本發(fā)明屬于功能微生物，具體涉及一種具有抗炎和分泌5-ht功能的戊糖片球菌菌株a20001及其衍生產(chǎn)品和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、近年來，腸道微生物在各種疾病中發(fā)揮作用日益突出，大量的“腸-腦”軸的研究表明，益生菌可以通過調(diào)節(jié)腸道中固有菌群豐度以及其相關(guān)的代謝分泌物的含量來影響大腦中神經(jīng)因子的表達，進而影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。開發(fā)出功能多樣且適配的益生菌對人體健康具有重大意義。

2、5-羥色胺(5-ht)又稱血清素，一類重要的神經(jīng)遞質(zhì)和信號分子，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周均發(fā)揮重大作用。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，參與調(diào)節(jié)情感、睡眠、攝食、體溫、活動與性活動。在周圍神經(jīng)系統(tǒng)中，參與血管緊張度和胃腸道運動的調(diào)節(jié)。例如腸道菌群5-ht與腸易激綜合癥有關(guān)，研究表明，腸道菌群能夠刺激單核巨噬細胞和肥大細胞，釋放5-ht，產(chǎn)生一系列促炎因子，抑制腸動力，介導腸道菌群與黏膜免疫系統(tǒng)的失調(diào)，最終產(chǎn)生內(nèi)臟高敏感性。此外，腸道菌群5-ht與阿爾茲海默癥也相關(guān)，研究證明運用ssri或直接增加細胞外5-ht的量能減少小鼠腦組織液中25％aβ含量。同時ssri能夠抑制5-ht重攝取，提高5-ht在腦內(nèi)的濃度，并通過與受體反應(yīng)降低aβ。此外，現(xiàn)有技術(shù)還公開了5-羥色胺與抑郁癥相關(guān)。公開號為cn114717148a的專利公開了一株緩解抑郁情緒的副干酪乳桿菌ccfm1229及其應(yīng)用，該菌株可以增加小鼠腦中的5-ht和bdnf濃度，具有緩解抑郁情緒的作用。再例如公開號cn116004455a的專利公開了一株具有分泌5-羥色胺(5-ht)功能的發(fā)酵粘液乳桿菌(limosilactobacillusfermentum)菌株a21196及其應(yīng)用，屬于功能微生物技術(shù)領(lǐng)域。所述菌株a21196不僅具有抑菌能力，還具有分泌5-ht的能力。

3、戊糖片球菌屬于革蘭氏陽性菌，作為人體共生菌，在預防病原菌感染、胃腸道炎癥中發(fā)揮作用。公開號為cn115851551a的專利公開了一株戊糖片球菌a21358具有抗幽門螺桿菌的作用，同時還具有降低胃腸道炎癥，維持腸道穩(wěn)態(tài)的作用。然而，目前還沒有關(guān)于戊糖片球菌同時具備抗炎、分泌5-ht的相關(guān)報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種新型戊糖片球菌菌株a20001，具有抗炎和分泌5-ht功能。

2、本發(fā)明提供了一種戊糖片球菌(pediococcuspentosaceus)菌株a20001，保藏編號為gdmcc?no：64674。

3、本發(fā)明提供了一種益生菌劑，活性成分包括所述戊糖片球菌菌株a20001。

4、優(yōu)選的，所述戊糖片球菌菌株a20001的形態(tài)包括戊糖片球菌菌體和/或戊糖片球菌芽孢。

5、優(yōu)選的，所述戊糖片球菌菌株a20001的濃度包括1×109cfu/mg～1×1011cfu/mg或1×109cfu/ml～1×1011cfu/ml。

6、優(yōu)選的，所述益生菌劑的劑型包括以下至少一種：片劑、滴劑、膠囊和粉劑。

7、本發(fā)明提供了所述戊糖片球菌菌株a20001或所述益生菌劑在制備富含5-羥色胺的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

8、本發(fā)明提供了一種所述戊糖片球菌菌株a20001分泌5-ht的測定方法，包括以下步驟：

9、將戊糖片球菌菌株a20001接種于mrs液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)，收集菌體，用hanks鹽平衡溶液重懸菌體后靜置培養(yǎng)，收集培養(yǎng)上清液上樣于高效液相色譜儀中檢測5-ht。

10、優(yōu)選的，所述高效液相色譜儀的檢測條件為：c18反相色譜柱的規(guī)格為200mm×4.6mm，直徑為5μm，流動相為0.02mol/l磷酸二氫鉀-甲醇溶液，流速為0.5ml/min，紫外檢測器，檢測波長為275nm。

