一種動(dòng)物組織提取dna方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種動(dòng)物組織提取DNA方法，包括如下步驟：將動(dòng)物組織裂解后，得到裂解混合液；向所述裂解混合液中加入鹽?炭混合液，混勻后依次冰浴、離心，得到上清液；向所述上清液中加入異丙醇，混勻后得到絮狀沉淀混合液；將所述絮狀沉淀混合液離心后得到DNA沉淀。本發(fā)明采用的動(dòng)物組織DNA提取方法，利用無毒的NaCl和活性炭代替現(xiàn)有方法中的苯酚、氯仿等有毒試劑，降低了提取動(dòng)物組織DNA提取過程中的安全風(fēng)險(xiǎn)；本發(fā)明提取的基本原理是利用DNA在高鹽度條件下與其他物質(zhì)的溶解度差異以及活性炭的吸附作用，實(shí)現(xiàn)DNA與雜質(zhì)物質(zhì)的分離。
【專利說明】
一種動(dòng)物組織提取DNA方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種動(dòng)物組織提取DNA方法。
【背景技術(shù)】
[0002]DNA(為英文Deoxyribonucleic acid的縮寫)，又稱脫氧核糖核酸，是染色體的主要化學(xué)成分，同時(shí)也是基因組成的，有時(shí)被稱為“遺傳微?！?。DNA是一種分子，可組成遺傳指令，以引導(dǎo)生物發(fā)育與生命機(jī)能運(yùn)作。主要功能是長期性的資訊儲(chǔ)存，可比喻為“藍(lán)圖”或“食譜”。其中包含的指令，是建構(gòu)細(xì)胞內(nèi)其他的化合物，如蛋白質(zhì)與RNA所需。帶有遺傳信息的DNA片段稱為基因，其他的DNA序列，有些直接以自身構(gòu)造發(fā)揮作用，有些則參與調(diào)控遺傳信息的表現(xiàn)。
[0003]DNA作為生物體內(nèi)的遺傳物質(zhì)之一，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物中，是分子生物學(xué)研究的重要實(shí)驗(yàn)材料，在動(dòng)物的分子生物學(xué)研究中有，往往需要提取動(dòng)物組織的DNA。
[0004]雖然現(xiàn)在動(dòng)物組織DNA提取的方法有很多，例如酚氯仿抽提法，操作繁瑣，往往需要反復(fù)抽提，而且操作過程中多次用到氯仿、苯酚等多種有毒的有機(jī)試劑;高鹽CTAB法，這種方法雖然操作簡單，但是多用于植物組織中DNA的提取，對(duì)于動(dòng)物內(nèi)臟組織提取的成功率較低，而且該方法產(chǎn)物雜質(zhì)較多。
[0005]有鑒于此，特提出此發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種動(dòng)物組織DNA提取方法，本方法主要利用高鹽度條件下DNA與其他物質(zhì)的溶解度差異以及活性炭的吸附作用，實(shí)現(xiàn)DNA與雜質(zhì)物質(zhì)的分離，并且本方法不僅操作簡單、成功率高、產(chǎn)物質(zhì)量好。
[0007]為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案:
[0008]—種動(dòng)物組織提取DNA方法，包括如下步驟:
[0009]將動(dòng)物組織裂解后，得到裂解混合液；
[0010]向所述裂解混合液中加入鹽-炭混合液，混勻后依次冰浴、離心，得到上清液；
[0011 ]向所述上清液中加入異丙醇，混勻后得到絮狀沉淀混合液；
[0012]將所述絮狀沉淀混合液離心后得到DNA沉淀。
[0013]本發(fā)明采用的動(dòng)物組織DNA提取方法，利用無毒的NaCl和活性炭代替現(xiàn)有方法中的苯酚、氯仿等有毒試劑，降低了提取動(dòng)物組織DNA提取過程中的安全風(fēng)險(xiǎn);本發(fā)明提取的基本原理是利用DNA在高鹽度條件下與其他物質(zhì)的溶解度差異以及活性炭的吸附作用，實(shí)現(xiàn)DNA與雜質(zhì)物質(zhì)的分離。
