專利名稱：一種制備高純度龍膽苦苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備高純度龍膽苦苷的方法，是一種應(yīng)用高速逆流色譜(HSCCC)法從龍膽粗提物中制備高純度龍膽苦苷的方法。
背景技術(shù)：
龍膽為龍膽科植物條葉龍膽Gentiana manshurica Kitag.、龍膽Gentiana scabra Bge.、三花龍膽Gentiana triflora pall.或堅(jiān)龍膽Gentiana rigescens Franch.的干燥根及根莖。其藥用部分的主要有效成分為龍膽苦苷，龍膽苦苷屬環(huán)烯醚萜苷類化合物，有清肝解毒、消食健胃的功效。龍膽苦苷已被中國(guó)藥典2005版作為龍膽HPLC方法含量測(cè)定的定量化學(xué)指標(biāo)。同時(shí)還是龍膽及其制品指紋圖譜的標(biāo)志性成分。因此說(shuō)高純度龍膽苦苷用途廣泛，需求量大。以前報(bào)道的龍膽苦苷提取分離主要是采用柱色譜法，需要使用固體填料，易產(chǎn)生不可逆吸附，具有樣品易損失、易污染、低效、速度慢和分離步驟繁瑣等缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備高純度龍膽苦苷的方法，是應(yīng)用高速逆流色譜(HSCCC)法從龍膽粗提物中制備高純度龍膽苦苷；是不需使用固體填料，而是應(yīng)用兩相互不混溶的溶劑系統(tǒng)在支撐管內(nèi)高速行星運(yùn)動(dòng)的方式下進(jìn)行天然產(chǎn)物的分離純化，因而沒(méi)有不可逆吸附，具有樣品無(wú)損失、無(wú)污染、高效、快速和大制備量分離的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的一種制備高純度龍膽苦苷的方法，采用分析型高速逆流色譜儀的小量制備及半制備型高速逆流色譜儀的較大量制備，其特征在于，選用氯仿-甲醇-正丁醇-水體積比為4-8∶3-6∶1-4∶3-6的溶劑系統(tǒng)，一次分離可以得到龍膽苦苷。室溫對(duì)分離度有一定影響，以上分離條件適合室溫在16-28℃時(shí)使用。當(dāng)室溫降低時(shí)，降低甲醇的比例，以提高分離度。反之亦然。
本發(fā)明的積極效果是提供了一種不需使用固體填料，沒(méi)有不可逆吸附，樣品無(wú)損失、無(wú)污染、高效、快速、低成本和大制備量分離龍膽苦苷的方法。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述實(shí)施例1采用分析型高速逆流色譜儀，溶劑選用正己烷-甲醇-水系統(tǒng)。首先以4∶5∶3∶5體積比將上述溶劑體系置于分液漏斗中，搖勻后靜止分層。待平衡一段時(shí)間后分離上、下相，以上相為固定相，下相為流動(dòng)相。取適量龍膽粗提物溶解于2ml下相中待用。采用美國(guó)產(chǎn)CCC-3000型高速逆流色譜儀進(jìn)行分離，將固定相注滿色譜分離柱，開(kāi)啟速度控制器，當(dāng)達(dá)到預(yù)定轉(zhuǎn)速時(shí)，開(kāi)始以一定流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，通過(guò)六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣。由首端向尾端洗脫，主機(jī)正轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)速為1300r/min，定時(shí)收集組分。
實(shí)施例2
采用半制備型高速逆流色譜儀，溶劑選用正己烷-甲醇-水系統(tǒng)。首先以7∶3∶1∶3體積比將上述溶劑體系置于分液漏斗中，搖勻后靜止分層。待平衡一段時(shí)間后分離上、下相，以上相為固定相，下相為流動(dòng)相。取適量龍膽粗提物溶解于10ml下相中待用。采用美國(guó)產(chǎn)CCC-1000型高速逆流色譜儀進(jìn)行分離，將固定相注滿色譜分離柱，開(kāi)啟速度控制器，當(dāng)達(dá)到預(yù)定轉(zhuǎn)速時(shí)，開(kāi)始以一定流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，通過(guò)六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣。由首端向尾端洗脫，主機(jī)正轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)速為900r/min，定時(shí)收集組分。
實(shí)施例3采用分析型高速逆流色譜儀，溶劑選用正己烷-甲醇-水系統(tǒng)。首先以4∶3∶1∶3體積比將上述溶劑體系置于分液漏斗中，搖勻后靜止分層。待平衡一段時(shí)間后分離上、下相，以上相為固定相，下相為流動(dòng)相。取適量龍膽粗提物溶解于2ml下相中待用。采用美國(guó)產(chǎn)CCC-3000型高速逆流色譜儀進(jìn)行分離，將固定相注滿色譜分離柱，開(kāi)啟速度控制器，當(dāng)達(dá)到預(yù)定轉(zhuǎn)速時(shí)，開(kāi)始以一定流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，通過(guò)六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣。由首端向尾端洗脫，主機(jī)正轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)速為1300r/min，定時(shí)收集組分。
實(shí)施例4采用分析型高速逆流色譜儀，溶劑選用正己烷-甲醇-水系統(tǒng)。首先以8∶6∶4∶6體積比將上述溶劑體系置于分液漏斗中，搖勻后靜止分層。待平衡一段時(shí)間后分離上、下相，以上相為固定相，下相為流動(dòng)相。取適量龍膽粗提物溶解于10ml下相中待用。采用美國(guó)產(chǎn)CCC-3000型高速逆流色譜儀進(jìn)行分離，將固定相注滿色譜分離柱，開(kāi)啟速度控制器，當(dāng)達(dá)到預(yù)定轉(zhuǎn)速時(shí)，開(kāi)始以一定流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出時(shí)，通過(guò)六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣。由首端向尾端洗脫，主機(jī)正轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)速為900r/min，定時(shí)收集組分。
權(quán)利要求
1.一種制備高純度龍膽苦苷的方法，其特征在于選用氯仿-甲醇-正丁醇-水體積比為4-8∶3-6∶1-4∶3-6的溶劑系統(tǒng)，采用分析型高速逆流色譜儀的小量制備及半制備型高速逆流色譜儀的較大量制備，一次分離可以得到龍膽苦苷。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備高純度龍膽苦苷的方法，采用分析型高速逆流色譜儀的小量制備及半制備型高速逆流色譜儀的較大量制備，其特征在于，選用氯仿－甲醇－正丁醇－水體積比為4－8∶3－6∶1－4∶3－6的溶劑系統(tǒng)，一次分離可以得到龍膽苦苷。不需使用固體填料，沒(méi)有不可逆吸附，樣品無(wú)損失、無(wú)污染、高效、快速、低成本和大制備量分離龍膽苦苷的方法。獲得的龍膽苦苷純度可達(dá)92％以上，適用于從由各種工藝條件制備的龍膽粗提物中分離制備龍膽苦苷。
文檔編號(hào)C07H1/00GK101070335SQ200610016839
公開(kāi)日2007年11月14日 申請(qǐng)日期2006年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月10日
發(fā)明者王艷艷, 王英平, 趙景輝, 劉繼永, 焉石 申請(qǐng)人:趙景輝