一種分析自然條件下特定種類微生物間相互作用的裝置的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物分析裝置，具體是一種分析自然條件下特定種類微生物間相互作用的裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]微生物間的相互作用形式多種多樣，目前對此研宄大多數(shù)在實驗室中進(jìn)行，無法完全還原自然環(huán)境條件，也受人為因素影響。因此，急需一種可以排除人為因素影響，能讓目標(biāo)微生物在自然條件下完成相互作用的裝置。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種分析自然條件下微生物間相互作用的裝置，該裝置在隔阻其他微生物對特定種類微生物間在自然條件下相互作用的接觸性影響的同時，還能保證相互作用的目標(biāo)微生物種類的純凈同時不隔阻自然環(huán)境中直徑小于所用濾膜孔徑的物質(zhì)對特定種類微生物間在自然條件下相互作用的影響，因此無需后續(xù)的目標(biāo)微生物分離純化工作，還能快速回收目標(biāo)微生物。
[0004]實現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是:
[0005]一種分析自然條件下特定種類微生物間相互作用的裝置，包括反應(yīng)器和取膜器，其中:
[0006]反應(yīng)器由反應(yīng)器主體和與其配裝的蓋體構(gòu)成，反應(yīng)器主體上部設(shè)有凸臺，在凸臺頂面、蓋體頂面分別設(shè)有相匹配的環(huán)狀寬平緣的凹面和穹頂，凹面和穹頂環(huán)狀寬平緣上分別設(shè)有內(nèi)嵌密封圈的環(huán)形半圓凹槽，在凹面和穹頂上還均勻布設(shè)有弧形通孔；
[0007]取膜器包括手柄、傳動桿、固定器和底座，傳動桿上套設(shè)有彈簧，與手柄連接，下端與固定器套接，固定器與底座相對設(shè)置，在傳動桿下部的圓周處設(shè)有刀刃，刀刃通過傳動桿與手柄連接。
[0008]所述反應(yīng)器主體和蓋體為中空圓柱狀。
[0009]所述環(huán)形半圓凹槽的直徑小于環(huán)狀寬平緣的凹面、穹頂?shù)闹睆健?br>[0010]所述固定器由一“凸”字狀的中空圓柱體與環(huán)形底部連成一體構(gòu)成，圓柱體與環(huán)形底部連接處和內(nèi)壁各四分之一圓周處分別設(shè)有四個向內(nèi)突起，與彈簧下部卡接。
[0011]所述底座為圓餅狀膠墊。
[0012]所述刀刃為環(huán)狀刀刃，刀刃外徑小于固定器的內(nèi)徑，且緊貼于固定器下部的內(nèi)壁頂部。
[0013]本發(fā)明產(chǎn)生的有益效果是:該裝置設(shè)計合理、操作簡便，可以在自然條件下完成特定種類微生物間相互作用的試驗，排除人為因素的干擾，使試驗數(shù)據(jù)具有極大的可靠性與參考價值。
【附圖說明】
[0014]圖1為本發(fā)明中反應(yīng)器主體的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0015]圖2為圖1的縱向剖視圖；
[0016]圖3為本發(fā)明中反應(yīng)器蓋體的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0017]圖4為圖3的縱向剖視圖；
[0018]圖5為本發(fā)明中取膜器的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0019]圖6為圖5的縱向剖視圖；
[0020]圖7為接合子篩選的實驗原理明示意圖；
[0021]圖中:1.反應(yīng)器主體1-1.主體凸起豎狀紋1-2.螺紋1-3.凹面 1_4.凹槽1-5.主體弧形通孔1-6.主體的橡膠密封圈2.反應(yīng)器蓋體2-1.蓋體凸起豎狀紋2-2.螺口 2-3.蓋體密封圈2-4.穹頂2-5.蓋體通孔3.手柄4.傳動桿5.固定器6.刀刃7.底座8.彈簧。
【具體實施方式】
[0022]下面結(jié)合附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述，但本
【發(fā)明內(nèi)容】
絕不局限于此。
[0023]本發(fā)明一種條件自然下分析微生物間相互作用的裝置，由反應(yīng)器和取膜器配合構(gòu)成，反應(yīng)器由反應(yīng)器主體I和與反應(yīng)器主體I配裝的反應(yīng)器蓋體2組成，其中:
