一種香豆素類nedd8激活酶抑制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了兩種具有不同通式的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑，及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體、代謝產(chǎn)物和前藥。本發(fā)明還公開了前述的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。藥理結(jié)果顯示，該化合物具有良好的NEDD8抑制活性、抗腫瘤細(xì)胞增殖作用、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡作用，是臨床上可用于制備治療腫瘤的藥物。
【專利說明】
一種香豆素類NEDD8激活酶抑制劑
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于生物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種香豆素類NEDD8激活酶抑制劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 惡性腫瘤是一大類嚴(yán)重危害人類健康的常見多發(fā)疾病，其致死率高，僅次于心腦 血管疾病。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，2012年全世界約有820萬人死于癌癥，預(yù)計(jì)2030年因癌癥 死亡的人數(shù)將超過1100萬。中國是癌癥發(fā)病率和病死率較高的國家，每年因此造成的經(jīng)濟(jì) 損失高達(dá)數(shù)千億元，并且隨著人口老齡化、生態(tài)及生活環(huán)境的惡化，這種趨勢(shì)更有可能加 劇。因此，尋找治療腫瘤的有效藥物備受關(guān)注。
[0003] 在真核細(xì)胞中，泛素蛋白酶體系統(tǒng)(UPS)負(fù)責(zé)蛋白質(zhì)的降解，并在維持細(xì)胞內(nèi)蛋白 質(zhì)動(dòng)態(tài)平衡中擔(dān)當(dāng)重要角色。UPS的底物蛋白參與諸如細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、細(xì)胞生長(zhǎng)及增殖、信 號(hào)傳導(dǎo)、DNA修復(fù)及細(xì)胞凋亡信號(hào)傳導(dǎo)過程。因此，UPS失調(diào)則會(huì)導(dǎo)致一些信號(hào)通路的異常激 活或抑制，進(jìn)而可能發(fā)展成為腫瘤或其他相關(guān)疾病。在UPS中，泛素首先由泛素激活酶(E1) ATP依賴性激活;其次通過轉(zhuǎn)硫醇作用轉(zhuǎn)移至泛素結(jié)合酶(E2)上，形成泛素-E2復(fù)合物;然后 在泛素連接酶(E3)的作用下轉(zhuǎn)移至待降解底物的賴氨酸殘基上;最后底物蛋白被多個(gè)泛素 修飾后，經(jīng)蛋白酶體26S識(shí)別并降解。
[0004] 泛素化過程的3個(gè)酶中，E3具有嚴(yán)格的底物特異性。目前已知RING-f inger E3s (CRLs)是UPS E3中最大的一個(gè)蛋白家族。它的底物蛋白包括很多與腫瘤相關(guān)的細(xì)胞調(diào)控蛋 白，如(Mt-1，ρ27,ρΙκΒα，NRF2，HIF_la，CyclinE，c-Jun，J-catenin，(Mc25A，Emil，c_Myc， mT0R，BimEL等（Genes&Cancer .2012,1:708-716)。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)只有當(dāng)CRLs被一個(gè)類泛素 NEDD8修飾后才具有催化活性(Mol Cell Biol 2000,20:2326-2333)。
[0005] NEDD8是由81個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)，與泛素有60 %的一致性和80 %同源性。 它通過級(jí)聯(lián)酶促反應(yīng)特異性與待修飾蛋白結(jié)合的過程被稱為Neddy lation。該過程與UPS類 似:首先，成熟的NEDD8在NEDD8激活酶(E1)催化下，ATP依賴性激活;然后被轉(zhuǎn)移至NEDD8結(jié) 合酶（E2);最后在NEDD8連接酶（E3)作用下，共價(jià)連接于被修飾蛋白上。NEDD8激活酶為 NEDD8通路中的限速酶，因此可以通過調(diào)節(jié)NEDD8激活酶的活性，來調(diào)節(jié)NEDD8通路以及泛素 蛋白酶體通路活性，從而達(dá)到治療腫瘤的目的。由于NEDD8通路處于泛素蛋白酶體通路的上 游，通過抑制NEDD8激活酶，降低Neddy lat ion活性，特異性下調(diào)泛素蛋白酶體通路中相關(guān)E3 (CRLs)的活性，從而特異性減少細(xì)胞內(nèi)與腫瘤相關(guān)蛋白的降解。
[0006] W02007092213A2公開了第一個(gè)NEDD8激活酶抑制劑MLN4924的結(jié)構(gòu)、制備方法及其 作為抗腫瘤藥物的應(yīng)用。MLN4924目前正處于一期臨床研究。MLN4924在NEDD8激活酶催化 下，與NEDD8形成NEDD8-MLN4924復(fù)合物，并由該復(fù)合物選擇性抑制NEDD8激活酶活性，從而 抑制NEDD8通路(Mol. Cell，2010，37:102-111)。除MLN4924以外，目前沒有其他NEDD8激活酶 抑制劑進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)，更無 NEDD8激活酶抑制劑藥物上市，因此尋找及開發(fā)新型NEDD8激活 酶抑制劑將對(duì)癌癥治療具有十分重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種香豆素類NEDD8激活酶抑制劑，以解決現(xiàn)有 技術(shù)存在的同類產(chǎn)品缺失的問題。
[0008] 本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供上述香豆素類NEDD8激活酶抑制劑的應(yīng)用。 [0009]本發(fā)明還要解決的技技術(shù)問題是提供上述香豆素類NEDD8激活酶抑制劑的制備方 法。
[0010]本發(fā)明最后要解決的技術(shù)問題是提供上述香豆素類NEDD8激活酶抑制劑的中間 體。
[0011] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
[0012] 除非另有定義，否則本文所有科技術(shù)語具有的涵義與權(quán)利要求主題所屬領(lǐng)域技術(shù) 人員通常理解的涵義相同。除非另有說明，本文全文引用的所有專利、專利申請(qǐng)、公開材料 通過引用方式整體并入本文。應(yīng)理解，上述簡(jiǎn)述和下文的詳述為示例性且僅用于解釋，而不 對(duì)本發(fā)明主題作任何限制。在本發(fā)明中，除非另有具體說明，否則使用單數(shù)時(shí)也包括復(fù)數(shù)。 必須注意，除非文中另有清楚的說明，否則在本說明書和權(quán)利要求書中所用的單數(shù)形式包 括所指事物的復(fù)數(shù)形式。還應(yīng)注意，除非另有說明，否則所用"或"、"或者"表示"和/或"。此 外，所用術(shù)語"包括"以及其它形式，例如"包含"、"含"和"含有"并非限制性。
[0013] 可在參考文獻(xiàn)（包括Carey and Sundberg"ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4? ED."Vols,A(2000)and B(2001),Plenum Press,New York)中找到對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)術(shù)語的定義。 除非另有說明，否則采用本領(lǐng)域技術(shù)范圍內(nèi)的常規(guī)方法，如質(zhì)譜、NMR、IR和UVMs光譜法和藥 理學(xué)方法。除非提出具體定義，否則本文在分析化學(xué)、有機(jī)合成化學(xué)以及藥物和藥物化學(xué)的 有關(guān)描述中采用的術(shù)語是本領(lǐng)域己知的?？稍诨瘜W(xué)合成、化學(xué)分析、藥物制備、制劑和遞送， 以及對(duì)患者的治療中使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。例如，可利用廠商對(duì)試劑盒的使用說明，或者按照本領(lǐng) 域公知的方式或本發(fā)明的說明來實(shí)施反應(yīng)和進(jìn)行純化。通?？筛鶕?jù)本說明書中引用和討論 的多個(gè)概要性和較具體的文獻(xiàn)中的描述，按照本領(lǐng)域熟知的常規(guī)方法實(shí)施上述技術(shù)和方 法。在本說明書中，可由本領(lǐng)域技術(shù)人員選擇基團(tuán)及其取代基以提供穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)式時(shí)所得 到的在化學(xué)上等同的取代基。舉例而言，-CH 2〇-等同于-〇CH2。本文所用的章節(jié)標(biāo)題僅用于組 織文章的目的，而不應(yīng)被解釋為對(duì)所述主題的限制。本發(fā)明中引用的所有文獻(xiàn)或文獻(xiàn)部分 包括但不限于專利、專利申請(qǐng)、文章、書籍、操作手冊(cè)和論文，均通過引用方式整體并入本 文。在本文中定義的某些化學(xué)基團(tuán)前面通過簡(jiǎn)化符號(hào)來表示該基團(tuán)中存在的碳原子總數(shù)。 例如，烷基是指具有總共1至6個(gè)碳原子的如下文所定義的烷基。簡(jiǎn)化符號(hào)中的碳原子總 數(shù)不包括可能存在于所述基團(tuán)的取代基中的碳。除前述以外，當(dāng)用于本發(fā)明的說明書及權(quán) 利要求書中時(shí)，除非另外特別指明，否則以下術(shù)語具有如下所示的含義。
[0014] 在本發(fā)明中，術(shù)語"鹵素"是指氟、氯、溴或碘。
[0015] "羥基"是指-OH基團(tuán)。
[0016] "羥基烷基"是指被羥基(-OH)取代的如下文所定義的烷基。
[0017] "羰基"是指-C(=0)-基團(tuán)。
[0018] "硝基"是指-N〇2。
[0019] "氰基，，是指-CN。
[0020] "氨基"是指-NH2。
[0021] "取代的氨基"是指被一個(gè)或兩個(gè)如下文所定義的烷基、烷基羰基、芳烷基、雜芳烷 基取代的氨基，例如，單烷基氨基、二烷基氨基、烷基酰胺基、芳烷基氨基、雜芳烷基氨基。
[0022] "羧基"是指-C00H。
[0023] 在本發(fā)明中，作為基團(tuán)或是其它基團(tuán)的一部分(例如用在鹵素取代的烷基等基團(tuán) 中），術(shù)語"烷基"意指僅由碳原子和氫原子組成、不含不飽和鍵、具有例如1至12個(gè)(優(yōu)選為1 至8個(gè)，更優(yōu)選為1至6個(gè))碳原子且通過單鍵與分子的其余部分連接的直鏈或支鏈的烴鏈基 團(tuán)。烷基的實(shí)例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、 正戊基、2-甲基丁基、2.2-二甲基丙基、正己基、庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、辛基、主基 和類基等。
[0024] 在本發(fā)明中，術(shù)語"烷氧基"是指式-0Ra基團(tuán)，其中匕為如上文所定義的烷基。燒氧 基的實(shí)例包括但不限于甲氧基、乙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧 基等。
[0025] 在本發(fā)明中，術(shù)語"烷基碳基"是指-C(0)-Ra基團(tuán)，其中Ra為如上文所定義的烷基。
[0026] 在本發(fā)明中，術(shù)語"烷氧基碳基"是指-C(0)0-Ra基團(tuán)，其中Ra為如上文所定義的烷 基。
[0027] 在本發(fā)明中，術(shù)語"單烷基氨基"是指式-NHRa基團(tuán)，其中Ra為如上文所定義的烷基。 單烷基氨基的實(shí)例包括但不限于甲氨基、乙氨基、異丙氨基等。
[0028] 在本發(fā)明中，術(shù)語"二烷基氨基"是指式_NRaRb基團(tuán)，其中iM^Rb各自獨(dú)立地為如上 文所定義的烷基。二烷基氨基的實(shí)例包括但不限于二甲氧基、二乙氨基、二丙氨基、甲基乙 基氣基等。
[0029] 在本發(fā)明中，作為基團(tuán)或是其它基團(tuán)的一部分，術(shù)語"烯基"意指僅由碳原子和氫 原子組成、含有至少一個(gè)雙鍵、具有例如2至14個(gè)(優(yōu)選為2至10個(gè)，更優(yōu)選為2至6個(gè))碳原子 且通過單鍵與分子的其余部分連接的直鏈或支鏈的烴鏈基團(tuán)，例如但不限于乙烯基、丙烯 基、稀丙基、丁 _1_烯基、丁 _2_烯基、戊-1-烯基、戊_1，4_二烯基等。
[0030] 在本發(fā)明中，作為基團(tuán)或是其它基團(tuán)的一部分，術(shù)語"炔基"意指僅由碳原子和氫 原子組成、含有至少一個(gè)三鍵和任選的一個(gè)或多個(gè)鍵、具有例如2至14個(gè)(優(yōu)選為2至10個(gè)， 更優(yōu)選為2至6個(gè))碳原子且通過單鍵與分子的其余部分連接的直鏈或支鏈的經(jīng)烴鏈基團(tuán)， 例如但不限于乙炔基、丙-1-炔基、丁-1-炔基、戊-1-稀-4-炔基等。
[0031] 在本發(fā)明中，作為基團(tuán)或是其它基團(tuán)的一部分，術(shù)語"環(huán)烷基"意指僅由碳原子和 氫原子組成的穩(wěn)定的非芳香族單環(huán)或多環(huán)烴基，其可包括稠合環(huán)體系、橋環(huán)體系或螺環(huán)體 系，具有3至15個(gè)碳原子，優(yōu)選具有3至10個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有3至8個(gè)碳原子，且其為飽和 或不飽和并可經(jīng)由任何適宜的碳原子通過單鍵與分子的其余部分連接。除非本說明書中另 外特別指明，環(huán)烷基中的碳原子可以任選地被氧化。環(huán)烷基的實(shí)例包括但不限于環(huán)丙基、環(huán) 丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)己二烯基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、1H-茚基、2,3_二 氫化茚基、1，2，3，4-四氫-萘基、5，6，7，8-四氫-萘基、8，9-二氫-7H-苯并環(huán)庚烯-6-基、6，7， 8,9-四氫-5!1-苯并環(huán)庚烯基、5,6,7,8,9，10-六氫-苯并環(huán)辛烯基、二環(huán)[2.2.1]庚基、7,7-二甲基-二環(huán)[2.2.1]庚基、二環(huán)[2.2.1]庚烯基、二環(huán)[2.2.2]辛基、二環(huán)[3.1.1]庚基、二環(huán)
[3.2.1]辛基、二環(huán)[2.2.2]辛烯基、二環(huán)[3.2.1]辛烯基、金剛烷基、和八氫-4，7_亞甲基- 1H-茚基等。
[0032] 在本發(fā)明中，術(shù)語"環(huán)烷基氧基"是指式-Rc基團(tuán)，其中Rc為如上文所定義的環(huán)烷 基。
