本發(fā)明涉及水產(chǎn)動物生理調(diào)控,尤其涉及一種調(diào)控大口黑鱸攝食基因cck的cck多肽及其應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、大口黑鱸(micropterus?salmoides),俗稱加州鱸,原產(chǎn)于美國加利福尼亞州密西西比河水系。因味道鮮美、營養(yǎng)成分豐富、抗病力強(qiáng)、生長迅速等特點(diǎn),受到養(yǎng)殖業(yè)的歡迎。然而,隨著魚粉資源的短缺、價格的暴漲等因素,迫使大口黑鱸水產(chǎn)配合飼料中的魚粉不斷降低,導(dǎo)致大口黑鱸攝食量降低等問題。因此,探明大口黑鱸攝食調(diào)控的關(guān)鍵靶基因以及構(gòu)建攝食調(diào)控的技術(shù)對大口黑鱸養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。
2、膽囊收縮素(cck)是調(diào)節(jié)食物攝入的重要因子。研究表明,cck屬于一種腦腸肽,在餐后作為一種神經(jīng)遞質(zhì)在大腦和周圍神經(jīng)元中釋放,抑制食物攝入,同時還參與脂質(zhì)運(yùn)輸、糖代謝調(diào)控等。在魚類中,cck也參與了攝食調(diào)控。研究表明,cck的中樞和外周注射均可抑制金魚的攝食(himick?andpeter?1994b,volkoffet?al?2003),而注射cck拮抗劑又增加了虹鱒的攝食量(徐少華.膽囊收縮素(cck)調(diào)控草魚攝食與生殖的作用機(jī)制研究[j].[2024-07-08].)。因此,研究大口黑鱸的cck基因,開發(fā)cck拮抗劑對提高大口黑鱸攝食率具有重要意義。
3、多肽是介于大分子蛋白質(zhì)和小分子藥物之間的具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生物功能的化合物。由于其主要來源于天然多肽或者天然多肽類似物,通常情況下,其結(jié)構(gòu)清楚、作用機(jī)制明確,許多性質(zhì)也往往介于小分子化學(xué)藥物與大分子抗體藥物之間。研究表明多肽具有靶點(diǎn)親和力高、療效穩(wěn)定、免疫原性低、毒副作用小、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于腫瘤、肝炎、糖尿病、艾滋病等疾病的預(yù)防、診斷和治療。
4、在水產(chǎn)動物中由于缺少成熟的細(xì)胞系,因此,多部分激活實(shí)驗(yàn)均為在體實(shí)驗(yàn),相關(guān)研究基因的激活方式妄想采用基因激活劑來實(shí)現(xiàn)。但基因激活劑是一種化學(xué)試劑,主要成分為脫落酸類物質(zhì),往往具有激活效率不高、特異性低等問題。因此,針對cck基因建立一個激活效率高、特異性強(qiáng)、安全可靠的技術(shù)手段對大口黑鱸乃至水產(chǎn)動物的生理調(diào)控是必不可少。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于建立大口黑鱸的cck基因激活劑,也為研究cck拮抗劑提供參考。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供以下技術(shù)方案:
3、本發(fā)明提供了一種調(diào)控大口黑鱸攝食基因cck的cck多肽,所述cck多肽的氨基酸序列如seq?id?no:1所示。
4、本發(fā)明還提供了一種所述cck多肽在制備調(diào)控大口黑鱸攝食產(chǎn)品中的應(yīng)用。
5、優(yōu)選的,所述cck多肽的注射量為150~200ng/g體重。
6、本發(fā)明還提供了一種所述的cck多肽在制備調(diào)控大口黑鱸厭食基因和促食基因中的應(yīng)用。
7、優(yōu)選的,所述厭食基因包括pomc和lepr。
8、優(yōu)選的,所述cck多肽正向調(diào)控所述厭食基因。
9、優(yōu)選的,所述促食基因包括npy和lpar1。
10、優(yōu)選的,所述cck多肽負(fù)向調(diào)控所述促食基因。
11、本發(fā)明還提供了一種所述的cck多肽在調(diào)控與下游攝食相關(guān)基因trhr的應(yīng)用。
12、本發(fā)明根據(jù)大口黑鱸cck基因的核苷酸序列,設(shè)計并合成了一條cck肽,并通過注射不同濃度的cck肽,檢測cck肽注射后對大口黑鱸攝食量的影響,根據(jù)實(shí)驗(yàn)最終確定較佳注射濃度為150ng/g體重的cck肽。然后分析cck肽對大口黑鱸腦和腸組織攝食相關(guān)基因的影響,驗(yàn)證了本發(fā)明針對大口黑鱸cck基因設(shè)計和合成的特異性cck肽能夠便捷、快速、高效地激活cck基因,從而調(diào)控大口黑鱸攝食。因此本發(fā)明提供的cck多肽及其應(yīng)用,可以為基因?qū)用嬲{(diào)控魚類攝食提供借鑒。
1.一種調(diào)控大口黑鱸攝食基因cck的cck多肽,其特征在于,所述cck多肽的氨基酸序列如seq?id?no:1所示。
2.一種權(quán)利要求1所述cck多肽在制備調(diào)控大口黑鱸攝食產(chǎn)品中的應(yīng)用。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,所述cck多肽的注射量為150~200ng/g體重。
4.一種權(quán)利要求1所述的cck多肽在制備調(diào)控大口黑鱸厭食基因和促食基因中的應(yīng)用。
5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于,所述厭食基因包括pomc和lepr。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,所述cck多肽正向調(diào)控所述厭食基因。
7.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于,所述促食基因包括npy和lpar1。
8.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,其特征在于,所述cck多肽負(fù)向調(diào)控所述促食基因。
9.一種權(quán)利要求1所述的cck多肽在調(diào)控與下游攝食相關(guān)基因trhr的應(yīng)用。