[0014]優(yōu)選地，裂解方法是:向動(dòng)物組織中加入裂解液和蛋白酶，在50°C?60°C條件下恒溫振蕩2?3Hr，得到裂解混合液。
[0015]在動(dòng)物組織DNA提取方法中，巨大的基因組DNA是很容易纏住大分子的蛋白質(zhì)，對(duì)于這些纏繞住DNA的大分子蛋白質(zhì)是非常難以去除的，影響提取的DNA純度；因此，本專利提供的DNA提取方法中，裂解液的作用是破壞細(xì)胞膜、核膜，并使組織蛋白與DNA分離，抑制細(xì)胞中脫氧核糖核酸酶的活性;蛋白酶的作用是使大分子的蛋白質(zhì)變小，對(duì)蛋白質(zhì)的游離有巨大的促進(jìn)作用。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)被蛋白酶消化變小后，則不容易被基因組DNA纏住，有利于蛋白質(zhì)在純化過程中的去除，使最終獲得的DNA的純度更高。該方法不僅操作簡單、成功率高、產(chǎn)物質(zhì)量好，而且解決了現(xiàn)有的動(dòng)物組織DNA提取方法中組織裂解不徹底的問題，提高了提取效率。
[0016]本發(fā)明采用的動(dòng)物組織DNA提取方法中，裂解液和蛋白酶的選擇均會(huì)影響提取的成功率及最終的產(chǎn)物純度。
[0017]優(yōu)選地，每I升所述裂解液中，含有20mlIM Tris-HCl(pH8.0)、1ml 0.5M EDTA、23.376g NaClaOOml 10%SDS，余量為蒸餾水。
[0018]更優(yōu)選地，所述蛋白酶為蛋白酶K。
[0019]經(jīng)過多次驗(yàn)證，采用上述裂解液及蛋白酶K，使動(dòng)物組織裂解非常徹底，增加了提取方法成功率、產(chǎn)物質(zhì)量好，并且提高了提取的效率。
[0020]優(yōu)選地，在所述向所述裂解混合液中加入鹽-炭混合液，混勻后依次冰浴、離心，得到上清液的步驟中:
[0021 ] 所述離心過程是在12000rpm條件下離心10?20min;
[0022]所述冰浴過程是10?20min。
[0023]本專利采用的動(dòng)物組織DNA提取方法中，冰浴過程是為了使不溶性蛋白發(fā)生沉淀，保持10?20min的冰浴時(shí)間基本上實(shí)現(xiàn)了大部分不溶性蛋白的析出，通過12000rpm的離心10?20min，實(shí)現(xiàn)了沉淀及上清液的分離，提高了最終DNA的產(chǎn)物質(zhì)量。
[0024]更優(yōu)選地，為保證提取出質(zhì)量更好的DNA，離心過程是在12000rpm條件下離心15min；
[0025]冰浴過程是15min D
[0026]優(yōu)選地，在得到所述絮狀沉淀混合液之后還包括:將所述絮狀沉淀混合液在-15 °C?-25°C條件下放置I?3Hr;
[0027]或?qū)⑺鲂鯛畛恋砘旌弦涸贠0C?6 °C條件下放置8?16Hr。
[0028]在本發(fā)明采用的動(dòng)物組織DNA提取方法中，在加入異丙醇之后可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀較少或不出現(xiàn)絮狀沉淀的現(xiàn)象，因此將絮狀沉淀混合液放置于_15°C?_25°C條件下放置I?3Hr或?qū)⑺鲂鯛畛恋砘旌弦涸贠 0C?6 °C條件下放置8?16Hr，在上述條件下能夠使得絮狀沉淀物的完全析出。
[0029]更優(yōu)選地的，為增加絮狀沉淀物的析出，將絮狀沉淀混合液放置于-20°C條件下放置 2Hr;
[0030]或?qū)⑺鲂鯛畛恋砘旌弦涸?°C條件下放置12Hr。
[0031]優(yōu)選地，在得到所述DNA沉淀之后還包括:
[0032]將所述DNA沉淀完全溶解于TE緩沖液中，得到DNA儲(chǔ)存液。