[0033] 在本發(fā)明中，作為基團(tuán)或是其它基團(tuán)的一部分，術(shù)語"雜環(huán)基"意指由2至14個(gè)碳原 子以及1至6個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子組成的穩(wěn)定的3元至20元非芳香族環(huán)狀基團(tuán)。除非本 說明書中另外特別指明，否則雜環(huán)基可以為單環(huán)、雙環(huán)、三環(huán)或更多環(huán)的環(huán)體系，其可包括 稠合環(huán)體系、橋環(huán)體系或螺環(huán)體系，其雜環(huán)基中的氮、碳或硫原子可任選地被氧化;氮原子 可任選地被季銨化;且雜環(huán)基可為部分或完全飽和。雜環(huán)基可以經(jīng)由碳原子或者雜原子并 通過單鍵與分子其余部分連接。在包含稠環(huán)的雜環(huán)基中，一個(gè)或多個(gè)環(huán)可以是下文所定義 的芳基或雜芳基，條件是與分子其余部分的連接點(diǎn)為非芳香族環(huán)原子。就本發(fā)明的目的而 言，雜環(huán)基優(yōu)選為包含1至3個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的穩(wěn)定的4元至11元非芳香性單環(huán)、 雙環(huán)、橋環(huán)或螺環(huán)基團(tuán)，更優(yōu)選為包含1至3個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的穩(wěn)定的4元至8元非 芳香性單環(huán)、雙環(huán)、橋環(huán)或螺環(huán)基團(tuán)。雜環(huán)基的實(shí)例包括但不限于：吡咯烷基、嗎琳基、哌嗪 基、呢陡基、硫代嗎琳基、2，7 -二氣雜_螺[3.5]壬烷基、2-氧雜氣雜-螺[3.3]庚坑 基、2,5_二氮雜-雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-基、氮雜環(huán)丁烷基、吡喃基、四氫吡喃基、四氫異喹啉 基、十氫異喹啉基、二氧環(huán)戊基、咪唑啉基、咪唑烷基、喹嗪基、噻唑烷基、異噻唑烷基、二氫 吲哚基、吡咯烷基、吡唑烷基、鄰苯二甲酰亞氨基等。
[0034] 在本發(fā)明中，術(shù)語〃雜環(huán)基氧基〃是指式-0Rd基團(tuán)，其中Rd為如上文所定義的雜環(huán) 基。
[0035] 在本發(fā)明中，作為基團(tuán)或是其它基團(tuán)的一部分，術(shù)語"芳香基"意指具有6至18個(gè)碳 原子(優(yōu)選具有6至10個(gè)碳原子)的共輒烴環(huán)體系基團(tuán)。就本發(fā)明的目的而言，芳基可以為單 環(huán)、雙環(huán)、三環(huán)或更多環(huán)的環(huán)體系，還可以與上文所定義的環(huán)烷基或雜環(huán)基稠合，條件是芳 基經(jīng)由芳香環(huán)上的原子通過單鍵與分子的其余部分連接。芳基的實(shí)例包括但不限于苯基、 荼基、惠基、菲基、蒽基、2，3-二氫-1H-異吲哚基、2-苯井噁唑啉酮等。
[0036] 在本發(fā)明中，術(shù)語"芳基烷基"是指被上文所定義的芳基所取代的上文所定義的烷 基。
[0037] 在本發(fā)明中，作為基團(tuán)或是其它基團(tuán)的一部分，術(shù)語"雜環(huán)芳香基"意指環(huán)內(nèi)具有1 至15個(gè)碳原子(優(yōu)選具有1至10個(gè)碳原子)和1至6個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5元至16元共 輒環(huán)系基團(tuán)。除非本說明書中另外特別指明，否則雜芳基可為單環(huán)、雙環(huán)、三環(huán)或更多環(huán)的 環(huán)體系，還可以與上文所定義的環(huán)烷基或雜環(huán)基稠合，條件是雜芳基經(jīng)由芳香環(huán)上的原子 通過單鍵與分子的其余部分連接。雜芳基中的氮、碳或硫原子可任選地被氧化;氮原子可任 選地被季銨化。就本發(fā)明的目的而言，雜芳基優(yōu)選為包含1至5個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的 穩(wěn)定的5元至12元芳香性基團(tuán)，更優(yōu)選為包含1至4個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的穩(wěn)定的5元 至10元芳香性基團(tuán)或者包含1至3個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5元至6元芳香性基團(tuán)。雜芳 基的實(shí)例包括但不限于噻吩基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、惡唑基、惡二唑基、異惡唑基、吡啶 基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、剛噪基、呋喃基、吡咯基、三唑基、三 嗪基、吲嗪基、異吲哚基、吲唑基、異吲唑基、嘌呤基、喹啉基、異喹啉基、二氮萘基、萘啶基、 喹噁唑啉基、蝶啶基、咔唑基、咔啉基、菲啶基、菲咯啉基、吖啶基、吩嗪基、異噻唑基、苯并噻 唑基、苯并噻吩基、苯硫基、中氮茚基、鄰二氮雜菲基、異惡唑基、吩惡嗪基、吩噻嗪基、4,5， 6,7_四氫苯并[b]噻吩基、萘并吡啶基、[1，2,4]三唑并[4,3-b]噠嗪基、[1，2,4]三唑并[4， 3-a]吡嗪、[1，2,4]三唑并[4,3-c]嘧啶、[1，2,4]三唑并[4,3-a]嘧啶、咪唑并[l，2-a]吡啶、 咪唑并[1，2-b ]噠嗪、咪唑并[1，2-a]吡嗪等。
[0038]在本發(fā)明中，術(shù)語"雜芳基烷基"文所定義的雜芳基所取代的土文所定義的烷基。
[0039] 在本發(fā)明中"任選的"或"任選地"表示隨后描述的事件或狀況可能發(fā)生也可能不 發(fā)生，且該描述同時(shí)包括該事件或狀況發(fā)生和不發(fā)生的情況。例如"任選地被取代的芳基" 表示芳基被取代或未被取代，且該描述同時(shí)包括被取代的芳基與未被取代的芳基。
[0040] 在本發(fā)明中，當(dāng)某一基團(tuán)被描述為"任選地取代"時(shí)，該基團(tuán)可任選地在一個(gè)或多 個(gè)適當(dāng)?shù)奈恢帽幌铝谢鶊F(tuán)取代:烷基、烯基、炔基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烯基、氰基、硝基、環(huán) 烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、三甲基甲硅烷基、-0Riq、-C(0)-Riq、-C(0)0-Ri()、-0C(0)-Ri()、-N (尺1〇)2、-(：(0州(1?1())2、4(1?1())(：(0)1?11、4(1?1())(：(0)01?1 1、4(1?1())3(0)"11(其中七為1或2)、-3 (0)t0(Rn)(其中 t為 1 或2)、-S(0)tRn(其中 t為0、1 或2)、-S(0)tN(R1Q)2(其中 t為 1 或2)，其中 各Rio獨(dú)立地為氣、烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、芳烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、 雜芳基或雜芳基烷基;且各Rii獨(dú)立地為烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、芳烷基、 雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基或雜芳基烷基。
[0041 ]本文所用術(shù)語"部分"、"結(jié)構(gòu)部分"、"化學(xué)部分"、"基團(tuán)"、"化學(xué)基團(tuán)"是指分子中 的特定片段或官能團(tuán)?；瘜W(xué)部分通常被認(rèn)為是嵌入或附加到分子上的化學(xué)實(shí)體。
[0042] "互變異構(gòu)體"是指質(zhì)子從分子的一個(gè)原子轉(zhuǎn)移至相同分子的另一個(gè)原子而形成 的異構(gòu)體。本發(fā)明的化合物的所有互變異構(gòu)形式也將包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0043] 在本發(fā)明中，術(shù)語〃藥學(xué)上可接受的鹽〃包括藥學(xué)上可接受的酸加成鹽
[0044] "藥學(xué)上可接受的酸加成鹽"是指能夠保留游離堿的生物有效性而無其它副作用 的，與無機(jī)酸或有機(jī)酸所形成的鹽。無機(jī)酸鹽包括但不限于鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸 鹽、磷酸鹽等;有機(jī)酸鹽包括但不限于甲酸鹽、乙酸鹽、2.2-二氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸 鹽、己酸鹽、辛酸鹽、癸酸鹽、十一碳烯酸鹽、乙醇酸鹽、葡糖酸鹽、乳酸鹽、癸二酸鹽、己二酸 鹽、戊二酸鹽、丙二酸鹽、草酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、棕櫚 酸鹽、硬脂酸鹽、油酸鹽、肉桂酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、谷氨酸鹽、焦谷氨酸鹽、天冬氨酸 鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、水楊酸鹽、4-氨 基水楊酸鹽、荼二磺酸鹽等。這些鹽可通過本專業(yè)己知的方法制備。
[0045] "多晶型物"是指本發(fā)明的某些化合物在固體狀態(tài)下由于存在兩種或兩種以上不 同分子排列而產(chǎn)生的不同固體結(jié)晶相。本發(fā)明的某些化合物可以存在多于一種晶型，本發(fā) 明旨在包括各種晶型及其混合物。
[0046] 通常，結(jié)晶化作用會(huì)產(chǎn)生本發(fā)明化合物的溶劑化物。本發(fā)明中使用的術(shù)語"溶劑化 物"是指包含一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明化合物分子與一個(gè)或多個(gè)溶劑分子的聚集體。溶劑可以是 水，該情況下的溶劑化物為水合物。或者，溶劑可以是有機(jī)溶劑。因此，本發(fā)明的化合物可以 以水合物存在，包括單水合物、二水合物、半水合物、倍半水合物、三水合物、四水合物等，以 及相應(yīng)的溶劑化形式。本發(fā)明化合物可形成真實(shí)的溶劑化物，但在某些情況下，也可以僅保 留不定的水或者水加上部分不定溶劑的混合物。本發(fā)明的化合物可以在溶劑中反應(yīng)或者從 溶劑中沉淀析出或結(jié)晶出來。本發(fā)明化合物的溶劑化物也包含在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
[0047] 本發(fā)明中"代謝產(chǎn)物"是指藥物被機(jī)體吸收后，在酶的作用下經(jīng)過體內(nèi)的官能團(tuán)化 反應(yīng)(I相生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)，包括氧化、還原、水解等)和結(jié)合反應(yīng)（II相生物轉(zhuǎn)化反應(yīng))等生物 轉(zhuǎn)化而產(chǎn)生的化合物。
[0048] 本發(fā)明還包括上述化合物的前藥。在本發(fā)明中，術(shù)語"前藥"表示可在生理學(xué)條件 下或通過溶劑分解而被轉(zhuǎn)化成本發(fā)明的生物活性化合物的化合物。因此，術(shù)語"前藥"是指 本發(fā)明的化合物的藥學(xué)上可接受的代謝前體。當(dāng)被給予有需要的個(gè)體時(shí)，前藥可以不具有 活性，但在體內(nèi)被轉(zhuǎn)化成本發(fā)明的活性化合物。前藥通常在體內(nèi)迅速轉(zhuǎn)化，而產(chǎn)生本發(fā)明的 母體化合物，例如通過在血液中水解來實(shí)現(xiàn)。前藥化合物通常在哺乳動(dòng)物生物體內(nèi)提供溶 解度、組織相容性或緩釋的優(yōu)點(diǎn)。前藥包括己知的氨基保護(hù)基和羧基保護(hù)基。具體的前藥制 備方法可參照Saulnier，M.G.，et al.，Bioorg. Med. Chem.Lett.1994,4,1985-1990; Greenwald.R.B.，et al.，J Med.Chem.2000.43.475。
[0049] 在本發(fā)明中"藥物組合物"是指本發(fā)明化合物與本領(lǐng)域通常接受的用于將生物活 性化合物輸送至哺乳動(dòng)物(例如人）的介質(zhì)的制劑。該介質(zhì)包括藥學(xué)上可接受的載體。藥物 組合物的目的是促進(jìn)生物體的給藥，利于活性成分的吸收進(jìn)而發(fā)揮生物活性。
[0050] 本文所用術(shù)語"藥學(xué)上可接受的"是指不影響本發(fā)明化合物的生物活性或性質(zhì)的 物質(zhì)（如載體或稀釋劑），并且相對(duì)無毒，即該物質(zhì)可施用于個(gè)體而不造成不良的生物反應(yīng) 或以不良方式與組合物中包含的任意組分相互作用。
[0051] 在本發(fā)明中"藥學(xué)上可接受的載體"包括但不限于任何被相關(guān)的政府管理部門許 可為可接受供人類或家畜使用的佐劑、載體、賦形劑、助流劑、增甜劑、稀釋劑、防腐劑、染 料、著色劑、矯昧劑、表面活性劑、潤(rùn)濕劑、分散劑、助懸劑、穩(wěn)定劑、等滲劑、溶劑或乳化劑。
[0052] 本文所用的有關(guān)術(shù)語"受試者"、"患者"或"個(gè)體"是指患有疾病或病癥等的個(gè)體， 包括哺乳動(dòng)物和非哺乳動(dòng)物。哺乳動(dòng)物的實(shí)例包括但不限于哺乳動(dòng)物綱的任何成員：人，非 人的靈長(zhǎng)類動(dòng)物（例如黑猩猩和其它猿類和猴）；家畜，例如牛、馬、綿羊、山羊、豬;家養(yǎng)動(dòng) 物，例如兔、狗和貓;實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物，包括啃齒類動(dòng)物，例如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳動(dòng)物的 實(shí)例包括但不限于鳥類和魚類等。在本文提供的一個(gè)有關(guān)方法和組合物的實(shí)施方案中，所 述哺乳動(dòng)物為人。
[0053] 本文所用術(shù)語"預(yù)防的"、"預(yù)防"和"防止"包括使病患減少疾病或病癥的發(fā)生或惡 化的可能性。
[0054]本文所用的術(shù)語"治療"和其它類似的同義詞包括以下含義：
[0055] 1、預(yù)防疾病或病癥在哺乳動(dòng)物中出現(xiàn)，特別是當(dāng)這類哺乳動(dòng)物易患有該疾病或病 癥，但尚未被診斷為己患有該疾病或病癥時(shí)；
[0056] 2、抑制疾病或病癥，即遏制其發(fā)展；
[0057] 3、緩解疾病或病癥，即，使該疾病或病癥的狀態(tài)消退;或者減輕該疾病或病癥所造 成的癥狀。
[0058] 本文所使用術(shù)語"有效量"、"治療有效量"或"藥學(xué)有效量"是指服用后足以在某種 程度上緩解所治療的疾病或病癥的一個(gè)或多個(gè)癥狀的至少一種藥劑或化合物的量。其結(jié)果 可以為跡象、癥狀或病因的消減和/或緩解，或生物系統(tǒng)的任何其它所需變化。例如，用于治 療的"有效量"是在臨床上提供顯著的病癥緩解效果所需的包含本文公開化合物的組合物 的量?？墒褂弥T如劑量遞增試驗(yàn)的技術(shù)測(cè)定適合于任意個(gè)體病例中的有效量。
[0059] 本文所用術(shù)語"服用"、"施用"、"給藥"等是指能夠?qū)⒒衔锘蚪M合物遞送到進(jìn)行 生物作用的所需位點(diǎn)的方法。這些方法包括但不限于口服途徑、經(jīng)十二指腸途徑、胃腸外注 射(包括靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)注射或輸注）、局部給藥和經(jīng)直腸給藥。本領(lǐng)域 技術(shù)人員熟知可用于本文所述化合物和方法的施用技術(shù)，例如在Goodman and Gilman,The Pharmacological Basis of Therapeutics,current ed.；PergPmon；and Remington's, Pharmaceutical Sciences (current edition), Mack Publishing Co. , Easton, Pa 中討論 的那些。
