本發(fā)明涉及拮抗耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌的噬菌體篩選，更具體地說(shuō)是涉及一種噬菌體a149及其在拮抗耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、糞腸球菌（ enterococcus?faecalis，?efs）是一種革蘭氏陽(yáng)性兼性厭氧細(xì)菌，在人和各種動(dòng)物的腸道中廣泛定植，被認(rèn)為是一種常見(jiàn)的腸道共生菌。但efs也可作為機(jī)會(huì)致病菌，引起菌血癥、心內(nèi)膜炎、尿道和傷口感染等疾病。隨著抗生素的廣泛使用，efs的耐藥性日趨嚴(yán)重，尤其是耐萬(wàn)古霉素腸球菌（vancomycin-resistant?enterococcus，vre）的出現(xiàn)，給臨床vre感染的治療帶來(lái)了困難。研究表明腸道內(nèi)的vre定植可能不引起癥狀，但可持續(xù)存在較長(zhǎng)的時(shí)間，成為vre的儲(chǔ)存庫(kù)，具有引起患者和他人感染的巨大風(fēng)險(xiǎn)。因此，開(kāi)發(fā)針對(duì)vre感染的抗生素替代方案迫在眉睫。

2、噬菌體是一種能夠感染并裂解細(xì)菌的病毒，可以在不損害其它微生物物種的情況下，靶向消滅特定細(xì)菌，在治療耐藥菌感染方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。此外，噬菌體容易獲得，殺菌速度快，對(duì)真核細(xì)胞無(wú)害安全，具有與其他抗菌藥物如抗生素、抗菌肽等的協(xié)同抑菌效應(yīng)，是一種十分有前景的抗生素替代療法。

3、如何提供一種能夠裂解耐萬(wàn)古霉素的糞腸球菌的烈性噬菌體是本領(lǐng)域技術(shù)人員亟需解決的技術(shù)問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明篩選出一株針對(duì)耐萬(wàn)古霉素的efs?v583的烈性噬菌體，對(duì)其進(jìn)行生物學(xué)特性及全基因組測(cè)序分析，并評(píng)價(jià)其在體外和體內(nèi)的抗菌能力，以期為開(kāi)發(fā)efs感染的噬菌體療法奠定基礎(chǔ)。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明實(shí)施例第一方面提供了一種拮抗耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌的噬菌體a149，所述噬菌體 (enterococcus?phage)a149保藏編號(hào)為cctcc?no:?m?20241804?，于2024年8月16日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國(guó).武漢.武漢大學(xué)。

4、本發(fā)明實(shí)施例第二方面提供了所述的噬菌體a149在制備治療和/或預(yù)防耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌感染的制劑中的應(yīng)用。

5、本發(fā)明實(shí)施例第三方面提供了治療和/或預(yù)防耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌感染的制劑，包括所述的噬菌體a149。

6、經(jīng)由上述的技術(shù)方案可知，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明以耐萬(wàn)古霉素的糞腸球菌v583為宿主菌，篩選到一株可以特異性裂解糞腸球菌的噬菌體，對(duì)噬菌體a149進(jìn)行多種細(xì)菌的裂解譜測(cè)定，結(jié)果顯示對(duì)糞腸球菌具有廣譜的裂解活性，對(duì)所測(cè)試的糞腸球菌有86.4%的覆蓋率，對(duì)所測(cè)試的屎腸球菌、金黃色葡萄球菌、單增李斯特菌和大腸桿菌均無(wú)裂解活性；而且小鼠腸道實(shí)驗(yàn)顯示，在噬菌體a149治療之后，治療組與對(duì)照組在治療后的兩天（day3，4）均有顯著差異，在第二天可降低v583載量達(dá)1.3個(gè)數(shù)量級(jí)。該結(jié)果證實(shí)a149可有效降低v583在小鼠腸道中的定植。

技術(shù)特征：

1.一種拮抗耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌的噬菌體a149，其特征在于，所述噬菌體(enterococcus?phage)a149保藏編號(hào)為cctcc?no:?m?20241804?，于2024年8月16日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國(guó).武漢.武漢大學(xué)。

2.權(quán)利要求1所述的噬菌體a149在制備治療和/或預(yù)防耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌感染的制劑中的應(yīng)用。

3.治療和/或預(yù)防耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌感染的制劑，其特征在于，包括權(quán)利要求1所述的噬菌體a149。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種噬菌體A149及其在拮抗耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌中的應(yīng)用，涉及拮抗耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌的噬菌體篩選技術(shù)領(lǐng)域，噬菌體(Enterococcus?phage)A149保藏編號(hào)為CCTCC?NO:M?20241804，于2024年8月16日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國(guó).武漢.武漢大學(xué)。本發(fā)明篩選出一株針對(duì)耐萬(wàn)古霉素的糞腸球菌的烈性噬菌體，對(duì)其進(jìn)行生物學(xué)特性及全基因組測(cè)序分析，并評(píng)價(jià)其在體外和體內(nèi)的抗菌能力，為開(kāi)發(fā)耐萬(wàn)古霉素的糞腸球菌感染的噬菌體療法奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)研發(fā)人員：張興林,馬俊飛,曾慧然,譚善杰,王武華,楊祥朋,李欣悅
受保護(hù)的技術(shù)使用者：臨沂大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21