一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法：（1）取木醋桿菌、嗜酸乳桿菌、巨大芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌分別活化，斜面培養(yǎng)；（2）將上述活化后的各微生物混合后放入三角瓶中，置于搖床內(nèi)，在28℃的條件下培養(yǎng)2天，控制pH在6.0?6.5，使菌數(shù)含量達(dá)5?6億/ml，即得微生物菌劑。所述步驟（2）優(yōu)選為：各微生物菌種數(shù)量比為木醋桿菌：嗜酸乳桿菌：巨大芽孢桿菌：側(cè)孢芽孢桿菌，為1:1.2?1.5:1.5?2.2:0.8。
【專利說明】
一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于本發(fā)明涉及植物病蟲害綠色生態(tài)防治技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑。
【背景技術(shù)】
[0002]煙草青枯病又稱煙痕、半邊瘋、格蘭維爾萎蔫病(Granvillewilt)，是由Ralstoniasolanacearum引起的細(xì)菌性土傳病害。現(xiàn)在該病廣泛分布于熱帶、亞熱帶和一些溫暖的地區(qū)，是我國南方煙草種植區(qū)常見的重要病害。廣東、湖南、福建、貴州及四川等煙區(qū)發(fā)病尤為嚴(yán)重，給煙葉生產(chǎn)帶來很大的損失。煙草青枯病堪稱煙草“癌癥”，目前尚無特效藥劑防治，而生物防治具有安全無公害、長效等優(yōu)點(diǎn)，是病害防治研究的熱點(diǎn)。
[0003]Ralstonia solanacearum Yabuuhi et al.稱青枯雷爾氏菌，屬細(xì)菌。菌體桿狀，兩端鈍圓，大小0.9—2 X 0.5-0.8(um)，有I一3根鞭毛，多單極生，無莢膜，革蘭氏染色陰性，好氣性。病菌生長溫限10°C — 37°C，30—35°C最適。52°C經(jīng)10分鐘致死。最適pH6.6。該菌已鑒別出5個(gè)小種及5個(gè)生物型，侵染煙草的菌株為小種I和生物型1、ΙΠ、IV，自然條件下，生物型也常變化。病菌主要在土壤中、遺落在土壤中的病殘?bào)w上及生長著的寄主體內(nèi)及根際越冬。種子一般不帶菌。主要初侵染來源是土壤、病殘組織和肥料中的病原菌。病原菌借排灌水、流水、帶菌肥料、病苗或附在幼苗上的病土，以及人畜和生產(chǎn)工具帶菌傳播。病田流水是病害再侵染和傳播的最重要方式。
[0004]青枯病發(fā)生的主要因素包括:土壤、氣候、肥料與施肥措施、水利條件和抗旱抗?jié)炒胧┑拳h(huán)境條件;煙田病原累積量;煙草品種的抗病性;煙株生長發(fā)育狀況和根系發(fā)達(dá)程度;煙田施肥水平和肥料類型;病害發(fā)現(xiàn)和防治時(shí)機(jī)。
[0005]上述因素相互影響，相互作用?？偟膩砜矗≡鶖?shù)大、土質(zhì)不良和品種抗病性差是導(dǎo)致青枯病大面積發(fā)生病的根本原因，氣候變化是造成病害流行的客觀原因，人為重視不夠和技術(shù)措施不到位是導(dǎo)致病害流行的主觀原因。土壤傳染、前期侵染、雨后集中發(fā)病是青枯病發(fā)生的典型方式。有的煙區(qū)出現(xiàn)大面積死煙，就是由于前期青枯病的侵染，加上雨后的蒸騰作用導(dǎo)致的。
[0006]煙葉的根系發(fā)育狀況、根系活力與其抗病性密切相關(guān)，煙苗移栽后的適度干旱有利于煙草根系的發(fā)育，如果煙苗移栽后煙田濕度大或移栽后4周內(nèi)又澆水的，尤其是向煙田內(nèi)追施氮肥，會導(dǎo)致煙株根系發(fā)育受阻、活力差，加上蒸騰作用，容易導(dǎo)致病害大面積發(fā)生?；瘜W(xué)防治的基礎(chǔ)依賴于煙葉的生長基礎(chǔ)，這也是有些防治青枯病的藥劑防治效果較差的原因之一。
[0007]本發(fā)明旨在提供一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，本產(chǎn)品與現(xiàn)有技術(shù)相比，天然安全，可以有效預(yù)防煙草青枯病，并且用量少，成本低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的是提供一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，本產(chǎn)品與現(xiàn)有技術(shù)相比，天然安全，可以有效預(yù)防煙草青枯病，并且用量少，成本低。
[0009]為了實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案:
一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于步驟如下:
(1)取木醋桿菌、嗜酸乳桿菌、巨大芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌分別活化，斜面培養(yǎng)；
(2)將上述活化后的各微生物混合后放入三角瓶中，置于搖床內(nèi)，在28°C的條件下培養(yǎng)2天，控制pH在6.0-6.5，使菌數(shù)含量達(dá)5-6億/ml，即得微生物菌劑。