[0060] 本文所使用術(shù)語"藥物組合"、"藥物聯(lián)用"、"聯(lián)合用藥"、"施用其它治療"、"施用其 它治療劑"等是指通過混合或組合不止一種活性成分而獲得的藥物治療，其包括活性成分 的固定和不固定組合。術(shù)語"固定組合"是指以單個(gè)實(shí)體或單個(gè)劑型的形式向患者同時(shí)施用 至少一種本文所述的化合物和至少一種協(xié)同藥劑。術(shù)語"不固定組合"是指以單獨(dú)實(shí)體的形 式向患者同時(shí)施用、合用或以可變的間隔時(shí)間順次施用至少一種本文所述的化合物和至少 一種協(xié)同制劑。這些也應(yīng)用到雞尾酒療法中，例如施用三種或更多種活性成分。
[0061] -種由下述通式m表示的中間體：
[0062]
[0063]上述中間體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
[0064] (1 )NaH溶于甲苯后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下冰浴攪拌4~6min，并在冰浴條件下向其中滴加 4_溴-2-羥基苯乙酮的甲苯溶液，滴加完畢后繼續(xù)冰浴攪拌15~25min;冰浴攪拌完成后，向 其中加入碳酸二乙酯并在110~125°C下加熱回流攪拌8~16h;加熱回流攪拌完成后，用鹽 酸水溶液調(diào)節(jié)混合體系pH至4~6后，過濾，濾液經(jīng)柱層析純化后得到1-(4-溴-2-羥基-苯） 丙酮酸乙酯；
[0065] (2)將步驟（1)中制備得到的1-(4-溴-2-羥基-苯)丙酮酸乙酯溶于甲苯后在110~ 125°C下加熱回流攪拌18~30h后，過濾，濾液經(jīng)甲苯洗滌并濃縮后，與甲苯混合后繼續(xù)在 110~125°C下加熱回流攪拌18~30h;加熱回流攪拌完成后過濾，取固體部分用甲苯洗滌， 干燥后，得到4-羥基-7-溴香豆素；
[0066] (3)將碳酸鉀、溴化芐和步驟(2)中制備得到的4-羥基-7-溴香豆素溶于乙腈后在 氮?dú)獗Ｗo(hù)下75~81°C加熱回流攪拌4~8h，過濾，濾液降至室溫后靜置0.5~1.5h后，過濾， 取固體部分用4°C的乙腈洗滌，干燥后，得到4-芐氧基-7-溴香豆素；
[0067] (4)將氯化鈀、聯(lián)萘二苯磷、碳酸銫和4-(N_苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶和步驟 (3)中制備得到的4-芐氧基-7-溴香豆素溶于1，4_二氧六環(huán)后，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，80~100°C下 加熱攪拌8~16h后，過濾，取濾液經(jīng)柱層析純化后得到7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺 基)哌啶)-4-芐氧基香豆素；
[0068] (5)將步驟(4)中制備得到的7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺基)哌啶)-4-芐氧 基香豆素和10%鈀碳溶于四氫呋喃后在室溫下攪拌6~12h后，加入氨氣飽和的甲醇溶液，， 攪拌4~6min后，過濾，濾液經(jīng)氨氣飽和的甲醇溶液洗滌并濃縮后得到黃色油狀粗品；將黃 色油狀粗品溶于混合溶液中，攪拌ο. 5~1.5h后，過濾，取固體部分用混合溶液洗滌后，干 燥，得到7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶)-4-羥基香豆素；
[0069] (6)將步驟(5)中制備得到的7-(4_(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶)-4_羥基香 豆素和三乙胺溶于二氯甲烷后冰浴攪拌5~15min，滴加三氟甲磺酸酐，滴加完成后在室溫 下攪拌1~3h后，經(jīng)100~200目硅膠制砂柱層析純化，得到三氟甲磺酸7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶)基香豆素-4-酯，即得所需制備的中間體。
[0070] 步驟（1)中，4-溴-2-羥基苯乙酮、NaH和碳酸二乙酯的摩爾比為1:2.1~2.4:1.1~ 1.4;4-溴-2-羥基苯乙酮的甲苯溶液中，溶質(zhì)4-溴-2-羥基苯乙酮的濃度為100~300g/L;鹽 酸水溶液中，溶質(zhì)HC1的質(zhì)量百分比為37~40%。
[0071] 步驟(2)中，1-(4-溴-2-羥基-苯)丙酮酸乙酯和溶解其所用甲苯的固液比為lg:5 ~10mL〇
[0072] 步驟(3)中，碳酸鉀、溴化芐和步驟(2)中制備得到的4-羥基-7-溴香豆素的摩爾比 為0.5~1:1.8~2.2:1 〇
[0073]步驟(4)中，氯化鈀、聯(lián)萘二苯磷、碳酸銫、4-(N_苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶和 步驟(3)中制備得到的4-芐氧基-7-溴香豆素的摩爾比0.005~0.01:0.08~0.1:1~1.1:1 ~1.2:1 〇
[0074] 步驟(5)中，步驟(4)中制備得到的7_(4_(N-苯乙基-N-叔丁氧幾基胺基)哌啶)_4_ 芐氧基香豆素和10%鈀碳的質(zhì)量比為1:0.01~0.05;所述的混合溶液由石油醚和乙酸乙酯 以3:1的體積比混合而成;氨氣飽和的甲醇溶液與四氫呋喃的體積比為1:3~5;黃色油狀粗 品和溶解其所用混合溶液的質(zhì)量比為1:3~5。
[0075] 步驟(6)中，步驟(5)中制備得到的7_(4_(N-苯乙基-N-叔丁氧幾基胺)哌啶)_4_輕 基香豆素、三乙胺和三氟甲磺酸酐的摩爾比為1:1.1~1.5:1.1~1.3。
[0076]上述中間體ΙΠ 在制備香豆素類NEDD8激活酶抑制劑中的應(yīng)用也在本發(fā)明的保護(hù)范 圍之內(nèi)。
[0077] 一種由下述通式I表示的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑，及其藥學(xué)上可接受的鹽、 溶劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體、代謝產(chǎn)物和前藥：
[0078] 1 具中，
[0080] 環(huán)A為芳香基，碳數(shù)為6~10;其中環(huán)A優(yōu)選苯基、喹啉基、嘧啶基或1，2，3-三氮唑 基；
[0081 ] P為環(huán)A上取代基Rt的數(shù)目，取值為0、1、2、3、4、或5,優(yōu)選0、1或2;
[0082] Rt各自獨(dú)立取自烷基、烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳香基或雜環(huán)芳香基，且Rt上的Η原 子任選地被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、-01-1^-01^-(:(0)-1^-(:(0)-01^-0(:(0)-1^-(:(0^ 中，X為0、1或2;所述的鹵素為氟、氯、溴或碘；
[0083] 心和1?2各自獨(dú)立取自烷基、烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳香基或雜環(huán)芳香基，且心和1?2 上的Η原子任選地被一個(gè)或多個(gè)選自-0!1、-^-順2、烷基、單烷基氨基、二烷基氨基、環(huán)烷 基、雜環(huán)基、烷基雜環(huán)基、烷氧基、羥基烷基、烷氧基烷基、羥基烷氧基烷基、烷基幾基烷基、 氣基烷基、-烷基氣基烷基、烷氧基幾基氣基烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、芳烷基、烷基 環(huán)烷基取代、環(huán)烷基幾基、烷氧基幾基、烷氧基幾基雜環(huán)基、（燒氧幾基）（烷基)氣基、（燒氧 基烷基）（烷基)氨基或(烷基羰基）（烷基)氨基的基團(tuán)取代。
[0084]優(yōu)選的，本發(fā)明的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑（I)結(jié)構(gòu)式如下：
[0085]
[0086]
[0087] 上述香豆素類NEDD8激活酶抑制劑（I)在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用也在本發(fā)明的 保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0088] 其中，所述的腫瘤為白血病、胃腸間質(zhì)瘤、組織細(xì)胞性淋巴瘤、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì) 胞肺癌、胰腺癌、肺鱗癌、肺腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、皮膚癌、上皮細(xì)胞癌、宮頸癌、卵 巢癌、腸癌、鼻咽癌、腦癌、骨癌、食道癌、黑色素瘤、腎癌或口腔癌。
[0089]上述香豆素類NEDD8激活酶抑制劑（I)的制備方法，其特征在于，它包括如下步驟： [0090]將上述中間體m、碳酸鈉、四（三苯基膦)鈀和化合物IV溶于四氫呋喃后，在氮?dú)獗?護(hù)下60~65 °C加熱回流攪拌1~3h，過濾，濾液經(jīng)濃縮和柱層析(PE: EA = 5:1)純化后，得到 中間體；中間體經(jīng)混合溶劑溶解后，室溫下攪拌4~6h;攪拌完成后，向所得混合體系中加入 甲苯，濃縮后加入乙醚，超聲后過濾，取固體部分用乙醚洗滌并干燥后，即得，
[0091]
[0092] 其中，上述中間體m、碳酸鈉、四（三苯基膦）鈀和化合物IV的摩爾比為1:0.5~ 1.2:0.01:1~1.3;化合物IV和四氫呋喃的固液比為1 g:5~200mL;中間體和混合溶劑的固 液比為lg: 5~200mL;混合溶劑由二氯甲烷和三氟醋酸以1:3~5的體積比混合而成;混合體 系和甲苯的固液比為lg:5~200mL;濃縮后的混合體系和乙醚的固液比為lg:5~200mL。
[0093] 上述香豆素類NEDD8激活酶抑制劑（I)的制備方法，，其特征在于，它包括如下步 驟：
[0094]將上述中間體m、二異丙基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦)鈀和化合物v溶于乙 腈后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫下攪拌〇. 5~1.5h后，過濾，濾液經(jīng)乙腈洗滌后，濃縮并經(jīng)柱層析純 化后，得到中間體；中間體溶于二甲亞砜后，加入NaN3，90~120 °C下攪拌0.5~1.5h，加水后 用乙酸乙酯萃取2~3次，取有機(jī)相濃縮并干燥，所得固體部分溶于三氟醋酸后在室溫下攪 拌2~6h，反應(yīng)完成后所得混合體系中加入甲苯，濃縮后加入乙醚，超聲后過濾，取固體部分 用乙醚洗滌并干燥后，即得，
[0095]
[0096] 其中，上述中間體ΙΠ 、二異丙基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦）鈀、化合物V和 NaN3的摩爾比為1:1~1.5:0.05~0.1:0.05~0.1:1~1.3:1.1~1.4;化合物V和乙腈的固 液比為1 g: 5~200mL;中間體和二甲亞砜的固液比為1 g: 5~200mL;固體部分和三氟醋酸的 固液比為lg:5~200mL;混合體系和甲苯的固液比為lg:5~200mL;濃縮后的混合體系和乙 醚的固液比為lg:5~200mL。
[0097] 一種由下述通式Π 表示的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑，及其藥學(xué)上可接受的鹽、 溶劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體、代謝產(chǎn)物和前藥：
[0098]
[0099] 其中，
[0100] 環(huán)Β為氫或芳香基，優(yōu)選C6-1Q芳香基，進(jìn)一步的，優(yōu)選苯基或嘧啶基；
[0101] q為環(huán)B上取代基Rs的數(shù)目，q的取值為0、1、2、3、4、或5,優(yōu)選0、1或2;
[0102] Rs各自獨(dú)立取自烷基、烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳香基、雜環(huán)芳香基，且Rt上的Η原子 任選地被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、-01-1^-01^-(:(0)-1^-(:(0)-01^-0(:(0)-1^-(:(0^ 中，X為0、1或2;所述的鹵素為氟、氯、溴或碘；
[0103] RjPR2各自獨(dú)立取自烷基、烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳香基、雜環(huán)芳香基，且心和心上 的Η原子任選地被一個(gè)或多個(gè)選自-OH、-CN、-NH 2、烷基、單烷基氨基、二烷基氨基、環(huán)烷基、 雜環(huán)基、烷基雜環(huán)基、烷氧基、羥基烷基、烷氧基烷基、羥基烷氧基烷基、烷基幾基烷基、氣基 烷基、-烷基氣基烷基、烷氧基幾基氣基烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、芳烷基、烷基環(huán)燒 基取代、環(huán)烷基幾基、烷氧基幾基、烷氧基幾基雜環(huán)基、（燒氧幾基）（烷基)氣基、（烷氧基燒 基）（烷基)氨基或(烷基羰基）（烷基)氨基的集團(tuán)取代。
[0104] 優(yōu)選的，本發(fā)明的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑（Π )結(jié)構(gòu)式如下：
[0105]
[0106] 上述香豆素類NEDD8激活酶抑制劑（Π )在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用也在本發(fā)明的 保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0107] 其中，所述的腫瘤為白血病、胃腸間質(zhì)瘤、組織細(xì)胞性淋巴瘤、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì) 胞肺癌、胰腺癌、肺鱗癌、肺腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、皮膚癌、上皮細(xì)胞癌、宮頸癌、卵 巢癌、腸癌、鼻咽癌、腦癌、骨癌、食道癌、黑色素瘤、腎癌或口腔癌。
[0108] 其中，制備得到的抗腫瘤藥物為固態(tài)、半固態(tài)、液態(tài)或氣態(tài)，包括但不限于片劑、膠 囊、粉劑、顆粒劑、膏劑、溶液劑、栓劑、注射劑、吸人劑、疑膠劑、微球和氣溶膠。
[0109] 其中，所述的抗腫瘤藥物的制備方法為本領(lǐng)域公知的制備方法。例如，旨在注射給 藥的藥物組合物可以通過將本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥與滅菌的蒸館 水組合來制備，從而形成溶液劑?？商砑颖砻婊钚詣┮源龠M(jìn)形成均勻溶液或混懸液。制備藥 物組合物的實(shí)際方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所己知，例如可參見The Science and Practice of Pharmacy(制藥科學(xué)與實(shí)踐），20th Edition(Philadelphia College of Pharmacy and Science,2000)〇
