本發(fā)明屬于微生物,具體涉及一種解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵液、可濕性粉劑和應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、現(xiàn)代作物的增產(chǎn)對化肥的依賴性越來越強(qiáng),化肥通過土壤在短時間內(nèi)為作物提供生長發(fā)育所需的大量養(yǎng)分,但人們?yōu)榱俗非螽a(chǎn)量而忽視了化肥給環(huán)境帶來的諸多問題,由于過度使用化肥,資源浪費(fèi)嚴(yán)重,土壤性質(zhì)發(fā)生改變,透氣性差。人們一直在尋找能發(fā)揮化肥的增肥作用但對環(huán)境友好的替代品。生物菌肥中的有效成分含有大量有益微生物,通過微生物的生命活動分解難溶物質(zhì),有效降低了土壤板結(jié)的情況,從而最大限度地使土壤的潛在肥力發(fā)揮出來,改善了農(nóng)作物的生長環(huán)境,為植物提供更多營養(yǎng),從而使農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量和品質(zhì)都得到了提升。
2、因此,本發(fā)明旨在開發(fā)一種含有解淀粉芽孢桿菌的生物菌肥,使其利于形成產(chǎn)品進(jìn)入市場。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的解淀粉芽孢桿菌zhr0發(fā)酵液,解淀粉芽孢桿菌zhr0的保藏號為cctccno:m?2014577,具有抑菌和促生雙重功能,且抗逆性強(qiáng)易培養(yǎng)。另外,將解淀粉芽孢桿菌開發(fā)成生物菌肥或生物農(nóng)藥,有利于其形成產(chǎn)品進(jìn)入市場流通??蓾裥苑蹌?yīng)用于田間既可采用灌根的方式,也可用于葉面噴施。因?yàn)榫鷦┊a(chǎn)品中的有效成分為活菌,生產(chǎn)時既要滿足粉劑的工藝要求,同時也要考慮制備粉劑所需的輔料對有效成分的活性是否有抑制作用,因此需針對目標(biāo)菌選擇合適的輔料。而本申請發(fā)明人通過實(shí)驗(yàn)研究獲得了可濕性粉劑,其理化性質(zhì)穩(wěn)定、菌體存活率高、常溫條件下貨架期長。
2、本發(fā)明第一方面提供一種發(fā)酵液,采用解淀粉芽孢桿菌zhr0發(fā)酵制得,解淀粉芽孢桿菌zhr0的保藏號為cctcc?no:m?2014577,所述菌劑中解淀粉芽孢桿菌zhr0的活菌量為(5~8)×108cfu/g。
3、本發(fā)明第二方面提供發(fā)酵液的制備方法,包括如下步驟:
4、1)將解淀粉芽孢桿菌zhr0轉(zhuǎn)接于培養(yǎng)基中,接種濃度(3~5)×107cfu/ml,36.5~37.5℃振蕩培養(yǎng)12~48h,制得種子液。可選地,接種濃度可以為3×107cfu/ml、4×107cfu/ml或5×107cfu/ml,或三者之間的值;可選地,振蕩培養(yǎng)時間為12~24h或24~48h。
5、2)以培養(yǎng)基的重量為計(jì),將種子液以25~35wt%的接種量接入裝有培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中發(fā)酵50~70h,得到發(fā)酵液。可選地,接種量為25~30wt%或30~35wt%;可選地,發(fā)酵時間為50~60h或60~70h。
6、本發(fā)明第三方面提供一種可濕性粉劑,包含第一方面所述的發(fā)酵液。
7、在一可行的實(shí)例中,所述可濕性粉劑還包括載體和助劑;其中,載體對發(fā)酵液的最大吸附量為3.0~4.5ml/g,載體和助劑的質(zhì)量比為(1~3):1。可選地,載體和助劑的質(zhì)量比為(1~2):1或(2~3):1;可選地,最大吸附量為3.0~4.0ml/g或4.~4.5ml/g。
8、在一可行的實(shí)例中,可濕性粉劑的潤濕時間為15~20s;可選地,時間為15~16s、16~18s或19~20s。
9、在一可行的實(shí)例中,可濕性粉劑的懸浮率為70~72%;可選地,懸浮率為70~71%或71~72%。
10、在一可行的實(shí)例中,可濕性粉劑中,解淀粉芽孢桿菌zhr0的活菌量為(5~8)×108cfu/g;可選地,可以為5×108cfu/g、6×108cfu/g、7×108cfu/g或8×108cfu/g,或三者之間的值。
11、在一可行的實(shí)例中,所述載體選自高嶺土、硅藻土、殼聚糖或滑石粉中的至少一種;優(yōu)選地,所述載體為硅藻土或高嶺土。
