專利名稱：包括施用抗－cd20抗體的b－細(xì)胞淋巴瘤聯(lián)合療法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗-CD20抗體或其片斷治療B-細(xì)胞淋巴瘤的用途，尤其是該抗體和片斷在聯(lián)合治療方案中的用途。
背景技術(shù)：
以前曾有人報(bào)道過抗CD20抗原的抗體作為B-細(xì)胞淋巴瘤的診斷和/或治療劑的用途。CD20是B-細(xì)胞淋巴瘤有用的標(biāo)記或靶，因?yàn)樵摽乖趷盒訠-細(xì)胞(即不斷增殖，可導(dǎo)致B-細(xì)胞淋巴瘤的B-細(xì)胞)表面以很高的密度被表達(dá)。
CD20或Bp35是B-淋巴細(xì)胞-限制性分化抗原，該抗原在前B細(xì)胞發(fā)育低級(jí)被表達(dá)，并保持不變直至漿細(xì)胞開始分化。一些人相信CD20分子可調(diào)節(jié)B-細(xì)胞激活過程的步驟，該步驟是細(xì)胞周期起始和分化所必需的。另外，如上所述，致瘤性(“腫瘤”)B-細(xì)胞上常以很高的水平表達(dá)CD20。CD20抗原對(duì)靶向療法而言很有吸引力，因?yàn)樗粫?huì)釋放，調(diào)制或內(nèi)化。
以前報(bào)道的涉及抗-CD20抗體的療法包括單獨(dú)或與第二種經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體或化學(xué)治療劑聯(lián)合施用治療性的抗-CD20抗體。
事實(shí)上，食品與藥品管理署批準(zhǔn)過一種抗-CD20抗體Rituxan用于治療復(fù)發(fā)的和以前治療過的低級(jí)非-Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)的用途。有人建議聯(lián)合使用Rituxan和經(jīng)放射性標(biāo)記的鼠抗-CD20抗體來治療B-細(xì)胞淋巴瘤。
然而，盡管據(jù)報(bào)道抗-CD20抗體，尤其是Rituxan(美國；在英國為MabThera；一般為Rituximab)能有效治療B-細(xì)胞淋巴瘤，如非-Hodgkin氏淋巴瘤，但經(jīng)治療的患者經(jīng)常會(huì)舊病復(fù)發(fā)。因此，能研究出更有效的治療方案將會(huì)很有利。
更特別地，如果抗-CD20抗體與其它淋巴瘤療法相結(jié)合具有有益的效果，和如果能研究出新的能減少復(fù)發(fā)可能性或頻率的聯(lián)合治療方案，結(jié)果將是有利的。如果能改善目前使用的B-細(xì)胞淋巴瘤治療方法，用嵌合或經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體治療對(duì)其它治療方法不起反應(yīng)的淋巴瘤患者，結(jié)果也將是有利可圖。如果抗-CD20抗體療法，特別是與其它療法聯(lián)合的抗-CD20抗體療法可用作除低級(jí)濾泡非-Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)以外的其它類型的淋巴瘤的療法，結(jié)果也將是有利可圖的。
發(fā)明簡述本發(fā)明公開了B-細(xì)胞淋巴瘤聯(lián)合療法，并報(bào)道了用嵌合的和經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體治療復(fù)發(fā)的或難治的B-細(xì)胞淋巴瘤的好處。特別是，已發(fā)現(xiàn)當(dāng)聯(lián)合施用抗-CD20抗體，細(xì)胞因子，放射性療法，重度骨髓抑制療法或化學(xué)療法進(jìn)行治療時(shí)能提供有利的協(xié)同作用。奇怪的是，與以前未接受過治療的患者相比，以前接受過骨髓或干細(xì)胞移植的患者的整個(gè)反應(yīng)速率出人意料地增加。
發(fā)明詳述本發(fā)明包括治療B-細(xì)胞淋巴瘤的聯(lián)合治療方案。通常，所述方法包括治療復(fù)發(fā)性B-細(xì)胞淋巴瘤的方法，其中以前接受過淋巴瘤治療的患者舊病復(fù)發(fā)，給該患者施用治療有效量的嵌合抗-CD20抗體。所述的既往治療包括例如用抗-CD20抗體進(jìn)行的既往治療，包括骨髓或干細(xì)胞移植的治療，放射性療法和化學(xué)療法。既往化學(xué)療法選自一組化學(xué)治療劑和聯(lián)合方案，包括CHOP，ICE，米托蒽醌，阿糖胞苷，DVP，ATRA，去甲氧柔紅霉素，hoelzer化學(xué)療法方案，La La化學(xué)療法方案，ABVD，CEOP，2-CdA，F(xiàn)LAG & IDA(隨后進(jìn)行或不進(jìn)行G-CSF治療)，VAD，M & P，C-Weekly，ABCM，MOPP和DHAP。
本發(fā)明的方法還包括治療患有B-細(xì)胞淋巴瘤的受試者的方法，其中所述受試者對(duì)包括上述所有療法的其它治療方法，即用嵌合抗-CD20抗體進(jìn)行的治療，包括骨髓或干細(xì)胞移植的治療，放射性療法和化學(xué)療法不起反應(yīng)。本發(fā)明特別地包括治療患者的方法，所述患者在施用嵌合抗-CD20抗體之后未表現(xiàn)出可見的腫瘤減輕或消退，所述方法包括給所述患者施用經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體。
本發(fā)明特別地提供了在施用嵌合抗體之后用經(jīng)放射性標(biāo)記的抗體治療患者的方法，籍此，在施用所述嵌合抗-CD20抗體約1周至約2年之后施用經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體。更特別地，在施用所述嵌合抗-CD20抗體約1周至約9個(gè)月之后施用經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體。
盡管任何抗-CD20抗體都可用于本發(fā)明的方法，但優(yōu)選的嵌合抗體是C2B8(IDEC Pharmaceuticals，Rituximab)。優(yōu)選的經(jīng)放射性標(biāo)記的抗體是Y2B8，該抗體是用釔-90(90Y)標(biāo)記的鼠抗體。然而，也可使用具有其它放射性標(biāo)記的抗體，尤其是經(jīng)β或α同位素標(biāo)記的抗體。也可使用抗-CD19抗體。
本領(lǐng)域技術(shù)人員知道選擇特定類型的抗-CD20抗體的參數(shù)。例如，嵌合和人源化抗體有利于降低免疫原性，便于抗體效應(yīng)物經(jīng)由人恒定區(qū)結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)免疫反應(yīng)。相反，鼠和其它哺乳動(dòng)物抗體有利于將放射性標(biāo)記傳遞至腫瘤細(xì)胞，因?yàn)檫@種抗體一般具有降低的體內(nèi)半壽期。
最初進(jìn)行的對(duì)患者不起作用或使患者舊病復(fù)發(fā)的抗體治療包括起初用嵌合抗體或哺乳動(dòng)物抗體進(jìn)行治療。還包括起初用包括抗-CD19抗體和抗-Lym抗體的其它抗體進(jìn)行治療，以及用經(jīng)諸如毒素的細(xì)胞毒組成成分和諸如Oncolym(Techniclone)或Bexxar(Coulter)的放射性標(biāo)記標(biāo)記的抗體進(jìn)行治療。
顯然，可實(shí)施本發(fā)明的聯(lián)合治療方案，籍此，可同時(shí)進(jìn)行所述療法，即同時(shí)施用或在相同的時(shí)間段內(nèi)(即療法是同時(shí)進(jìn)行的，但不是精確地在相同時(shí)間點(diǎn)施用藥劑)施用抗-CD20抗體。也可以在其它療法之前或之后施用本發(fā)明的抗-CD20抗體?？梢韵嗬^給藥，而不用管患者是否對(duì)第一個(gè)療法有反應(yīng)，從而降低減弱或復(fù)發(fā)的可能性。
本發(fā)明的聯(lián)合療法包括治療B-細(xì)胞淋巴瘤的方法，所述方法包括施用至少一種嵌合的抗-CD20抗體和至少一種細(xì)胞因子。本發(fā)明特別地包括治療B-細(xì)胞淋巴瘤的方法，所述方法包括施用含有至少一種抗-CD20抗體和至少一種細(xì)胞因子的協(xié)同治療組合，其中治療效果優(yōu)于單獨(dú)施用任一種療法的相加效果。優(yōu)選的細(xì)胞因子選自α干擾素，γ干擾素，IL-2，GM-CSF和G-CSF。抗-CD20抗體和細(xì)胞因子可以任一次序相繼施用，或者聯(lián)合使用。
本發(fā)明還包括治療B-細(xì)胞淋巴瘤的方法，所述方法包括在化學(xué)治療方案之前，之中或之后給患者施用治療有效量的嵌合抗-CD20抗體。所述化學(xué)治療方案至少選自CHOP，ICE，米托蒽醌，阿糖胞苷，DVP，ATRA，去甲氧柔紅霉素，hoelzer化學(xué)療法方案，La La化學(xué)療法方案，ABVD，CEOP，2-CdA，F(xiàn)LAG & IDA(隨后進(jìn)行或不進(jìn)行G-CSF治療)，VAD，M& P，C-Weekly，ABCM，MOPP和DHAP。
本發(fā)明還包括治療B-細(xì)胞淋巴瘤的方法，所述方法包括在骨髓或外周干細(xì)胞移植之前，之中或之后給患者施用治療有效量的嵌合抗-CD20抗體。所述骨髓移植也可伴隨其它治療方案，如化學(xué)療法。通過在重度骨髓抑制療法之前或之后給患者施用嵌合抗-CD20抗體，本發(fā)明的抗體也可用于減少骨髓或干細(xì)胞中殘留的CD20+腫瘤細(xì)胞。也可以在體外使用這種抗體以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞編程性死亡，并減少或治愈骨髓或干細(xì)胞中殘留的腫瘤細(xì)胞，然后再將骨髓或干細(xì)胞回輸至患者體內(nèi)。
應(yīng)理解干細(xì)胞移植可以是同種異型或自身移植。如果移植是同種異型(即來自另一個(gè)人)的移植，公開的治療方案包括在施用抗-CD20抗體之前用免疫抑制藥物進(jìn)行治療。也希望同時(shí)施用其它藥物，所述藥物經(jīng)設(shè)計(jì)可以增強(qiáng)對(duì)移植物的接受程度并刺激免疫細(xì)胞的產(chǎn)生和分化。例如，已證實(shí)給骨髓移植受體施用GM-CSF可促進(jìn)特異性骨髓細(xì)胞的發(fā)育，既而產(chǎn)生循環(huán)的抗-感染嗜中性白細(xì)胞，并提高骨髓移植受體的存活率。
本發(fā)明的方法可用于治療多種B-細(xì)胞淋巴瘤，包括低級(jí)/濾泡非-Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)，小淋巴細(xì)胞(SL)NHL，中級(jí)/濾泡NHL，中級(jí)彌散性NHL，高級(jí)免疫母細(xì)胞NHL，高級(jí)淋巴母細(xì)胞NHL，高級(jí)小的非-裂解細(xì)胞NHL，腫瘤體積較大的(bulky disease)NHL和Waldenstrom氏巨球蛋白血癥。本領(lǐng)域技術(shù)人員清楚地知道由于分類系統(tǒng)的改變，這些淋巴瘤經(jīng)常具有不同的名稱，本發(fā)明的聯(lián)合治療方案也有利于患有歸類于不同名下之淋巴瘤的患者。