[0110] 其中，所述的抗腫瘤藥物的給藥途徑包括但不限于口服、局部、經(jīng)皮、肌肉、靜脈、 吸入、腸胃外、舌下、直腸、陰道及鼻內(nèi)。例如，適合口服給藥的劑型包括膠囊、片劑、顆粒劑 以及糖漿等。這些制劑中包含的本發(fā)明的化合物可以是固體粉末或顆粒;水性或非水性液 體中的溶液或是混懸液；油包水或水包油的乳劑等。上述劑型可由活性化合物與一種或多 種載體或輔料經(jīng)由通用的藥劑學(xué)方法制成。上述的載體需要與活性化合物或其他輔料兼 容。對(duì)于固體制劑，常用的無毒載體包括但不限于甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、纖維素、葡 萄糖、庶糖等。用于液體制劑的載體包括但不限于水、生理鹽水、葡萄糖水溶液、乙二醇和聚 乙二醇等。活性化合物可與上述載體形成溶液或是混懸液。具體的給藥方式和劑型取決于 化合物本身的理化性質(zhì)以及所應(yīng)用疾病的嚴(yán)重程度等。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠根據(jù)上述因素 并結(jié)合其自身具有的知識(shí)來確定具體的給藥途徑。例如可參見:李俊，《臨床藥理學(xué)》，人 民衛(wèi)生出版社，2008.06; 丁玉峰，論臨床劑型因素與合理用藥，醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，26(5)，2007; Howard C.Ansel，Loyd V Allen，Jr.，Nicholas G.Popovich著，張志強(qiáng)主譯，〈〈藥物劑型與 給藥體系》，中國醫(yī)藥科技出版社，2003.05。
[0111 ]同時(shí)，本發(fā)明中香豆素類NEDD8激活酶抑制劑可以與一種或多種其它的本發(fā)明化 合物或者一種或多種其它抗癌藥物聯(lián)合或組合使用，以治療和/或預(yù)防腫瘤?？梢耘c本發(fā)明 化合物聯(lián)用的藥物包括但不限于萬珂、多西他賽、吉西他濱、順鉑、卡鉑、格列衛(wèi)、替莫唑胺、 阿霉素、達(dá)卡巴嗪、特羅凱、依托泊糖苷、柔紅霉素以及阿糖胞昔等。
[0112] 上述香豆素類NEDD8激活酶抑制劑（Π )的制備方法，包括如下步驟：
[0113] 將上述中間體ΙΠ 、二異丙基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦)鈀和化合物VI溶于乙 腈后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下在室溫下攪拌〇. 5~1.5h后，過濾，濾液經(jīng)濃縮后經(jīng)柱層析純化，得中間 體；中間體溶于四氫呋喃后加入TBAF，室溫下攪拌5~15min后溶于乙酸乙酯，取有機(jī)相用飽 和食鹽水洗滌2~3次后溶于混合溶劑中，室溫下攪拌4~8h;攪拌完成后將所得的混合體系 溶于甲苯，濃縮，加入乙醚，超聲后過濾，固體部分用乙醚洗滌后干燥，即得，
[0114]
[0115] 其中，上述中間體m、二異丙基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦）鈀、化合物VI和 TBAF的的摩爾比為1:1~1.5:0.05~0.1:0.05~0.1:1~1.3:1.1~1.4;所述的混合溶劑由 三氟乙酸和二氯甲烷以1:3~5的體積比混合而成；混合體系和甲苯的固液比為lg: 5~ 200mL;濃縮后的混合體系和乙醚的固液比為1 g: 5~200mL。
[0116] 上述香豆素類NEDD8激活酶抑制劑（Π )的制備方法，包括如下步驟：
[0117] 將上述中間體ΙΠ 、二異丙基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦)鈀和化合物VI溶于乙 腈后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下在室溫下攪拌〇. 5~1.5h后，過濾，濾液經(jīng)濃縮后經(jīng)柱層析純化，得中間 體；中間體溶于混合溶劑中，室溫下攪拌4~8h;攪拌完成后將所得的混合體系溶于甲苯，濃 縮，加入乙醚，超聲后過濾，固體部分用乙醚洗滌后干燥，即得，
[0118]
[0119] 其中，上述中間體m、二異丙基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦）鈀、化合物VI和 TBAF的的摩爾比為1:1~1.5:0.05~0.1:0.05~0.1:1~1.3:1.1~1.4;化合物VI和乙腈的 固液比為1 g: 5~200mL;所述的混合溶劑由三氟乙酸和二氯甲烷以1:3~5的體積比混合而 成；中間體和混合溶劑的固液比為1 g: 5~200mL;混合體系和甲苯的固液比為1 g: 5~200mL; 濃縮后的混合體系和乙醚的固液比為1 g: 5~2 0 Om L。
[0120]上述制備方法中，沒有特別說明的的柱層析，都是使用PE:EA = 20:1的層析柱。
[0121] 有益效果：
[0122] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)勢(shì):本發(fā)明化合物能夠有效抑制腫瘤細(xì)胞增 值，對(duì)NEDD8激活酶高表達(dá)細(xì)胞增值抑制效果明顯?？捎糜谥委熌[瘤，與硼替佐米聯(lián)合用藥 具有協(xié)同作用，增加藥效。
【附圖說明】
[0123] 圖1為實(shí)施例37中試驗(yàn)結(jié)果示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0124] 下述實(shí)施例中，1-1~1-26和Π-1~Π-10的制備總反應(yīng)式如下所示
[0125]
應(yīng)后脫Boc制得1-1~1-22,關(guān)鍵中間體7依次經(jīng)Sonogashiva反應(yīng)、與NaN3點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)及 脫Boc后制得1-23~1-26。關(guān)鍵中間體7經(jīng)Sonogashiva反應(yīng)后脫Boc制得Π-1~Π-10。
[0127] 實(shí)施例i 7-(4-(苯乙胺基)哌啶-1-取代)-4-苯基-香豆素（1-1)
[0128] 操作步驟：
[0129] (1)1-(4-溴-2-羥基-苯)丙酮酸甲酯（1)的合成
[0130] 2L四頸圓底燒瓶中加入1000mL無水甲苯及31g NaH，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，冰浴攪拌5min。 冰浴條件下滴加溶有60g 4-溴-2-羥基苯乙酮的甲苯溶液400mL。滴加完畢后繼續(xù)冰浴攪拌 20min。然后滴加67g碳酸二乙酯。滴加完畢后加熱回流攪拌過夜。TLC檢測(cè)反應(yīng)完畢后，冰浴 降溫，用濃鹽酸調(diào)pH至酸性。過濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌，濾液濃縮的粗品。用柱層析純化 (PE:EA = 20:1)的產(chǎn)品 60·418<3ΗΝΜΚ(300ΜΗζ，ΟΧη3)δ:7·53(υ = 8·4Ηζ，1Η)，7·22(8，1Η)， 7.08(d,J=5.7Hz,lH),3.98(s,2H),3.77(s,3H).MS(ESI)(m/z):295.0[M+23] +.
[0131] (2)4-羥基-7-溴香豆素(2)的合成
[0132] 500mL圓底燒瓶中加入300mL甲苯。及60.41 g化合物!，加熱回流攪拌24h。有大量白 色固體生成，過濾，濾液用甲苯洗滌。收集濾餅并干燥，濾液濃縮得黃色油狀物，加入200mL 甲苯，繼續(xù)加熱回流攪拌24h。過濾，濾餅用甲苯洗滌，收集濾餅并干燥。得白色固體產(chǎn)品 37.23g〇HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.76(d ,J = 8.4Hz,lH),7.22(d ,J=1.8Hz,lH),7.08(dd, J = 8.4,1.8Hz,lH) ,5.61(s,lH) .MS(ESI)(m/z) :239·0[Μ-1] + · (3)4-芐氧基-7-溴香豆素 (3)的合成
[0133] 500mL圓底燒瓶中加入300mL無水乙腈，37.23g中間體2，42.69g碳酸鉀及52.6g溴 化芐，氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下加熱回流攪拌6h。趁熱過濾，濾液靜置自然降溫至室溫后繼續(xù)靜置 1 h。有白色絮狀固體生成。過濾，濾餅用4 °C的乙腈洗滌。收集濾餅干燥。的17.27g產(chǎn)品。HNMR (300MHz,DMS0-d6)5：7.75-7.72(m,2H),7.56-7.52(m,3H),7.47-7.40(m,3H),6.09(s,lH), 5.35(s,2H).
[0134] (4)7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺基)哌啶)-4-芐氧基香豆素(5)
[0135] 500mL圓底燒瓶中依次加入400mL 1,4-二氧六環(huán)、0.18g氯化鈀、3.14g BINAP、 17.28g碳酸銫及15.35g 4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺）哌啶(4)。置換氮?dú)?次，90°C加熱 攪拌過夜。TLC檢測(cè)反應(yīng)完畢后，自然降溫至室溫。過濾，濾餅用1，4_二氧六環(huán)洗滌。合并濾 液，濃縮的粗品。柱層析純化的15.4g黃色油狀產(chǎn)品。
[0136] (5) 7-( 4-( N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶)-4-羥基香豆素(6)
[0137] 250mL圓底燒瓶中加入100mL四氫呋喃，15.4g中間體5,及l(fā)g 10%鈀碳。室溫?cái)嚢?過夜。TLC檢測(cè)反應(yīng)完畢后。加入100mL氨氣飽和的甲醇溶液，攪拌5min。過濾。濾餅用氨氣飽 和的甲醇溶液洗滌。合并濾液濃縮，得黃色油狀粗品。加入200mL PE:EA = 3:1的混合溶液溶 解，攪拌lh，有灰色固體生成。過濾，濾餅用PE :EA = 3:1的混合溶液洗滌，收集濾餅，干燥的 7.18g產(chǎn)品。HNMR(300MHz，DMS0-d6)S:7.59(d，J = 9Hz，lH) ,7.31-7.19(m，5H)，6.95(d，J = 8.7Hz,lH),6.76(s,lH),5.32(s,lH),4.02(d,J=13.2Hz,2H),3.48(lH),3.24(s,2H),2.91 (t,J=12.6Hz,2H),2.77(t,2H),1.82(d,2H),1.63(d,2H),1.38(s,9H).
[0138] (6)三氟甲磺酸7-(4_(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶)基香豆素-4-酯(7)
[0139] 25mL圓底燒瓶中加入0.45g中間體6，5mL無水二氯甲烷及0.147g三乙胺。冰浴攪拌 lOmin后滴加三氟甲磺酸酐0.408g。滴加完畢后自然升溫至室溫，繼續(xù)攪拌2KTLC檢測(cè)反應(yīng) 完畢后，直接加入lg 100-200目硅膠制砂柱層析純化，得0.36g黃色油狀產(chǎn)品。
[0140] (7)7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-苯基香豆素（1-1)
[0141] 25mL圓底燒瓶中依次加入5mL無水四氫呋喃，0.12g中間體7,0.058g碳酸鈉， 0.012g四（三苯基膦)鈀，及0.027g苯基硼酸。置換氮?dú)夂螅獨(dú)獗Ｗo(hù)條件下加熱回流攪拌 2h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完畢后，過濾，濾餅用四氫呋喃洗滌。合并濾液，濃縮，柱層析(PE:EA = 5 : 1)，所得中間體用3mL二氯甲烷溶解，加入0.5mL三氟醋酸，室溫?cái)嚢柽^夜。反應(yīng)完畢后加入 lmL甲苯，濃縮。加入15mL乙醚，超聲5min，過濾，濾餅用乙醚洗滌。收集濾餅干燥，得45.5mg 產(chǎn)品，純度96.9%。
[0142] ·ΜΚ(300ΜΗζ，0Μ50-(16)δ:7·56(8,3Η)，7.51(s，2H)，7.22(m，6H)，6.96(d，2H)， 6.07(s,H) ,4.05(d,J=13.2Hz,2H) ,3.40(s,H) ,3.21(s,2H) ,2.91(m,4H) ,2.07(d,J = 10· 1Hz，2H)，1.54((1,J= 11 ·4Ηζ，2Η) .C匪R(500MHz，DMS0-d6)S: 160.81.156.41,155.68， 152.93,137.51,135.74,129.99,129.27,129.09,129.06,128.75,127.97,127.26,111.91， 109.66,109.32,101.16,54.68,45.89,45.21,32.23,27.51.HRMS(ESI)(m/z):425.2239[M+ 1]+,calculated for C28H29N202,425.2229.
[0143] 實(shí)施例2 7-(4-苯乙胺基哌啶_丨-取代)-4-(3-氟-4-甲基苯-丨-取代)香豆素 （〗-2)
[0144] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.147g中間體7、0.042g3-氟-4-甲基苯硼酸、0.0148四（三苯基膦)鈀和0.064碳酸鈉，得74.611^，產(chǎn)率81.2%，純度 99.0%〇
[0145] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.45(t,J=7.6Hz,H),7.23-7.38(m,8H),6.95(d,2H), 6.09(s,H),4.05(d,J=12.8Hz,2H),3.40(s,H),3.23(s,2.65),2.90(m,4H),2.33(s,3H), 2.08(d,J=10.7Hz,2H), 1.51 (q, J= 11.8Hz , 2H). CNMR( 500MHz , DMS〇-d6) δ ： 161.93 , 160.74.159.99.156.39.154.27.152.96.137.52.135.27.135.20.132.52.132.48.129.09, 129.06.127.86.127.25.126.36.126.22.124.71.115.54.115.36.111.93.109.81.109.09, 101.15.
[0146] 實(shí)施例3 7-(4-苯乙胺基哌啶_丨-取代)-4-(3-甲基-4-氟苯-丨_取代)香豆素 （〗-3)
[0147] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.16g中間體7、0.045g3_甲 基-4-氟苯硼酸、0.015 8四（三苯基膦）鈀和0.0678碳酸鈉，得64.911^，產(chǎn)率56.5%，純度 97.5%〇
[0148] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.44(d,J=7.3Hz,H),7.23-7.38(m,8H),6.96(d,2H), 6.06(s,H),4.05(d,J=13.3Hz,2H),3.39(H),3.22(s,2H),2.90(m,4H),2.31(s,3H),2.08 (d，J = 11.0Hz，2H)，1.51(q，J=11.6Hz，2H) .C匪R(500MHz,DMS0-d6)S: 162.74,160.78， 156.37,154.79,152.92,137.50,132.21,131.79,129.10,129.06,128.39,128.33,127.98， 127.26,125.56,125.42,115.94,115.76,111.92,109.69,109.27,101.13,54.66,45.87， 45.19,32.22,27.51,14.58.