[0010]所述步驟(2)優(yōu)選為:各微生物菌種數(shù)量比為木醋桿菌:嗜酸乳桿菌:巨大芽孢桿菌:側(cè)孢芽孢桿菌，為1: 1.2-1.5:1.5-2.2:0.8。
[0011]上述復(fù)合菌制劑的使用方法為:稀釋500倍后，分別在煙草移栽、零星發(fā)病、旺長期將藥劑均勻噴灑在頁面，20 mL/株噴灑處理，50 mL/株灌根處理，共處理3次。
[0012]供試烤煙品種云煙97品種，常規(guī)烤煙品種，由云煙85與CV 87組合選育而成。
[0013]煙株發(fā)病情況調(diào)查采用小區(qū)普查的方式，按GB/23222-2008《煙草病蟲害分級及調(diào)查方法》調(diào)查各處理發(fā)病情況，并計(jì)算各處理病情指數(shù)、防治效果。對照組使用清水處理。
[0014]煙草青枯病病情分級標(biāo)準(zhǔn)(以株為單位):
O級:全株無?。?br> I級:莖部偶有褪綠斑，或病側(cè)1/2以下葉片凋萎；
3級:莖部有黑色條斑，但不超過1/2，或病側(cè)1/2?2/3葉片凋萎；
5級:莖部黑色條斑超過1/2，但未到達(dá)莖頂部，或病側(cè)2/3以上葉片凋萎；
7級:莖部黑色條斑到達(dá)莖頂部，或病株葉片全部凋萎；
發(fā)病率(％)=病株數(shù)/調(diào)查株數(shù)X100
病情指數(shù)=Σ (發(fā)病株數(shù)X該病級代表值)/(調(diào)查總株數(shù)X最高級代表值)X 100 防治效果(％)=(對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))/對照病情指數(shù)X100 本發(fā)明的有益之處在于:
本發(fā)明提供了一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，本產(chǎn)品與現(xiàn)有技術(shù)相比，天然安全，可以有效預(yù)防煙草青枯病，并且用量少，成本低。
【具體實(shí)施方式】
[0015]實(shí)施例1:
一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于步驟如下:
(1)取木醋桿菌、嗜酸乳桿菌、巨大芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌分別活化，斜面培養(yǎng)；
(2)將上述活化后的各微生物混合后放入三角瓶中，置于搖床內(nèi)，在28°C的條件下培養(yǎng)2天，控制pH在6.0，使菌數(shù)含量達(dá)6億/ml，即得微生物菌劑。
[0016]所述步驟(2)優(yōu)選為:各微生物菌種數(shù)量比為木醋桿菌:嗜酸乳桿菌:巨大芽孢桿菌:側(cè)孢芽孢桿菌，為1:1.2:2.2:0.8。
[0017]上述復(fù)合菌制劑的使用方法為:稀釋500倍后，分別在煙草移栽、零星發(fā)病、旺長期將藥劑均勻噴灑在頁面，20 mL/株噴灑處理，50 mL/株灌根處理，共處理3次。
[0018]供試烤煙品種云煙97品種，常規(guī)烤煙品種，由云煙85與CV 87組合選育而成。
[0019]結(jié)果:打頂后一個(gè)月，相對于對照組發(fā)病率53.5%，本實(shí)施例處理的烤煙發(fā)病率僅為5.3%，防治效果為69.9%。
[0020]實(shí)施例2:
一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于步驟如下:
(1)取木醋桿菌、嗜酸乳桿菌、巨大芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌分別活化，斜面培養(yǎng)；
(2)將上述活化后的各微生物混合后放入三角瓶中，置于搖床內(nèi)，在28°C的條件下培養(yǎng)2天，控制pH在6.5，使菌數(shù)含量達(dá)5億/ml，即得微生物菌劑。
[0021 ]所述步驟(2)優(yōu)選為:各微生物菌種數(shù)量比為木醋桿菌:嗜酸乳桿菌:巨大芽孢桿菌:側(cè)孢芽孢桿菌，為1:1.5:1.5:0.8。
[0022]上述復(fù)合菌制劑的使用方法為:稀釋500倍后，分別在煙草移栽、零星發(fā)病、旺長期將藥劑均勻噴灑在頁面，20 mL/株噴灑處理，50 mL/株灌根處理，共處理3次。
[0023]供試烤煙品種云煙97品種，常規(guī)烤煙品種，由云煙85與CV 87組合選育而成。
[0024]結(jié)果:打頂后一個(gè)月，相對于對照組發(fā)病率53.5%，本實(shí)施例處理的烤煙發(fā)病率僅為8.3%，防治效果為55.3%。
[0025]實(shí)施例3:
一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于步驟如下:
(1)取木醋桿菌、嗜酸乳桿菌、巨大芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌分別活化，斜面培養(yǎng)；
