脂肪酸GLA和ALA油脂，提取率為82%。實施例6
1)將發(fā)酵結(jié)束后的裂壺藻發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)分離收集藻細(xì)胞，保持藻泥含水量在 70%-90% ；將藻泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等藻泥的溫度降至 15-40°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在攪拌情況下，利用堿調(diào)節(jié)pH，使得藻泥pH8. 0-14. 0之間；
4)在攪拌情況下，按照藻泥重量比加入3%抗氧化劑抗壞血性酸棕櫚酸酯，混合均勻；
5)將藻泥泵入高壓均質(zhì)機(jī)的桐體中，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)的工作壓力為120-130Mpa，保持高壓均質(zhì)機(jī)的溫度在30-95°C，將藻泥進(jìn)行高壓均質(zhì)破壁，破壁后的料液直接打入球磨機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為25Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的裂壺藻藻泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小時；
8)按重量比藻泥水=1 2. 5-6. 5的比例從藻泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制料?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到DHA油脂，提取率為94%。實施例7
1)將發(fā)酵結(jié)束后的雙鞭甲藻發(fā)酵液利用分離系統(tǒng)分離收集雙鞭甲藻細(xì)胞，保持藻泥含水量在70%-90% ；將藻泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，；
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等藻泥的溫度降至20°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在高速攪拌情況下，利用堿調(diào)節(jié)pH，使得藻泥pH8. 0-14.0之間；
4)在高速攪拌情況下，按照藻泥重量比加入m抗氧化劑混合物(維生素E1. 5%，天然迷迭香0. 5%)，混合均勻；
5)將藻泥膠體磨的中，調(diào)節(jié)膠體磨的工作轉(zhuǎn)速為HOOOrpm以下，控制溫度在30_95°C， 將藻泥進(jìn)行高壓均質(zhì)破壁，破壁后的料液直接打入球磨機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為30Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的雙鞭甲藻藻泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小
時；
8)按重量比藻泥水=1 2. 5-6. 5的比例從藻泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制料?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到DHA油脂，提取率為91%。實施例8
1)將發(fā)酵結(jié)束后的高山被孢霉發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)分離收集真菌細(xì)胞，保持細(xì)胞泥含水量在70%-90% ；將細(xì)胞泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等細(xì)胞泥的溫度降至 15-40°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在攪拌情況下，利用堿調(diào)節(jié)pH，使得細(xì)胞泥pH8. 0-14.0之間；
4)在攪拌情況下，按照細(xì)胞泥重量比加入2.5%抗氧化劑混合物(維生素E 1%，抗壞血性酸棕櫚酸酯1. 5%)，混合均勻；
5)將細(xì)胞泥泵入高壓均質(zhì)機(jī)的桐體中，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)的工作壓力為120-130Mpa，保持高壓均質(zhì)機(jī)的溫度在30-95°C，將細(xì)胞泥進(jìn)行高壓均質(zhì)破壁，破壁后的料液直接打入球磨機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為30Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的細(xì)胞泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小時；
8)按重量比細(xì)胞泥水=1 2. 5-6. 5的比例從細(xì)胞泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制料?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到多不飽和脂肪酸ARA油脂，提取率為85%。實施例9
1)將發(fā)酵結(jié)束后的深黃被孢霉發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)分離收集真菌細(xì)胞，保持細(xì)胞泥含水量在70%-90% ；將細(xì)胞泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等細(xì)胞泥的溫度降至 15-40°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在攪拌情況下，利用堿調(diào)節(jié)pH，使得細(xì)胞泥pH8. 0-14.0之間；
4)在攪拌情況下，按照細(xì)胞泥重量比加入1.5%抗氧化劑混合物(維生素E 1%，天然迷迭香0. 5%)混合均勻；
5)將細(xì)胞泥泵入高壓均質(zhì)機(jī)的桐體中，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)的工作壓力為120-130Mpa，保持高壓均質(zhì)機(jī)的溫度在30-95°C，將細(xì)胞泥進(jìn)行高壓均質(zhì)破壁，破壁后的料液直接打入球磨機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為25Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的細(xì)胞泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小時；
8)按重量比細(xì)胞泥水=1 2. 5-6. 5的比例從細(xì)胞泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴?，并控制料?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到多不飽和脂肪酸EPA油脂，提取率為85%。實施例10
