本發(fā)明涉及生物領(lǐng)域,特別是涉及番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp在提高植物防御能力中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、番茄灰葉斑病是近年來新發(fā)生及流行的一種真菌性病害,且發(fā)病率逐年增加。病原菌為半知菌亞門絲孢綱匍柄霉屬真菌,主要是由茄匍柄霉(stemphylium?solani)和番茄匍柄霉(s.lycopersici)侵染所致。該病在世界范圍內(nèi)均有發(fā)生,溫暖潮濕地區(qū)尤為嚴(yán)重。近年來在我國南方和北方的春夏季普遍發(fā)生,尤其是在早春保護(hù)地栽培中危害較為嚴(yán)重,可造成番茄品質(zhì)下降和產(chǎn)量銳減20%-80%,給番茄生產(chǎn)造成嚴(yán)重影響。
2、傳統(tǒng)的煙草花葉病毒(tmv)是煙草花葉病的病原體,屬于tobamovirus群。tmv的寄主范圍廣,可以侵染38個科400多種植物。當(dāng)tmv侵染植物后,其遺傳物質(zhì)侵入煙株細(xì)胞后會迅速復(fù)制,由于煙草并沒有完全抵抗病毒的防御能力和系統(tǒng),導(dǎo)致被侵染煙株持續(xù)處在感病狀態(tài)。感病植株葉綠素受破壞,從而削弱植物的光合作用,使其不能健康生長,導(dǎo)致畸形、矮化甚至死亡等現(xiàn)象,煙葉基本再無利用價值,在全球范圍內(nèi)每年都會造成數(shù)億美元的損失。
3、番茄細(xì)菌性斑點病是由丁香假單孢菌番茄致病變種(pseudomonas?syringaepv.tomato)引起的、發(fā)生在番茄上的病害,是危害全世界番茄生產(chǎn)的重要病害之一。主要為害葉、莖、花、葉柄和果實,尤以葉緣及未成熟果實最明顯,發(fā)病植株生長緩慢,果實膨大受阻,嚴(yán)重影響果實質(zhì)量。病害發(fā)生后,一般減產(chǎn)10-30%,嚴(yán)重地塊減產(chǎn)50%以上。
4、病原物的侵染造成的農(nóng)作物減產(chǎn)已成為全球糧食安全的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。目前防治番茄灰葉斑病、番茄細(xì)菌性斑點病和煙草花葉病毒病的主要方法是化學(xué)防治?;瘜W(xué)農(nóng)藥的長期大量使用會造成病菌產(chǎn)生抗藥性,并給環(huán)境和人類健康造成危害。且生產(chǎn)中防治細(xì)菌病害的藥劑主要是抗生素和銅制劑,有效的抗植物病毒制劑也較少,防治效果不佳。因此,生物防治越來越被重視。
5、真菌病毒是一類以真菌為宿主的病毒,在真菌中普遍存在,其中少數(shù)病毒感染植物病原真菌后會導(dǎo)致真菌致病力顯著下降。這類真菌病毒被稱為低毒真菌病毒,有用于生物防治植物病害的潛力。在我國真菌病毒應(yīng)用于植物病害生物防治已經(jīng)進(jìn)入應(yīng)用階段。2023年華中農(nóng)業(yè)大學(xué)姜道宏教授團(tuán)隊將真菌病毒研發(fā)的植物疫苗開發(fā)成“綠油寶”(用于油菜)、“綠稻寶”(用于水稻)、“綠麥寶”(用于小麥)3種微生物菌劑,利用它們拌種,可實現(xiàn)播種和防病一體化,促進(jìn)作物健康生長。近年來,隨著分子植物病理學(xué)研究的深入,發(fā)現(xiàn)不少激發(fā)子可以激活植物免疫反應(yīng),讓植物對病原物產(chǎn)生強(qiáng)烈而持久的抵抗力。以此為基礎(chǔ),針對植物病害開發(fā)植物免疫誘抗劑(植物免疫激活劑)也成為研究的熱點。植物免疫誘抗劑(植物免疫激活劑)的開發(fā)和利用是綠色環(huán)保的植物病害防治方式。本發(fā)明擬通過開發(fā)真菌病毒的衣殼蛋白作為新的激發(fā)子,實現(xiàn)植物病害的有效防治。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的是提供番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp在提高植物防御能力中的應(yīng)用,以解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題。本發(fā)明提供的番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp能夠有效提高植物防御能力,最終實現(xiàn)對病害的防治。
2、為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供了如下方案:
3、本發(fā)明提供了番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp、編碼基因slav1-cp或含編碼基因slav1-cp生物材料在提高植物防御能力中的應(yīng)用,所述番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp的氨基酸序列如seq?id?no.1所示,或為與seq?id?no.1所示序列同源性為50%以上的序列;所述編碼基因slav1-cp的核苷酸序列如seq?id?no.2所示,或為與seq?idno.2所示序列同源性為70%以上的序列。
4、優(yōu)選的,所述防御能力包括但不限于抗病能力。
