一種皺木耳多糖的提取方法
【專(zhuān)利摘要】一種皺木耳多糖的提取方法，它涉及一種多糖的提取方法。它要解決目前黑木耳多糖的提取方法不適用于提取皺木耳多糖，存在提取率低，耗時(shí)長(zhǎng)，多糖損失嚴(yán)重的問(wèn)題。方法：一、制備皺木耳粉；二、采用纖維素酶制備酶解液；三、制備浸提液；四、對(duì)浸提液進(jìn)行脫色和醇沉；五、沉淀物烘干，獲得皺木耳多糖。本發(fā)明采用酶解法提取皺木耳多糖，纖維素酶不僅可以水解細(xì)胞壁中的主要成分，使細(xì)胞壁破裂，有利于多糖流出，提高溶出率，多糖損失少，純度較高，還可以為后續(xù)提取液的純化創(chuàng)造有利條件；反應(yīng)條件溫和，無(wú)需加入其它化學(xué)試劑，耗時(shí)短，可以有力的保護(hù)多糖結(jié)構(gòu)。本發(fā)明提取方法簡(jiǎn)單，適合推廣使用，為今后皺木耳多糖的研究提供技術(shù)支持。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種皺木耳多糖的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種多糖的提取方法，具體涉及一種皺木耳多糖的短時(shí)高效提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]木耳是一種珍貴的藥食兩用真菌。木耳含有豐富的多糖，如巖藻糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、木糖和葡萄糖醛酸。木耳多糖是從木耳中提取的多糖成分，具有獨(dú)特的生理功能，所以受到了人們廣泛關(guān)注，它已成為木耳開(kāi)發(fā)利用的熱點(diǎn)。木耳多糖是木耳的重要活性成分，包括抗腫瘤和免疫活動(dòng)，抗衰老活性，降血糖活性，抗氧化活性、保肝、降血脂、降壓、抑制血小扳聚集、抗血栓形成、提高機(jī)體免疫功能、改善心肌缺氧、抗?jié)?、抗放射、?duì)組織損傷具有保護(hù)作用等。
[0003]皺木耳，別名脆木耳、多皺木耳、木耳、砂耳子;實(shí)體一般較小，耳狀、膠質(zhì)、稍堅(jiān)韌，可食用，質(zhì)地較脆，往往產(chǎn)量大，便于收集?？伤幱?，補(bǔ)氣血、潤(rùn)肺、止血。有滋潤(rùn)、強(qiáng)壯、通便之功效，并能治痔。皺木耳多糖有提高機(jī)體免疫機(jī)能的作用。皺木耳多糖能使血清TC、LDL-C顯著下降，并相對(duì)提高血清HDL-C，可見(jiàn)皺木耳多糖對(duì)冠心病和動(dòng)脈粥樣硬化有良好的防治作用，具有較好的降血脂作用。皺木耳資源豐富，價(jià)格低廉，值得進(jìn)一步開(kāi)發(fā)研究，它對(duì)中老人會(huì)產(chǎn)生良好的保健作用。
[0004]目前，研究人員對(duì)黑木耳多糖提取方法進(jìn)行了大量的研究，但他們主要集中于傳統(tǒng)的水提醇沉法研究木耳得到粗多糖。此方法不適用于提取皺木耳多糖，存在提取率低，耗時(shí)長(zhǎng)，多糖損失嚴(yán)重的問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是解決目前黑木耳多糖的提取方法不適用于提取皺木耳多糖，存在提取率低，耗時(shí)長(zhǎng)，多糖損失嚴(yán)重的問(wèn)題，而提供一種皺木耳多糖的提取方法。
[0006]—種皺木耳多糖的提取方法，按以下步驟實(shí)現(xiàn):
[0007]一、鄒木耳粉的制備:用粉碎機(jī)將皺木耳全部粉碎，然后過(guò)40目篩，獲得皺木耳粉；
[0008]二、纖維素酶酶解:向步驟一所得皺木耳粉中加入質(zhì)量濃度為4%_5%的纖維素酶溶液進(jìn)行酶解，然后以8_12°C/min的速率升溫至80°C，滅酶，獲得酶解液；
[0009]三、浸提:步驟二所得酶解液于50°C水浴鍋浸提1.5-2.5h，獲得浸提液；
[0010]四、脫色和醇沉:步驟三所得浸提液離心，過(guò)濾取上層清液，80°C水浴，并滴加質(zhì)量濃度為30 %的雙氧水進(jìn)行脫色，然后用3倍體積的質(zhì)量濃度為95 %的乙醇溶液進(jìn)行醇沉，靜置2-3h，獲得沉淀物；
[0011]五、烘干:取出沉淀物置于平皿中放入烘箱烘干，獲得皺木耳多糖，即完成皺木耳多糖的提取。
[0012]本發(fā)明采用酶解法提取皺木耳多糖，主要是因?yàn)榘櫮径募?xì)胞壁堅(jiān)韌，成分比較單一，主要為幾丁質(zhì)(一種乙酰葡萄糖胺的多聚體)，并含有少量的葡聚糖和纖維素。在多糖提取過(guò)程中適當(dāng)加入纖維素酶不僅可以水解細(xì)胞壁中的主要成分，使細(xì)胞壁破裂，有利于多糖流出，提高溶出率，還可以為后續(xù)提取液的純化創(chuàng)造有利條件；
