一種制備高純度6’-o-反式桂皮酰梓醇的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種用聚酰胺為吸附材料進行常壓洗脫制得高純度6' -0-反式桂皮 酰梓醇的方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 胡黃連為我國的傳統(tǒng)中藥，是玄參科植物胡黃連的干燥根莖，應(yīng)用歷史悠久，療效 確切。主要功效清熱，涼血，燥濕。治疳疾，驚癇，瀉痢，勞熱骨蒸，自汗，盜汗，吐血，衄血，火 目艮，痔瘺，瘡瘍。6' -0-反式桂皮酰梓醇是胡黃連的主要有效成分之一，具有抗菌、保肝利 膽和保護神經(jīng)細胞的作用。
[0003] 已有的制備6' -0-反式桂皮酰梓醇的專利有二，其一（專利號：201310618996. 8) 主要技術(shù)為采用高壓制備液相進行分離制得高純度的6' -0-反式桂皮酰梓醇，此法上樣 量小、效率低、耗材昂貴，增加了 6' -0-反式桂皮酰梓醇的生產(chǎn)成本；另一專利(專利號： 200710164321. 5)所用溶劑為丙酮，丙酮易燃、易揮發(fā)，有毒，為后期的殘留檢查帶來麻煩， 同時也不利于工業(yè)化生產(chǎn)過程中的勞動保護。本技術(shù)采用常壓方法，上樣量大、成本低、效 率高，采用無毒性溶劑等優(yōu)點，特別適用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
[0004] 6' -0-反式桂皮酰梓醇的結(jié)構(gòu)式為：


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 采用專利（專利號：201110400683. 6)所介紹的10-香莢酰梓醇制備的方法制備 10-香莢酰梓醇后所剩的提取物為原料，加適量硅膠拌樣，進行硅膠柱層析分離，濕法裝柱， 干法上樣，用乙酸乙酯為洗脫溶劑洗脫，初期洗脫雜質(zhì)，繼續(xù)洗脫可得到純度不低于70%的 6' -〇-反式桂皮酰梓醇。
[0006] 聚酰胺柱洗脫：將所得的純度不低于70%的6' -0-反式桂皮酰梓醇轉(zhuǎn)為水液上聚 酰胺柱，用水洗脫，初期洗脫液無6' -0-反式桂皮酰梓醇，繼續(xù)洗，收集洗脫液即可得到純 度不低于90%的6' -0-反式桂皮酰梓醇。
[0007] 本發(fā)明含量測定用HPLC檢測方法為： 標(biāo)準(zhǔn)樣品液的配制 精密稱取5mg 6' -0-反式桂皮酰梓醇對照品置于50ml的容量瓶中，加水，超聲溶解定 容，作為標(biāo)準(zhǔn)樣品液，濃度為〇. lmg/ml。
[0008] 測試樣品液的配制 精密稱取5mg 6'-0_反式桂皮酰梓醇樣品置于50ml的容量瓶中，加水，超聲溶解定容， 作為測試樣品液，濃度為0. lmg/ml。
[0009] 檢測條件： 流動相：乙腈一水一冰醋酸（25:75:0. 5)經(jīng)混合，過濾，脫氣后使用；色譜柱：0DS-C18 柱4. 6X250mm，流速：0. 8ml/min，進樣體積：20ul，檢測波長：282nm，6'-〇-反式桂皮酰梓 醇保留時間：為12. 5-15min。
[0010]
【具體實施方式】： 以下實施例對本發(fā)明作具體說明，對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步描述，但是本發(fā)明的 保護范圍并不限于這些實施例所包含內(nèi)容。
[0011] 實施例1。
[0012] 1)裝柱：聚酰胺20g，95%乙醇浸泡，除去氣泡后裝柱，繼續(xù)用95%乙醇洗脫，洗至 洗脫液澄清透明；再用酸堿交替處理，最后水洗至中性即可。
[0013] 2)上樣：取適量硅膠柱處理后的6'-0-反式桂皮酰梓醇轉(zhuǎn)為水液上聚酰胺柱，含 6' -0-反式桂皮酰梓醇0. 5g。