[0149] 實(shí)施例4 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(3,4-二甲基苯-1-取代)香豆素（1-4) [0150]合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.12g中間體7、0.033g3，4-二甲基苯硼酸、0.0118四（三苯基膦）鈀和0.05 8碳酸鈉，得78.911^，產(chǎn)率69.3%，純度 98.8%〇
[0151] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.20-7.38(m,9H),6.96(d,2H),6.02(s,H),4.05(d,J= 13.1Hz,2H),3.36(lH),3.22(s,2H),2.90(m,4H),2.30(s,6H),2.07(d,J=9.6Hz,2H),1.52 (q，J=11.0Hz，2H).CMMR(500MHz，DMS0-d6)S:160.89，156.41，155.83，152.84，138.49， 137.50,137.35,133.24,130.26,129.69,129.11,129.07,128.10,127.27,126.18,111.87， 109.39,109.24,101.15,54.68,45.88,45.19,32.23,27.50,19.81,19.67.
[0152] 實(shí)施例5 7-(4-苯乙胺基哌啶_丨-取代)-4-(3,4-二甲基苯-丨_取代)香豆素 （〗-5)
[0153] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，所用原料為0.16g中間體7、0.056g 2-三氟甲基苯 硼酸、0. 〇16g四（三苯基膦)鈀和0.067g碳酸鈉，得67. lmg，產(chǎn)率50.8%，純度96.1 %。
[0154] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.93(d,J = 7.7Hz,lH) ,7.74-7.86(m,2H) ,7.48(d,J = 7.4Hz,lH),7.24-7.38(m,5H),6.98(s,lH),6.88(d ,J = 9.1Hz,lH),6.65(d ,J = 8.9Hz,lH), 6.87(s,lH) ,4.07(d,J=13.4Hz,2H) ,3.39(s,lH) ,3.22(s,2H) ,2.89(m,4H),2.06(d,J = 11·2Ηζ，2Η)，1.54(d，J=12.1Hz，2H).C匪R(500MHz，DMS0-d6)S:160.34，155.74，153.50， 153.01,137.52,133.79,133.14,130.99,130.19,129.10,129.06,127.88,127.53,127.44， 127.26,127.20,126.96,126.92,125.35,123.17,118.86,116.47,111.97,110.80,110.44， 100.79,54.64,45.85,45.80,32.22,27.52,27.48.
[0155] 實(shí)施例6 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(3-甲氧基-4-甲基苯-1-取代）香豆素 (1-6)
[0156] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.12g中間體7、0.037g3_甲 氧基-4-甲基苯硼酸、0.01 lg四（三苯基膦)鈀和0.05g碳酸鈉，得61.6mg，產(chǎn)率49.0%，純度 98.6%〇
[0157] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5:7.24-7.37(m,7H),6.95-7.02(m,4H),6.10(s,H),4.05 (d J=13.1Hz,2H),3.84(s,3H),3.40(lH),3.36(d,lH),3.23(s,2H),2.90(m,4H),2.23(s, 3H),2.07(d,J=11.43Hz,2H),1.52(q,J=11.4Hz,2H).CNMR(500MHz,DMS0-d6)5：160.92, 157.90,156.43,155.78,152.88,137.52,134.58,130.99,129.09,129.06,128.14,127.75, 127.26,120.58,111.87,110.80,109.44,109.39,101.16,55.86,54.69,45.89,45.22, 32.23,27.55,16.33.
[0158] 實(shí)施例7 7-(4-苯乙胺基哌啶_丨-取代)-4-(3-氯-4-氟苯-丨_取代)香豆素（〗-7)
[0159] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.12g中間體7、0.039g3-氯-4-氟苯硼酸、0.0118四（三苯基膦）鈀和0.05 8碳酸鈉，得47.111^，產(chǎn)率49.1%，純度 97.8%〇
[0160] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.75(d,J = 7.1Hz,H) ,7.58(t,J = 8.8Hz,H) ,7.51 (m, 2H),7.24-7.37(m,5H),7.18(d ,J = 9.1Hz,H),6.96(d,2H),6.14(s,H),4.05(d ,J = 13.1Hz, 2H) ,3.37(d,l) ,3.22(s,2H),2.90(m,4H),2.08(d,J=11.61Hz,2H) ,1.52(q,J=11.73Hz, 2H).CNMR(500MHz,DMS0-d6)5：160.63,159.25,157.26,156.33,153.24,153.03,137.55, 133.40,133.37,131.06,129.86,129.80,129.05,127.76,127.24,120.65,120.50,117.88, 117.72,111.99,110.27,109.05,101.10,101.10,54.62,45.86,45.20,32.21,27.55.
[0161] 實(shí)施例8 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(3-氯-4-三氟甲基苯-1-取代）香豆素 (1-8)
[0162] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.16g中間體7、0.066g3_ 氯-4-三氟甲基苯硼酸、0.016g四（三苯基膦）鈀和0.067g碳酸鈉，得產(chǎn)物80.3mg，產(chǎn)率 50.8%，純度 99.1%。
[0163] ·ΜΚ(300ΜΗζ，0Μ50-(16)δ:8·02(υ = 8·2Ηζ，1Η) ,7.，88(s, 1H)，7.66((1, J = 8.3Hz，lH)，7.25-7.38(m，5H)，7.15(d，J = 8.9Hz，lH)，6.95(t，2H)，6.22(s，H)，4.06(d，J = 13.6Hz,2H) ,3.38(d,H) ,3.23(s,2H) ,2.90(m,4H) ,2.08(d,J=11.3Hz,2H) ,1.51(q,J = 11·2Hz，2H)·CNMR(500MHz，DMS0-d6)S:160·47，156·34，153·13，152·62，141·52，137·50, 131.72,129.09,129.06,128.79,128.30,127.83,127.67,127.58,127.26,126.45,124.28， 122.11,119.94,118.89,116.51,112.04,110.60,108.73,101.12,54.65,45.85,45.21， 32.22,27.57.HRMS(ESI)(m/z):527.1719[M+l]+,calculated for C29H27N202C1, 527.1713.
[0164] 實(shí)施例9 7-(4-苯乙胺基哌啶_丨-取代)-4-(3-三氟甲氧基苯-丨-取代)香豆素 d- 9)
[0165] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.16g中間體7、0.061 g3-三 氟甲氧基苯硼酸、0.0168四（三苯基膦)鈀和0.0678碳酸鈉，得產(chǎn)物56.311^，產(chǎn)率41.3%，純 度 99.0%。
[0166] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.69(t,J = 7.9Hz,lH),7.53(t,J = 7.0Hz,2H) ,7.51(s, IH) ,7.15-7.38(m,5H) ,7.15(d,J = 8.7Hz,lH) ,6.97(d,2H) ,6.15(s, 1H) ,4.06(d,J = ll.lHz,2H),3.35(t,lH),3.20(d,2H),2.90(m,4H),2.11(d ,J=10.6Hz,2H),1.52(q,J = 11·0Hz，2H)·CNMR(500MHz，DMS0-d6)δ :160·61，156·39，153·78，153·02，148·90，137·87, 137.50.131.47.129.09.129.06.128.03.127.61.127.26.122.37.121.55.121.42.119.50, 118.90,117.47,116.51,112.02,110.25,108.99,101.17,54.67,45.86,45.21,32.23, 27.53.HRMS(ESI)(m/z):509.2063[M+1] +, calculated for C29H28N203,509.2052.
[0167] 實(shí)施例10 7-(4-苯乙胺基哌啶_丨-取代）-4-(3-甲氧基-5-氯苯-丨_取代）香豆素 (1-10)
[0168] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.12g中間體7、0.041g3_甲 氧基-5-氯苯硼酸、0.Oilg四（三苯基膦)鈀和0.05g碳酸鈉，得產(chǎn)物59.8mg，產(chǎn)率60.8%，純 度 99.0%。
[0169] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.20-7.37(m,7H),7.11(s,H),6.98(d,3H),6.13(s,H), 4.05(d,J=13.4Hz,2H) ,3.85(s,3H) ,3.41(s,H) ,3.20(d,2H) ,2.90(q,4H) ,2.08(d,J = 9.5Hz，2H)，1.52(q，J=11.6Hz，2H).C匪R(500MHz，DMS0-d6)S:160.74，160.68，156.33, 154.04,152.99,138.44,137.53,134.65,129.10,129.06,127.78,127.26,120.61,115.41， 113.67,112.00,109.99,109.00,56.31,54.63,45.86,45.19,32.22,27.53.
[0170] 實(shí)施例11 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(2,5-二甲氧基苯-1-取代)香豆素（I- II)
[0171] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.12g中間體7、0.04g 2，5-二甲氧基苯硼酸、0.0128四（三苯基膦)鈀和0.058碳酸鈉，得產(chǎn)物77.31^，產(chǎn)率63.4%，純度 98.3%〇
[0172] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.24-7.38(m,5H),7.05-7.15(m,2H),6.85-6.93(m, 2H),6.03(s,lH),4.02(d,J=13.1Hz,2H),3.75(s,3H),3.66(s,3H),3.37(d,lH),3.22(s, 2H)，2.89(m，4H)，2.07(d，J=10.6Hz，2H)，1.51(q，J=11.4Hz，2H).CNMR(500MHz，DMS0-d6) δ :160.99,155.76,153.89,153.66,152.82,150.38,137.53,129.10,129.06,128.29， 127.26,125.26,115.93,115.80,113.40,111.85,110.64,109.94,100.79,56.44,55.98， 54.66.45.94.45.19.32.22.27.50.
[0173] 實(shí)施例12 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(苯并[1，4]二氧六環(huán))香豆素（1-12) [0174]合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.16g中間體7、0.053gl，4_ 苯并二氧六環(huán)-6-硼酸、0.015g四（三苯基膦）鈀和0.067g碳酸鈉，得產(chǎn)物58 . lmg，產(chǎn)率 54.35%，純度98.9%。
[0175] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.28-7.38(m,6H),6.96-7.04(m,5H),6.02(s,lH),4.32 (s,4H),4.05(d,J=12.8Hz,2H),3.40(s,lH),3.23(s,2H),2.90(m,4H),2.08(d,J= 11·3Hz,2H)，1.52(q，J=10.5Hz,2H).C匪R(500MHz，DMS0-d6)S:160.87,156.39,155.02， 152.86,145.12,143.95,137.52,129.09,129.05,128.68,128.04,127.25,121.94,117.88， 117.57.111.84.109.35.109.22.101.15.64.71.64.57.54.68.45.89.45.21.32.22.27.52.
[0176] 實(shí)施例13 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(喹啉-8-取代)香豆素（1-13)
[0177] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為O.lg中間體7、0.032g喹啉-8-硼酸、0.009g四（三苯基膦)鈀和0.042g碳酸鈉，得產(chǎn)物47.9mg，產(chǎn)率60.1 %，純度99.2 %。
[0178] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：8.49(d ,J = 8.19Hz,lH) ,8.16(d, 7.17Hz , 1H), 7,73(t, 2H) ,7.58(dd,J = 8.1Hz,4.2Hz,1H) ,7.27-7.37(m,5H) ,6.98(s,lH) ,6.76(d,J = 9.3Hz, 1H) ,6.57(d,J = 8.8Hz, 1H) ,6.16( s,lH) ,4.00(d, J= 13.2Hz , 2H), 3.33( s , 1H), 3.21 (s , 2H)，2.89(m，4H)，2.05(d，J=10.8Hz，2H)，l .54((1, J=10.8Hz，2H).CNMR(500MHz，DMS0-d6) δ :160.97,155.68,155.65,152.71,151.18,145.77,137.51,136.95,135.05,130.12， 130.08，129.09，129.05，128.64，128.35，127.25，126.84，122.43，111.78，111.37，111.20， 100.79,54.68,45.97,45.19,32.22,27.47.
[0179] 實(shí)施例14 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(喹啉-7-取代)香豆素（1-14)
[0180] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟（7)所用原料為0.12g中間體7、0.038g喹 啉-7-硼酸、0.012g四（三苯基膦）鈀和0.05g碳酸鈉，得產(chǎn)物51.7mg，產(chǎn)率54.1%，純度 90.5%〇
[0181] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：8.49(d,J=8.4Hz,lH),8.13(t,2H),7.64-7.72(m,2H), 7.26-7.38(m,7H),6.96(t,2H),6.25(s,H),4.06(d,J=14.0Hz,2H),3.35(lH),3.2(d,2H), 2.89(m,4H),2.08(d,J=10.5Hz,2H),1.52(q,J=11.6Hz,2H),CNMR(500MHz,DMS0-d6)5： 160.76,156.45,154.90,152.99,151.91,147.52,137.52,136.90,136.70,129.29,129.10, 129.06,128.90,128.62,127.98,127.26,127.02,122.90,111.99,110.30,109.26,101.18, 54.65.45.87.45.20.32.22.27.52.
[0182] 實(shí)施例15 7-(4-苯乙胺基哌啶_丨-取代）-4-(2-氟-6-甲氧基苯-丨_取代）香豆素 (1-15)
[0183] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.12g中間體7、0.038g2-氟-6-甲氧基苯硼酸、0.012g四（三苯基膦)鈀和0.05g碳酸鈉，得產(chǎn)物49.3mg，產(chǎn)率51.9 %， 純度99.7%。
[0184] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.51(q,J = 8.2Hz,lH) ,7.27-7.38(m,5H) ,6.90-7.10 (m,4H),6.82(d,lH),6.12(s,1H),4.03(d,J=12.4Hz,2H),3.75(s,3H),3.40(s,1H),3.22 (s,2H),2.89(m,4H),2.06(d,J=ll.lHz,2H),1.51(qJ=10.9Hz,2H).CNMR(500MHz,DMS0-d6)5：160.68,160.49,155.91,153.00,147.44,137.53,132.10,132.02,129.10,129.05, 127.44,127.25,112.23,112.11,112.07,111.96,109.71,108.47,108.33,100.90,56.74, 54.63,45.93,45.18,32.22,27.43.