[0013]本發(fā)明提取效率高，多糖損失少:酶解法提取木耳多糖的反應(yīng)條件溫和，無(wú)需加入其它化學(xué)試劑(例如酸堿浸提法會(huì)加入強(qiáng)酸強(qiáng)堿)，無(wú)需高溫處理(例如水浸提法需要長(zhǎng)時(shí)的高溫)，而且提取耗時(shí)短，可以有力的保護(hù)多糖結(jié)構(gòu)，多糖純度較高。
[0014]本發(fā)明提取方法簡(jiǎn)單，適合推廣使用，為今后皺木耳多糖的研究提供技術(shù)支持。
【具體實(shí)施方式】
[0015]本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉的【具體實(shí)施方式】，還包括各【具體實(shí)施方式】之間的任意組合。
[0016]【具體實(shí)施方式】一:本實(shí)施方式一種皺木耳多糖的提取方法，按以下步驟實(shí)現(xiàn):
[0017]—、鄒木耳粉的制備:用粉碎機(jī)將皺木耳全部粉碎，然后過(guò)40目篩，獲得皺木耳粉；
[0018]二、纖維素酶酶解:向步驟一所得皺木耳粉中加入質(zhì)量濃度為4%_5%的纖維素酶溶液進(jìn)行酶解，然后以8_12°C/min的速率升溫至80°C，滅酶，獲得酶解液；
[0019]三、浸提:步驟二所得酶解液于50°C水浴鍋浸提1.5-2.5h，獲得浸提液；
[0020]四、脫色和醇沉:步驟三所得浸提液離心，過(guò)濾取上層清液，80°C水浴，并滴加質(zhì)量濃度為30 %的雙氧水進(jìn)行脫色，然后用3倍體積的質(zhì)量濃度為95 %的乙醇溶液進(jìn)行醇沉，靜置2-3h，獲得沉淀物；
[0021]五、烘干:取出沉淀物置于平皿中放入烘箱烘干，獲得皺木耳多糖，即完成皺木耳多糖的提取。
[0022]本實(shí)施方式步驟一中的皺木耳粉，收集到密封的容器中，在陰涼干燥處存放，可供隨時(shí)使用。
[0023]【具體實(shí)施方式】二:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一不同是:步驟二中向步驟一所得皺木耳粉中加入質(zhì)量濃度為4.5%的纖維素酶溶液。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一相同。
[0024]【具體實(shí)施方式】三:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一不同是:步驟二中皺木耳粉與纖維素酶溶液的固液比為1:1。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一相同。
[0025]【具體實(shí)施方式】四:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一不同是:步驟二中酶解條件為:500C、pH 5.0的條件下酶解3-4h。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一相同。
[0026]【具體實(shí)施方式】五:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一不同是:步驟二中以10°C/min的速率升溫至80°C。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一相同。
[0027]【具體實(shí)施方式】六:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一不同是:步驟三中酶解液于50°C水浴鍋浸提2h。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一相同。
[0028]【具體實(shí)施方式】七:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一不同是:步驟四中離心條件為:4500r/min離心lOmin。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一相同。
[0029]【具體實(shí)施方式】八:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一不同是:步驟五中烘干條件為:100-110°C下烘干2h。其它步驟及參數(shù)與【具體實(shí)施方式】一相同。