例如，歐洲和美國病理學(xué)家提出的最新分類系統(tǒng)被稱為修訂的歐美淋巴瘤(REAL)分類法。該分類系統(tǒng)在其它外周B-細(xì)胞腫瘤中分辨出套細(xì)胞淋巴瘤和緣細(xì)胞淋巴瘤，并根據(jù)細(xì)胞學(xué)將一些類別分成等級(jí)，即小細(xì)胞，大小混合的細(xì)胞，大細(xì)胞。應(yīng)理解本發(fā)明的聯(lián)合療法有利于所有類別的淋巴瘤。
美國國立癌癥研究所(NCI)依次將一些REAL類別分為在臨床上更有用的“無痛型”或“攻擊型”淋巴瘤名稱。無痛型淋巴瘤包括濾泡細(xì)胞淋巴瘤(分成細(xì)胞學(xué)“級(jí)別”)，彌散性小淋巴細(xì)胞淋巴瘤/慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)，淋巴漿細(xì)胞樣/Waldenstrom氏巨球蛋白血癥，緣區(qū)淋巴瘤和多毛細(xì)胞白血病。攻擊型淋巴瘤包括彌散性混合細(xì)胞和大細(xì)胞淋巴瘤，Burkitt氏淋巴瘤/彌散性小的非-裂解細(xì)胞淋巴瘤，淋巴母細(xì)胞淋巴瘤，套細(xì)胞淋巴瘤和AIDS-相關(guān)淋巴瘤。本發(fā)明的聯(lián)合治療方案也有利于這些淋巴瘤。
也可根據(jù)基于其它疾病特征的“級(jí)別”對(duì)非-Hodgkin氏淋巴瘤進(jìn)行分類，所述級(jí)別包括低級(jí)，中級(jí)和高級(jí)淋巴瘤。低級(jí)淋巴瘤通常表現(xiàn)為結(jié)節(jié)病，通常是不痛或生長緩慢的。中級(jí)和高級(jí)疾病通常表現(xiàn)為具有大的結(jié)節(jié)外大體積腫瘤的更具攻擊性的疾病。本發(fā)明的聯(lián)合治療方案也有利于中級(jí)和高級(jí)疾病以及低級(jí)NHL。
Ann Arbor分類系統(tǒng)通常也可用于NHL患者。在此系統(tǒng)中，可根據(jù)患者是否具有明確限定的一般化癥狀(有為B，無為A)而將成人的I，II，III和IV期NHL分為A和B類。B類患者具有下列癥狀在診斷前6個(gè)月體重?zé)o故減輕10％以上，體溫超過38℃的不明原因的發(fā)燒和夜間盜汗。偶爾也會(huì)使用專門的階段劃分系統(tǒng)I期-涉及單個(gè)淋巴結(jié)區(qū)域或局部涉及單個(gè)淋巴外器官或位點(diǎn)。
II期-涉及隔膜同側(cè)的兩個(gè)或多個(gè)淋巴結(jié)區(qū)域或局部涉及單個(gè)相關(guān)的淋巴外器官或位點(diǎn)及其區(qū)域性淋巴結(jié)，同時(shí)涉及或不涉及隔膜同側(cè)的其它淋巴結(jié)區(qū)域。
III期-涉及隔膜兩側(cè)的淋巴結(jié)區(qū)域，可能同時(shí)還局部涉及淋巴外器官或位點(diǎn)，涉及脾臟，或兩者都涉及。
IV期-彌散性(多個(gè)-病灶)涉及1個(gè)或多個(gè)淋巴外位點(diǎn)，同時(shí)涉及或不涉及相關(guān)的淋巴結(jié)，或者涉及分離的淋巴外器官并涉及遠(yuǎn)離的(非-區(qū)域性的)結(jié)節(jié)。詳情參見“國際非-Hodgkin氏淋巴瘤預(yù)后因子計(jì)劃攻擊型非-Hodgkin氏淋巴瘤的預(yù)測(cè)模型”，新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志，329(14)987-994(1993)。
以下將通過例舉的數(shù)據(jù)闡明優(yōu)選的抗體，劑量方案和特定的療法組合。
Rituximab和Y2B8非-Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)影響著約250,000個(gè)美國人。大多數(shù)NHL患者都不能被化學(xué)療法，放射性療法或高劑量自身骨髓(ABMT)療法或外周血干細(xì)胞(PBSC)支持體治愈。
約80％非-Hodgkin氏淋巴瘤是B-細(xì)胞惡性腫瘤，95％以上的該淋巴瘤在其細(xì)胞表面表達(dá)CD20抗原。所述抗原是很具吸引力的免疫治療靶，因?yàn)樗鼉H出現(xiàn)在B細(xì)胞上，而不出現(xiàn)在造血干細(xì)胞，前B細(xì)胞，正常漿細(xì)胞或其它正常組織上。該抗原不會(huì)脫離細(xì)胞表面，也不會(huì)調(diào)制抗體結(jié)合(1)。
Rituximab是新一代單克隆抗體，它可克服鼠抗體遭遇的局限性，包括半壽期短，刺激人效應(yīng)物功能的能力有限和免疫原性(2，3)。
Rituximab是經(jīng)基因工程改造的單克隆抗體，它具有鼠輕鏈和重鏈可變區(qū)和人γI重鏈和κ輕鏈恒定區(qū)。嵌合抗體由兩個(gè)451個(gè)氨基酸長的重鏈和兩個(gè)213個(gè)氨基酸長的輕鏈組成，其分子量約為145kD。Rituximab在固定補(bǔ)體和介導(dǎo)ADCC方面比其鼠親代更加有效，它可在人補(bǔ)體的存在下介導(dǎo)CDC(4)。該抗體可抑制B-細(xì)胞系FL-18，Ramos和Raji的細(xì)胞生長，使具有化學(xué)抗性的人淋巴瘤細(xì)胞系對(duì)白喉毒素，蓖麻毒蛋白，CDDP，阿霉素和表鬼臼毒素吡喃葡糖苷變得敏感，并以依賴于劑量的方式在DHL-4人B-細(xì)胞淋巴瘤系中誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡(5)。就人而言，在第一次灌注之后，抗體的半壽期約為60小時(shí)，在第四次灌注之后即隨每次劑量增加至174小時(shí)。該抗體的免疫原性低；在7次臨床研究的355個(gè)患者中，僅有3個(gè)(＜1％)患者具有可測(cè)的抗-嵌合抗體(HACA)反應(yīng)。
使用鼠2B8抗體對(duì)Rituximab進(jìn)行基因工程改造。為了診斷和治療的目的，2B8抗體也可與不同的放射性標(biāo)記綴合。為此，共同懸而未決的申請(qǐng)流水號(hào)08/475,813，08/475,815和08/478,967(皆全文列入本文作為參考)公開了可用于在施用治療性抗體之前診斷性“顯象”B-細(xì)胞淋巴瘤腫瘤的經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20綴合物。“In2B8”綴合物含有特異于人CD20抗原的鼠單克隆抗體2B8，該抗體經(jīng)由雙功能螯合劑，即MX-DTPA(二乙三胺五乙酸)與銦[111](111In)結(jié)合，所述螯合劑含有1-異硫氰酸根合芐基-3-甲基-DTPA和1-甲基-3-異硫氰酸根合芐基-DTPA的1∶1混合物。選擇銦-[111]為診斷用放射性核素是因?yàn)樗砂l(fā)射γ射線，而且可以先用作顯象劑。
涉及螯合劑和螯合劑綴合物的專利是本領(lǐng)域已知的。例如，Gansow的美國專利4,831,175涉及多取代的二乙三胺五乙酸螯合物和含有該螯合物的蛋白質(zhì)綴合物及其制備方法。Gansow的美國專利5,099,069，5,246,692，5,286,850和5,124,471也涉及多取代的DTPA螯合物。這些專利的全文列入本文作為參考。
選擇MX-DTPA作為便于螯合的特定雙功能螯合劑是因?yàn)樗鼘?duì)三價(jià)金屬具有高親和性，可提供增加的腫瘤非腫瘤比例，降低的骨攝入，并使放射性核素在靶位點(diǎn)，即B-細(xì)胞淋巴瘤腫瘤位點(diǎn)的體內(nèi)保留時(shí)間更長。然而，其它雙功能螯合劑也是本領(lǐng)域已知的，并且也有利于腫瘤療法。
美國專利5,736,137中公開了用于靶向和破壞B-細(xì)胞淋巴瘤和腫瘤細(xì)胞的經(jīng)放射性標(biāo)記的治療性抗體。特別是，Y2B8綴合物含有相同的抗-人CD20鼠單克隆抗體2B8，該抗體經(jīng)由相同的雙功能螯合劑與釔-[90](90Y)結(jié)合。選擇該放射性核素用于治療是鑒于下列幾個(gè)原因。90Y長達(dá)64小時(shí)的半壽期足以使腫瘤積累一定量的抗體，與131I不同的是，90Y能發(fā)射范圍為100至1000個(gè)細(xì)胞直徑的高能量的純?chǔ)律渚€，在其衰變過程中沒有相伴隨的γ照射。最低量的穿透輻射使得可以給門診病人施用90Y-標(biāo)記的抗體。另外，細(xì)胞殺傷不需要內(nèi)化標(biāo)記抗體，局部發(fā)射離子化輻射對(duì)缺乏靶抗原的鄰近腫瘤細(xì)胞具有致死效應(yīng)。
由于使用相同雙功能螯合劑分子MX-DTPA使90Y放射性核素與2B8抗體結(jié)合，Y2B8綴合物具有與上述相同的優(yōu)點(diǎn)，例如放射性核素在靶位點(diǎn)(腫瘤)的保留時(shí)間延長。然而，與111In不同的是，它不能用于顯象的目的，原因是它缺乏與顯象相關(guān)的γ輻射。因此，在本發(fā)明的聯(lián)合治療方案中，診斷用“顯象”放射性核素，如111In可用于在施用治療性嵌合或90Y-標(biāo)記抗體之前和/或之后測(cè)定腫瘤的位置和相對(duì)大小。另外，銦-標(biāo)記的抗體能夠進(jìn)行劑量學(xué)評(píng)估。
根據(jù)抗體的所需用途，即用作診斷劑還是治療劑，其它放射性標(biāo)記也是本領(lǐng)域已知的，并已用于類似的目的。例如，已用于臨床診斷的放射性核素包括131I，125I，123I，99Tc，67Ga以及111In?？贵w已被多種放射性核素標(biāo)記以潛在用于靶向免疫療法(Peirersz等(1987)，單克隆抗體綴合物用于診斷和治療癌癥的用途，免疫細(xì)胞生物學(xué)，65111-125)。這些放射性核素包括188Re和186Re以及90Y，較少用到199Au和67Cu。I-(131)也可用于治療目的。美國專利5,460,785(列入本文作為參考)提供了這些放射性同位素的列表。
正如美國專利5,736,137所報(bào)道的，給患有B-細(xì)胞淋巴母細(xì)胞腫瘤的小鼠施用經(jīng)放射性標(biāo)記的Y2B8綴合物以及未經(jīng)標(biāo)記的嵌合抗-CD20抗體可導(dǎo)致腫瘤顯著消退。另外，該文報(bào)道的人臨床試驗(yàn)表明用嵌合抗-CD20抗體灌注淋巴瘤患者可使其體內(nèi)的B-細(xì)胞顯著耗盡。實(shí)際上，嵌合2B8是最近被FDA批準(zhǔn)的美國第一個(gè)抗-癌單克隆抗體，其名稱為Rituxan。因此，至少有一種嵌合的抗-CD20抗體已被證實(shí)對(duì)治療B-細(xì)胞淋巴瘤有效。
另外，美國專利5,736,137(列入本文作為參考)公開了依次施用Rituxan，被銦-標(biāo)記和/或釔-標(biāo)記的嵌合抗-CD20鼠單克隆抗體。盡管這些聯(lián)合療法中使用的經(jīng)放射性標(biāo)記的抗體是鼠抗體，起初用嵌合抗-CD20抗體治療足以耗盡B-細(xì)胞群體以使HAMA反應(yīng)減弱，從而便于聯(lián)合治療和診斷方案。
因此，在聯(lián)合免疫療法的上下文中，鼠抗體能特別地用作診斷試劑。另外，美國專利5,736,137中證實(shí)在施用Rituxan之后施用治療有效劑量的經(jīng)釔-標(biāo)記的抗-CD20抗體足以(a)清除未被嵌合抗-CD20抗體清除的任何殘留的外周血B-細(xì)胞；(b)開始耗盡淋巴結(jié)中的B-細(xì)胞；或(c)開始耗盡其它組織中的B-細(xì)胞。
