本發(fā)明涉及一種溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料的制備方法。
背景技術(shù)：
目前，生物材料快速發(fā)展，主要針對(duì)某些生物相容性好的材料進(jìn)行生物方面的應(yīng)用。以殼聚糖/氧化石墨烯材料為例來(lái)說(shuō)，由于殼聚糖生物相容性好、免疫排斥反應(yīng)小、無(wú)細(xì)胞毒性、易降解同時(shí)具有抗菌消炎的優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域，例如作為生物傳感器、組織工程支架、藥物緩釋載體等等，同時(shí)在復(fù)合氧化石墨烯材料以后，該材料的機(jī)械應(yīng)力、電傳導(dǎo)性得以增強(qiáng)，進(jìn)一步擴(kuò)大了殼聚糖/氧化石墨烯的應(yīng)用范圍。
然而，作為生物材料，殼聚糖/氧化石墨烯材料往往要作用在細(xì)胞培養(yǎng)體系中，如何能讓細(xì)胞均勻分布在殼聚糖/氧化石墨烯材料中以便實(shí)現(xiàn)該材料的載藥、傳感功能成為當(dāng)前研究的難題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料的制備方法，以便殼聚糖/氧化石墨烯復(fù)合材料在低于37℃時(shí)能以液態(tài)和細(xì)胞充分混勻，使得材料和細(xì)胞更加均勻、充分接觸，進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)殼聚糖/氧化石墨烯材料的功能。
本發(fā)明的技術(shù)方案：
一種溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料的制備方法，步驟如下：
制備濃度為100-600mg/l的氧化石墨烯水溶液，超聲20min，向氧化石墨烯水溶液中加入殼聚糖粉末，使得殼聚糖/氧化石墨烯的質(zhì)量比為0.1～0.6，冰水浴條件下磁力攪拌，并逐滴滴入冰醋酸，使得冰醋酸/水的體積比為0.1％～0.6％，持續(xù)攪拌2h，得到澄清透明的溶液；配置β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，在冰水浴條件下，向澄清透明的溶液中逐滴滴入β-甘油磷酸二鈉鹽溶液，使得β-甘油磷酸二鈉鹽的濃度在0.1-0.2mol/l，充分?jǐn)嚢?0min，即得到溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯；保存在4℃條件下，待用時(shí)取出，置于37℃水浴10-15min，即得溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料。
本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明能夠拓寬殼聚糖/氧化石墨烯材料在生物技術(shù)方面的應(yīng)用，以該方法制備的殼聚糖/氧化石墨烯材料能夠在進(jìn)行生物利用之前在低溫條件下先和目的細(xì)胞充分混合。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合技術(shù)方案，進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的具體實(shí)施方式。
實(shí)施例1：
取100mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴條件下，向其中加入200mg殼聚糖粉末，攪拌成乳濁液，由于殼聚糖不溶于水，向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸，邊加邊攪拌，待乳濁液逐漸澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，逐滴滴入置于磁力攪拌器，充分?jǐn)嚢?.5小時(shí)，存放于4℃冰箱，待用時(shí)取出，37℃水浴10-15min，即得100mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準(zhǔn))。
實(shí)施例2：
采用200mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴條件下，向其中加入200mg殼聚糖粉末，攪拌成乳濁液，向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸，邊加邊攪拌，待乳濁液逐漸澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，逐滴滴入置于磁力攪拌器，充分?jǐn)嚢?.5小時(shí)，存放于4℃冰箱，待用時(shí)取出，37℃水浴10-15min，即得200mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準(zhǔn))。
實(shí)施例3：
取400mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴條件下，向其中加入200mg殼聚糖粉末，攪拌成乳濁液，由于殼聚糖不溶于水，向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸，邊加邊攪拌，待乳濁液逐漸澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，逐滴滴入置于磁力攪拌器，充分?jǐn)嚢?.5小時(shí)，存放于4℃冰箱，待用時(shí)取出，37℃水浴10-15min，即得400mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準(zhǔn))。
實(shí)施例4：
取600mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴條件下，向其中加入200mg殼聚糖粉末，攪拌成乳濁液，由于殼聚糖不溶于水，向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸，邊加邊攪拌，待乳濁液逐漸澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，逐滴滴入置于磁力攪拌器，充分?jǐn)嚢?.5小時(shí)，存放于4℃冰箱，待用時(shí)取出，37℃水浴10-15min，即得600mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準(zhǔn))。
本發(fā)明方法的磁力攪拌過(guò)程是處于紫外燈照射下進(jìn)行，經(jīng)過(guò)紫外燈持續(xù)照射，可以營(yíng)造一種無(wú)菌環(huán)境，同時(shí)減少支架材料內(nèi)部的微生物。
本發(fā)明優(yōu)選包括在制備殼聚糖/氧化石墨烯復(fù)合支架時(shí)不采用交聯(lián)劑。