12、在一可行的實(shí)例中,所述助劑選自三聚磷酸鈉、木質(zhì)素磺酸鈉、sds、sdbs、peg或吐溫80中的至少一種;優(yōu)選地,所述助劑為三聚磷酸鈉和sdbs;更優(yōu)選地,所述三聚磷酸鈉和sdbs的質(zhì)量比為1:(10~40);可選地,所述三聚磷酸鈉和sdbs的質(zhì)量比為1:(10~20)、1:(20~30)或1:(30~40)。
13、在一可行的實(shí)例中,高嶺土:sdbs:三聚磷酸鈉=61.3:37.4:1.3。
14、本發(fā)明第四方面提供可濕性粉劑的制備方法,包括如下步驟:
15、1)向載體中加入發(fā)酵液,發(fā)酵液的用量為載體對發(fā)酵液的最大吸附量,最大吸附量為3.0~4.5ml/g;可選地,最大吸附量可以為3.0~4.0ml/g或4.0~4.5ml/g;
16、2)將吸附發(fā)酵液的載體在35~50℃下烘干得到原粉;可選地,溫度可以為35~40℃、40~45℃或45~50℃;
17、3)按質(zhì)量比要求,將原粉與助劑混合得到可濕性粉劑。
18、本發(fā)明第五方面提供第一方面的發(fā)酵液和第三方面所述的可濕性粉劑在土壤肥料中的應(yīng)用。
19、在一些可行實(shí)例中,在下述任一項(xiàng)中的應(yīng)用:
20、1)在柑橘根際土壤中作為生物肥料的應(yīng)用;
21、2)在促進(jìn)土壤中有機(jī)質(zhì)增加中的應(yīng)用;
22、3)在促進(jìn)土壤中有效n元素和/或有效p元素和/或速效k元素增加中的應(yīng)用;
23、4)在改良土壤ph中的應(yīng)用。
24、本發(fā)明第六方面提供可濕性粉劑的施用方式,稀釋50~200倍后環(huán)施于植物根部滴水線處,例如稀釋50倍、100倍、150倍或200倍。
25、本發(fā)明提供的菌劑、發(fā)酵液和可濕性粉劑具有至少下述有益技術(shù)效果:
26、1)本發(fā)明的解淀粉芽孢桿菌zhr0發(fā)酵液,具有抑菌和促生雙重功能,且抗逆性強(qiáng)易培養(yǎng)。
27、2)本發(fā)明的可濕性粉劑,其理化性質(zhì)穩(wěn)定、菌體存活率高、常溫條件下貨架期長。
28、3)本發(fā)明的可濕性粉劑應(yīng)用于柑橘根際土壤中,促進(jìn)土壤中有機(jī)質(zhì)增加,促進(jìn)土壤中有效n元素和/或有效p元素和/或速效k元素增加,還可以改良土壤ph。
29、保藏證明說明:
30、保藏機(jī)構(gòu):中國典型培養(yǎng)物保藏中心;
31、保藏編號:cctcc?no:m?2014577;
32、保藏日期:2014年11月18日;
33、保藏地址:湖北省武漢市武昌區(qū)八一路299號武漢大學(xué);
34、分類學(xué)命名:解淀粉芽孢桿菌zhr0(bacillus?amyloliquefaciens?zhr0)。
1.一種發(fā)酵液,其特征在于,采用解淀粉芽孢桿菌zhr0發(fā)酵制得,解淀粉芽孢桿菌zhr0的保藏號為cctcc?no:m?2014577。
2.如權(quán)利要求1所述的發(fā)酵液的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
3.一種可濕性粉劑,其特征在于,包含如權(quán)利要求1所述的發(fā)酵液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的可濕性粉劑,其特征在于,所述可濕性粉劑還包括載體和助劑;其中,載體對發(fā)酵液的最大吸附量為3.0~4.5ml/g,載體和助劑的質(zhì)量比為(1~3):1;
5.如權(quán)利要求4所述的可濕性粉劑,其特征在于,所述載體選自高嶺土、硅藻土、殼聚糖或滑石粉中的至少一種;優(yōu)選地,所述載體為硅藻土或高嶺土。
6.如權(quán)利要求4或5所述的可濕性粉劑,其特征在于,所述助劑選自三聚磷酸鈉、木質(zhì)素磺酸鈉、sds、sdbs、peg或吐溫80中的至少一種;
7.如權(quán)利要求3~6任一項(xiàng)所述的可濕性粉劑的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
8.如權(quán)利要求1所述的發(fā)酵液、或如權(quán)利要求3~6任一項(xiàng)所述的可濕性粉劑在土壤肥料中的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,在下述任一項(xiàng)中的應(yīng)用:
10.如權(quán)利要求3~6任一項(xiàng)所述的可濕性粉劑的施用方式,其特征在于,稀釋50~200倍后環(huán)施于植物根部滴水線處。