本發(fā)明屬于生物，尤其涉及樟芝突變株a2-14及其在制備三萜類化合物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、樟芝(antrodia?cinnamomea)又稱為牛樟芝、牛樟菇等，通常為紅棕色的馬蹄狀、塔狀或板狀等，生長(zhǎng)在牛樟樹(shù)(cinnamomum?kanehira?hayata)腐朽的樹(shù)干內(nèi)壁或潮濕表面，富含三萜類化合物、多糖類和泛醌衍生物等，具有保肝護(hù)肝、抗炎、抗腫瘤、抗癌等獨(dú)特療效。研究表明，三萜類化合物是最主要的生物活性物質(zhì)之一，在樟芝的藥用價(jià)值中起重要作用。然而，樟芝的宿主唯一，生長(zhǎng)周期漫長(zhǎng)，難以滿足當(dāng)下社會(huì)需求。

2、近年來(lái)，樟芝的人工培養(yǎng)受到廣泛關(guān)注，主要集中在培養(yǎng)基優(yōu)化、生產(chǎn)工藝優(yōu)化和成分研究等方面。其中，液體培養(yǎng)菌絲體工藝易控制，染菌幾率小，發(fā)酵周期短(一般1-2周)，是樟芝人工培養(yǎng)最有前景的途徑。但是，目前樟芝菌絲體生物合成三萜類化合物的產(chǎn)量低，不能滿足市場(chǎng)需求。因此，選育高產(chǎn)三萜類化合物的樟芝菌種迫在眉睫。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供樟芝突變株a2-14及其在制備三萜類化合物中的應(yīng)用，該樟芝突變株生物合成三萜類化合物的產(chǎn)量較高，具有較好的工業(yè)應(yīng)用前景。

2、為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

3、樟芝(antrodia?cinnamomea)a2-14，保藏編號(hào)為cctcc?no：m?20241365，保藏日期：2024年06月24日。

4、上述樟芝突變株a2-14的培養(yǎng)基，主要由有機(jī)碳源、有機(jī)氮源與鹽溶液組成；其中，有機(jī)碳源、有機(jī)氮源與鹽溶液的配比為8.5g:1.0g:100ml。

5、鹽溶液由水、kh2po4和mgso4·7h2o配制而成，每升鹽溶液中含kh2po4?1.0g、mgso4·7h2o0.5g。

6、菌劑，含有上述樟芝突變株a2-14或其活性成分。

7、上述樟芝突變株a2-14、培養(yǎng)基或菌劑在制備三萜類化合物中的應(yīng)用。

8、三萜類化合物的制備方法，使用上述培養(yǎng)基培養(yǎng)樟芝突變株a2-14，收集菌絲體，提取三萜化合物，即得。

9、培養(yǎng)基條件為ph?4.5、溫度29℃、搖床轉(zhuǎn)速180rpm，培養(yǎng)時(shí)間為28天。

10、培養(yǎng)基按以下配制：85.0g/l葡萄糖，10.0g/l酵母提取物，1.0g/l無(wú)水磷酸二氫鉀，0.5g/l七水硫酸鎂，用檸檬酸緩沖液調(diào)整ph為4.5。

11、培養(yǎng)中，孢子接種終濃度為1×105孢子/ml。

12、針對(duì)目前樟芝生物合成三萜類化合物產(chǎn)量低的問(wèn)題，發(fā)明人以樟芝突變菌株e2-3-7為出發(fā)菌株，通過(guò)常壓常溫等離子體(artp)隨機(jī)誘變獲得了一株樟芝(antrodiacinnamomea)a2-14，保藏編號(hào)為cctcc?no：m?20241365，保藏日期：2024年06月24日。研究表明，本發(fā)明所得樟芝突變株生物合成三萜類化合物的產(chǎn)量較高(同等條件下為出發(fā)菌株約1.8倍)，具有較好的工業(yè)應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.樟芝(antrodia?cinnamomea)a2-14，保藏編號(hào)為cctcc?no：m?20241365，保藏日期：2024年06月24日。

2.權(quán)利要求1所述樟芝突變株a2-14的培養(yǎng)基，其特征在于該培養(yǎng)基主要由有機(jī)碳源、有機(jī)氮源與鹽溶液組成；其中，所述有機(jī)碳源、有機(jī)氮源與鹽溶液的配比為8.5g:1.0g:100ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)基，其特征在于：所述鹽溶液由水、kh2po4和mgso4·7h2o配制而成，每升鹽溶液中含kh2po4?1.0g、mgso4·7h2o?0.5g。

4.一種菌劑，其特征在于含有權(quán)利要求1所述樟芝突變株a2-14或其活性成分。

5.權(quán)利要求1所述樟芝突變株a2-14、權(quán)利要求2所述培養(yǎng)基或權(quán)利要求4所述菌劑在制備三萜類化合物中的應(yīng)用。

6.一種三萜類化合物的制備方法，其特征在于：使用權(quán)利要求2所述培養(yǎng)基培養(yǎng)權(quán)利要求1所述樟芝突變株a2-14，收集菌絲體，提取三萜化合物，即得。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于：所述培養(yǎng)基條件為ph?4.5、溫度29℃、搖床轉(zhuǎn)速180rpm，培養(yǎng)時(shí)間為28天。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于：所述培養(yǎng)基按以下配制：85.0g/l葡萄糖，10.0g/l酵母提取物，1.0g/l無(wú)水磷酸二氫鉀，0.5g/l七水硫酸鎂，用檸檬酸緩沖液調(diào)整ph為4.5。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于：所述培養(yǎng)中，孢子接種終濃度為1×105孢子/ml。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一株樟芝(Antrodia?cinnamomea)A2?14，保藏編號(hào)為CCTCC?NO：M20241365，保藏日期：2024年06月24日。該突變株是以樟芝突變菌株E2?3?7為出發(fā)菌株，通過(guò)常壓常溫等離子體(ARTP)隨機(jī)誘變而得。研究表明，本發(fā)明所得樟芝突變株生物合成三萜類化合物的產(chǎn)量較高(同等條件下為出發(fā)菌株約1.8倍)，具有較好的工業(yè)應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：馮家勛,趙帥,王雅玲
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣西大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21