[0033]TE緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時(shí)抵抗pH改變的溶液。PH緩沖系統(tǒng)對(duì)維持生物的正常pH值，正常生理環(huán)境起重要作用。多數(shù)細(xì)胞僅能在很窄的pH范圍內(nèi)進(jìn)行活動(dòng)，而且需要有緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現(xiàn)的PH變化。因此，在本專利采用的動(dòng)物組織DNA提取方法中，采用TE緩沖液溶解DNA，起到穩(wěn)定儲(chǔ)存DNA的目的。
[0034]在生物體中有三種主要的pH緩沖體系，它們是蛋白質(zhì)、重碳酸鹽緩沖體系和磷酸鹽緩沖體系。每種緩沖體系所占的分量在各類細(xì)胞和器官中是不同的；因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)不同的動(dòng)物組織選擇不同的TE緩沖液。
[0035]優(yōu)選地，在得到所述DNA沉淀之后還包括:
[0036]向所述DNA沉淀中加入乙醇沖洗后離心，吸除乙醇后風(fēng)干，得到精制DNA沉淀。
[0037]本專利采用的動(dòng)物組織DNA提取方法中，將所述絮狀沉淀混合液離心后得到的DNA沉淀可能還會(huì)包含一部分雜質(zhì)，例如異丙醇。因此向所述DNA沉淀中加入乙醇進(jìn)行沖洗，并采用槍頭將乙醇吸除后風(fēng)干，即可得到精制DNA。因此，DNA沉淀經(jīng)過乙醇清洗后吸除并風(fēng)干，基本上能偶去除DNA沉淀上殘留的異丙醇，使最終得到的精制DNA沉淀產(chǎn)物質(zhì)量高。
[0038]優(yōu)選地，在所述向DNA沉淀中加入乙醇沖洗后離心，吸除乙醇后風(fēng)干，得到精ffjljDNA沉淀的步驟中:
[0039 ] 所述離心過程是在12000rpm條件下離心0.5?2min。
[0040]優(yōu)選地，所述鹽-炭混合液為每30ml飽和NaCl溶液中加入Ig活性炭混合得到。
[0041]由現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明提供的一種動(dòng)物組織DNA提取方法，利用高鹽度條件下DNA與其他物質(zhì)的溶解度差異以及活性炭的吸附作用，實(shí)現(xiàn)DNA與雜質(zhì)物質(zhì)的分離，本方法不僅操作簡單、成功率高，而且得到的產(chǎn)物質(zhì)量好。
【具體實(shí)施方式】
[0042]下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0043]實(shí)施例1
[0044]為說明本專利所采用技術(shù)方案效果，本實(shí)施例1提供現(xiàn)有技術(shù)中的動(dòng)物組織DNA提取方法一一酚氯仿抽提法，其具體實(shí)驗(yàn)過程如下:
[0045]I)、取組織樣并剪碎置于1.5mL離心管中；
[0046]2 )、向離心管中加入組織裂解液和蛋白酶K混合液，在37 0C水浴條件下放置12Hr;
[0047]3 )、向離心管中加平衡酚500uL，充分混勻，4°C、12000rpm條件下離心15min;
[0048]4)、小心吸取上層水相至另一離心管中；
[0049]5)、重復(fù)步驟3和4;
[0050]6)、向離心管中加氯仿-異戊醇(比例24:l)500uL，充分混勻，4°C、12000rpm條件下離心15min，小心吸取上層水相至另一離心管中
[0051 ] 7)、重復(fù)步驟6直到看不到蛋白凝膠為止；
[0052]8)、準(zhǔn)確量取上清，并轉(zhuǎn)移到新的離心管中，向離心管中加入2倍體積的冷乙醇，4°C放置IHr，可見絮狀DNA析出；
[0053]9)、在4°C、12000rpm條件下離心15分鐘，得到DNA沉淀，棄掉上清液；
[0054]10)、向上述DNA沉淀中加入500uL70%乙醇，12000rpm離心10分鐘，棄上清，重復(fù)兩次；