[0185] 實(shí)施例16 7-(4-苯乙胺基哌啶-丨-取代）-4-(4-甲氧羰基苯-丨-取代）香豆素 d-16)
[0186] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.1 g中間體7、0.033g 4-甲 氧羰基苯硼酸、0 . oig四（三苯基膦)鈀和0. 〇42g碳酸鈉，得產(chǎn)物67 . lmg，產(chǎn)率83.0%，純度 99.1%〇
[0187] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：8. ll(d,J = 8.1Hz,2H) ,7.64(d,J = 8.0Hz,2H) ,7.25- 7.38(m，5H)，7.16(d，J = 8.8Hz，H)，6.95(t，2H)，6.14(s，H)，4.05(d，J=13.4Hz，2H)，3.91 (s,3H),3.37(d,H),3.23(s,2H),2.89(m,4H),2.07(d,J=11.0Hz,2H),1.55(q,J=11.2Hz, 2H).C匪R(500MHz，DMS0-d6)S :166.21，160.63，156.40，154.54，153.01，140.30，137.51, 130.89.130.00. 129.31.129.10.129.06.127.77.127.26.111.97.110.00.108.89.101.16， 54.64.52.83.45.85.45.19.32.22.27.51. HRMS(ESI)(m/z):483.2291[M+l]+,calculated for C30H31N204,483.2284.
[0188] 實(shí)施例17 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(異吲哚啉-1-酮-5-取代)香豆素（I-17)
[0189] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.13g中間體7、0.064g異吲 哚啉-1-酮-5-硼酸、0.013 8四（三苯基膦)鈀和0.0558碳酸鈉，得產(chǎn)物75.611^，產(chǎn)率70.7%， 純度97.7%。
[0190] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.82(d ,J = 7.8Hz,lH),7.70(s,lH),7.56(d ,J = 7.9Hz, 1H),7.20-7.38(m,7H),6.95(t,2H),6.12(s,lH),4.46(s,2H),4.06(d,J=13.1Hz,2H), 3.40(1H),3.21(d,2H),2.90(m,4H),2.08(d,J=10.6Hz,2H),1.56(q,J=10.41Hz,2H) ?CMMR(500MHz，DMS0-d6)S:169.73，160.69，156.39，155.25，152.99，145.09，138.59， 137.50,134.03,129.10,129.06,128.49,127.96,127.26,124.26,123.59,111.95,110.02， 109.18.101.13.54.65.45.86.45.50.45.20.32.22.27.51.
[0191] 實(shí)施例18 7-(4-苯乙胺基哌啶_丨-取代)-4-(4-苯基苯-丨_取代)香豆素（〗- 18)
[0192] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.15g中間體7、0.054g4_苯 基苯硼酸、0.0148四（三苯基膦）鈀和0.061 8碳酸鈉，得產(chǎn)物78.111^，產(chǎn)率63.3%，純度 98.2%〇
[0193] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.85(d,J = 8.2Hz,2H),7.75(d,J = 7.4Hz,2H) ,7.59(d, J = 8.1Hz,2H) ,7.50(t,J = 7.1Hz,2H) ,7.42(d,J = 7.2Hz,lH),7.25-7.40(m,6H) ,6.98(d, 2H),6.13(s,H),4.06(d,J=13.3Hz,2H),3.40(t,H),3.23(s,2H),2.90(m,4H),2.08(d, 2H),1.52(q,J=12.0Hz,2H),CNMR(500MHz,DMS0-d6)5：160.82,156.45,155.27,152.95, 141.75.139.69.137.51.134.76.129.53.129.48.129.09.129.06.128.42.128.00. 127.50, 127.24,111.93,109.59,109.27,101.20,54.69,45.89,45.22,32.23,27.54.HRMS(ESI)(m/ z):501.2554[M+1]+,calculated for C34H33N202,501.2542
[0194] 實(shí)施例19 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(4-苯氧基苯-1-取代)香豆素（1-19)
[0195] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.15g中間體7、0.058g4-苯 氧基苯硼酸、0 . 〇14g四（三苯基膦）鈀和0.061g碳酸鈉，得產(chǎn)物68.4mg，產(chǎn)率53.7%，純度 94.9%〇
[0196] ·ΜΚ(300ΜΗζ，0Μ50-(16)δ:7·44-7·54(πι，4Η)，7.20-7.38(m，7H) ,7.12(d，J = 8.4Hz,2H),6.99(s,lH),6.08(s,lH),4.05(d,J=13.32Hz,2H),3.37(d,H),3.20(d,2H), 2.89(m,4H),2.07(d,J=10.9Hz,2H),1.51(q,J=12.1Hz,2H),CNMR(500MHz,DMS0-d6)5： 160.82.158.67.156.43.156.17.155.00. 152.90.137.47.130.76.130.70.130.35.129.10, 129.06,128.02,127.27,124.72,119.98,118.55,111.89,109.49,109.33,101.19,55.45, 54.70,45.89,45.21,32.24,27.52.HRMS(ESI)(m/z):517.2498[M+l]+,calculated for C34H33N203,517.2491.
[0197] 實(shí)施例20 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(3-甲基-4-甲氧基-5-氯苯-1-取代） 香豆素（1-20)
[0198] 合成方法如實(shí)施例1，不同的是，所用原料為0. lg中間體7、0.037g 3-甲基-4-甲氧 基-5-氯苯硼酸、0.0 lg四（三苯基膦)鈀和0.042g碳酸鈉，得產(chǎn)物71.9mg，產(chǎn)率83.0%，純度 97.3%〇
[0199] ·ΜΚ(300ΜΗζ，0Μ50-(16)δ:7·44(8，Η) ,7.24-7 ·38(ι?，7H)，6.97(d，2H)，6.09(s， 1H),4.05(d,J=12.8Hz,2H),3.83(s,3H),3.37(d,2H),3.23(s,2H),2.90(m,4H),2.35(s, 3H),2.08(d，J=11.0Hz，2H),1.56(q,2H).C匪R(500MHz，DMS0-d6)S:160.71,156.33， 155.13,153.88,152.95,137.51,134.15,132.40,130.47,129.10,129.06,128.03,127.89， 127.59,127.26,111.98,109.84,109.09,101.12,60.49,54.65,45.86,45.19,32.22， 27.53.HRMS(ESI)(m/z):503.2112[M+1] +,calculated for C30H32N203C1,503.2101.
[0200] 實(shí)施例21 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(3,4,5-三甲氧基苯-1-取代)香豆素 (1-21)
[0201]合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.1 g中間體7、0.039g 3，4， 5-三甲氧基苯硼酸、0 ·Olg四（三苯基膦)鈀和0 · 042g碳酸鈉，得產(chǎn)物71 · 9mg，得產(chǎn)物68 · 2mg， 產(chǎn)率79.1%，純度97.6%。
[0202] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.28-7.43(m,6H),6.97(s,2H),6.79(s,H),6.14(s, 1H),4.05(d,J=13.0Hz,2H),3.83(s,6H),3.75(s,3H),3.40(s,lH),3.23(s,2H),2.92(t, 4H),2.08(d，J=11.5Hz，2H),1.56(q,2H).C匪R(500MHz,DMS0-d6)δ:160.89,156.40, 155.62,153.50,152.89,138.89,137.53,131.12,129.09,129.06,128.21,127.25,111.91, 109.52,109.34,106.44,101.15,60.55,56.55,54.68,45.89,45.22,32.22,27.58.
[0203] 實(shí)施例22 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(尿嘧啶-5-取代)香豆素（1-22)
[0204]合成方法如實(shí)施例1，不同的是，在步驟(7)所用原料為0.11 g中間體7、0.035g尿嘧 啶-5-硼酸、0.02g四（三苯基膦）鈀和0.045g碳酸鈉，得產(chǎn)物21.5mg，產(chǎn)率28.0 %，純度 91.0%〇
[0205] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.68(d,J=5.0Hz,lH),7.27-7.38(m,6H),6.90(d,2H), 6.08(s,lH),4.04(d,J=13.89Hz,2H),3.34(s,lH),3.22(s,2H),2.91(m,4H) ,2.06(d,J = II. 6Hz,2H),1.51(dd,J=11.4Hz,9.3Hz,2H),CNMR(500MHz,DMS0-d6)5：162.75,161.01, 155.77,152.75,151.57,149.37,142.70,137.45,129.11,129.07,128.66,127.29,111.60, III. 24,109.99,108.81,100.70,54.72,45.99,45.16,32.25,27.42.
[0206] 實(shí)施例23 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(4-環(huán)丙基-1,2,3-三氮唑-5-取代)香 豆素（1-23)
[0207] 25mL圓底燒瓶中加入5mL無水乙腈、O.llg中間體7、0.034g二異丙基乙基胺、 0.0031g碘化亞銅、0.0 lg四（三苯基膦)鈀及0.0272g苯乙炔。置換氮?dú)夂?，氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫 攪拌1KTLC檢測(cè)完畢后，過濾，濾液用乙腈洗滌。濃縮濾液，粗品經(jīng)柱層析純化，所得中間體 用3mL二甲亞砜溶解，加入0.0132g NaN3，加熱至100 °C攪拌lh，加入1 OmL水，用乙酸乙酯萃 取三次，合并有機(jī)相，濃縮干燥，所得固體中加入〇. 5mL三氟醋酸，室溫?cái)嚢柽^夜，反應(yīng)完畢 后加入lmL甲苯，濃縮。加入15mL乙醚，超聲5min，過濾，濾餅用乙醚洗滌。收集濾餅干燥，得 21.2mg產(chǎn)品，產(chǎn)率25.2%。
[0208] HNMR(500MHz，DMS0-d6)δ:7·37-7·25(m，6H)，7·05-6·93(m，2H)，6·30(m，1H)，4·10 (d J=13.5Hz,2H),3.41(br,lH),3.23(s,2H),2.99(m,4H),2.12(d ,J=llHz,2H),2.00(m, 1H)，1.63(m，2H)，1.03(t，2H)，0.88(m，2H).CMMR(500MHz，DMS0-d6)S :160.82，160.51， 156.50,153.13,152.97,151.02,144.99,143.52,141.87,137.50,129.09,129.06,127.26， 119.30,111.81,110.93,108.79,108.29,100.95,54.71,45.86,45.22,32.23,27.53,9.08， 8.69.
[0209] 實(shí)施例24 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(4-環(huán)己基-1，2,3-三氮唑-5-取代)香 豆素（1-24)
[0210] 制備方法同實(shí)施例23,所不同的是，所用原料為0.13g中間體7、0.026g環(huán)己基乙 炔、0.013g四（三苯基膦)鈀、0.004g碘化亞銅、0.057g二異丙基乙基胺0.014g疊氮化鈉，得 產(chǎn)物 10.2mg，產(chǎn)率11.3%，純度 93.7%。
[0211] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.44(d,J = 8.9Hz,lH) ,7.34-7.20(m,5H) ,6.97-6.91 (m,2H),6.07(s,lH),4.00(d J=13.1Hz,2H),3.31(br,lH),3.17(m,4H),2.82(m,2H),2.00 (m,2H),1.82-1.65(m,5H),1.56-1.17(m,10H),CNMR(500MHz,DMS0-d6)δ：160.78,156/ 41.153.33,146.51,145.87,139.13,137.39,129.04,128.86,128.48,126.77,111.71, 109.91,109.04,100.61,54.43,46.68,45.97,34.29,33.84,32.76,29.44,26.13,25.79.實(shí) 施例25 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(4-苯基-1，2，3-三氮唑-5-取代)香豆素（1-25) [0212]制備方法同實(shí)施例23,所不同的是，所用原料為0.13g中間體7、0.028g4-苯基乙 炔、0.013g四（三苯基膦)鈀、0.004g碘化亞銅、0.57g二異丙基乙基胺0.014g疊氮化鈉，得產(chǎn) 物 16. lmg，產(chǎn)率21.3%，純度92.8%。
[0213] HNMR(500MHz,DMS0-d6)5： 15.69(br,lH) ,7.55(d,J = 7HZ,2H) ,7.41-7.20(m, 10H) ,6.97( s,lH) ,6.88(d, J = 9Hz , 1H), 6.11 (s , 1H), 4.07(d, J= 13.5Hz , 2H), 3.39(br, lH),3.22(s,2H),2.967(m,4H),2.10(d,J=10.5Hz,2H),1.60(m,2H).CNMR(500MHz,DMS0-d6)5： 160.57,156.45,153.09,137.50,129.40,129.09,129.06,127.86,127.26,111.81, 108.71,100.90,54.65,45.77,45.21,32.22,27.57.
[0214] 實(shí)施例26 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(4-(3-氯苯-1-取代)-1,2,3-三氮唑-5_取代)香豆素（1-26)
[0215]制備方法同實(shí)施例23,所不同的是，所用原料為0.13g中間體7、0.031g 3-氯苯-1-乙炔、O.Ollg四（三苯基膦)鈀、0.004g碘化亞銅、0.51g二異丙基乙基胺0.013g疊氮化鈉，得 產(chǎn)物 16. lmg，產(chǎn)率21.3%，純度92.0%。
[0216] HNMR(500MHz,DMS0-d6)5：15.90(br,lH),7.65(s,lH),7.42-7.18(m,9H),6.97(s, 1H) ,6.86(d,J = 9Hz,lH) ,6.14(s,lH) ,4.07(d,J=13Hz,2H) ,3.41(m,lH) ,3.24(t,2H), 2.97(m,4H),2.11(d,J=11.5Hz,2H),1.61(m,2H).
[0217] 實(shí)施例27 7-(4-苯乙胺基哌啶-卜取代)-4-乙炔基香豆素（Π -1)
[0218] 25mL圓底燒瓶中加入5mL無水乙腈、0 · 1 33g (0 · 223mmo 1)中間體7、0 · 058g (0 · 452mmol)二異丙基乙基胺、0 · 004g(0 · 021mmol)鵬化亞銅、0 · 0129g(0 · 0116mmol)四（三 苯基膦)鈀、以及0.025g(0.223mmol)苯乙炔。置換氮?dú)?，氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫?cái)嚢鑜hJLC檢測(cè)完 畢后，過濾，濾液用乙腈洗滌。濃縮濾液，粗品經(jīng)柱層析純化，得〇.119g中間體。該中間體 0.119g溶解于5mLTHF中，并加入0.093g TBAF，室溫?cái)嚢鑜Omin。反應(yīng)完畢后加入50mL乙酸乙 酯稀釋，有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌3次。濃縮有機(jī)相，所得殘?jiān)盟弥虚g體用4mL TFA:DCM =1:5的混合溶劑溶解，室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)完畢后加入lmL甲苯，濃縮反應(yīng)液。加入15mL乙醚， 超聲5min，過濾，濾餅用乙醚洗滌。收集濾餅干燥，得46. lmg產(chǎn)品，產(chǎn)率55.5 %，純度96.7 %。
[0219] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.58(d,J = 9.0Hz,lH) ,7.28-7.38(m,5H) ,7.04(d,J = 9.0Hz,lH),6.91(s,lH),6.36(s,lH),5.16(s,lH),4.06(d,J=12.4Hz,2H),3.38(d,H), 3.24(s，4H)，2.89(m，4H)，2.07(d，J=11.6Hz，2H)，1.54(d，2H).CNMR(500MHz，DMS0-d6)S: 160.18,155.82,153.41,137.52,136.06,129.09,129.05,127.43,127.25,114.10,112.15， 109.02.100.76.93.16.77.67.54.64.45.86.45.22.32.22.27.55.