因此，放射性標(biāo)記與癌癥治療性抗體的綴合提供了一種有價(jià)值的臨床工具，從而用于評(píng)估該抗體的潛在治療效力，產(chǎn)生診斷試劑以監(jiān)測(cè)治療的進(jìn)程，并設(shè)計(jì)其它治療劑以用于增強(qiáng)嵌合抗體最初的腫瘤-殺傷效力。鑒于抗-CD20抗體治療非-Hodgkin氏淋巴瘤的效力已被證實(shí)，而且已知淋巴細(xì)胞對(duì)放射性敏感，將這種嵌合的和經(jīng)放射性標(biāo)記的治療性抗體用于目的在于降低非-Hodgkin氏淋巴瘤之復(fù)發(fā)或難治頻率的聯(lián)合治療方案會(huì)十分有利。另外，如果這種聯(lián)合治療方案能用于治療其它B-細(xì)胞淋巴瘤，結(jié)果也將是有利的。
低級(jí)或?yàn)V泡NHL復(fù)發(fā)或難治NHL的單一-藥劑研究經(jīng)FDA批準(zhǔn)的Rituximab基于5個(gè)主要在低級(jí)或?yàn)V泡NHL患者中進(jìn)行的單一-藥劑研究。劑量范圍為10-500mg/m2的單一Rituximab灌注l期研究闡明仍未達(dá)到最大耐受劑量；然而，據(jù)認(rèn)為最高劑量時(shí)的灌注時(shí)間長度不利于門診患者的治療。15個(gè)患者中的ORR是13％(表1)(6)。
表1 Rituximab效力結(jié)果簡述
*N＝可評(píng)價(jià)的患者數(shù)目無法獲得在I/II期劑量-變化研究的I期，患者接受每周一次共計(jì)4次的125至375mg/m2灌注。未顯示出與劑量相關(guān)的毒性，選擇375mg/m2作為II期劑量。在接受該劑量的37個(gè)患者中，有17(46％)個(gè)患者的腫瘤消退，包括3(8％)個(gè)完全反應(yīng)(CR)和14(38％)個(gè)部分反應(yīng)PR(7)。
隨后，在166個(gè)復(fù)發(fā)或難治的，低級(jí)或?yàn)V泡NHL(國際操作方式[IWF]A-D型和REAL分類，小淋巴細(xì)胞淋巴瘤，濾泡中心，濾泡I，II，III級(jí)(8))患者中，每周一次共計(jì)4次以375mg/m2的劑量灌注Rituximab以進(jìn)行關(guān)鍵性的single-arm研究。從該研究中排除腫瘤塊＞10cm或外周血中具有＞5000個(gè)淋巴細(xì)胞/μl的患者。平均年齡為58歲(105個(gè)男性，61個(gè)女性)，以前接受的治療次數(shù)中位值為3。在149個(gè)被評(píng)價(jià)的患者中，56％的患者涉及到骨髓。45％患者具有≥2個(gè)結(jié)節(jié)外位點(diǎn)，41％的患者患有大體積腫瘤(≥5cm)。
完全反應(yīng)需要所有淋巴結(jié)消退至＜1×1cm2(在相距至少28天的兩個(gè)時(shí)機(jī)，由脖子，胸，腹和骨盆CT掃描圖象證實(shí))，淋巴瘤的所有癥狀和跡象消退，骨髓，肝臟和脾臟正?；?。部分反應(yīng)需要將損害的垂直測(cè)定值的總數(shù)降低≥50％，并在至少28天內(nèi)沒有任何進(jìn)行性疾病的跡象。據(jù)認(rèn)為，即使觀察到可測(cè)疾病凈減輕(＞50％)，未獲得CR或PR的患者仍是非-反應(yīng)者。從第一次灌注直至疾病有所發(fā)展，測(cè)定出至疾病發(fā)展的時(shí)間。
整個(gè)反應(yīng)率(ORR)為48％，其中CR 6％，PR 42％(8)。反應(yīng)者疾病有所發(fā)展的時(shí)間中位值(TTP)為13.2個(gè)月，反應(yīng)所需的時(shí)間中位值(DR)為11.6個(gè)月。80個(gè)反應(yīng)者中有22(28％)個(gè)在20.9+至32.9+個(gè)月一直保持腫瘤消退狀態(tài)(9)。
施用Rituximab導(dǎo)致快速和持續(xù)的B-細(xì)胞耗盡。83％患者的循環(huán)B-細(xì)胞在施用前3次劑量的過程中耗盡，在治療后的6至9個(gè)月內(nèi)繼續(xù)耗盡。治療后12個(gè)月，B-細(xì)胞水平中位值恢復(fù)正常。盡管NK細(xì)胞計(jì)數(shù)中位值保持不變，但在基線處較高的絕對(duì)NK細(xì)胞計(jì)數(shù)和對(duì)Rituximab的反應(yīng)之間觀察到正相關(guān)關(guān)系。
分析幾個(gè)基線預(yù)后因子以測(cè)定它們與反應(yīng)的相關(guān)性。顯然，在ABMT或PBSC之后復(fù)發(fā)的23個(gè)患者中，以前未經(jīng)受過高劑量治療的患者的ORR為78％對(duì)43％(p＜0.01)。在多變量分析中，相對(duì)于小淋巴細(xì)胞淋巴瘤患者而言，濾泡NHL患者的ORR較高(58％對(duì)12％，p＜0.01)，相對(duì)于化學(xué)抗性復(fù)發(fā)患者而言，化學(xué)敏感復(fù)發(fā)患者的ORR較高(53％對(duì)36％，p＝0.06)。以下因素對(duì)反應(yīng)率無影響年齡＞60歲，結(jié)節(jié)外疾病，以前曾接受過anthracycline治療或涉及到骨髓。
在治療和加強(qiáng)治療過程中的血清抗體濃度中位值和多時(shí)間點(diǎn)反應(yīng)之間發(fā)現(xiàn)了具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的相關(guān)性(11)。
相對(duì)于小淋巴細(xì)胞淋巴瘤患者而言，濾泡NHL患者的血清抗體水平較高。平均血清抗體與腫瘤塊測(cè)量數(shù)值和基線處的循環(huán)B-細(xì)胞數(shù)目之間也呈負(fù)相關(guān)。較低血清抗體濃度和較高循環(huán)NHL細(xì)胞數(shù)目和較大腫瘤體積的相關(guān)性表明抗體清除的主要模式針對(duì)的是腫瘤細(xì)胞。
高血清抗體濃度與反應(yīng)和較小的腫瘤體積或較少的循環(huán)細(xì)胞的相關(guān)性表明較高或更高劑量的Rituximab是在一些患者子集，如大體積腫瘤患者中誘導(dǎo)反應(yīng)所必需的。
然而，在43％腫瘤＞5cm的患者和35％腫瘤＞7cm的患者中，用Rituximab也可引起反應(yīng)，這表明用Rituximab治療大體積腫瘤患者也是可行的。這一發(fā)現(xiàn)是出人意料的，因?yàn)殚L期以來人們一直認(rèn)為由于腫瘤的致密性，抗體療法無法治療大體積腫瘤。
在日本進(jìn)行的研究(12)中，每周一次共計(jì)4次地用250mg/cm2(N＝4)或375mg/cm2(N＝8)Rituximab治療復(fù)發(fā)的B-細(xì)胞淋巴瘤患者。在11個(gè)可評(píng)價(jià)的患者中，有8個(gè)患有濾泡NHL，2個(gè)患有彌散性大-細(xì)胞NHL，1個(gè)患有套細(xì)胞淋巴瘤。11個(gè)患者中有2個(gè)具有CR，5個(gè)具有PR，ORR為64％；所有反應(yīng)者都具有濾泡組織學(xué)。
由于在以前的研究中Rituximab血清水平與反應(yīng)正相關(guān)，在低級(jí)或?yàn)V泡NHL患者中進(jìn)行8次每周1次的劑量為375mg/cm2的RituximabII期研究。在可評(píng)價(jià)的患者中，ORR為60％，CR率為14％，PR率為46％。反應(yīng)者TTP和DR的中位值分別為13.4+個(gè)月和19.4+個(gè)月(13)。盡管難以橫向比較這些研究結(jié)果，但使用更高劑量似乎能改善TTP和DR。
與抗體療法僅可用于小的轉(zhuǎn)移性疾病的早期假說相反，Rituximab對(duì)大腫瘤疾病也十分有效。在獨(dú)立進(jìn)行的研究中，31個(gè)復(fù)發(fā)或難治的，腫瘤體積較大的低級(jí)NHL(單個(gè)損害的直徑＞10cm)患者接受每周一次共計(jì)4次的375mg/cm2Rituximab灌注。28個(gè)可評(píng)價(jià)患者中有12(43％)個(gè)顯示出CR(1，4％)或PR(11，39％)(14)。
Waldenstrom氏巨球蛋白血癥Waldenstrom氏巨球蛋白血癥(WM)是惡性腫瘤，其中B淋巴細(xì)胞分泌過量的IgM抗體。WM通常發(fā)生于60歲以上的老人，但在30出頭的成人中也可測(cè)出該病。目前，WM被認(rèn)為是罕見的不可治愈的無痛型惡性腫瘤，過去曾用血漿去除術(shù)治療過該病以降低血清粘度。醫(yī)生經(jīng)常建議使用諸如烷化劑和皮質(zhì)類固醇的化學(xué)治療藥物。最常推薦的WM治療藥物是Leustatin(2CdA)。
據(jù)報(bào)道，7個(gè)接受Rituximab治療(375mg/cm2，每周一次共計(jì)4次)的Waldenstrom氏巨球蛋白血癥患者中有4(57％)個(gè)有反應(yīng)(15)。疾病未繼續(xù)發(fā)展的存活時(shí)間中位值為8個(gè)月(3-27+個(gè)月)。因此，Rituximab應(yīng)該可用于聯(lián)合治療方案，尤其可以與諸如2CdA的化學(xué)治療劑一起使用。
慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)CLL是小淋巴細(xì)胞淋巴瘤(SLL)的液體(白血病的)等同物。當(dāng)用標(biāo)準(zhǔn)劑量的Rituximab進(jìn)行治療時(shí)，相對(duì)于其它低級(jí)NHL亞型患者而言，SLL患者具有較低的血清水平和較低的反應(yīng)率。這可能是因?yàn)镃LL患者具有很高水平的循環(huán)腫瘤細(xì)胞，而且，據(jù)認(rèn)為CLL所涉及惡性細(xì)胞的細(xì)胞表面CD20的表達(dá)水平降低。
然而，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)用Rituximab可以治療諸如CLL的血液惡性腫瘤。最近的臨床研究評(píng)價(jià)了用較高劑量的Rituximab治療CLL患者(16)。所有患者首先接受的劑量為375mg/m3以使灌注-復(fù)發(fā)的副作用最小化。隨后的每周劑量(3)保持相同，但以增加的劑量水平給藥。16個(gè)患者接受劑量為500-1500 mg/m3的治療。平均年齡為66歲(25至78)。81％具有III-IV晚期疾病。平均白血細(xì)胞計(jì)數(shù)為40×109/L(范圍為4-200)，Hgb 11.6g/dl(范圍為7.7-14.7)，血小板75×109/L(范圍為16-160)，β2免疫球蛋白中位值為4.5mg/L(范圍為3.1-9.2)。以前接受的治療次數(shù)中位值為2.5(范圍為1-9)。60％的患者對(duì)治療不起反應(yīng)。兩個(gè)患者在施用第一次劑量(375mg/m3)時(shí)并發(fā)嚴(yán)重的高血壓；另一個(gè)患者接受了進(jìn)一步的治療。盡管未全面評(píng)價(jià)劑量為1500mg/m3時(shí)的患者，但隨后逐步增加的劑量所產(chǎn)生的毒性較輕。8個(gè)患者結(jié)束了治療(4個(gè)在500mg/m3時(shí)，3個(gè)在650mg/m3時(shí)，1個(gè)在825mg/m3時(shí))。1個(gè)用560mg/m3治療的患者的病情全面減輕。1個(gè)患者在治療過程中具有進(jìn)行性淋巴細(xì)胞增多的癥狀，所有其它患者的外周血淋巴細(xì)胞增多癥狀減輕，但對(duì)淋巴結(jié)的影響較小。進(jìn)行劑量逐步增加的研究。