[0055]11)、自然風(fēng)干DNA沉淀10分鐘；
[0056]12)、向DNA沉淀中加入10uL TE緩沖液或雙蒸水，在4°C條件下12Hr使DNA沉淀溶解;妥善保存該DNA儲(chǔ)存液。
[0057]現(xiàn)有技術(shù)中的酚氯仿抽提法，采用平衡酚及氯仿對(duì)動(dòng)物組織進(jìn)行處理，并且需要進(jìn)行多次重復(fù)操作;平衡酚和氯仿具有較大的毒性，因此在采用酚氯仿抽提法進(jìn)行動(dòng)物組織DNA提取過程中，需要特別注意實(shí)驗(yàn)安全問題。
[0058]實(shí)施例2
[0059]I)、剪取動(dòng)物組織并剪碎，將其放入1.5mL的離心管中；
[0060]2)、向離心管中加入500uL裂解液和20uL蛋白酶K(兩者可預(yù)先混好)，將離心管放置于恒溫振蕩器中55°C振蕩2小時(shí)；
[0061]3)、取出裂解充分的離心管，向每管中加入300uL鹽-炭混合液(用前震蕩混勻)，顛倒混勻6-8次后冰浴15分鐘；
[0062]4)、在12000rpm、室溫條件下離心15分鐘，小心地取上清500uL至新的1.5mL的Axgen離心管中(在吸取的過程中小心避免吸到沉淀)；
[0063]5)、加入等體積的500uL異丙醇于Axgen離心管中，顛倒直至形成絮狀沉淀；
[0064]6)、在12000rpm、室溫條件離心15分鐘后棄上清，得到DNA沉淀。
[0065]本實(shí)施例提供的一種動(dòng)物組織DNA提取方法中，利用無毒的NaCl和活性炭代替現(xiàn)有方法中的苯酚、氯仿等有毒試劑，降低了提取動(dòng)物組織DNA提取過程中的安全風(fēng)險(xiǎn);本發(fā)明提取的基本原理是利用DNA在高鹽度條件下與其他物質(zhì)的溶解度差異以及活性炭的吸附作用，實(shí)現(xiàn)DNA與雜質(zhì)物質(zhì)的分離。
[0066]在本實(shí)施例中，裂解液的制備方法是:將20ml IM Tris-HCl (pH8.0)、1ml 0.5MEDTA、23.376g NaCl、100ml 10%SDS混合后，用蒸餾水定容至IL。為保證本專利中最終提取物的質(zhì)量，此裂解液在使用前需要進(jìn)行高壓滅菌操作；
[0067]在本實(shí)施例中，蛋白酶K的最終使用濃度為0.4mg/ml;該蛋白酶K一般需要在-20°C條件下保存，并且在制備該蛋白酶K的過程中采用的溶劑為無菌水。
[0068]在本實(shí)施例中，鹽-炭混合液的制備方法是:每30ml飽和NaCl溶液加入Ig活性炭混合而成，其中活性炭優(yōu)選為粉末狀活性炭;一方面粉末狀活性炭能夠增加吸附面積，提高吸附效率，使得雜質(zhì)的吸附更為完全。
[0069]在動(dòng)物組織DNA提取方法中，巨大的基因組DNA是很容易纏住大分子的蛋白質(zhì)，對(duì)于這些纏繞住DNA的大分子蛋白質(zhì)是非常難以去除的，影響提取的DNA純度；因此，本實(shí)施例提供的DNA提取方法中，裂解液的作用是破壞細(xì)胞膜、核膜，并使組織蛋白與DNA分離，抑制細(xì)胞中脫氧核糖核酸酶的活性;蛋白酶K的作用是使大分子的蛋白質(zhì)變小，對(duì)蛋白質(zhì)的游離有巨大的促進(jìn)作用。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)被蛋白酶消化變小后，則不容易被基因組DNA纏住，有利于蛋白質(zhì)在純化過程中的去除，使最終獲得的DNA的純度更高。本實(shí)施例提供的DNA提取方法不僅操作簡單、成功率高、產(chǎn)物質(zhì)量好，而且解決了現(xiàn)有的動(dòng)物組織DNA提取方法中組織裂解不徹底的問題，提高了提取效率。
[0070]實(shí)施例3
[0071 ] I)、剪取動(dòng)物組織并剪碎，將其放入1.5mL的離心管中；