[0024]如圖1-2所示，反應(yīng)器主體I為中空圓柱狀，其下部外壁設(shè)有主體凸起豎狀紋1-1，中部設(shè)有直徑略小于下部直徑的凸臺，凸臺圓周部分開設(shè)有螺紋1-2，頂部設(shè)有具有寬平緣凹面1-3，凹面1-3上均勻布設(shè)有數(shù)個主體弧形通孔1-5，在凹面1-3的邊緣處還開設(shè)有一直徑略小于凹面直徑的環(huán)形半圓凹槽1-4，凹槽1-4內(nèi)嵌有橫切面為T字狀的橡膠密封圈1-6 ；
[0025]如圖3-4所示，反應(yīng)器蓋體2為中空圓柱狀，外壁設(shè)有蓋體凸起豎狀紋2-1，內(nèi)壁設(shè)有與螺紋1-2匹配螺接的螺口 2-2，在反應(yīng)器蓋體2內(nèi)部頂面設(shè)有與凹面1-3相匹配的寬平緣穹頂2-4，穹頂2-4上均勻布設(shè)有數(shù)個蓋體弧形通孔2-5，在穹頂2-4的圓周部分亦開設(shè)有一直徑略小于穹頂直徑的環(huán)形半圓凹槽2-6，凹槽2-6內(nèi)嵌有橫切面為T字狀的橡膠密封圈 2-3 ；
[0026]反應(yīng)器主體I與反應(yīng)器蓋體2通過螺紋1-2和螺口 2-2螺接擰緊，通過分別鑲嵌在反應(yīng)器主體I的密封圈1-6和反應(yīng)器蓋體2的密封圈2-3完全被壓緊。
[0027]如圖5-6所示，取膜器由手柄3、傳動桿4、彈簧8、刀刃6和縱切面為中空為“凸”字狀的圓柱形固定器5及底座7構(gòu)成；刀刃6和固定器5下部為環(huán)形，底座7為圓餅狀膠墊。手柄3與刀刃6通過傳動桿4相連，彈簧8套設(shè)在傳動桿4上，傳動桿4上部的外壁的四個突起的外壁所在圓周直徑大于彈簧8外壁所在圓周直徑，使傳動桿4被彈簧8懸掛；固定器5的上小、下大柱狀體接合部內(nèi)壁各四分之一圓周處設(shè)為四個向內(nèi)突起，四個向內(nèi)突起內(nèi)壁所在圓的直徑小于彈簧8外壁所在圓的直徑，將彈簧8頂掛；彈簧8與傳動桿4穿過固定器5 ;刀刃6外徑略小于固定器5內(nèi)徑且緊貼于固定器5下部的內(nèi)壁。在將手柄3壓下時，通過傳動桿4將刀刃6壓出固定器5少許，使其與底座7接觸；松開手柄3后，彈簧8可通過傳動桿4將手柄3頂起，刀刃6復(fù)位至固定器5中。
[0028]本發(fā)明裝置的工作過程是:
[0029]1、在超凈臺上，將2層直徑略大于橫切面為T字狀的橡膠密封圈直徑，但小于反應(yīng)器主體寬平緣所在圓直徑的圓形微孔濾膜置于反應(yīng)器主體的寬平緣凹面上，使微孔濾膜將橡膠密封圈完全覆蓋；
[0030]2、將待分析的特定種類微生物的適量菌泥置于微孔濾膜中央；
[0031]3、另取2層同上直徑的微孔濾膜，將步驟2的菌泥及步驟I的微孔濾膜完全覆蓋；
[0032]3、將反應(yīng)器蓋體通過螺口與反應(yīng)器主體擰緊，使菌泥夾在4層微孔濾膜中；
[0033]4、將反應(yīng)器置于研宄環(huán)境中，使其在自然條件下產(chǎn)生相互作用。
[0034]5.當(dāng)相互作用研宄結(jié)束后，將反應(yīng)器取出并用清水沖洗干凈后置于超凈臺中；
[0035]6.小心打開反應(yīng)器，將接觸外界環(huán)境的2層濾膜(最外面的2層膜)棄去，將中間夾有菌泥的2層膜置于滅菌的取膜器的底座中央，并通過固定器將膜的邊緣完全壓緊；
[0036]7.按下手柄，通過刀刃將膜未接觸外界環(huán)境微生物的部分切下，并置于無菌生理鹽水中沖洗，從而獲得自然條件下相互作用的細(xì)菌。
[0037]實驗證明:
[0038]以本裝置進(jìn)行了桂林會仙濕地自然水體環(huán)境條件下攜帶四環(huán)素抗性基因(teiB)，表型為強(qiáng)力霉素抗性的大腸桿菌(分離自野生黑頸長尾雉糞便，PCR產(chǎn)物測序驗證經(jīng))與克雷伯氏產(chǎn)酸菌突變株TR-M30-1 [于曉宇江紹鋒藍(lán)運(yùn)華，等，對菌根分泌物強(qiáng)趨性產(chǎn)酸克氏菌突變體的篩選.廣西師范大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版，2014，32(2):130-136]的四環(huán)素抗性基因接合轉(zhuǎn)移效率實驗，實驗原理和結(jié)果如圖7所示。其中:X表示不能生長，樣示能生長；
[0039]圖7中:供體菌'Escherichia coli, (強(qiáng)力霉素抗性)，菌落在紫外光下無綠色熒光，無固氮能力只能在完全培養(yǎng)基上生長；
[0040]受體菌-,Klebsilla oxytoca突變體，Knf (卡那霉素抗性)，被轉(zhuǎn)座子m Tn 5gusA -pgfp2隨傳標(biāo)記，菌落在紫外光下顯綠色焚光；有固氮能力可在無氮培養(yǎng)基上生長;