改善CLL患者反應(yīng)的另一種方法是使用細(xì)胞因子上調(diào)CD20抗原。在一項(xiàng)體外研究中，將CLL患者的單核細(xì)胞與多種細(xì)胞因子一起保溫24小時(shí)。流式細(xì)胞計(jì)數(shù)的結(jié)果顯示出IL-4，GM-CSF和TNF-α顯著的上調(diào)作用(17)。實(shí)際上，最新的數(shù)據(jù)表明在CLL細(xì)胞上觀察到的CD20上調(diào)僅局限于腫瘤細(xì)胞(Venogopal等，Poster-泛太平洋淋巴瘤會(huì)議，1999年6月，慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)細(xì)胞中由細(xì)胞因子-誘導(dǎo)的CD20抗原表達(dá)上調(diào)僅局限于腫瘤細(xì)胞)。初步的數(shù)據(jù)也表明使用濃度為500至1000U/ml的α干擾素僅24小時(shí)之后，α干擾素也能上調(diào)CLL細(xì)胞上的CD20。
因此，通過在使用Rituximab之前給CLL患者施用某些細(xì)胞因子或兩者同時(shí)使用，可以上調(diào)惡性B-細(xì)胞表面的CD20表達(dá)，從而使CD20以及其它細(xì)胞表面標(biāo)記，如CD19成為更具吸引力的免疫治療靶。已開始一項(xiàng)合作研究以檢測(cè)體內(nèi)上調(diào)CD20所需的最適細(xì)胞因子劑量。研究方法包括起初以250mcg/m2SQ QD×3用GM-CSF治療10個(gè)患者，然后以4mcg/kgSQ QD×3用IL治療10個(gè)患者，再以5mcg/kg SQ QD×3用GM-CSF治療10個(gè)患者。通過Ficon Hypaque離心分離單核細(xì)胞以進(jìn)行細(xì)胞凋亡研究，從而測(cè)定CD20上調(diào)是否能通過Rituximab轉(zhuǎn)變?yōu)樵鰪?qiáng)對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷力的形式。
CLL的抗體療法可與其它常規(guī)的已知能用于治療CLL的化學(xué)療法聯(lián)合。最常使用的CLL單一藥劑是每天0.1mg/kg或每4周0.4至1.0mg/kg苯丁酸氮芥(leukeran)。苯丁酸氮芥常與口服強(qiáng)的松(30至100mg/m2/d)聯(lián)合使用，強(qiáng)的松可用于治療自身免疫細(xì)胞減少癥。環(huán)磷酰胺是苯丁酸氮芥的替代品，常用劑量是每3-4周1-2g/m2，可與長春新堿和類固醇聯(lián)合使用(例如COP方案)。
已使用過多種藥物組合來治療CLL，包括COP(環(huán)磷酰胺，長春新堿和強(qiáng)的松)和CHOP(這三種藥物加上阿霉素)。Fludarabine也能起到治療CLL的作用，每3-4周以25-30mg/m2/d治療的一組患者的ORR為50％。盡管一些患者對(duì)fludarabine不起反應(yīng)。這些患者也對(duì)2-CdA具有抗性，因?yàn)閷?duì)fludarabine不起反應(yīng)的患者經(jīng)常也對(duì)2-CdA不起反應(yīng)(O’Brien等，新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志，330319-322(1994))。
因此，抗-CD20抗體療法可特別地用于治療對(duì)化學(xué)治療藥物的治療不起反應(yīng)的患者或者在經(jīng)過所述治療之后舊病復(fù)發(fā)的患者。在這些患者中，Rituximab療法也可與放射性療法聯(lián)合。已證實(shí)在約1/3患者中，低組分大小為15cGy至總劑量為75-150cGy的TBI也是有效的。
最近，在CLL患者中用CALGB進(jìn)行了II期試驗(yàn)。同時(shí)施用Rituximab和fludarabine，接著用Rituximab進(jìn)行鞏固治療對(duì)導(dǎo)入fludarabine，接著用Rituximab進(jìn)行治療。
Rituximab與重度骨髓抑制療法在無痛淋巴瘤中，重度骨髓抑制療法產(chǎn)生了反應(yīng)；然而，盡管使用了高-劑量療法，殘留的腫瘤細(xì)胞仍舊存在，重新灌注的PBSC含有腫瘤細(xì)胞。在干細(xì)胞活動(dòng)化之前和移植之后使用Rituximab以減少殘留的CD20+腫瘤細(xì)胞，和所收集的骨髓或干細(xì)胞中的污染物。臨時(shí)性的結(jié)果表明在收集的細(xì)胞中沒有可測(cè)的CD20+細(xì)胞。24個(gè)患者中有18個(gè)獲得了移入物，患者能較好地耐受治療。進(jìn)行PCR試驗(yàn)以評(píng)價(jià)殘留的腫瘤細(xì)胞(18)。
用Rituximab再次治療復(fù)發(fā)的低級(jí)NHL評(píng)價(jià)對(duì)53個(gè)已對(duì)Rituximab作出反應(yīng)但后來又舊病復(fù)發(fā)的患者所進(jìn)行的再次治療試驗(yàn)(19)。56個(gè)可評(píng)價(jià)患者中有7(13％)個(gè)得到CR，16個(gè)得到PR(29％)，ORR為42％。4個(gè)具有第二次反應(yīng)的患者接受了第三次治療；其中的3個(gè)患者作出反應(yīng)。
用Rituximab治療兩個(gè)療程之后，一個(gè)患者的腫瘤(起初被分類為濾泡，小的裂解細(xì)胞NHL)不再表達(dá)CD20抗原，并在轉(zhuǎn)化彌散性大細(xì)胞NHL時(shí)對(duì)Rituximab不起反應(yīng)(20)。
因此，盡管用Rituximab再次治療能有效治療先用Rituximab治療之后舊病復(fù)發(fā)的患者，在第二次治療之后CD20-腫瘤細(xì)胞的出現(xiàn)頻率增加。這一觀察結(jié)果支持本文所述聯(lián)合治療方案的實(shí)用性。
聯(lián)合使用Rituximab和CHOP化學(xué)療法治療低級(jí)NHL使用環(huán)磷酰胺，阿霉素，長春新堿和強(qiáng)的松(CHOP)的化學(xué)療法是低級(jí)或?yàn)V泡NHL有效的一線療法。盡管最初的反應(yīng)率高，但終會(huì)發(fā)生復(fù)發(fā)，隨后的化學(xué)治療方案能在較短的時(shí)間內(nèi)使病情減輕。進(jìn)行II期試驗(yàn)以在新診斷的和復(fù)發(fā)的低級(jí)或?yàn)V泡NHL中評(píng)價(jià)CHOP和Rituximab的聯(lián)合(21)，因?yàn)樗鼈兊淖饔脵C(jī)理沒有交叉抗性，Rituximab與包括阿霉素的某些細(xì)胞毒性藥物能夠協(xié)同作用(5)。
38個(gè)患者中有29個(gè)以前未接受過抗癌治療。每3周以標(biāo)準(zhǔn)劑量施用CHOP共6個(gè)周期，并且6次灌注Rituximab(375mg/m2)。在始于第8天的第一個(gè)CHOP周期前的第1和第6天施用Rituximab灌注1和2。分別在第三和第五次CHOP周期前2天施用Rituximab灌注3和4，分別在第6次CHOP周期之后的第134和第141天施用Rituximab灌注5和6。
在此聯(lián)合療法研究中，38個(gè)被治療的患者100％作出反應(yīng)(CR，58％；PR，42％)。在完成治療的35個(gè)可評(píng)價(jià)患者中，63％具有CR，37％具有PR(21)。DR中位值為35.3+個(gè)月，在36.7+個(gè)月的中位觀察時(shí)間之后，未達(dá)到疾病未繼續(xù)發(fā)展的存活時(shí)間中位值。在36+個(gè)月至53.4+個(gè)月之后，20個(gè)患者的病情仍是減輕的(22)。該DR給人的印象很深，甚至對(duì)一線治療而言也是如此，該試驗(yàn)群體中有24％的患者在化學(xué)療法之后仍會(huì)舊病復(fù)發(fā)。
在用CALGB進(jìn)行的研究中，40個(gè)低級(jí)NHL患者每周一次共計(jì)8次地接受Rituximab并從第8天開始每天口服環(huán)磷酰胺。20個(gè)患者以每周一次共計(jì)8次的劑量僅接受Rituximab。
在低級(jí)NHL患者中用ECOG進(jìn)行III期研究，將結(jié)果與聯(lián)合使用環(huán)磷酰胺和fludarabine(Arm A)與標(biāo)準(zhǔn)的CVP療法(Arm B)的結(jié)果相比較。在對(duì)Arm A或Arm B隨機(jī)化時(shí)，根據(jù)年齡，腫瘤負(fù)擔(dān)，組織學(xué)和B癥狀將患者分層。兩個(gè)arm中的反應(yīng)者第二次對(duì)Rituximab維持療法(375mg/m2，2年內(nèi)每6個(gè)月每周一次共計(jì)4次)(Arm C)或觀察(Arm D)隨機(jī)化。
Rituximab與細(xì)胞因子聯(lián)合Rituximab加α干擾素干擾素是參與調(diào)制免疫系統(tǒng)的細(xì)胞因子(23)。干擾素增加抗體效力的機(jī)理包括加強(qiáng)抗原表達(dá)(24)，增加抗體進(jìn)入腫瘤的擊靶(25，26)并增強(qiáng)免疫毒素的細(xì)胞毒性(27)。
在聯(lián)合試驗(yàn)中，給復(fù)發(fā)的低級(jí)或?yàn)V泡NHL患者施用對(duì)NHL具有單-劑臨床活性的細(xì)胞因子α干擾素(Roferon-A)和Rituximab。每周3次皮下施用α干擾素(2.5或5MIU)共12周。從治療的第5周開始，以每周一次共計(jì)4次的劑量(375mg/m2)經(jīng)IV灌注施用Rituximab。ORR為45％(17/38個(gè)患者)；11％具有CR，34％具有PR。反應(yīng)者DR和TTP中位值的Kaplan-Meier估計(jì)值分別為22.3+和25.2+個(gè)月(29)。以前進(jìn)行的聯(lián)合使用α干擾素和含有anthracyclines的化學(xué)治療方案的研究使疾病開始發(fā)展的時(shí)間推遲，但不能始終如一地增加反應(yīng)率或存活率(30-32)。這些早期研究的結(jié)果表明相對(duì)于僅使用Rituximab而言，聯(lián)合使用Rituximab和α干擾素可使疾病開始發(fā)展的時(shí)間推遲。
Rituximab加G-CSF在獨(dú)立的研究中，在復(fù)發(fā)低級(jí)NHL患者中評(píng)價(jià)Rituximab和G-CSF。已在體外以及健康自愿者體內(nèi)闡明G-CSF通過其對(duì)髓樣前體細(xì)胞的作用誘導(dǎo)FcRI-陽性嗜中性白細(xì)胞，所述白細(xì)胞在ADCC中能作為效應(yīng)細(xì)胞起作用。因此，開始進(jìn)行I/II期研究以評(píng)價(jià)聯(lián)合療法的毒性和效力。
