專利名稱：一種青霉素類抗生素及其中間體的分子印跡型聚合物的制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及分子印跡聚合物的制備方法；具體說是動(dòng)物源性食品中一種青霉素類抗生素及其中間體的分子印跡聚合物的制備方法。
背景技術(shù)：
青霉素類抗生素是含有6-氨基青霉烷酸出-APA)母核結(jié)構(gòu)的一類廣譜抗生素，對(duì)革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有較強(qiáng)的抗菌作用，因而廣泛用于獸醫(yī)臨床。在動(dòng)物飼養(yǎng)中如不正確使用青霉素類抗生素將導(dǎo)致其動(dòng)物源性食品安全問題。分子印跡技術(shù)(Molecular Imprinting Techniqe, MIT)是近年來出現(xiàn)的制備具有識(shí)別功能的聚合物材料的新技術(shù)，可獲得在空間結(jié)構(gòu)和結(jié)合位點(diǎn)上與某一分子完全匹配 的分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymers,MIPs)。這一技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于單一目標(biāo)化合物的固相萃取柱制備，但是同時(shí)用于多種化合物及其中間體分離的分子印跡型固相萃取柱制備方法未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種青霉素類抗生素及其中間體的分子印跡聚合物的制備方法，該分子印跡聚合物制得的固相萃取柱對(duì)具有6-APA母核的青霉素類抗生素PEN、AMP、AMO及其中間產(chǎn)物6-APA均有良好的識(shí)別性能。本發(fā)明技術(shù)方案如下一種青霉素類抗生素及其中間體的分子印跡型聚合物的制備方法，該制備方法按如下步驟進(jìn)行(I)稱取質(zhì)量不大于O. 22g模板分子6-氨基青霉烷酸(6-APA)溶解于10 mL甲酸溶液中，加入功能單體甲基丙烯酸(MAA) O. 265-0. 795mL，于室溫下在超聲振蕩30min，使模板分子與功能單體充分結(jié)合；然后向加入交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)2.57-6.43 mL，偶氮二異丁腈(AIBN) O. 05 g，混合均勻，超聲振蕩15 min，在N2保護(hù)下置60 °C水浴中加熱24 h，得到白色固體聚合物；(2)將步驟(I)將所得的白色固體聚合物粉碎，研磨過220目(粒徑O. 065 mm)篩，用體積比8:2或7:3或6:3的乙腈-水或體積比6:4的甲醇/乙酸溶液洗脫聚合物中的模板分子(6-APA)，再用去離子水洗脫溶劑，收集產(chǎn)物于烘箱中60 °C干燥，得到以6-APA為虛擬模板的印跡聚合物。作為優(yōu)選，本發(fā)明方法中所述模板分子功能單體交聯(lián)劑的摩爾比為1:5:30。一種固相萃取柱填料，所述填料由權(quán)利要求I所述的6-APA為虛擬模板的印跡聚合物和硅藻土組成，所述印跡聚合物與硅藻土的質(zhì)量比為2:1。與已有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果體現(xiàn)在本發(fā)明以6-氨基青霉烷酸出-APA)母核為分子印跡聚合物的模板，制得分子印跡聚合物，經(jīng)粉碎后與不同比例膨松劑(硅藻土)混合裝柱，所制得的固相萃取柱對(duì)具有6-APA母核的青霉素類抗生素PEN、AMP、AMO及其中間體6-APA均有良好的識(shí)別性能。


圖I為匪IPs的紅外光譜2為MIPs的紅外光譜3為WIPs的掃描電鏡圖4為MIPs的掃描電鏡SEM圖。圖5a為實(shí)施例3牛奶樣品色譜圖。圖5b為實(shí)施例3加標(biāo)牛奶樣品的色譜圖。
具體實(shí)施例方式以下通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案做進(jìn)一步說明。實(shí)施例中的試驗(yàn)步驟和試驗(yàn)所用產(chǎn)品及試驗(yàn)器材，若無特別說明均為本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)手段、市購常規(guī)產(chǎn)品及公知儀器。實(shí)施例I(I)通過分別加入5 mL的甲醇、甲酸、乙醇、二氯甲烷、N，N- 二甲基酰胺、甲醇/水(7/3)、乙腈、乙腈/水(7/3)、乙腈/水(8/2)做為溶劑，考察不同溶劑的對(duì)6-APA和MAA的溶解效果，見表I。因模板分子6-APA不完全溶于有機(jī)溶劑，且微溶于水，遇堿分解，對(duì)酸較穩(wěn)定，綜合考慮選擇甲酸作為致孔劑。表I不同溶劑的對(duì)6-APA和MAA的溶解效果
權(quán)利要求
1.一種青霉素類抗生素及其中間體的分子印跡型聚合物的制備方法，其特征在于按如下步驟進(jìn)行 (I)稱取質(zhì)量不大于O. 22g模板分子6-氨基青霉烷酸(6-APA)溶解于10 mL甲酸溶液中，加入功能單體甲基丙烯酸(MAA) O. 265-0. 795mL，于室溫下在超聲振蕩30 min，使模板分子與功能單體充分結(jié)合；然后加入交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA) 2.57-6.43 mL;再加入偶氮二異丁腈(AIBN) O. 05 g，混合均勻，超聲振蕩15 min，在N2保護(hù)下置60 °〇水浴中加熱24 h，得到白色固體聚合物； (2 )將步驟(I)將所得的白色固體聚合物粉碎，研磨過220目篩，用體積比8:2或7:3或6:3的乙腈-水或體積比6:4的甲醇/乙酸溶液洗脫聚合物中的模板分子(6-APA)，再用去離子水洗脫溶劑，收集產(chǎn)物于烘箱中60 °C干燥，得到以6-APA為虛擬模板的印跡聚合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述青霉素類抗生素及其中間體的分子印跡型聚合物的制備方法， 其特征在于所述模板分子功能單體交聯(lián)劑的摩爾比為1:5:30。
3.一種固相萃取柱填料，其特征在于，所述填料由權(quán)利要求I所述的6-APA為虛擬模板的印跡聚合物和硅藻土組成，所述印跡聚合物與硅藻土的質(zhì)量比為2:1。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種青霉素類抗生素及其中間體的分子印跡型聚合物的制備方法，該方法以6-氨基青霉烷酸(6-APA)為模版分子，甲基丙烯酸(MAA)為功能單體，以乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，通過溶解、聚合、洗脫等步驟得到以6-APA為虛擬模板的印跡聚合物。該印跡聚合物用于固相萃取柱的填料，所制得的固相萃取柱對(duì)青霉素類抗生素青霉G鉀(PEN)、氨芐青霉素(AMP)、阿莫西林(AMO)及其中間體6-APA均有良好的識(shí)別性，可用于動(dòng)物源性食品中青霉素類抗生素殘留檢測的樣品前處理。
文檔編號(hào)C08F222/14GK102924645SQ201210475719
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月21日
發(fā)明者檀華蓉, 司雄元, 田春秋, 蘇紅曉, 祁克宗 申請人:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)