(2)將上述活化后的各微生物混合后放入三角瓶中，置于搖床內(nèi)，在28°C的條件下培養(yǎng)2天，控制pH在6.1，使菌數(shù)含量達(dá)6億/ml，即得微生物菌劑。
[0026]所述步驟(2)優(yōu)選為:各微生物菌種數(shù)量比為木醋桿菌:嗜酸乳桿菌:巨大芽孢桿菌:側(cè)孢芽孢桿菌，為1:1.3:1.6:0.8。
[0027]上述復(fù)合菌制劑的使用方法為:稀釋500倍后，分別在煙草移栽、零星發(fā)病、旺長期將藥劑均勻噴灑在頁面，20 mL/株噴灑處理，50 mL/株灌根處理，共處理3次。
[0028]供試烤煙品種云煙97品種，常規(guī)烤煙品種，由云煙85與CV 87組合選育而成。
[0029]結(jié)果:打頂后一個(gè)月，相對于對照組發(fā)病率53.5%，本實(shí)施例處理的烤煙發(fā)病率僅為6.3%，防治效果為60.7%。
實(shí)施例4:
一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于步驟如下:
(1)取木醋桿菌、嗜酸乳桿菌、巨大芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌分別活化，斜面培養(yǎng)；
(2)將上述活化后的各微生物混合后放入三角瓶中，置于搖床內(nèi)，在28°C的條件下培養(yǎng)2天，控制pH在6.4，使菌數(shù)含量達(dá)5億/ml，即得微生物菌劑。
[0030]所述步驟(2)優(yōu)選為:各微生物菌種數(shù)量比為木醋桿菌:嗜酸乳桿菌:巨大芽孢桿菌:側(cè)孢芽孢桿菌，為1:1.4:2.1:0.8。
[0031]上述復(fù)合菌制劑的使用方法為:稀釋500倍后，分別在煙草移栽、零星發(fā)病、旺長期將藥劑均勻噴灑在頁面，20 mL/株噴灑處理，50 mL/株灌根處理，共處理3次。
[0032]供試烤煙品種云煙97品種，常規(guī)烤煙品種，由云煙85與CV 87組合選育而成。
[0033]結(jié)果:打頂后一個(gè)月，相對于對照組發(fā)病率53.5%，本實(shí)施例處理的烤煙發(fā)病率僅為7.3%，防治效果為59.6%。
[0034]實(shí)施例5:
一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于步驟如下:
(I)取木醋桿菌、嗜酸乳桿菌、巨大芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌分別活化，斜面培養(yǎng)； (2)將上述活化后的各微生物混合后放入三角瓶中，置于搖床內(nèi)，在28°C的條件下培養(yǎng)2天，控制pH在6.2，使菌數(shù)含量達(dá)6億/ml，即得微生物菌劑。
[0035]所述步驟(2)優(yōu)選為:各微生物菌種數(shù)量比為木醋桿菌:嗜酸乳桿菌:巨大芽孢桿菌:側(cè)孢芽孢桿菌，為1:1.2:1.7:0.8。
[0036]上述復(fù)合菌制劑的使用方法為:稀釋500倍后，分別在煙草移栽、零星發(fā)病、旺長期將藥劑均勻噴灑在頁面，20 mL/株噴灑處理，50 mL/株灌根處理，共處理3次。
[0037]供試烤煙品種云煙97品種，常規(guī)烤煙品種，由云煙85與CV 87組合選育而成。
[0038]結(jié)果:打頂后一個(gè)月，相對于對照組發(fā)病率53.5%，本實(shí)施例處理的烤煙發(fā)病率僅為5.8%，防治效果為67.1%。
[0039]可見，本發(fā)明提供了一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，本產(chǎn)品與現(xiàn)有技術(shù)相比，天然安全，可以有效預(yù)防煙草青枯病，并且用量少，成本低。
[0040]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實(shí)施方式】，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于步驟如下: (1)取木醋桿菌、嗜酸乳桿菌、巨大芽孢桿菌、側(cè)孢芽孢桿菌分別活化，斜面培養(yǎng)； (2)將上述活化后的各微生物混合后放入三角瓶中，置于搖床內(nèi)，在28°C的條件下培養(yǎng)2天，控制pH在6.0-6.5，使菌數(shù)含量達(dá)5-6億/ml，即得微生物菌劑； 所述步驟(2)優(yōu)選為:各微生物菌種數(shù)量比為木醋桿菌:嗜酸乳桿菌:巨大芽孢桿菌:側(cè)孢芽孢桿菌，為1: 1.2-1.5:1.5-2.2:0.8。2.權(quán)利要求1所述的方法制備得到的預(yù)防煙草青枯病的復(fù)合菌制劑。3.權(quán)利要求2所述的復(fù)合菌制劑的使用方法，其特征在于: 稀釋500倍后，分別在煙草移栽、零星發(fā)病、旺長期將藥劑均勻噴灑在頁面，20 mL/株噴灑處理，50 mL/株灌根處理，共處理3次。
【文檔編號】C12N1/20GK106047760SQ201610551285
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年7月14日
【發(fā)明人】房春華
【申請人】德清龍溪農(nóng)業(yè)科技有限公司