在I期和II期中，在施用Rituximab前2天，給患者施用標(biāo)準(zhǔn)劑量的G-CSF(5μg/kg/天)達(dá)3天。I期由劑量漸增的Rituximab(125，250或375mg/m2，每周一次共計(jì)4次)組成。迄今為止評(píng)價(jià)的9個(gè)患者的早期結(jié)果顯示出ORR為67％(44％CR，22％PR)，在9個(gè)患者的8個(gè)中毒性較低(33)。最常見的不良反應(yīng)是發(fā)燒(4/8個(gè)患者)，鼻炎(4/8)，發(fā)冷(3/8)和頭疼(3/8)，這些反應(yīng)和以前在僅施用Rituximab時(shí)觀察到的不良反應(yīng)差不多。開始該項(xiàng)研究的II期部分，以檢查G-CSF和375mg/m2Rituximab×4聯(lián)合的效力。
Rituximab加IL-2使用高劑量的自身外周血干細(xì)胞(PBSC)或骨髓(BM)獲救療法治療NHL，然而成功的治療受到高復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)(50-80％)的限制。在改善移植后病情減輕所延續(xù)時(shí)間的努力中，已在多個(gè)治療中心研究了包括用IL-2進(jìn)行高劑量和低劑量治療的免疫療法。該研究表明IL-2療法顯示出移植后早期的抗-腫瘤活性。
起初，在自身移植之后，患者顯示出延遲型免疫重構(gòu)，它可潛在地導(dǎo)致免疫-介導(dǎo)的腫瘤根除削弱(43，44)。實(shí)際上，已證實(shí)CD4+T細(xì)胞和細(xì)胞毒CD8+T細(xì)胞被抑制(45-49)。體外試驗(yàn)證實(shí)對(duì)促細(xì)胞分裂原和可溶性抗原作出反應(yīng)，T細(xì)胞細(xì)胞裂解和增殖反應(yīng)嚴(yán)重受抑制以及IL-2產(chǎn)量減少。然而，可溶性IL-2能恢復(fù)這些免疫反應(yīng)，這表明自身移植之后，患者體內(nèi)的免疫細(xì)胞能對(duì)外源性的IL-2作出反應(yīng)(47)。BMT之后，外周血NK活性也保持在比對(duì)照值低的水平，通過加入外源性的IL-2可以增強(qiáng)NK活性(49)。這些數(shù)據(jù)表明在干細(xì)胞移植之后，馬上給患者施用IL-2可以在腫瘤負(fù)擔(dān)最小且缺乏IL-2時(shí)也缺乏免疫反應(yīng)性的關(guān)鍵時(shí)刻增強(qiáng)免疫反應(yīng)性。
例如，Caligiuru等已證實(shí)以0.45×106U/M2/天的劑量，經(jīng)24小時(shí)CIV連續(xù)12周施用的IL-2(Hoffman-LaRoche)能擴(kuò)展CD56 bright NK細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)目(50-52)。在門診病人背景中以很小的毒性給未接受移植的患者施用此方案。
動(dòng)物模型證實(shí)當(dāng)與腫瘤-特異性T效應(yīng)細(xì)胞一起施用時(shí)，誘導(dǎo)非-LAK的低劑量IL-2能顯著增強(qiáng)抗-腫瘤活性(53)。另外，Soiffer等(54)給13個(gè)正經(jīng)受復(fù)發(fā)性白血病或淋巴瘤治療的自身BMT或T細(xì)胞耗盡的同種異型BMT受體施用低劑量的IL-2。在實(shí)驗(yàn)室中證實(shí)了增強(qiáng)的免疫反應(yīng)性，循環(huán)的CD56 bright CD16+CD3-NK細(xì)胞增加5至40倍。另外，這一低劑量的IL-2治療方案導(dǎo)致體外殺傷NK靶K562的能力增強(qiáng)。當(dāng)Soiffer等(55)修訂29個(gè)接受低劑量IL-2的同種異型BMT患者的結(jié)果時(shí)，他們發(fā)現(xiàn)相對(duì)于組織學(xué)對(duì)照(30％)而言，這些患者(70％)具有超級(jí)存活能力(p＝0.41)。
Lauria等(56)在ABMT之后中位值為42天時(shí)，以2×106IU/m2qod的劑量2周，然后以3×106IU/m2的劑量每周2次總共1年用IL-2治療11個(gè)高級(jí)NHL患者。表型分析表明在治療6個(gè)月之后，總淋巴細(xì)胞，尤其是CD16和CD56 NK細(xì)胞的比例和絕對(duì)數(shù)目持續(xù)并顯著地增加(p＝0.001)。在開始治療之后接下來的時(shí)間中位值為22個(gè)月(范圍為10至42個(gè)月)時(shí)，無一患者的疾病有所發(fā)展。另外，2個(gè)患者在ABMT之后仍有殘留的疾病，1個(gè)在肝臟，第二個(gè)在淋巴結(jié)，他們?cè)贗L-2療法7和10個(gè)月之后得到完全的反應(yīng)。
Vey等(57)用低劑量IL-2治療25個(gè)難治或復(fù)發(fā)HD(11個(gè)患者)和NHL(14個(gè)患者)患者。48％的患者患有移植物抗性疾病，84％的患者在ABMT之后獲得了CR。在移植后平均54天起開始用IL-2進(jìn)行治療，IL-2治療由長達(dá)5天的第一個(gè)周期接著是隔周2天的4個(gè)周期組成?；颊咂骄邮?60×106IU/m2IL-2。持續(xù)治療5年后，存活和DFS的可能性為72％(HD73％，NHL 70％)和45％(HD 36％和NHL 48％)。
Fred Hutchinson癌癥研究中心(FHCRC)的研究小組最近發(fā)現(xiàn)低劑量的IL-2療法能被門診病人背景較好地耐受，用低劑量IL-2治療的患者的病情減輕時(shí)間長于未用IL-2治療的患者。IL-2治療與某些群體的免疫細(xì)胞數(shù)目增加相關(guān)，所述細(xì)胞包括CD8+CD69+細(xì)胞；CD16+CD8+細(xì)胞；CD16+CD69+細(xì)胞；CD16+CD56+細(xì)胞；CD16+CD122+細(xì)胞；CD16+Dr+細(xì)胞；和CD8+CD56+細(xì)胞。針對(duì)腫瘤靶K562和Daudi的裂解活性的表達(dá)增加，增加倍數(shù)的中位值分別為5.9和6.5。復(fù)發(fā)(如果發(fā)生的話)在移植后中位值為17.8個(gè)月時(shí)發(fā)生，據(jù)報(bào)道，病情減輕的時(shí)間特征性地長于在未接受IL-2治療的移植受體中原先見到的病情減輕時(shí)間。
從收集自用IL-2對(duì)ABMT移植受體進(jìn)行的單個(gè)療法研究的鼓舞人心的數(shù)據(jù)看，假定Rituximab的生物活性是通過ADCC和補(bǔ)體-介導(dǎo)的裂解活性介導(dǎo)的，移植之后聯(lián)合使用IL-2療法和Rituximab似乎是合理的。因此，與FHCRC合作開始進(jìn)行I期試驗(yàn)以評(píng)價(jià)聯(lián)合治療方案的安全性和潛在效力。
也進(jìn)行獨(dú)立的II期研究以評(píng)價(jià)接受低劑量IL-2和Rituximab的患者中HACA形成的效力和影響。該項(xiàng)研究的特殊目的是評(píng)估體內(nèi)暴露于IL-2是否能增強(qiáng)ADCC，ADCC活性是否與臨床反應(yīng)相關(guān)。選擇患者的標(biāo)準(zhǔn)是經(jīng)組織學(xué)證實(shí)為II-IV期低級(jí)，濾泡B-細(xì)胞或套細(xì)胞淋巴瘤。為了臨床研究的目的，通過免疫組織化學(xué)將套細(xì)胞淋巴瘤限定為CD5+，CD23-(如果可以得到的話)和/或bcl-1+。合格的患者是對(duì)首次用標(biāo)準(zhǔn)療法，即化學(xué)療法，放射性療法，ABMT和/或免疫療法治療不起反應(yīng)或經(jīng)過該治療之后舊病復(fù)發(fā)的患者。
Rituximab加GM-CSF以治療復(fù)發(fā)的低級(jí)或?yàn)V泡B-細(xì)胞淋巴瘤開始進(jìn)行兩個(gè)獨(dú)立的II期試驗(yàn)以檢測(cè)Rituximab和GM-CSF聯(lián)合療法的效力。一個(gè)研究包括40個(gè)復(fù)發(fā)型低級(jí)B-細(xì)胞淋巴瘤患者，并包括從第一次施用Rituximab劑量之前1小時(shí)起，每周一次共計(jì)4次(第1，8，15，22天)地以375mg/m2的劑量施用Rituximab，并每周3次共計(jì)8周地以250mcg的劑量皮下施用GM-CSF(Leukine，Immunex)?？墒褂迷擁?xiàng)研究評(píng)價(jià)聯(lián)合治療方案的臨床效力(整個(gè)反應(yīng)率(ORR)，整個(gè)完全反應(yīng)率，至疾病有所發(fā)展的時(shí)間和成功存活的時(shí)間)，鑒定聯(lián)合療法的安全性(不良反應(yīng)的性質(zhì)，量，持續(xù)時(shí)間和可逆性)，并測(cè)定聯(lián)合療法對(duì)相關(guān)淋巴細(xì)胞子集和細(xì)胞因子的影響。第二項(xiàng)研究也計(jì)劃監(jiān)測(cè)免疫學(xué)參數(shù)以評(píng)估殺傷機(jī)理(補(bǔ)體C3和C4，CH50，流式細(xì)胞計(jì)數(shù)CD3，CD4，CD8，CD16，CD19和CD56和ADCC分析)。
Rituximab加γ-干擾素γ-干擾素也可與Rituximab一起用于聯(lián)合療法以治療低級(jí)或高級(jí)淋巴瘤患者。最近發(fā)現(xiàn)γ-干擾素能上調(diào)多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者漿細(xì)胞，患者B-細(xì)胞以及正常供體B-細(xì)胞上的CD20表達(dá)(Treon等，Lugano，1999)。實(shí)際上，Treon及其同事已證實(shí)γ-干擾素能增強(qiáng)這些細(xì)胞與Rituximab的結(jié)合。以依賴于劑量的方式誘導(dǎo)漿細(xì)胞上的CD20表達(dá)，用少至1U/ml的γ-干擾素即可觀察到上調(diào)。以100U/ml的劑量，在48小時(shí)時(shí)即到達(dá)穩(wěn)定期，因此，當(dāng)與Rituximab聯(lián)合使用時(shí)，γ-干擾素也是有用的。
中級(jí)和高級(jí)NHL單一藥劑研究在歐洲和澳大利亞進(jìn)行的研究中，在54個(gè)復(fù)發(fā)或難治的中級(jí)或高級(jí)NHL患者中評(píng)價(jià)其它的劑量方案(34)。每周一次共計(jì)8次地用劑量為375mg/m2的Rituximab灌注，或者第一次用375mg/m2的劑量，接著每周一次共計(jì)7次地用500mg/m2的Rituximab進(jìn)行灌注。ORR為31％；(CR9％，PR 22％)，劑量方案之間沒有顯著的差異。彌散性大-細(xì)胞淋巴瘤患者(N＝30)的ORR為37％，套細(xì)胞淋巴瘤患者(N＝12)的ORR為33％。
聯(lián)合使用Rituximab和CHOP化學(xué)療法在另一項(xiàng)研究中，31個(gè)中級(jí)或高級(jí)NHL患者(19個(gè)女性，12個(gè)男性，平均年齡為49歲)在6個(gè)21-天CHOP周期中的每一個(gè)周期的第1天接受了Rituximab(35)。在30個(gè)可評(píng)價(jià)的患者中，有19個(gè)CR(63％)和10個(gè)PR(33％)，ORR為96％。據(jù)認(rèn)為該方案能被較好地耐受，相對(duì)于僅用Rituximab或CHOP的療法而言，可導(dǎo)致較高的反應(yīng)率。