[0220] 實(shí)施例28 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(2-環(huán)丙基乙炔-1-取代)香豆素（Π - 2)
[0221 ] 25mL圓底燒瓶中加入5mL無水乙腈、0.080g (0 . 134mmo 1)中間體7、0.035g (0 · 271mmol)二異丙基乙基胺、0 · 0025g(0.013mmol)鵬化亞銅、0 · 008g(0 · 006mmol)四（三苯 基膦)鈀、以及0.014g(0.211mmol)環(huán)丙基乙炔。置換氮?dú)?，氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫?cái)嚢鑜hJLC檢測(cè) 完畢后，過濾，濾液用乙腈洗滌。濃縮濾液，粗品經(jīng)柱層析純化，所得中間體用4mL TFA: DCM =1:5的混合溶劑溶解，室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)完畢后加入lmL甲苯，濃縮反應(yīng)液。加入15mL乙醚， 超聲5min，過濾，濾餅用乙醚洗滌。收集濾餅干燥，得23.Omg產(chǎn)品，純度97.1%。
[0222] HNMR(500MHz,DMS0-d6)5：7.56(d,J = 7.5Hz,lH) ,7.36-7.25(m,5H) ,7.03(d,J = 7.5Hz,lH),6.87(s,lH),6.16(s,H),4.08(d,J=13Hz,2H),3.38(lH),3.23(s,lH),2.98(m, 4H),2.12(d,J=llHz,2H),1.77(m,lH),1.63(m,2H),1.06(t,2H),0.93(s,2H).C匪R (500MHz,DMS0-d6)5：160.45,155.72,153.28,137.57,137.53,129.09,129.05,127.63, 127.24,112.24,112.05,109.52,108.20,100.74,70.52,54.64,45.91,45.22,9.87,0.57.
[0223] 實(shí)施例29 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(2-環(huán)己基乙炔-1-取代)香豆素（Π- 3)
[0224]制備方法同實(shí)施例28,所不同的是，所用原料為0.13g中間體7、0.26g環(huán)己基乙炔、 0.017g四（三苯基膦）鈀、0.004g碘化亞銅和0.056g二異丙基乙基胺，得產(chǎn)物48.9mg，產(chǎn)率 49.4%，純度 97.1%。
[0225] HNMR(500MHz,DMS0-d6)5：7.58(d,J=8.5Hz,lH),7.34(m,2H),7.26(m,3H),7.05 (dd ,J = 9Hz,2.5Hz,lH),6.89(d ,J = 2Hz,lH),6.191(s,lH),4.07(d ,J=13Hz,2H),3.38(s, 1H),3.22(s,lH),2.92(m,4H),2.83(m,lH),2.09(d,J=10.5Hz,2H),1.87(m,2H),1.52(m, 5H),1.36(m，3H).C匪R(500MHz，DMS0-d6)δ :160.46,155.76,153.29,137.51,137.46， 129.10,129.06,127.50,127.26,112.46,112.14,109.50,108.05,100.77,75.41,54.63, 45.89.45.19.32.22.32.01.29.44.27.52.25.65.24.55.
[0226] 實(shí)施例30 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(2-苯基乙炔-1-取代)香豆素（Π-4)
[0227] 制備方法同實(shí)施例28，所不同的是，所用原料為0.13g中間體7、0.028g 4-苯基乙 炔、0.013g四（三苯基膦)鈀、0.004g碘化亞銅、0.057g二異丙基乙基胺，得產(chǎn)物24.0mg，產(chǎn)率 25.7%，純度 91.5%。
[0228] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.72(t,3H),7.52(d,3H),7.30(t,6H),7.06(d,J= 8.0Hz,lH),6.94(s,lH),6.42(s,H),4.08(d,J=13.8Hz,2H),3.41(s,lH),3.24(s,2H), 2.92(m,4H),2.09(d ,J = 10.0Hz,2H),1.55(t,2H).
[0229] 實(shí)施例31 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(2-(3-甲基苯-1-取代）乙炔-1-取代） 香豆素（Π -5)
[0230]制備方法同實(shí)施例28，所不同的是，所用原料為0.1 g中間體7、0.022g 3-甲基苯基 乙炔、O.Olg四（三苯基膦)鈀、0.003g碘化亞銅、0.043g二異丙基乙基胺，得產(chǎn)物57.3mg，產(chǎn) 率73.9%，純度98.8%。
[0231] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.75(d ,J = 8.9Hz,lH),7.56(s,lH),7.51(d ,J = 7.2Hz, 1H),7.25-7.43(m,7H),7.06(d,J=9.0Hz,1H),6.94(s,lH),6.39(s,lH),4.07(d,J= 13.7Hz,2H),3.35(q,lH),3.20(m,2H),2.90(m,4H),2.37(s,3H),2.09(d,J=11.3Hz,2H), 1.52(dd，J=21.0Hz，11.7Hz，2H).C匪R(500MHz，DMS0-d6)S :160.34，155.83，153.40, 138.93,137.53,136.62,132.97,131.70,129.74,129.34,129.09,129.06,127.70,127.25， 120.82,112.80,112.15,109.09,101.31,100.84,83.34,54.64,45.91,45.23,32.22， 27.56,21.10.
[0232] 實(shí)施例32 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(2-(4-甲基苯-1-取代）乙炔-1-取代） 香豆素（Π -6)
[0233]制備方法同實(shí)施例28，所不同的是，所用原料為0.13g中間體7、0.028g 4-甲基苯 乙炔、0.013g四（三苯基膦)鈀、0.004g碘化亞銅、0.57g二異丙基乙基胺，得產(chǎn)物41.6mg，產(chǎn) 率 53.7%，純度 98.8%。
[0234] HNMR(300MHz，DMS0-d6)S:7.74(d，J = 8.9Hz，lH)，7.61(d，J = 8.0Hz，2H)，7.24-7.38(m,7H) ,7.06(d ,J = 8.9Hz,lH) ,6.93(s,lH) ,6.38(s,lH) ,4.07(d, J= 13.4Hz , 2H), 3.37(t,lH),3.23(s,2H),2.90(m,4H),2.38(s,3H),2.09(d ,J=11.19Hz,2H),1.53(q ,J = 10.5Hz，2H).CNMR(500MHz，DMS0-d6)S:160.39，155.82，153.37，141.13，137.52，136.73, 132.61.130.09.129.11.129.07.127.72.127.26.117.94.112.58.112.14.109.09.101.56, 100.64,83.24,54.63,45.90,45.21,32.22,27.55,21.63.
[0235] 實(shí)施例33 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(2-(3-氯苯-1-取代）乙炔-1-取代)香 豆素（Π -7)
[0236] 制備方法同實(shí)施例28,所不同的是，中所用原料為0.13g中間體7、0.026g 3-氯基 苯乙炔、0.013g四（三苯基膦)鈀、0.004g碘化亞銅、0.57g二異丙基乙基胺，得產(chǎn)物56.3mg， 產(chǎn)率58.0%，純度98.6%。
[0237] HNMR(500MHz,DMS0-d6)5：7.87(s,lH),7.80(d ,J = 9.0Hz,lH),7.70(d ,J = 7.5Hz, 1H) ,7.62(d ,J = 8.5Hz,lH),7.53(t ,J = 7.5Hz,lH) ,7.34(t ,J = 7.5Hz,2H) ,7.26(m,3H), 7.05(dd,J=8.5Hz,2Hz,lH),6.93(d,2Hz,lH),4.09(d,13.5Hz,2H),3.38(1H),3.23(s, 2H)，2.93(m，4H),2.ll(d，J=10.05Hz，2H)，1.57(m，2H).CNMR(500MHz，DMS0-d6)S:160.27， 155.84,153.43,137.53,136.14,134.00,132.09,131.31,130.97,129.10,129.06,127.87， 127.26,122.94,113.33,112.12,108.90,100.81,99.05,84.59,54.61,45.88,45.21， 32.22.27.56.
[0238] 實(shí)施例34 7-(4-苯乙胺基哌啶_丨-取代)-4-(2-(4-氯苯-1-取代）乙炔-1-取代)香 豆素（Π -8)
[0239] 制備方法同實(shí)施例28，所不同的是，所用原料為0.13g中間體7、0.026g 4-氯基苯 乙炔、0.013g四（三苯基膦)鈀、0.004g碘化亞銅、0.57g二異丙基乙基胺，得產(chǎn)物49.7mg，產(chǎn) 率 51.2%，純度 98.8%。
[0240] HNMR(300MHz,DMS0-d6)5：7.75(d,J = 8.56Hz,3H),7.59(dJ = 8.4Hz,2H),7.25-7.38(m,5H),7.05(d ,J = 9.3Hz,lH),6.94(s,lH),6.43(s,H),4.07(d ,J=13.1Hz,2H),3.37 (m,H),3.23(s,2H),2.90(m,4H),2.09(d ,J = ll.lHz,2H),1.52(q ,J = 11.2Hz,2H)
[0241] 實(shí)施例35 7-(4-苯乙胺基哌啶-1-取代)-4-(2-(吡啶-1-取代）乙炔-1-取代)香豆 素（Π -9)
[0242]制備方法同實(shí)施例28，所不同的是，所用原料為0.11 g中間體7、0.0 21 g吡啶-2-乙 炔、O.Ollg四（三苯基膦)鈀、0.004g碘化亞銅、0.48g二異丙基乙基胺，得產(chǎn)物60.4mg，產(chǎn)率 66.8%，純度 98.1%。
[0243] HNMR(500MHz,DMS0-d6)5：8.70(d,J = 4.6Hz,lH),7.96(t,J = 7.7Hz,lH) ,7.84(d, J = 7.5Hz,lH) ,7.73(d ,J = 8.9Hz,lH) ,7.52(m,lH),7.25-7.38(m,5H) ,7.09(d ,J = 8.9Hz , 1H) ,6.95(d,J=1.5Hz 1H),6.49(s , 1H) ,4.08(d, J= 13.0Hz ,2H),3.42(s , 1H),3.23(s , 2H),2.90(m,4H),2.09(d,J=11.2Hz,2H),1.53(q,J=11.9Hz,2H).CNMR(500MHz,DMS0-d6) 5:160.20,155.85,153.46,151.02,141.17,137.60,137.51,135.72,129.10,129.06, 128.84,127.53,127.26,125.35,113.77,112.19,108.88,100.82,99.56,82.00,54.63, 45.86,45.22,32.22,27.57.