[0072]2)、向離心管中加入500uL裂解液和20uL蛋白酶K(兩者可預(yù)先混好)，將離心管放置于恒溫振蕩器中60°C振蕩2.5小時(shí)；
[0073]3)、取出裂解充分的離心管，向每管中加入300uL鹽-炭混合液(用前震蕩混勻)，顛倒混勻6-8次后冰浴20分鐘；
[0074]4)、在12000rpm、室溫條件下離心20分鐘，小心地取上清500uL至新的1.5mL的Axgen離心管中(在吸取的過程中小心避免吸到沉淀)；
[0075]5)、加入等體積的500uL異丙醇于Axgen離心管中，顛倒直至形成絮狀沉淀；
[0076]6)、在12000rpm、室溫條件離心20分鐘后棄上清，得到DNA沉淀。
[0077]7)、向DNA沉淀中加入10uL TE緩沖液或雙蒸水，在4°C條件下12Hr使DNA沉淀溶解;妥善保存該DNA儲(chǔ)存液。
[0078]在本實(shí)施例中，采用TE緩沖液溶解DNA，起到穩(wěn)定儲(chǔ)存DNA的目的；TE緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時(shí)抵抗PH改變的溶液。PH緩沖系統(tǒng)對(duì)維持生物的正常pH值，正常生理環(huán)境起重要作用。多數(shù)細(xì)胞僅能在很窄的PH范圍內(nèi)進(jìn)行活動(dòng)，而且需要有緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現(xiàn)的pH變化。
[0079]另外，需要說明的是，在生物體中有三種主要的pH緩沖體系，它們是蛋白質(zhì)、重碳酸鹽緩沖體系和磷酸鹽緩沖體系。每種緩沖體系所占的分量在各類細(xì)胞和器官中是不同的；因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)不同的動(dòng)物組織選擇不同的TE緩沖液。
[0080]實(shí)施例4
[0081 ] I)、剪取動(dòng)物組織并剪碎，將其放入1.5mL的離心管中；
[0082]2)、向離心管中加入500uL裂解液和20uL蛋白酶K(兩者可預(yù)先混好)，將離心管放置于恒溫振蕩器中50°C振蕩2小時(shí)；
[0083]3)、取出裂解充分的離心管，向每管中加入300uL鹽-炭混合液(用前震蕩混勻)，顛倒混勻6-8次后冰浴1分鐘；
[0084]4)、在12000印111、室溫條件下離心10分鐘，小心地取上清500uL至新的1.5mL的Axgen離心管中(在吸取的過程中小心避免吸到沉淀)；
[0085]5)、加入等體積的500uL異丙醇于Axgen離心管中，顛倒直至形成絮狀沉淀；
[0086]6)、將步驟5)中得到的絮狀沉淀混合液放置于_20°C條件下放置2Hr。
[0087]7)、在12000rpm、室溫條件離心1分鐘后棄上清，得到DNA沉淀。
[0088]實(shí)施例5
[0089]在本實(shí)施例中，除步驟6)外其它步驟均與實(shí)施例4相同，其中步驟6)的實(shí)施過程為:
[0090]6)、將步驟5)中得到的絮狀沉淀混合液在4°C條件下放置12Hr。
[0091]在實(shí)施例4與實(shí)施例5中，在加入異丙醇之后可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀較少或不出現(xiàn)絮狀沉淀的現(xiàn)象，因此采用在低溫條件下放置一定時(shí)間，以達(dá)到絮狀沉淀物的完全析出。
[0092]實(shí)施例6
[0093]在實(shí)施例2的基礎(chǔ)上，還包括如下步驟:
[0094]7)、加入500uL的70%乙醇于各管，顛倒沖洗沉淀；
[0095]8)、12000rpm離心I分鐘，用200uL的槍頭將乙醇吸掉，留下精制DNA沉淀在管中(小心不要吸走精制DNA沉淀)；
[0096]9)、自然風(fēng)干精制DNA沉淀。