1)將發(fā)酵結(jié)束后的小克銀漢發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)分離收集真菌細(xì)胞，保持細(xì)胞泥含水量在70%-90% ；將細(xì)胞泥收集到一個帶有冷卻盤管和攪拌的儲罐中，
2)通過在罐體的盤管中通入溫度為10°C冷卻水進(jìn)行冷卻，等細(xì)胞泥的溫度降至15-40°C，關(guān)閉冷卻水進(jìn)出口 ；
3)在攪拌情況下，利用堿調(diào)節(jié)pH，使得細(xì)胞泥pH8. 0-14.0之間；
4)在攪拌情況下，按照細(xì)胞泥重量比加入3%抗氧化劑混合物(維生素E1%，天然迷迭香0. 5%，抗壞血性酸棕櫚酸酯1. 5%)，混合均勻；
5)將細(xì)胞泥泵入高壓均質(zhì)機(jī)的桐體中，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)的工作壓力為120-130Mpa，保持高壓均質(zhì)機(jī)的溫度在30-95°C，將細(xì)胞泥進(jìn)行高壓均質(zhì)破壁，破壁后的料液直接打入球磨機(jī)的儲罐中；
6)調(diào)節(jié)球磨機(jī)的壓力為20Mpa，控制溫度在30-95°C，進(jìn)行二次破壁和破乳，二次破壁后的料液裝入帶有布?xì)夤艿篮捅P管的儲罐中；
7)將破壁后的細(xì)胞泥升溫到30-95°C，在20-150rpm攪拌下加熱維持0.5-5小時；
8)按重量比細(xì)胞泥水=1 2. 5-6. 5的比例從細(xì)胞泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴⒖刂屏蠝?0-95°C，添加適量的食用鹽在250-350rpm攪拌下維持50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到多不飽和脂肪酸GLA和ALA油脂，提取率為87%。 盡管結(jié)合優(yōu)選實施方案具體展示和介紹了本發(fā)明，但所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明白，在不脫離所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，在形式上和細(xì)節(jié)上對本發(fā)明做出各種變化，均為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于包括如下步驟 步驟1 將發(fā)酵結(jié)束后的真菌或藻類發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)收集細(xì)胞，保持真菌或是藻細(xì)胞泥含水量在70-90% ；步驟2 控制細(xì)胞泥溫度在15-40°C ； 步驟3 使用酸或堿調(diào)節(jié)細(xì)胞泥PH為0-5或8-14 ； 步驟4 在細(xì)胞泥中加入細(xì)胞泥質(zhì)量1-3%的抗氧化劑； 步驟5 將細(xì)胞泥泵入膠體磨或高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行破壁，控制溫度在30-95°C ； 步驟6 膠體磨或高壓均質(zhì)機(jī)出來的細(xì)胞泥通過球磨機(jī)進(jìn)行二次破壁和破乳，控制溫度在 30-95 0C ；步驟7 破壁后的細(xì)胞泥在20-150rpm的攪拌條件下升溫至30_95°C，并維持0. 5-5小時；步驟8 按重量比細(xì)胞泥水=1 2. 5-6. 5從細(xì)胞泥底部通過布?xì)夤芗尤霟崴⒖刂茰囟?0-95°C，在250-350rpm攪拌50-80min，將料液通過三相分離機(jī)分離得到油脂。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于步驟4中所述的的抗氧化劑為維生素E、天然迷迭香、抗壞血性酸棕櫚酸酯中的一種或它們的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于步驟6中所述的高壓均質(zhì)機(jī)的工作壓力為120-130Mpa。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于步驟6中膠體磨的工作轉(zhuǎn)速為HOOOrpm以下。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于所述的酸為鹽酸、硫酸、檸檬酸或乳酸，所述的堿為氫氧化鈉。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于所述的球磨機(jī)為砂磨機(jī)或珠磨機(jī)，其工作壓力為20-30Mpa。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一權(quán)利要求所述的一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于所述的藻類為裂壺藻或雙鞭甲藻，油脂為DHA油脂。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一權(quán)利要求所述的一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于所述的真菌為高山被孢霉，油脂為ARA油脂。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一權(quán)利要求所述的一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于所述的真菌為深黃被孢霉，油脂為EPA油脂。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一權(quán)利要求所述的一種從真菌或藻類中物理破壁提取油脂的方法，其特征在于所述的真菌為小克銀漢，油脂為GLA和ALA油脂。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從富含油脂的真菌或藻類細(xì)胞中物理破壁提取油脂的的方法，其主要通過將發(fā)酵結(jié)束后的真菌或藻類發(fā)酵液通過分離系統(tǒng)分離并收集細(xì)胞控制細(xì)胞泥，細(xì)胞泥通過膠體磨或是高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行物理破壁，并通過球磨機(jī)進(jìn)行二次球磨破壁和破乳，最后將料液通過三相分離機(jī)分離得到富含多不飽和脂肪酸的油脂。本發(fā)明采用物理的破壁和提取方法，工藝簡單，細(xì)胞破壁效率高，由于低溫和抗氧化處理，可有效保護(hù)藻類和真菌細(xì)胞內(nèi)的活性成分，產(chǎn)品綠色無毒無殘留，可以用于提取油脂為DHA油脂、ARA油脂、EPA油脂、GLA和ALA油脂等，適合于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C11B1/00GK102433215SQ20111028352
公開日2012年5月2日 申請日期2011年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月22日
發(fā)明者鐘惠昌, 陳水榮, 陳禮毅 申請人:廈門匯盛生物有限公司