5、優(yōu)選的,所述抗病能力包括但不限于抗真菌性病害、抗細(xì)菌性病害、抗病毒性病害或抗卵菌性病害的能力。
6、優(yōu)選的,所述植物包括但不限于番茄、煙草或辣椒。
7、優(yōu)選的,所述生物材料包括但不限于重組載體、表達(dá)盒或重組菌。
8、優(yōu)選的,所述真菌性病害為番茄灰葉斑??;所述細(xì)菌病害為番茄細(xì)菌性斑點??;所述病毒性病害為煙草花葉病。
9、本發(fā)明提供了一種提高植物防御能力的方法,包括利用含番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp的溶液噴灑植物的步驟。
10、進(jìn)一步優(yōu)選的,所述溶液中番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp的濃度為0.03mg/ml。
11、優(yōu)選的,所述植物包括番茄、煙草或辣椒。
12、本發(fā)明提供了番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp、編碼基因slav1-cp或含編碼基因slav1-cp生物材料在制備植物免疫激活劑中的應(yīng)用,所述番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp的氨基酸序列如seq?id?no.1所示;所述編碼基因slav1-cp的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。
13、本發(fā)明提供了一種植物免疫激活劑,所述植物免疫激活劑的有效成分包括番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp;所述番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。
14、本發(fā)明公開了以下技術(shù)效果:
15、本發(fā)明提供的番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp、編碼基因slav1-cp或含編碼基因slav1-cp生物材料能夠激活植物免疫反應(yīng),提高植物中防衛(wèi)相關(guān)基因(slnpr1、slpr1、ntpr1和capr1)的表達(dá)量,以此誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病性,減少病原菌的侵染,為提高植物抗性提供了新途徑,同時也為新型植物免疫誘抗劑(植物免疫激活劑)的研發(fā)提供了新材料。而且該蛋白已經(jīng)在多種植物中進(jìn)行驗證,均具有提高植物抗病能力的效果,因此可以應(yīng)用于多種植物病害的防治。
1.番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp、編碼基因slav1-cp或含編碼基因slav1-cp生物材料在提高植物防御能力中的應(yīng)用,其特征在于,所述番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp的氨基酸序列如seq?id?no.1所示;所述編碼基因slav1-cp的核苷酸序列如seqid?no.2所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述防御能力包括抗病能力。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述抗病能力包括抗真菌性病害、抗細(xì)菌性病害、抗病毒性病害的能力或抗卵菌性病害的能力。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述植物包括番茄、煙草或辣椒。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述生物材料包括重組載體、表達(dá)盒或重組菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于,所述真菌性病害為番茄灰葉斑??;所述細(xì)菌病害為番茄細(xì)菌性斑點??;所述病毒性病害為煙草花葉病。
7.一種提高植物防御能力的方法,其特征在于,包括利用含番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp的溶液噴灑植物的步驟。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述植物包括番茄、煙草或辣椒。
9.番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp、編碼基因slav1-cp或含編碼基因slav1-cp生物材料在制備植物免疫激活劑中的應(yīng)用,其特征在于,所述番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp的氨基酸序列如seq?id?no.1所示;所述編碼基因slav1-cp的核苷酸序列如seqid?no.2所示。
10.一種植物免疫激活劑,其特征在于,所述植物免疫激活劑的有效成分包括番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp;所述番茄匍柄霉真菌病毒外殼蛋白slav1-cp的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。