專利名稱：特異性結(jié)合堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體的肽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于肽技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及特異性結(jié)合堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體的肽，其可用于抑制高表達(dá)bFGF受體的細(xì)胞增殖并阻斷bFGF誘導(dǎo)的Erkl和Erk2 激酶活化，從而可用于治療黑素瘤等腫瘤。本發(fā)明還涉及了包含該肽的藥物組合物和制備方法等。
背景技術(shù)：
堿性成纖維細(xì)胞生長因子，即bFGF (basic fibroblast growth factor)，又稱 FGF-2，是成纖維細(xì)胞生長因子(fibroblast growth factor, FGF)家族的成員之一。bFGF 通過結(jié)合和活化細(xì)胞表面受體而激活胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，介導(dǎo)細(xì)胞增殖等生物反應(yīng)，是廣譜的促有絲分裂原。bFGF在體內(nèi)分布廣泛且具有多種重要的生物學(xué)功能，其時空表達(dá)及表達(dá)水平受到嚴(yán)謹(jǐn)?shù)恼{(diào)控。研究表明，bFGF及其受體表達(dá)的異常上調(diào)與腫瘤等疾病密切相關(guān)° (參見 Beenken A, Mohammadi M. The FGF family: biology, pathophysiology and therapy. Nat Rev Drug Discov. 2009，8(3) : 235-253; Korc M, Friesel RE. The role of fibroblast growth factors in tumor growth. Curr Cancer Drug Targets. 2009, 9(5): 639-651 ； Rusnati Μ, Presta Μ. Fibroblast growth factors/fibroblast growth factor receptors as targets for the development of anti-angiogenesis strategies. Curr Pharm Des. 2007，13(20) : 2025-2044 ；以及，Cronauer MV, Schulz WA, Seifert HH, Ackermann R, Burchardt Μ, Fibroblast growth factors and their receptors in urological cancers: basic research and clinical implications. Eur Urol. 2003, 43(3) : 309-319)。經(jīng)過長期艱苦的研究，并結(jié)合一些篩選的運氣，本發(fā)明人獲得了一種肽，令人驚訝的是，其能夠有效而且特異地結(jié)合堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體，阻斷bFGF所介導(dǎo)的細(xì)胞增殖，可用于抑制高表達(dá)bFGF受體的細(xì)胞增殖并阻斷bFGF誘導(dǎo)的Erkl和Erk2激酶活化， 從而可用于治療黑素瘤等腫瘤。該肽可以采用現(xiàn)有技術(shù)合成，成本低，但是效果好，適用范圍廣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供特異性結(jié)合堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體的肽，優(yōu)選是特異結(jié)合表達(dá)堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體的細(xì)胞的肽，其可用于抑制高表達(dá)bFGF受體的細(xì)胞增殖并阻斷bFGF誘導(dǎo)的Erkl和Erk2激酶活化，從而可用于治療黑素瘤等腫瘤；另外， 該肽可以采用現(xiàn)有技術(shù)合成，成本低，但是效果好，適用范圍廣。具體而言，在第一個方面，本發(fā)明提供了包括序列Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro 的肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯。所述肽優(yōu)選可以是由序列 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro 組成的肽，也可以是在 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro 肽的N末端和/或C末端增加一個或多個(如，一個或幾個，優(yōu)選如一個至五個)氨基酸殘基，
3更優(yōu)選在Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro肽的C末端增加一個或多個(如，一個或幾個，優(yōu)選如一個至五個)氨基酸殘基。對于在C末端增加氨基酸殘基的情況，在本發(fā)明的具體實施方式
中，所述肽的具體實例是序列為Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro-Gly-Gly-Gly-Ser的肽。本文中的肽中各氨基酸殘基之間通常是通過肽鍵相連的，盡管其他鍵相連的肽也涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。優(yōu)選在本發(fā)明的第一方面中，包括序列 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro的肽中任意兩個相鄰的氨基酸都是通過肽鍵相連的。本文中所使用的肽及氨基酸、氨基酸殘基和化學(xué)基團(tuán)的表示方法均為所屬領(lǐng)域公認(rèn)的表示方法。其中氨基酸或氨基酸殘基的縮寫可參照表1中定義，這些縮寫可以指L-型的氨基酸，也可以指D-型的氨基酸。在本發(fā)明的具體實施方式
中，氨基酸或氨基酸殘基指 L-型的氨基酸或氨基酸殘基。其中，氨基酸或氨基酸殘基可以根據(jù)其側(cè)鏈性質(zhì)的相似性而分成以下組疏水性氨基酸(A、I、L、M、F、P、W、Y、V)、親水性氨基酸(R、D、N、C、E、Q、G、H、K、 S、T)、脂肪族側(cè)鏈的氨基酸(G、A、V、L、I、P)、含羥基側(cè)鏈的氨基酸(S、T、Y)、含硫原子側(cè)鏈的氨基酸(C、M)、含羧酸和酰胺側(cè)鏈的氨基酸(D、N、E、Q)、含堿性基團(tuán)側(cè)鏈的氨基酸(R、K、 H)、含芳香族側(cè)鏈的氨基酸(H、F、Y、W)。通常，處于同組中的氨基酸或氨基酸殘基具有相似的性質(zhì)。表1氨基酸縮寫表
權(quán)利要求
1.包括序列Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro的肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯，優(yōu)選所述肽是序列為 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro 的肽或是序列為 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr -Pro-Gly-Gly-Gly-Ser 的肽。
2.組合物，其包括權(quán)利要求1所述的肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯，以及藥學(xué)上可接受的載體。
3.權(quán)利要求1所述的肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在制備特異性結(jié)合表達(dá)bFGF受體的細(xì)胞的組合物中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求1所述的肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在制備抑制細(xì)胞增殖的組合物中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其中細(xì)胞增殖是由堿性成纖維細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)的。
6.權(quán)利要求4或5所述的應(yīng)用，其中細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞，優(yōu)選是黑素瘤細(xì)胞。
7.權(quán)利要求1或2所述的肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在制備抗Erkl和Erk2激酶活化的藥物或試劑中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1或2所述的肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在制備抗腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其中腫瘤是黑素瘤。
10.類似于Leuler-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro的肽，優(yōu)選所述肽能夠通過噬菌體展示來篩選得到。
全文摘要
本發(fā)明公開了特異性結(jié)合堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體的肽，其包括序列Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro，其可用于抑制高表達(dá)bFGF受體的細(xì)胞增殖并阻斷bFGF誘導(dǎo)的Erk1和Erk2激酶活化，從而可用于治療黑素瘤等腫瘤。本發(fā)明還公開了包含該肽的藥物組合物和制備方法等。
文檔編號C07K1/00GK102453079SQ20101052595
公開日2012年5月16日 申請日期2010年11月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月1日
發(fā)明者吳曉萍, 李校堃 申請人:李校堃