[0097]本實(shí)施例中提供的動(dòng)物組織DNA提取方法中，將所述絮狀沉淀混合液離心后得到的DNA沉淀可能還會(huì)包含一部分雜質(zhì)，例如異丙醇。因此向所述DNA沉淀中加入乙醇進(jìn)行沖洗，并采用槍頭將乙醇吸除后風(fēng)干，即可得到精制DNA。因此，DNA沉淀經(jīng)過乙醇清洗后吸除并風(fēng)干，基本上能除去除DNA沉淀上殘留的異丙醇，使最終得到的精制DNA沉淀雜質(zhì)少、質(zhì)量尚O
[0098]盡管已用具體實(shí)施例來說明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識(shí)到，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，包括如下步驟: 將動(dòng)物組織裂解后，得到裂解混合液； 向所述裂解混合液中加入鹽-炭混合液，混勻后依次冰浴、離心，得到上清液； 向所述上清液中加入異丙醇，混勻后得到絮狀沉淀混合液； 將所述絮狀沉淀混合液離心后得到DNA沉淀。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，所述裂解方法為: 向動(dòng)物組織中加入裂解液和蛋白酶，在50°C?60°C條件下恒溫振蕩2?3Hr，得到裂解混合液。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，每I升所述裂解液中，含有20ml IM Tris-HCl(ρΗ8.0)、1ml 0.5Μ EDTA、23.376g NaCUlOOml 10%SDS，余量為蒸餾水。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，所述蛋白酶為蛋白酶K。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，在所述向所述裂解混合液中加入鹽-炭混合液，混勻后依次冰浴、離心，得到上清液的步驟中: 所述離心過程是在12000rpm條件下離心10?20min; 所述冰浴過程是10?20min。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，在得到所述絮狀沉淀混合液之后還包括:將所述絮狀沉淀混合液在-15 °C?_25°C條件下放置I?3Hr; 或?qū)⑺鲂鯛畛恋砘旌弦涸贠 0C?6 °C條件下放置8?16Hr。7.根據(jù)權(quán)利要求1-6所述的動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，在得到所述DNA沉淀之后還包括: 將所述DNA沉淀完全溶解于TE緩沖液中，得到DNA儲(chǔ)存液。8.根據(jù)權(quán)利要求1-6所述的動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，在得到所述DNA沉淀之后還包括: 向所述DNA沉淀中加入乙醇沖洗后離心，吸除乙醇后風(fēng)干，得到精制DNA沉淀。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，在所述向DNA沉淀中加入乙醇沖洗后離心，吸除乙醇后風(fēng)干，得到精制DNA沉淀的步驟中: 所述離心過程是在12000rpm條件下離心0.5?2min。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物組織提取DNA方法，其特征在于，所述鹽-炭混合液為每30ml飽和NaCl溶液中加入I g活性炭混合得到。
【文檔編號(hào)】C12N15/10GK105969764SQ201610556689
【公開日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2016年7月14日
【發(fā)明人】唐中林, 范新浩, 李奎, 周榮, 楊亞嵐
【申請(qǐng)人】中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所