[0244] 實(shí)施例35 7-(4-苯乙胺基哌啶-卜取代)-4-(2-(吡啶-3-取代）乙炔-卜取代)香豆 素（Π -9)
[0245] 制備方法同實(shí)施例28，所不同的是，所用原料為0.11 g中間體7、0.0 21 g吡啶-3-乙 炔、O.Ollg四（三苯基膦)鈀、0.004g碘化亞銅、0.48g二異丙基乙基胺，得產(chǎn)物71.2mg，產(chǎn)率 78.7%，純度 96.3%。
[0246] 實(shí)施例36細(xì)胞增殖抑制活性實(shí)驗(yàn)
[0247] 本實(shí)施例所描述的細(xì)胞增殖抑制活性實(shí)驗(yàn)，是用來測(cè)定本發(fā)明化合物對(duì)于NEDD8 激活酶高表達(dá)的細(xì)胞株及對(duì)MLN4924敏感細(xì)胞株的增殖抑制活性，受試化合物對(duì)細(xì)胞增殖 的抑制活性用半數(shù)抑制濃度IC 5Q來表示。該類試驗(yàn)的試驗(yàn)方案如下:選擇不同細(xì)胞，如A549 細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞或K562等(細(xì)胞購于中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫/中國科 學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心），以適宜的細(xì)胞濃度(例如，60000個(gè)細(xì)胞/mL培養(yǎng) 基)將細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板上。之后將細(xì)胞放置于37°C，5%C0 2的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)12小時(shí) 后，向培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基中加入一系列濃度梯度的藥物，一般選擇10個(gè)濃度。之后將細(xì)胞放 回原培養(yǎng)環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)，之后按照CCK-8的方法，測(cè)定受試化合物對(duì)不同細(xì)胞增殖 的影響，并計(jì)算不同濃度的化合物對(duì)細(xì)胞增殖的抑制活率。之后對(duì)不同濃度的化合物下細(xì) 胞增殖抑制率進(jìn)行參數(shù)擬合，計(jì)算出IC 5Q數(shù)據(jù)。結(jié)果見表1
[0248]表1本發(fā)明化合物對(duì)人源性腫瘤細(xì)胞的Κ：5〇(μΜ)
[0249]
[0251] 實(shí)施例37細(xì)胞內(nèi)NEDD8激活酶活性抑制實(shí)驗(yàn)
[0252] 本實(shí)施例所描述的細(xì)胞內(nèi)NEDD8激活酶活性抑制的實(shí)驗(yàn)，是用來測(cè)定本發(fā)明化合 物對(duì)于腫瘤細(xì)胞株內(nèi)NEDD8激活酶的抑制活性，如AGS細(xì)胞。活性取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的對(duì)數(shù)生 長(zhǎng)期細(xì)胞，以1.5 X 105個(gè)細(xì)胞/mL密度接種于6孔板，每孔接種2mL。培養(yǎng)24h。裂解細(xì)胞并提 取蛋白。用western方法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)相關(guān)蛋白含量。結(jié)果顯示1-18對(duì)胃癌AGS有劑量依賴性 抑制Uba3-NEDD8(NEDD8激活酶β亞基與NEDD8結(jié)合的復(fù)合物）、Ubcl2-NEDD8生成的作用。隨 著1-18的劑量升高，A549胞內(nèi)P27XDT1及NRF2含量水平逐漸上升，說明該化合物促進(jìn)胞內(nèi) 泛素 CRLs E3酶底物的積累。詳細(xì)結(jié)果見圖1。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種由下述通式in表示的中間體：2. 不乂利安豕1所還的甲I日」懷的制爸萬'/云，兵特征在于，包括如下步驟： (I )NaH溶于甲苯后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下冰浴攪拌4~6min，并在冰浴條件下向其中滴加4-溴_ 2-羥基苯乙酮的甲苯溶液，滴加完畢后繼續(xù)冰浴攪拌15~25min;冰浴攪拌完成后，向其中 加入碳酸二乙酯并在110~125°C下加熱回流攪拌8~16h;加熱回流攪拌完成后，用鹽酸水 溶液調(diào)節(jié)混合體系PH至4~6后，過濾，濾液經(jīng)柱層析純化后得到1-(4-溴-2-羥基-苯)丙酮 酸乙酯； (2) 將步驟（1)中制備得到的1-(4-溴-2-羥基-苯)丙酮酸乙酯溶于甲苯后在110~125 °(：下加熱回流攪拌18~30h后，過濾，濾液經(jīng)甲苯洗滌并濃縮后，與甲苯混合后繼續(xù)在110~ 125°C下加熱回流攪拌18~30h;加熱回流攪拌完成后過濾，取固體部分用甲苯洗滌，干燥 后，得到4-羥基_7_溴香?素； (3) 將碳酸鉀、溴化芐和步驟(2)中制備得到的4-羥基-7-溴香豆素溶于乙腈后在氮?dú)?保護(hù)下75~8TC加熱回流攪拌4~8h，過濾，濾液降至室溫后靜置0.5~1.5h后，過濾，取固 體部分用4°C的乙腈洗滌，干燥后，得到4-芐氧基-7-溴香豆素； (4) 將氯化鈀、聯(lián)萘二苯磷、碳酸銫和4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶和步驟(3)中 制備得到的4-芐氧基-7-溴香豆素溶于1，4_二氧六環(huán)后，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，80~100°C下加熱 攪拌8~16h后，過濾，取濾液經(jīng)柱層析純化后得到7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺基)哌 啶)-4_芐氧基香豆素； (5) 將步驟(4)中制備得到的7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺基)哌啶)-4-芐氧基香 豆素和10%鈀碳溶于四氫呋喃后在室溫下攪拌6~12h后，加入氨氣飽和的甲醇溶液，，攪拌 4~6min后，過濾，濾液經(jīng)氨氣飽和的甲醇溶液洗滌并濃縮后得到黃色油狀粗品；將黃色油 狀粗品溶于混合溶液中，攪拌0.5~1.5h后，過濾，取固體部分用混合溶液洗滌后，干燥，得 到7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶)-4-羥基香豆素； (6) 將步驟(5)中制備得到的7-(4_(N-苯乙基-N-叔丁氧幾基胺)哌啶)_4_羥基香?素 和三乙胺溶于二氯甲烷后冰浴攪拌5~15min，滴加三氟甲磺酸酐，滴加完成后在室溫下攪 拌1~3h后，經(jīng)100~200目硅膠制砂柱層析純化，得到三氟甲磺酸7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁 氧羰基胺)哌啶)基香豆素-4-酯，即得所需制備的中間體。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（1)中，4-溴-2-羥基苯乙酮、NaH 和碳酸二乙酯的摩爾比為1:2.1~2.4:1.1~1.4;4_溴-2-羥基苯乙酮的甲苯溶液中，溶質(zhì) 4_溴-2-羥基苯乙酮的濃度為100~300g/L;鹽酸水溶液中，溶質(zhì)HCl的質(zhì)量百分比為37~ 40% 〇4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，1-(4-溴-2-羥基-苯)丙酮 酸乙酯和溶解其所用甲苯的固液比為Ig: 5~10mL。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，碳酸鉀、溴化芐和步驟(2) 中制備得到的4-羥基-7-溴香豆素的摩爾比為0.5~1:1.8~2.2:1。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)中，氯化鈀、聯(lián)萘二苯磷、碳酸 銫、4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶和步驟(3)中制備得到的4-芐氧基-7-溴香豆素的 摩爾比 0.005 ~0.01:0.08 ~0.1:1~1.1:1~1.2:1。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(5)中，步驟(4)中制備得到的7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺基)哌啶）-4-芐氧基香豆素和10%鈀碳的質(zhì)量比為1:0.01 ~〇. 1;所述的混合溶液由石油醚和乙酸乙酯以3:1的體積比混合而成；氨氣飽和的甲醇溶 液與四氫呋喃的體積比為1:3~5;黃色油狀粗品和溶解其所用混合溶液的質(zhì)量比為1:3~ 5〇8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(6)中，步驟(5)中制備得到的7-(4-(N-苯乙基-N-叔丁氧羰基胺)哌啶)-4-羥基香豆素、三乙胺和三氟甲磺酸酐的摩爾比為 1:1.1~1.5:1.1~1.3 〇9. 權(quán)利要求1所述的中間體在制備香豆素類NEDD8激活酶抑制劑中的應(yīng)用。10. -種由下述通式I表示的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑，及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶 劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體、代謝產(chǎn)物和前藥：其中， 環(huán)A為芳香基，碳數(shù)為6~10; P為0、1、2、3、4、或5; Rt各自獨(dú)立取自烷基、烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳香基或雜環(huán)芳香基，且Rt上的H原子任 選地被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、-OH^Rh-ORirC(O)-R1 ^C(O)-OR1 ^OC(O)-Rh-C(O)N (RiU(O)x-R^-NHh-NHRh-N(R1)L-NHC(O)R^-NHC(O)OR 1S-NR2C(O)R1 的基團(tuán)取代；其 中，X為0、1或2;所述的鹵素為氟、氯、溴或碘； Ri和R2各自獨(dú)立取自烷基、烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳香基或雜環(huán)芳香基，且RjPR2上的H 原子任選地被一個(gè)或多個(gè)選自-OH、-CN、-NH2、烷基、單烷基氨基、二烷基氨基、環(huán)烷基、雜環(huán) 基、烷基雜環(huán)基、烷氧基、羥基烷基、烷氧基烷基、羥基烷氧基烷基、烷基幾基烷基、氣基燒 基、-烷基氣基烷基、烷氧基幾基氣基烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、芳烷基、烷基環(huán)烷基 取代、環(huán)烷基幾基、烷氧基幾基、烷氧基幾基雜環(huán)基、（燒氧幾基）（烷基)氣基、（烷氧基烷基） (烷基)氨基或(烷基羰基）（烷基)氨基的基團(tuán)取代。11. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑，其特征在于，其結(jié)構(gòu)式為：或12. 權(quán)利要求10所述的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的腫瘤為白血病、胃腸間質(zhì)瘤、組織 細(xì)胞性淋巴瘤、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、肺鱗癌、肺腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝 癌、皮膚癌、上皮細(xì)胞癌、宮頸癌、卵巢癌、腸癌、鼻咽癌、腦癌、骨癌、食道癌、黑色素瘤、腎癌 或口腔癌。14. 權(quán)利要求10所述的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑的制備方法，其特征在于，它包括 如下步驟： 將權(quán)利要求1中所述的中間體、碳酸鈉、四（三苯基膦)鈀和化合物IV溶于四氫呋喃后， 在氮?dú)獗Ｗo(hù)下60~65°C加熱回流攪拌1~3h，過濾，濾液經(jīng)濃縮和柱層析純化后，得到中間 體；中間體經(jīng)混合溶劑溶解后，室溫下攪拌4~6h;攪拌完成后，向所得混合體系中加入甲 苯，濃縮后加入乙醚，超聲后過濾，取固體部分用乙醚洗滌并干燥后，即得，15. 根據(jù)權(quán)利要求14所述的制備方法，其特征在于，權(quán)利要求1中所述的中間體、碳酸 鈉、四（三苯基膦)鈀和化合物IV的摩爾比為1:0.5~1.2:0.01:1~1.3;化合物IV和四氫呋 喃的固液比為Ig: 5~200mL;中間體和混合溶劑的固液比為Ig: 5~200mL;混合溶劑由二氯 甲烷和三氟醋酸以1:3~5的體積比混合而成;混合體系和甲苯的固液比為Ig: 5~200mL;濃 縮后的混合體系和乙醚的固液比為Ig: 5~200mL。16. 權(quán)利要求10所述的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑的制備方法，其特征在于，它包括 如下步驟： 將權(quán)利要求1中所述的中間體、二異丙基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦)鈀和化合物 V溶于乙腈后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫下攪拌0.5~1.5h后，過濾，濾液經(jīng)乙腈洗滌后，濃縮并經(jīng) 柱層析純化后，得到中間體；中間體溶于二甲亞砜后，加入NaN 3,90~120°C下攪拌0.5~ 1.5h，加水后用乙酸乙酯萃取2~3次，取有機(jī)相濃縮并干燥，所得固體部分溶于三氟醋酸后 在室溫下攪拌2~6h，反應(yīng)完成后所得混合體系中加入甲苯，濃縮后加入乙醚，超聲后過濾， 取固體部分用乙醚洗滌并干燥后，即得，17. 根據(jù)權(quán)利要求16所述的制備方法，其特征在于，權(quán)利要求1中所述的中間體、二異丙 基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦)鈀、化合物V和NaN 3的摩爾比為1:1~1.5:0.05~0.1: 0.05~0.1:1~1.3:1.1~1.4;化合物V和乙腈的固液比為Ig:5~200mL;中間體和二甲亞 砜的固液比為Ig: 5~200mL;固體部分和三氟醋酸的固液比為Ig: 5~200mL;混合體系和甲 苯的固液比為I g: 5~200mL;濃縮后的混合體系和乙醚的固液比為I g: 5~200mL。18. -種由下述通式Π 表示的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑，及其藥學(xué)上可接受的鹽、 溶劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體、代謝產(chǎn)物和前藥：其中， 環(huán)B為氫或芳香基，碳數(shù)為6~10; q為0、1、2、3、4、或5; Rs各自獨(dú)立取自烷基、烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳香基、雜環(huán)芳香基，且Rt上的H原子任選 地被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、H-Rh-ORh-C(O)-Rh-C(O)-ORh-OC(O)-Rh-C(O)N(R1)^-S (O)x-Rh-NH^-NHR1 ^N(R1)L-NHC(O)R1 ^NHC(O)OR1S-NR2C(O)R1 的基團(tuán)取代；其中，X為0、 1或2;所述的鹵素為氟、氯、溴或碘； Ri和R2各自獨(dú)立取自烷基、烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳香基、雜環(huán)芳香基，且Ri和R2上的H原 子任選地被一個(gè)或多個(gè)選自-OH、-CN、-NH2、烷基、單烷基氨基、二烷基氨基、環(huán)烷基、雜環(huán) 基、烷基雜環(huán)基、烷氧基、羥基烷基、烷氧基烷基、羥基烷氧基烷基、烷基幾基烷基、氣基燒 基、-烷基氣基烷基、烷氧基幾基氣基烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、芳烷基、烷基環(huán)烷基 取代、環(huán)烷基幾基、烷氧基幾基、烷氧基幾基雜環(huán)基、（燒氧幾基）（烷基)氣基、（烷氧基烷基） (烷基)氨基或(烷基羰基）（烷基)氨基的集團(tuán)取代。19. 根據(jù)權(quán)利要求18所述的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑，其特征在于，其結(jié)構(gòu)式為：20. 權(quán)利要求18所述的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。21. 根據(jù)權(quán)利要求20所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的腫瘤為白血病、胃腸間質(zhì)瘤、組織 細(xì)胞性淋巴瘤、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、肺鱗癌、肺腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝 癌、皮膚癌、上皮細(xì)胞癌、宮頸癌、卵巢癌、腸癌、鼻咽癌、腦癌、骨癌、食道癌、黑色素瘤、腎癌 或口腔癌。22. 權(quán)利要求18所述的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑的制備方法，其特征在于，包括如 下步驟： 將權(quán)利要求1中所述的中間體、二異丙基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦)鈀和化合物 VI溶于乙腈后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下在室溫下攪拌0.5~1.5h后，過濾，濾液經(jīng)濃縮后經(jīng)柱層析純 化，得中間體；中間體溶于四氫呋喃后加入TBAF，室溫下攪拌5~15min后溶于乙酸乙酯，取 有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌2~3次后溶于混合溶劑中，室溫下攪拌4~8h;攪拌完成后將所得 的混合體系溶于甲苯，濃縮，加入乙醚，超聲后過濾，固體部分用乙醚洗滌后干燥，即得，23. 根據(jù)權(quán)利要求16所述的制備方法，其特征在于，權(quán)利要求1中所述中間體、二異丙基 乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦)鈀、化合物VI和TBAF的的摩爾比為1:1~1.5:0.05~0.1: 0.05~0.1:1~1.3:1.1~1.4;所述的混合溶劑由三氟乙酸和二氯甲烷以1:3~5的體積比 混合而成;混合體系和甲苯的固液比為Ig: 5~200mL;濃縮后的混合體系和乙醚的固液比為 lg:5~200mL。24. 權(quán)利要求18所述的香豆素類NEDD8激活酶抑制劑的制備方法，其特征在于，包括如 下步驟： 將權(quán)利要求1中所述的中間體、二異丙基乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦)鈀和化合物 VI溶于乙腈后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下在室溫下攪拌0.5~1.5h后，過濾，濾液經(jīng)濃縮后經(jīng)柱層析純 化，得中間體；中間體溶于混合溶劑中，室溫下攪拌4~8h;攪拌完成后將所得的混合體系溶 于甲苯，濃縮，加入乙醚，超聲后過濾，固體部分用乙醚洗滌后干燥，即得， i VL25. 根據(jù)權(quán)利要求24所述的制備方法，其特征在于，權(quán)利要求1中所述中間體、二異丙基 乙基胺、碘化亞銅、四（三苯基膦)鈀、化合物VI和TBAF的的摩爾比為1:1~1.5:0.05~0.1: 0.05~0.1:1~1.3:1.1~1.4;化合物VI和乙腈的固液比為I g: 5~200mL;所述的混合溶劑 由三氟乙酸和二氯甲烷以1:3~5的體積比混合而成沖間體和混合溶劑的固液比為lg:5~ 200mL;混合體系和甲苯的固液比為I g: 5~200mL;濃縮后的混合體系和乙醚的固液比為I g: 5~200mL。
【文檔編號(hào)】A61K31/4709GK106008475SQ201610333812
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年5月19日
【發(fā)明人】王玉斌, 陸鵬, 袁新睿
【申請(qǐng)人】南京工業(yè)大學(xué)