[0030]通過(guò)以下實(shí)施例驗(yàn)證本發(fā)明的有益效果:
[0031 ] 實(shí)施例
[0032]—種皺木耳多糖的提取方法，按以下步驟實(shí)現(xiàn):
[0033]一、鄒木耳粉的制備:用粉碎機(jī)將皺木耳全部粉碎，然后過(guò)40目篩，獲得皺木耳粉；
[0034]二、纖維素酶酶解:向步驟一所得皺木耳粉中加入質(zhì)量濃度為4%的纖維素酶溶液，于50°C、pH 5.0的條件下酶解3.5h，然后以10 °C/min的速率升溫至80°C，滅酶，獲得酶解液；
[0035]三、浸提:步驟二所得酶解液于50°C水浴鍋浸提2h，獲得浸提液；
[0036]四、脫色和醇沉:步驟三所得浸提液以4500r/min的速率離心lOmin，過(guò)濾取上層清液，80 0C水浴，并滴加質(zhì)量濃度為30 %的雙氧水進(jìn)行脫色，然后用3倍體積的質(zhì)量濃度為95 %的乙醇溶液進(jìn)行醇沉，靜置2.5h，獲得沉淀物；
[0037]五、烘干:取出沉淀物置于平皿中放入烘箱，105°C下烘干2h，獲得皺木耳多糖，SP完成皺木耳多糖的提取。
[0038]本實(shí)施例中所得皺木耳多糖的提取效率高，酶解法提取木耳多糖的得率與水浸提法的得率相比，酶解法的多糖得率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于水浸提法。酶解法可以將提取率提高35%-45%，而且酶解法提取木耳多糖的反應(yīng)條件溫和，無(wú)需加入其它化學(xué)試劑，無(wú)需高溫處理，多糖損失少。
[0039]雖然采用實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。但是應(yīng)該理解的是，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種皺木耳多糖的提取方法，其特征在于它按以下步驟實(shí)現(xiàn): 一、鄒木耳粉的制備:用粉碎機(jī)將皺木耳全部粉碎，然后過(guò)40目篩，獲得皺木耳粉； 二、纖維素酶酶解:向步驟一所得皺木耳粉中加入質(zhì)量濃度為4%_5%的纖維素酶溶液進(jìn)行酶解，然后以8_12°C/min的速率升溫至80°C，滅酶，獲得酶解液； 三、浸提:步驟二所得酶解液于50V水浴鍋浸提1.5-2.5h，獲得浸提液； 四、脫色和醇沉:步驟三所得浸提液離心，過(guò)濾取上層清液，80V水浴，并滴加質(zhì)量濃度為30 %的雙氧水進(jìn)行脫色，然后用3倍體積的質(zhì)量濃度為95 %的乙醇溶液進(jìn)行醇沉，靜置2-3h，獲得沉淀物； 五、烘干:取出沉淀物置于平皿中放入烘箱烘干，獲得皺木耳多糖，即完成皺木耳多糖的提取。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種皺木耳多糖的提取方法，其特征在于步驟二中向步驟一所得皺木耳粉中加入質(zhì)量濃度為4.5%的纖維素酶溶液。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種皺木耳多糖的提取方法，其特征在于步驟二中皺木耳粉與纖維素酶溶液的固液比為1:1。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種皺木耳多糖的提取方法，其特征在于步驟二中酶解條件為:50°C、pH 5.0的條件下酶解3-411。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種皺木耳多糖的提取方法，其特征在于步驟二中以10°C/min的速率升溫至80 °C。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種皺木耳多糖的提取方法，其特征在于步驟三中酶解液于50°C水浴鍋浸提2h。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種皺木耳多糖的提取方法，其特征在于步驟四中離心條件為:4500r/min 離心 lOmin。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種皺木耳多糖的提取方法，其特征在于步驟五中烘干條件為:100-110 °C 下供干 2h。
【文檔編號(hào)】C08B37/08GK105968232SQ201610594793
【公開(kāi)日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2016年7月26日
【發(fā)明人】李良, 潘磊, 王笑穎, 陳浩然, 楊曉宇, 洪瑞
【申請(qǐng)人】東北農(nóng)業(yè)大學(xué)