NCI屬下的癌癥治療和診斷部門與IDEC藥物有限公司合作研究Rituximab對(duì)其它適應(yīng)癥的治療。在患有混合型，彌散性大細(xì)胞和免疫母細(xì)胞大細(xì)胞組織學(xué)NHL的老年(＞60歲)患者中，通過ECOG，CALGB和SWOG進(jìn)行CHOP對(duì)CHOP和Rituximab的II期試驗(yàn)(計(jì)劃N＝630)。此項(xiàng)研究包括第二次對(duì)Rituximab維持療法對(duì)非-維持療法隨機(jī)化。
Dana Farber研究所在40個(gè)以前未經(jīng)治療的套細(xì)胞淋巴瘤患者中進(jìn)行Rituximab和CHOP的III期試驗(yàn)。在第1天施用Rituximab，每過21天在第1-3天施用CHOP共6個(gè)周期。此項(xiàng)研究的accrual已經(jīng)完成。在近期被診斷為濾泡淋巴瘤的患者中，通過SWOG進(jìn)行CHOP接下來為Rituximab的II期試驗(yàn)。分析這兩個(gè)試驗(yàn)的結(jié)果。
通過AIDS惡性腫瘤合作小組在HIV-相關(guān)NHL中進(jìn)行CHOP和Rituximab對(duì)單一CHOP的II期試驗(yàn)；計(jì)劃使用120個(gè)患者。
在重度骨髓抑制療法復(fù)發(fā)之后使用Rituximab在用高劑量的自身PBSC支持體治療之后，Rituximab在復(fù)發(fā)的中級(jí)NHL患者中顯示出有希望的早期結(jié)果。7個(gè)患者中的6個(gè)有反應(yīng)(1CR和5PR)，1個(gè)患者具有穩(wěn)定的疾??；療法能被較好地耐受(36)。
安全性體驗(yàn)在5項(xiàng)單一-藥劑美國研究中，315個(gè)患者的不良反應(yīng)和臨床實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)被匯總以提供Rituximab在低級(jí)或?yàn)V泡NHL患者中的安全性狀況。大多數(shù)不良反應(yīng)與灌注相關(guān)，在第一次灌注之后即以逐漸降低的頻率出現(xiàn)。最常見的與灌注-相關(guān)的不良反應(yīng)是發(fā)燒(49％)，發(fā)冷(32％)，惡心(18％)，疲勞(16％)，頭疼(14％)，血管性水腫(13％)，搔癢(10％)，偶爾還會(huì)有低血壓(10％)和支氣管痙攣(8％)。在治療期間(最后一次劑量后30天)，10％的患者感受到3或4級(jí)不良反應(yīng)，這些反應(yīng)主要與灌注相關(guān)或是血液反應(yīng)。1.3％的患者出現(xiàn)血小板減少癥(＜50,000個(gè)血小板/mm3)，1.9％的患者出現(xiàn)中性白細(xì)胞減少癥(＜1000/mm3)，1.0％的患者出現(xiàn)貧血(＜8gm/dL)。盡管Rituximab在70％-80％的患者中可誘導(dǎo)B-細(xì)胞耗盡，但在極少數(shù)患者中觀察到血清免疫球蛋白的異常降低，而感染的發(fā)生率并未增加。
在10％患者中出現(xiàn)需要終止Rituximab灌注的低血壓，它在1％患者中為3或4級(jí)反應(yīng)。據(jù)報(bào)道在13％患者中出現(xiàn)血管性水腫，在1個(gè)患者中此反應(yīng)被認(rèn)為是嚴(yán)重的。在8％患者中出現(xiàn)支氣管痙攣；2％患者接受了支氣管擴(kuò)張藥的治療。我們注意到有一則閉塞性細(xì)支氣管炎的報(bào)道。第二次和隨后的灌注沒有使大多數(shù)患者再經(jīng)受與灌注相關(guān)的毒性。再次治療后仍有不良反應(yīng)的患者百分比類似于第一個(gè)療程之后報(bào)道的百分比(14)。
在灌注Rituximab的過程中，4個(gè)患者發(fā)生心率失常。這4個(gè)患者中的一個(gè)因?yàn)槭倚膭?dòng)過速和室上心動(dòng)過速而不再繼續(xù)接受治療。其它3個(gè)患者經(jīng)受了三聯(lián)脈(N＝1)和不規(guī)則的脈搏(N＝2)，不需要終止治療。在有心肌梗塞病史的1個(gè)受試者中，在灌注過程中出現(xiàn)心絞痛，并在灌注后4天出現(xiàn)心肌梗塞。
相對(duì)于患有非-大體積腫瘤的患者而言，患有大體積腫瘤的患者中不良反應(yīng)和3和4級(jí)不良反應(yīng)的整個(gè)發(fā)生率較高。在損害＞10cm的患者中，頭暈，中性白細(xì)胞減少癥，血小板減少癥，肌痛，貧血和胸痛的發(fā)生率較高。相對(duì)于損害＜10cm的患者而言，患有大體積腫瘤的患者中3或4級(jí)中性白細(xì)胞減少癥，貧血，低血壓和呼吸困難的發(fā)生率也較高(19)。
由于FDA于1997年批準(zhǔn)Rituximab可用于治療復(fù)發(fā)或難治的低級(jí)或?yàn)V泡NHL，估計(jì)17,000個(gè)患者已接受該治療。1998年5月，有8份售后報(bào)道概括地描述了與使用Rituximab相關(guān)的嚴(yán)重的灌注-相關(guān)不良反應(yīng)，該反應(yīng)可導(dǎo)致致死的后果。在8個(gè)致死病例的7個(gè)中，在第一次灌注Rituximab時(shí)即出現(xiàn)嚴(yán)重的癥狀。8個(gè)病例中有2個(gè)的死亡原因未見報(bào)道或仍不清楚。嚴(yán)重的呼吸道反應(yīng)，包括氧過少，肺浸潤或成人呼吸窘迫綜合征是所報(bào)道的8個(gè)死亡病例中的6個(gè)的死亡原因。1個(gè)患者在治療前的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)為600,000/mm3；另一個(gè)患者的肌酸酐為8；第三個(gè)患者的呼吸速率為40；第四個(gè)患者的各類血細(xì)胞減少。具有高腫瘤負(fù)擔(dān)或高數(shù)目循環(huán)惡性細(xì)胞的患者處于高風(fēng)險(xiǎn)之中，應(yīng)在每次灌注的過程中密切監(jiān)測(cè)這些患者。
最近描述的大多數(shù)不良反應(yīng)是以前在Rituximab臨床研究中觀察到的。一個(gè)值得注意的例外是與腫瘤快速裂解相關(guān)的灌注-相關(guān)綜合征，在具有高數(shù)目循環(huán)腫瘤細(xì)胞的6個(gè)患者中報(bào)道過該綜合征(37，38)。該綜合征的特征在于發(fā)燒，打寒戰(zhàn)，與血氧過少相關(guān)的支氣管痙攣，外周血淋巴細(xì)胞快速減少，腫瘤破壞的實(shí)驗(yàn)室證據(jù)和瞬時(shí)，嚴(yán)重的血小板減少癥。這些患者被診斷為B-前淋巴細(xì)胞白血病(N＝2)，慢性淋巴細(xì)胞白血病(N＝2)，套細(xì)胞淋巴瘤(N＝1)或轉(zhuǎn)化的NHL(N＝1)；所有患者都具有增加的循環(huán)淋巴細(xì)胞，大體積腺病和organomegaly。盡管這6個(gè)患者中的5個(gè)需要住院治療，但被消退的癥狀和隨后的Rituximab治療能被較好地耐受；最后一個(gè)患者拒絕進(jìn)一步的治療，2周后死于進(jìn)行性疾病。
在7個(gè)CLL患者和1個(gè)套細(xì)胞淋巴瘤患者的獨(dú)立報(bào)道中，在第一次灌注Rituximab之后，在淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)＞10×109L的患者中觀察到腫瘤裂解綜合征(39)。
聯(lián)合使用90釔-標(biāo)記的抗-CD20抗體和Rituximab的放射性免疫療法我們?cè)u(píng)價(jià)的另一種NHL治療方法是與Rituximab聯(lián)合的經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體(IDEC-Y2B8)。IDEC-Y2B8(90Y-ibritumomabtiuxetan)是經(jīng)由螯合劑MX-DTPA與90Y綴合的鼠IgG1κ抗-CD20抗體，所述螯合劑與抗體共價(jià)結(jié)合。在IDEC-Y2B8之前施用Rituximab(250mg/m2)以耗盡外周B淋巴細(xì)胞并改善經(jīng)放射性標(biāo)記的抗體的生物分布。
在最近報(bào)道的I/II期研究中(40-42)，用IDEC-Y2B8治療低級(jí)NHL(N＝34)，中級(jí)NHL(N＝14)或套細(xì)胞淋巴瘤(N＝3)患者。平均年齡為60歲，71％為男性，96％為白種人。在51個(gè)復(fù)發(fā)或難治NHL患者中，34個(gè)(67％)對(duì)單劑量0.2，0.3或0.4mCi/kgIDEC-Y2B8有反應(yīng)。低級(jí)或?yàn)V泡NHL患者的ORR為82％(28/34)，中級(jí)淋巴瘤患者的ORR為43％(6/14)。套細(xì)胞疾病患者都無反應(yīng)。
進(jìn)行比較IDEC-Y2B8與Rituximab(375mg/m2，每周一次共4次)治療低級(jí)濾泡或轉(zhuǎn)化NHL患者之效果的III期隨機(jī)化研究。也對(duì)復(fù)發(fā)NHL患者(對(duì)Rituximab不起反應(yīng))進(jìn)行另一個(gè)III期試驗(yàn)。
概述由于缺乏有療效的NHL療法，治療的目的是在有意義的一段時(shí)間內(nèi)控制疾病，并減輕腫瘤-相關(guān)癥狀而不會(huì)有過多的毒性。用Rituximab治療是簡單的，22-天門診病人療法，對(duì)大多數(shù)患者而言副作用較小。在臨床研究中，50％可評(píng)價(jià)的復(fù)發(fā)或化學(xué)療法難以治愈的低級(jí)或?yàn)V泡NHL患者獲得了完全或部分反應(yīng)。在關(guān)鍵性的研究中，這些反應(yīng)無需維持療法即可持續(xù)一段時(shí)間；反應(yīng)者的TTP中位值為13.2個(gè)月，DR中位值為11.6個(gè)月。
Rituximab被批準(zhǔn)為復(fù)發(fā)低級(jí)或?yàn)V泡B-細(xì)胞NHL患者的安全而有效的治療方法。它具有顯著的臨床活性，新的作用機(jī)制，與其它療法相比，具有有利的反應(yīng)率和反應(yīng)持續(xù)時(shí)間。正在進(jìn)行的研究的完成將進(jìn)一步證實(shí)其它Rituximab方案的作用和Rituximab在治療其它CD20+B-淋巴細(xì)胞惡性腫瘤時(shí)的作用。
參考文獻(xiàn)1.Press O，Appelbaum F，Ledbetter J，Martin P，Zarling J，Kidd P，ThomasE.人B細(xì)胞淋巴瘤的單克隆抗體IFS(抗-CD20)血清療法，血液1987；69584-591。
2.Diliman R.抗體作為細(xì)胞毒素的療法，臨床腫瘤學(xué)雜志1994；121497-1515.
3.Grossbard M，Press 0，Appelbaum F，Bernstein I，Nadler L.基于單克隆抗體的白血病和淋巴瘤療法，血液1992；80863-878.