11、優(yōu)選的，所述振蕩培養(yǎng)的溫度為36～38℃；

12、所述振蕩培養(yǎng)的時間為10～14h；

13、所述振蕩培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為120～220rpm；

14、所述靜置培養(yǎng)的時間為1.5～2.5h。

15、本發(fā)明提供了所述戊糖片球菌菌株a20001或所述益生菌劑在制備抗炎和/或5-ht缺乏導致的疾病的藥物中的應(yīng)用。

16、本發(fā)明提供了一種戊糖片球菌菌株a20001，保藏編號為gdmcc?no：64674。本發(fā)明從廣西健康百歲老人糞便中分離獲得菌株a20001，經(jīng)分子鑒定和形態(tài)鑒定屬于戊糖片球菌(pediococcuspentosaceus)。所述菌株a20001具有生長速度快的特點，接種2h內(nèi)即可進入對數(shù)生長期，并在14h時可達到穩(wěn)定期，該菌生長穩(wěn)定，在24h內(nèi)未出現(xiàn)衰亡期。采用高效液相色譜法(hplc)定性檢測結(jié)果顯示，菌株a20001具有自分泌5-ht的功能，并且分泌量優(yōu)于同樣本篩選的對照菌株a21196，109cfu/ml的菌種a20001自分泌5-ht的產(chǎn)量為2.898μg/ml，對照菌株a21196自分泌量為2.535μg/ml。同時，本發(fā)明還開展了體外炎癥模型檢測實驗，戊糖片球菌a20001菌株的處理能夠有效降低促炎因子的表達，并且抑制炎癥反應(yīng)的效果與商業(yè)菌株鼠李糖乳桿菌菌株gg(lgg)相當或更優(yōu)?？梢姡景l(fā)明提供的戊糖片球菌菌株a20001同時具備抗炎和分泌5-ht的功能，為腸道炎癥相關(guān)疾病和/或5-ht分泌不足導致的抑郁癥等疾病的治療提供了新思路。

17、本發(fā)明提供了一種所述戊糖片球菌菌株a20001分泌5-ht的測定方法，包括以下步驟：將戊糖片球菌菌株a20001接種于mrs液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)，收集菌體，用hanks鹽平衡溶液重懸菌體后靜置培養(yǎng)，收集培養(yǎng)上清液上樣于高效液相色譜儀中檢測5-ht。本發(fā)明提供的測定方法具有高效、簡便、靈敏、穩(wěn)定、重現(xiàn)性好的特點，適用于5-ht的定性定量快速分析。

技術(shù)特征：

1.一種戊糖片球菌(pediococcuspentosaceus)菌株a20001，其特征在于，保藏編號為gdmcc?no：64674。

2.一種益生菌劑，其特征在于，活性成分包括權(quán)利要求1所述戊糖片球菌菌株a20001。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述益生菌劑，其特征在于，所述戊糖片球菌菌株a20001的形態(tài)包括戊糖片球菌菌體和/或戊糖片球菌芽孢。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述益生菌劑，其特征在于，所述戊糖片球菌菌株a20001的濃度包括1×109cfu/mg～1×1011cfu/mg或1×109cfu/ml～1×1011cfu/ml。

5.根據(jù)權(quán)利要求2～4中任意一項所述益生菌劑，其特征在于，所述益生菌劑的劑型包括以下至少一種：片劑、滴劑、膠囊和粉劑。

6.權(quán)利要求1所述戊糖片球菌菌株a20001或權(quán)利要求2～5中任意一項所述益生菌劑在制備富含5-羥色胺的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

7.一種權(quán)利要求1所述戊糖片球菌菌株a20001分泌5-羥色胺的測定方法，其特征在于，包括以下步驟：

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述測定方法，其特征在于，所述高效液相色譜儀的檢測條件為：c18反相色譜柱的規(guī)格為200mm×4.6mm，直徑為5μm，流動相為0.02mol/l磷酸二氫鉀-甲醇溶液，流速為0.5ml/min，紫外檢測器，檢測波長為275nm。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述測定方法，其特征在于，所述振蕩培養(yǎng)的溫度為36～38℃；

10.權(quán)利要求1所述戊糖片球菌菌株a20001或權(quán)利要求2～5中任意一項所述益生菌劑在制備抗炎和/或5-羥色胺缺乏導致的疾病的藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種具有抗炎和分泌5?HT功能的戊糖片球菌(Pediococcus?pentosaceus)菌株A20001及其衍生產(chǎn)品和應(yīng)用，屬于功能微生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明從廣西健康百歲老人糞便中分離獲得菌株A20001，經(jīng)分子鑒定和形態(tài)鑒定屬于戊糖片球菌。所述戊糖片球菌菌株A20001同時具備抗炎和分泌5?HT的功能，為腸道炎癥相關(guān)疾病和/或5?HT分泌不足導致的抑郁癥等疾病的治療提供了新思路。

技術(shù)研發(fā)人員：銀夢,甘彩玉,盧金媚,羅衛(wèi)飛,蘆志龍,潘虹
受保護的技術(shù)使用者：廣西愛生生命科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21