[0041]阿須貝無氮培養(yǎng)基:葡萄糖10 g, KH2PO4 0.2 g, MgSO4.7H20 0.4 g, NaCl 0.2 g,CaSO4.2H20 0.2 g，CaCO3 0.5 g，瓊脂 1.5_2%，去離子水 I L，pH 7.0-7.2。
[0042]供體菌-.Escherichia co7i，(強(qiáng)力霉素抗性)，菌落在紫外光下無綠色焚光，無固氮能力只能在完全培養(yǎng)基上生長；
[0043]受體菌-,Klebsilla oxytoca突變體，Knf (卡那霉素抗性)，被轉(zhuǎn)座子m Tn 5gusA -pgfp2隨傳標(biāo)記，菌落在紫外光下顯綠色焚光；有固氮能力可在無氮培養(yǎng)基上生長;
[0044]阿須貝無氮培養(yǎng)基:葡萄糖10 g，KH2PO4 0.2 g，MgSO4.7H20 0.4 g，NaCl 0.2 g,CaSO4.2H20 0.2 g，CaCO3 0.5 g，瓊脂 1.5_2%，去離子水 I L，pH 7.0-7.2 ；
[0045]LA培養(yǎng)基:胰蛋白胨10 g，酵母浸出粉5 g，NaCl 5 g，，去離子水I L，瓊脂1.2-1.5%。
[0046]以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征及本發(fā)明的優(yōu)點。本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種分析自然條件下特定種類微生物間相互作用的裝置，其特征是:包括反應(yīng)器和取膜器，其中: 反應(yīng)器由反應(yīng)器主體和與其配裝的蓋體構(gòu)成，反應(yīng)器主體上部設(shè)有凸臺，在凸臺頂面、蓋體頂面分別設(shè)有相匹配的環(huán)狀寬平緣的凹面和穹頂，凹面和穹頂上分別設(shè)有內(nèi)嵌密封圈的環(huán)形半圓凹槽，在凹面和穹頂上還均勻布設(shè)有弧形通孔； 取膜器包括手柄、傳動桿、固定器和底座，傳動桿上套設(shè)有彈簧，與手柄連接，下端與固定器套接，固定器與底座相對設(shè)置，在固定器下部的圓周處設(shè)有刀刃，刀刃通過傳動桿與手柄連接。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征是:所述反應(yīng)器主體和蓋體為中空圓柱狀。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征是:所述環(huán)形半圓凹槽的直徑小于環(huán)狀寬平緣的凹面、穹頂?shù)闹睆健?br>4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征是:所述固定器由一“凸”字狀的中空圓柱體與環(huán)形底部連成一體構(gòu)成，圓柱體與環(huán)形底部連接處和內(nèi)壁各四分之一圓周處分別設(shè)有四個向內(nèi)突起，與彈簧下部卡接。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征是:所述底座為圓環(huán)狀膠墊。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征是:所述刀刃為環(huán)狀刀刃，刀刃外徑小于固定器的內(nèi)徑，且緊貼于固定器下部的內(nèi)壁頂部。
【專利摘要】本實用新型公開了一種分析自然條件下特定種類微生物間相互作用的裝置，其特征是：包括反應(yīng)器和取膜器，其中：反應(yīng)器由反應(yīng)器主體和與其配裝的蓋體構(gòu)成，反應(yīng)器主體上部設(shè)有凸臺，在凸臺頂面、蓋體頂面分別設(shè)有相匹配的環(huán)狀寬平緣的凹面和穹頂，凹面和穹頂上分別設(shè)有內(nèi)嵌密封圈的環(huán)形半圓凹槽，在凹面和穹頂上還均勻布設(shè)有弧形通孔；取膜器包括手柄、傳動桿、固定器和底座，傳動桿上套設(shè)有彈簧，與手柄連接，下端與固定器套接，固定器與底座相對設(shè)置，在固定器下部的圓周處設(shè)有刀刃，刀刃通過傳動桿與手柄連接。該裝置設(shè)計合理、操作簡便，可以在自然條件下完成特定種類微生物間相互作用的試驗，排除人為因素的干擾，使試驗數(shù)據(jù)具有極大的可靠性與參考價值。
【IPC分類】C12M1-26, C12M1-00, C12M1-12
【公開號】CN204589178
【申請?zhí)枴緾N201520168825
【發(fā)明人】陸祖軍, 梁士楚, 李云飛, 藍(lán)運(yùn)華, 劉袆
【申請人】廣西師范大學(xué)
【公開日】2015年8月26日
【申請日】2015年3月25日