4.Reff M，Camer K，Chambers K，Chinn P，Leonard J，Raab R，NewmanR，Hanna N，Anderson D.嵌合小鼠-人CD20單克隆抗體引起的體內(nèi)B細(xì)胞損耗，血液1994；83435445.Demidem A，Lam T，Alas S，Hariharan K，Hanna N，Bonavida B.嵌合的抗-CD2O(IDEC-C2B8)單克隆抗體使B細(xì)胞淋巴瘤系對(duì)細(xì)胞毒藥物的細(xì)胞殺傷作用敏感，癌癥生物療法&放射藥物1997；12177-186.
6.Maloney D，Liles T，Czerwinski D，Waldichuk C，Rosenberg J，Grill-Lopez A；Levy R.對(duì)復(fù)發(fā)性B-細(xì)胞淋巴瘤患者使用逐步增加的單劑量嵌合抗CD20單克隆抗體(IDEC-C2B8)灌輸?shù)腎期臨床實(shí)驗(yàn)，血液1994；842457-2466.
7.Maloney D，Grillo-Lopez A，White C，Bodkin D，Schilder R，Neidhart J，Janakiraman N，F(xiàn)oon K，Liles T-M，Dallaire B，Wey K，Royston I，DavisT，Levy R.，復(fù)法性低級(jí)非Hodgkin氏淋巴瘤患者的IDEC-C2B8(Rituximab)抗-CD20單克隆抗體療法，血液1997；902188-2195.
8.McLaughlin P，Grillo-Lopez A，Link B，Levy R，Czuczman M，Williams M，Heyman M，Bence-BrucklerI，White C，Cabanillas F，JainV，Ho A，Lister J，Wey K，Shen D，Dallaire B.復(fù)發(fā)惰性淋巴瘤的Rituximab嵌合抗-CD20單克隆抗體療法半數(shù)患者對(duì)4劑量治療方案有反應(yīng)，臨床腫瘤學(xué)雜志1998；162825-2833.
9.McLaughlin P，Grillo-Lopez A，Maloney D，Link B，Levy R，CzuczmanM，Cabanillas F，Dallaire B，White C.對(duì)用rituximab治療的復(fù)發(fā)性或頑固性，或低級(jí)或?yàn)V泡性NHL患者的長期跟蹤功效控制，血液1998；92414a-415a.
10.Janakiraman N，McLaughlin P，White C，Maloney D，Shen D，Grillo-Lopez A.RituximabNHL中效應(yīng)細(xì)胞與臨床活性間的相關(guān)性，血液1998；92(10增刊1)337a..
11.Berinstein N，Grillo-Lopez A，White C，Bence-Bruckler I，Maloney D，Czuczman M，Green D，Rosenberg J，McLaughlin P，Shen D.治療復(fù)發(fā)低級(jí)或?yàn)V泡性非Hodgkin氏淋巴瘤中，血清Rituximab(IDEC-C2B8)濃度與抗腫瘤反應(yīng)間的關(guān)系，腫瘤學(xué)年刊1998；9995-1001.
12.Tobinai K，Kobayashi Y，Narabayashi M，Ogura M，Kagami Y，Morishima Y，Ohtsu T，Igarashi T，Sasaki Y，Kinoshita T，Murate T.嵌合抗CD-20單克隆抗體(IDEC-C2B8，rituximab)在復(fù)發(fā)性B細(xì)胞淋巴瘤中的可行性和藥物動(dòng)力學(xué)研究，腫瘤學(xué)年刊1998；9527-534.
13.Piro L，White C，Grillo-Lopez A，Janakiraman N，Saven A，Beck T，Varns C，Shuey S，Czuczman M，Lynch J，Kolitz J，Jain V.復(fù)發(fā)性或頑固性或低級(jí)或?yàn)V泡性非Hodgkin氏淋巴瘤的長期Rituxan(抗-CD20單克隆抗體)療法，1999；待審14.Davis T，White C，Grillo-Lopez A，Velasquez W，Link B，Maloney D，Dillman R，Williams M，Mohrbacher A，Weaver R，Dowden S，Levy R.Rituximabbulky disease的NHL患者的II期(PII)實(shí)驗(yàn)，血液1998；92(10增刊1)414a.
15.Byrd J，White C，Thomas S，Veldsquez W，Rosenberg J，Grillo-LopezA.Rituximab療法對(duì)經(jīng)過治療的瓦爾登斯特倫巨球蛋白血癥活性的初步證據(jù)，血液1998；92(10增刊1)106(a).
16.O′Brien S，F(xiàn)reireich E，Andreeff M，Lemer S，Keating M.Rituxan在慢性淋巴白血病中的I/IlI期研究(CLL)，血液1998；92105a，#431.
17.Venugopal P，Sivararnan S，Huang X，Chopra H，O′Brein T，Jajeh A，Preisler H.通過體外細(xì)胞因子處理來上調(diào)慢性淋巴白血病(CLL)細(xì)胞中的CD20表達(dá)，血液1998；10247a.
18.Flinn I，O′Donnell P，Noga S，Vogelsang G，Grever M，Goodrich A，Abrams R，Marcellus D，Miller C，Jones R，Ambinder R.NHL的體內(nèi)清除和用Rituximab PBSC移植體進(jìn)行的佐劑免疫療法，血液1998；92648a，#2673.
19.Davis T，Levy R，White C，Czuczman M，McLaughlin P，Link B，Yarns C，Weaver R，Grillo-Lopez A，Rituximab對(duì)低級(jí)或?yàn)V泡(LG/F)性NHL患者的II期(PII)二次治療(ReRx)研究，血液1998；92(10增刊1)414a.
20.Davis T，Czerwinski D，Levy R.利用抗CD20抗體治療B細(xì)胞淋巴瘤可以造成CD20抗原表達(dá)消失，臨床癌癥研究1999；5待出版21.Czuczman M，Grillo-Lopez A，White C，Saleh M，Gordon L，LoBuglioF，Jonas C，Klippenstein D，Dallaire B，Yarns C.聯(lián)合使用嵌合抗CD20單克隆抗體和CHOP化療法來治療低級(jí)B細(xì)胞淋巴瘤患者，臨床腫瘤學(xué)雜志1999；17268-276.
22.White C，Czuczman M，Grillo-Lopez A，White C，Saleh M，Gordon L，LoBuglio A，Jonas C，Alkuzweny B，Dowen S.對(duì)低級(jí)淋巴瘤(LGIFNHL)患者的Rituximab/CHOP化學(xué)免疫療法三年(中值)跟蹤后的無進(jìn)行幸存者(PFS)，ASCO學(xué)報(bào)1999，待出版.
23.Wadler S，Schwartz E.干擾素對(duì)細(xì)胞毒性藥物的生物調(diào)整原理，腫瘤學(xué)研討1992；1945-48.
24.Nakamura K，Kubo A，Hosokawa S，Nagaike K，Hashimoto S，α-干擾素對(duì)于抗-α-胎蛋白單克隆抗體尋靶肝細(xì)胞瘤的影響，腫瘤學(xué)1993；503540.
25.Greiner J，Guadagni F，Noguchi P，Pestka S，Colcher D，F(xiàn)isher P，SchlomJ.重組干擾素增強(qiáng)單克隆抗體在體內(nèi)對(duì)癌癥損害的尋靶能力，科學(xué)1987；235895-898.
26.Murray J，Zukiwski A，Mujoo K，Rosenblum M.重組α干擾素增強(qiáng)抗黑素瘤單克隆抗體在體內(nèi)的腫瘤尋靶能力，生物應(yīng)答調(diào)節(jié)物雜志(Journal of Biological Response Modifiers)1990；9；556-563.
27.Yokota S，Hara H，Luo Y，Seon B.α干擾素和正定霉素對(duì)抗人T-白血病免疫毒素的體內(nèi)抗腫瘤活性的協(xié)同效應(yīng)，癌癥研艽1990；5032-37.
28.Grillo-Lopez A，Dallaire B，Shen C，Yarns C，McClure A，Caralli V.復(fù)發(fā)性低級(jí)或?yàn)V泡性淋巴瘤患者的備選治療方案IDEC-C2B8的作用，抗體免疫佐劑和放射藥物1995；860.
29.Davis T，Maloney D，White C，Grillo-Lopez A，Williams M，Weiner G，Sklenar T，Levy R.Rituximab和α干擾素對(duì)低級(jí)或?yàn)V泡(LGIF)性非Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)的聯(lián)合免疫療法間歇分析，美國臨床腫瘤學(xué)會(huì)學(xué)報(bào)1998；17lla.
30.Smalley R，Andersen J，Hawkins M，Bhide V，O′Connell M，Oken M，Borden B.干擾素α與細(xì)胞毒性化療聯(lián)合用于非Hodgkin氏淋巴瘤患者，新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志 1992；3271336-1341.
31.Hagenbeek A，Carde P，Meerwaldt JH，Somers R，Thomas J，De BockR，Raemaekers JM，van Hoof A，De WoIf-Peeters C，.van Glabbeke M.人重組干擾素α-2a對(duì)I期和IV期低級(jí)惡性非Hodgkin氏淋巴瘤患者的持續(xù)緩解，歐盟癌癥淋巴瘤研究和治療合作小組，臨床腫瘤學(xué)雜志 1998；1641-47.
32.Solal-Ce′ligny P，Lepage E，Brousse N，Tendler C，Brice P，Haioun C，Gabarre J，Pignon B，Tertian G，Bouabdallah R，Rossi J-F，Doyen C，Coiffier B.，針對(duì)晚期濾泡性淋巴瘤的有或沒有干擾素α-2b的含Doxorubicin療法對(duì)d′etude des lymphomes folliculaires 86實(shí)驗(yàn)小組的生存率和毒性的最后分析.臨床腫瘤學(xué)雜志1998；162332-2338.
33.van der Kolk L，Grillo-Lopez A，Gerritsen W，Jonkhoff A，Baars J，van Oers M.嵌合抗-CD20單克隆抗體(rituxirnab)加上G-CSF在復(fù)發(fā)性B細(xì)胞淋巴瘤I/II期臨床實(shí)驗(yàn)，血液1998；92241b，#4037.
34.Coiffier B，Haioun C，Ketterer N，Engert A，Tilly H，Ma D，Johnson P，Lister A，F(xiàn)euring-Buske M，Radford JA，Capdeville R，Diehl V，Reyes F.Rituximab(抗-CD20單克隆抗體)治療復(fù)發(fā)性或頑固性進(jìn)行性淋巴瘤多通道H期研究，血液1998；921927-1932.
35.Link B，Grossbard M，F(xiàn)isher R，Czuczman M，Gilman P，Lowe A，VoseJ.對(duì)未經(jīng)治療或高級(jí)NHL患者聯(lián)合使用rituximab與CHOP化療的安全性和有效性的II期初步研究，美國臨床腫瘤學(xué)會(huì)學(xué)報(bào)1998；173a.
36.Tsai，D，Moore H，Porter D，Vaughn D，Luger S，Loh R，Schuster S，Stadtmauer E.高劑量療法和自體外周干細(xì)胞移植(PSCT)后，進(jìn)行性中級(jí)非Hodgkin氏淋巴瘤對(duì)Rituximab有高反應(yīng)率，血液1998；92415a，#1713.
37.Byrd J，Waselenko J，Maneatis T，Murphy T，Weickum R，Ward F，White C.對(duì)有循環(huán)血液腫瘤細(xì)胞的血癌患者的Rituximab療法與增強(qiáng)的灌輸相關(guān)性副作用和快速腫瘤裂解之間的聯(lián)系，血液1998；92(10Suppl 1)106a.
38.Jensen M，Winkler U，Manzke O，Diehl V，Engert A.用抗-CD20單克隆抗體(IDEC-C2B8，rituximab)處理過的B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血病和淋巴細(xì)胞增多患者中的快速腫瘤裂解，血液學(xué)年刊1998；7789-91.
39.Winkler U，Jensen M，Manzke O，Tesch H，Bohlen H，Diehi V，EngertA.用單克隆抗體Rituximab處理B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)和淋巴細(xì)胞增多患者的嚴(yán)重副作用，血液1998；92285b，#4228.