[0014] 3)洗脫：用水為溶劑洗脫，每IOml收集一次，用高效液相跟蹤監(jiān)測，前30ml (第 一個柱床）無6' -0-反式桂皮酰梓醇；40ml - 60ml (第二柱床）洗下6' -0-反式桂皮酰梓 醇，純度不低于90%，約占上樣量的50% ;繼續(xù)洗直至無6' -0-反式桂皮酰梓醇。
[0015] 4)取步驟3收集的6' -0-反式桂皮酰梓醇不低于90%的流出液回收溶劑，減壓 蒸干即得6' -〇-反式桂皮酰梓醇粉末，稱重得質(zhì)量為0. 28g，純度93%。
[0016] 5)聚酰胺柱再生：用95%乙醇洗，洗至乙醇無色，再用水替換柱中乙醇即可。
[0017] 實施例2。
[0018] 1)裝柱：聚酰胺3kg裝大柱，95%乙醇浸泡，除去氣泡后裝柱，繼續(xù)用95%乙醇洗 脫，洗至洗脫液澄清透明；再用酸堿交替處理，最后水洗至中性備用。
[0019] 2)上樣：取適量硅膠柱處理后的6' -0-反式桂皮酰梓醇水液1600ml上聚酰胺 柱，含6' -0-反式桂皮酰梓醇50g。
[0020] 3)洗脫：水為洗脫液洗脫，每800ml收集一次，用高效液相跟蹤監(jiān)測，前8000ml (第一個柱床）無6' -0-反式桂皮酰梓醇；9000ml - 16000ml (第二柱床）洗下6' -0-反式 桂皮酰梓醇，純度不低于90%，約占上樣量的85% ;繼續(xù)洗直至無6' -0-反式桂皮酰梓醇即 可。
[0021] 4)取步驟3收集的6' -0-反式桂皮酰梓醇不低于90%的流出液回收溶劑，減壓 蒸干即得6' -〇-反式桂皮酰梓醇粉末，稱重得質(zhì)量為42. 5g，純度92%。
[0022] 5)聚酰胺柱再生：用95%乙醇洗，洗至乙醇無色，再用水替換柱中乙醇即可。
【主權(quán)項】
1. 常壓柱層析制備高純度6' -O-反式桂皮酰梓醇，其特征在于，常壓條件下以制備 10-香莢酰梓醇后所剩的提取物為原料，硅膠柱層析結(jié)合聚酰胺柱層析制備含量不低于 90%的高純度6' -0-反式桂皮酰梓醇。2. 如權(quán)利要求1中所述的高純度6' -0-反式桂皮酰梓醇制備方法，其特征在于，所用 吸附材料為聚酰胺。3. 如權(quán)利要求1所述的高純度6' -0-反式桂皮酰梓醇制備方法，其特征在于，初期采 用硅膠柱層析，洗脫液為乙酸乙酯、無水乙醇或二者一定比例混合。4. 如權(quán)利要求1中所述的高純度6' -0-反式桂皮酰梓醇制備方法，其特征在于，層析 聚酰胺做固定相、水做流動相，進行常壓柱層析。5. 如權(quán)利要求1中所述的高純度6' -0-反式桂皮酰梓醇制備方法，其特征在于，所用 聚酰胺為20-100目。6. 如權(quán)利要求1中所述的高純度6' -0-反式桂皮酰梓醇制備方法，其特征在于，每 100mL聚酰胺上樣品（按純品計）5g以下。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種高純度6’-O-反式桂皮酰梓醇的制備方法，所用原料為采用專利（專利號：201110400683.6）“10-香莢酰梓醇制備的方法” 所介紹的制備10-香莢酰梓醇后所剩的提取物，經(jīng)初步分離后，以硅膠為固定相，用洗脫劑進行洗脫分離，回收溶劑轉(zhuǎn)為水液，以聚酰胺為固定相，水洗脫，即可得純度不低于90%的6’-O-反式桂皮酰梓醇，拓展了6’-O-反式桂皮酰梓醇的分離提純方法。本技術(shù)采用常壓方法，成本低，效率高，特別適用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
【IPC分類】C07H1/06, C07H17/04
【公開號】CN104892699
【申請?zhí)枴緾N201510224528
【發(fā)明人】劉文卉, 劉培冉, 楊濤, 賀靈劍, 李嘯然, 孫士青
【申請人】濟南東源生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司
【公開日】2015年9月9日
【申請日】2015年5月5日