40.Witzig T，White C，Wiseman G，Gordon L，Emmanouilides C，Raubitschek A，Janakiraman N，Gutheil J，Spies S，Silverman D，ParkerE，Grillo-Lopez A.用IDEC-Y2B8放射免疫療法治療復(fù)發(fā)性或頑固性CD2O陽性B細(xì)胞非Hodgkin氏淋巴瘤的I/II期實(shí)驗(yàn)，臨床腫瘤學(xué)雜志1999；已提交.
41.Wiseman G，White C，Witzig T，Gordon L，Emmanouilides C，Raubitschek A，Janakiraman N，Spies S，Silverman D，Gutheil J，Schilder R，Parker E，Rosenberg J，Grillo-Lopez A.IDEC-Y2B8放射免疫療法基線骨髓累及和血小板計(jì)數(shù)是優(yōu)于放射性測(cè)定的血液毒性預(yù)報(bào)，血液1998；92417a.
42.Witzig T，White C，Wiseman G，Gordon L，Emmanouilides C，Raubitschek A，Janakirahian N，Spies S，Silverman D，Gutheil J，Schilder R，Ding E，Shen D，Grillo-Lopez A.IDEC-Y2B8放射免疫療法脾腫大患者的反應(yīng)，血液1998；92417(a).
43.Witherspoon RP，Lum LG，Storb R.骨髓移植后的免疫重構(gòu)，血液學(xué)研討212，1984.
44.Anderson，KC等，抗B1清除的自體骨髓移植后的血液移植和免疫重構(gòu)，血液69597，1987.
45.Lum LG.人骨髓移植后的免疫重構(gòu)的動(dòng)力學(xué)，血液69369，1987.
46.Azogui O.，Gluckman B.，F(xiàn)radelizi，D.，人同種骨髓移植后IL-2產(chǎn)生的抑制，免疫學(xué)雜志1311205，198347.Welte，K.等，骨髓移植后的患者白介素-2產(chǎn)生缺陷以及通過高度純化的白介素體外恢復(fù)缺陷的T淋巴細(xì)胞增殖，血液64380，1984.
48.Cayeau，S.等，骨髓移植后T細(xì)胞的個(gè)體發(fā)生不能合成白介素(IL-2)，并且即使有外源IL-2的情況下，也缺少CDE4+和CD8+細(xì)胞介導(dǎo)的增殖，血液742270，1989.
49.Bosley，A.等，白介素-2作為抗最小殘留疾病的鞏固免疫療法，NouvRev Fr Hematol3213，1990.
50.Caligiuri，M.A等，在晚期癌癥中長期持續(xù)灌輸?shù)蛣┝恐亟M白介素-2免疫調(diào)整延長，沒有明顯毒性，臨床腫瘤學(xué)雜志92110，1991.
51.Caligiuri，M.A.等，長期灌注低劑量重組IL-2后，NK細(xì)胞的選擇性免疫調(diào)整，臨床研究雜志91123，1993.
52.Caligiuri，M.A.，低劑量重組白介素-2療法基本原理和臨床應(yīng)用前景，SEM in Oncol 203，1993.
53.Klarnet，J.P.等，抗原驅(qū)動(dòng)的T細(xì)胞克隆可以在體內(nèi)增殖，消除擴(kuò)散性白血病并提供特異性免疫記憶，免疫學(xué)雜志.1384012，1987.
54.Soiffer，RJ.等，自體和T細(xì)胞耗竭性同種骨髓移植后長期灌注低劑量重組白介素-2的臨床和免疫效應(yīng)，血液79517，1992.
55.Soiffer，RJ.等，T細(xì)胞耗竭性同種骨髓移植后低劑量白介素-2對(duì)疾病復(fù)發(fā)的影響，血液84964，1994.
56.Lauria，F(xiàn).等，非Hodgkin氏患者在自體骨髓移植后低劑量皮下給予rIL-2帶來的免疫和臨床改善，BMT 1879，1996.
57.Vey，N.等，其后給予重組白介素-2的自體骨髓移植在惡性淋巴瘤中的初步研究，白血病&淋巴瘤21107，1996.
58.Venugopal，P.等，通過細(xì)胞因子上調(diào)CD20在CLL細(xì)胞中的表達(dá)，提交給ASH會(huì)議，1998年12月。
權(quán)利要求
1.治療復(fù)發(fā)性B-細(xì)胞淋巴瘤的方法，所述方法包括給復(fù)發(fā)性B-細(xì)胞淋巴瘤患者施用治療有效量的抗-CD20抗體。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述患者以前曾接受過抗-CD20抗體治療。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述患者以前曾接受過骨髓或干細(xì)胞移植。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述患者以前曾接受過放射性治療。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述患者以前曾接受過針對(duì)所述B-細(xì)胞淋巴瘤的化學(xué)療法。
6.權(quán)利要求5的方法，其中所述化學(xué)療法選自CHOP，ICE，米托蒽醌，阿糖胞苷，DVP，ATRA，去甲氧柔紅霉素，hoelzer化學(xué)療法方案，La La化學(xué)療法方案，ABVD，CEOP，2-CdA，隨后進(jìn)行或不進(jìn)行G-CSF治療的FLAG&IDA，VAD，M&P，C-Weekly，ABCM，MOPP和DHAP。
7.治療患有B-細(xì)胞淋巴瘤的受試者的方法，所述受試者在施用嵌合抗-CD20抗體之后未表現(xiàn)出可見的腫瘤減輕或消退，所述方法包括給所述患者施用經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體。
8.權(quán)利要求7的方法，其中在施用所述嵌合抗-CD20抗體之后約1周至約2年內(nèi)施用所述經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體。
9.權(quán)利要求8的方法，其中在施用所述嵌合抗-CD20抗體之后約1周至約9個(gè)月內(nèi)施用所述經(jīng)放射性標(biāo)記的抗-CD20抗體。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗-CD20抗體是嵌合抗-CD20抗體。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述嵌合抗體是C2B8(Rituximab)。
12.治療B-細(xì)胞淋巴瘤的方法，所述方法包括施用協(xié)同作用的治療組合，所述組合含有至少一種抗-CD20抗體和至少一種細(xì)胞因子，其中治療效果優(yōu)于任一種單獨(dú)施用的療法相加的效果。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述至少一種細(xì)胞因子選自α干擾素，γ干擾素，IL-2，GM-CSF和G-CSF。
14.權(quán)利要求13的方法，其中所述抗-CD20抗體和所述α干擾素，γ干擾素，IL-2，GM-CSF和G-CSF可以任一次序相繼施用，或者聯(lián)合使用。
15.權(quán)利要求12的方法，其中所述抗-CD20抗體是嵌合抗體。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗體是C2B8(Rituximab)。
17.治療B-細(xì)胞淋巴瘤的方法，所述方法包括在化學(xué)治療方案之前，之中或之后給患者施用治療有效量的抗-CD20抗體。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述化學(xué)治療方案至少選自CHOP，ICE，米托蒽醌，阿糖胞苷，DVP，ATRA，去甲氧柔紅霉素，hoelzer化學(xué)療法方案，La La化學(xué)療法方案，ABVD，CEOP，2-CdA，隨后進(jìn)行或不進(jìn)行G-CSF治療的FLAG&IDA，VAD，M&P，C-Weekly，ABCM，MOPP和DHAP。
19.權(quán)利要求17的方法，其中所述抗-CD20抗體是嵌合抗體。
20.權(quán)利要求19的方法，其中所述嵌合抗體是C2B8(Rituximab)。
21.治療B-細(xì)胞淋巴瘤的方法，所述方法包括在骨髓或干細(xì)胞移植之前，之中或之后給患者施用治療有效量的抗-CD20抗體。
22.權(quán)利要求21的方法，其中所述抗-CD20抗體是嵌合抗-CD20抗體。
23.權(quán)利要求22的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗體是C2B8(Rituximab)。
24.在重度骨髓抑制療法之前或之后減少骨髓或干細(xì)胞中殘留的CD20+腫瘤細(xì)胞的方法，所述方法包括給患者施用抗-CD20抗體。
25.權(quán)利要求24的方法，其中所述抗-CD20抗體是嵌合抗-CD20抗體。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述嵌合抗-CD20抗體是C2B8(Rituximab)。
27.權(quán)利要求1的方法，其中所述B-細(xì)胞淋巴瘤選自低級(jí)/濾泡非-Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)，小淋巴細(xì)胞(SL)NHL，中級(jí)/濾泡NHL，中級(jí)彌散性NHL，慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)，高級(jí)免疫母細(xì)胞NHL，高級(jí)淋巴母細(xì)胞NHL，高級(jí)小的非-裂解細(xì)胞NHL，腫瘤體積較大的(bulkydisease)NHL，套細(xì)胞淋巴瘤，AIDS-相關(guān)的淋巴瘤和Waldenstrom氏巨球蛋白血癥。
28.權(quán)利要求12的方法，其中所述B-細(xì)胞淋巴瘤選自低級(jí)/濾泡非-Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)，小淋巴細(xì)胞(SL)NHL，中級(jí)/濾泡NHL，中級(jí)彌散性NHL，慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)，高級(jí)免疫母細(xì)胞NHL，高級(jí)淋巴母細(xì)胞NHL，高級(jí)小的非-裂解細(xì)胞NHL，腫瘤體積較大的(bulkydisease)NHL，套細(xì)胞淋巴瘤，AIDS-相關(guān)的淋巴瘤和Waldenstrom氏巨球蛋白血癥。
29.權(quán)利要求17的方法，其中所述B-細(xì)胞淋巴瘤選自低級(jí)/濾泡非-Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)，小淋巴細(xì)胞(SL)NHL，中級(jí)/濾泡NHL，中級(jí)彌散性NHL，慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)，高級(jí)免疫母細(xì)胞NHL，高級(jí)淋巴母細(xì)胞NHL，高級(jí)小的非-裂解細(xì)胞NHL，腫瘤體積較大的(bulkydisease)NHL，套細(xì)胞淋巴瘤，AIDS-相關(guān)的淋巴瘤和Waldenstrom氏巨球蛋白血癥。
30.權(quán)利要求21的方法，其中所述B-細(xì)胞淋巴瘤選自低級(jí)/濾泡非-Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)，小淋巴細(xì)胞(SL)NHL，中級(jí)/濾泡NHL，中級(jí)彌散性NHL，慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)，高級(jí)免疫母細(xì)胞NHL，高級(jí)淋巴母細(xì)胞NHL，高級(jí)小的非-裂解細(xì)胞NHL，腫瘤體積較大的(bulkydisease)NHL，套細(xì)胞淋巴瘤，AIDS-相關(guān)的淋巴瘤和Waldenstrom氏巨球蛋白血癥。
31.權(quán)利要求24的方法，其中所述B-細(xì)胞淋巴瘤選自低級(jí)/濾泡非-Hodgkin氏淋巴瘤(NHL)，小淋巴細(xì)胞(SL)NHL，中級(jí)/濾泡NHL，中級(jí)彌散性NHL，慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)，高級(jí)免疫母細(xì)胞NHL，高級(jí)淋巴母細(xì)胞NHL，高級(jí)小的非-裂解細(xì)胞NHL，腫瘤體積較大的(bulkydisease)NHL，套細(xì)胞淋巴瘤，AIDS-相關(guān)的淋巴瘤和Waldenstrom氏巨球蛋白血癥。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療B－細(xì)胞淋巴瘤的聯(lián)合治療方案，它包括給患有低級(jí)、中級(jí)－或高級(jí)非霍奇金淋巴瘤的患者服用抗－CD20抗體。
文檔編號(hào)C02F1/00GK1689646SQ200510062688
公開日2005年11月2日 申請(qǐng)日期1999年8月11日 優(yōu)先權(quán)日1998年8月11日
發(fā)明者A·戈里羅-洛佩茲 申請(qǐng)人:拜奧根Idec公司