專利名稱：多窗口、多檢測指標檢測卡的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及生物醫(yī)藥技術，特別是醫(yī)學檢驗技術，具體是涉及一種檢測卡 與檢測試紙。
背景技術：
免疫層析法(Immunochromatography)是九十年代興起的一種基于膠體金技術的
快速診斷技術，其原理是將特異的抗體先固定于硝酸纖維膜的某一區(qū)帶，當該干燥的硝 酸纖維素膜一端浸入樣品后，由于毛細管作用，樣品將沿著該膜向前移動，當移動至固 定有抗體的區(qū)域時，樣品中相應的抗原即與該抗體發(fā)生特異性結合，若用膠體金可使該 區(qū)域顯示一定的顏色，從而實現特異性的免疫診斷。除膠體金外，采用彩色乳膠顆?；?者磁顆粒作為標記物進行免疫層析法檢測試劑的開發(fā)也較為成熟，同樣應用于抗原抗體 反應，具有簡便，快速，特異性強，靈敏度高，費用低的優(yōu)點。免疫層析法技術在國內外無論人醫(yī)應用方面，還是獸醫(yī)應用方面，小分子物質 檢測方面，都已經研制出了多種膠體金免疫層析快速檢測試紙。目前，已有的免疫層析法技術檢測試紙具有以下缺點1. 一種項目進行一種指標的檢測；2.指標顯示顏色和形式單一；3.不同檢測指標在同一窗口觀察。
發(fā)明內容本實用新型的目的在于提供一種多窗口、多檢測指標檢測卡，解決現有免疫 層析法技術檢測試紙所具有的上述缺點。為實現上述目的，本實用新型采用的技術方案包括一種多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于包括檢測試紙與卡套，其中該檢測試紙具有一個PVC背襯，在該PVC背襯上粘附有首尾相接的樣品墊、結 合墊、檢測膜結構和吸水墊，該檢測膜結構具有至少兩個包被膜，每兩個該包被膜之間 通過硝酸纖維素膜相互連接，該至少兩個包被膜與該結合墊以及該吸水墊之間也通過硝 酸纖維素膜相連接；該卡套具有一個供該檢測試紙裝套于內的容置空間，該卡套對應該檢測試紙的 樣品墊開設有一個加樣孔，該卡套還設有與該檢測膜結構位置相對應的至少一個觀察窗。在一個較佳的技術方案中該至少兩個包被膜以及該硝酸纖維素膜為一體結 構。在一個較佳的技術方案中該包被膜是通過在該硝酸纖維素膜上包被抗原原料 所形成。在一個較佳的技術方案中該至少兩個包被膜的形狀互不相同。[0016]在一個較佳的技術方案中該包被膜的形狀為條形、菱形、圓形或者十字形。[0017]在一個較佳的技術方案中該結合墊上包被有標記物。[0018]在一個較佳的技術方案中該標記物是膠體金顆粒、彩色乳膠顆?；蛘叽蓬w 粒。[0019]在一個較佳的技術方案中該觀察窗是長方形、圓形、三角形、四邊形、五邊 形、六邊形或者橢圓形。[0020]在一個較佳的技術方案中該觀察窗的數目與該包被膜的數量相等，各觀察窗 的位置分別與各包被膜的位置和大小相對應。[0021]與現有技術相比較，采用上述技術方案的本實用新型具有的優(yōu)點在于本實 用新型選用多種原料作為檢測線，相應選擇多種原料獲得標記物，在樣品墊上加入樣品 后，樣品經過結合墊并且與相應的結合物形成免疫復合物，該復合物涌動至硝酸纖維素 膜上后，可能在不同原料包被的條帶與包被原料發(fā)生反應，呈現出不同條帶，并且通過 多窗口的塑料卡套進行結果觀察。通過對于不同窗口中顯色條帶的判斷，進行樣品結果 的判斷。


[0022]圖1是本實用新型檢測試紙的側面剖視圖；[0023]圖2是本實用新型檢測試紙的正面示意圖；[0024]圖3是本實用新型的塑料卡套正面結構示意圖；[0025]圖4是本實用新型的塑料卡套側面結構示意圖。[0026]附圖標記說明1-樣品墊；2-結合墊；3檢測膜結構；31-硝酸纖維素膜； 32-包被膜；321-TP包被膜；322-HBsAg單克隆抗體膜；323-HCV包被膜；4-吸水 墊；7-PVC背襯；8-卡套；81-觀察窗；82-加樣孔；83-容置空間。
具體實施方式
[0027]本實用新型提供的多窗口、多檢測指標檢測卡，包括檢測試紙與塑料卡套，以 下結合附圖來描述該檢測試紙的制造過程與具體結構。[0028]首先，以一種能夠同時檢測梅毒(TP)抗體、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和 丙型肝炎病毒(HCV)抗體的檢測卡的制備方法為例，介紹本實用新型所述的檢測卡及其 檢測試紙與檢測膜的結構如下[0029]步驟1、將檢測用多種抗原原料分區(qū)域地包被在硝酸纖維素膜上，得到檢測膜結 構3，本實施例中所使用的抗原原料包括TP抗原、抗HBsAg的單克隆抗體以及HCV抗原。[0030]1)用0.01MPH7.4PBS緩沖液將基因工程表達的TP抗原稀釋到65μ g/ml，用 ^odot點膜儀將其包被于硝酸纖維素膜31上，包被量為0.6yl/cm，包被形狀為條形，從 而形成條狀的TP包被膜321 ；[0031]2)用0.01MPH7.4PBS緩沖液將抗HBsAg的單克隆抗體稀釋到200 μ g/ml，用^odot點膜儀將其包被于硝酸纖維素膜31上，包被量為0.6yl/cm，包被形狀為橢圓形， 從而形成橢圓形的HBsAg單克隆抗體膜322 ；[0032]3)用0.01MPH7.4PBS緩沖液將基因工程表達的HCV抗原稀釋到100 μ g/ml，用^odot點膜儀將其包被于硝酸纖維素膜31上，包被量為0.6yl/cm，包被形狀為十字形， 從而形成十字形的HCV包被膜323 ；[0033]4) 37 °C烘干，封裝備用。[0034]從圖1、圖2中可以看到，所述的TP包被膜321、HBsAg單克隆抗體膜322、 HCV包被膜323沿該硝酸纖維素膜31長度方向依序排列，相互之間的間距以Icm為宜， 中間通過該硝酸纖維素膜31連接為一體結構。[0035]步驟2、將多種原料與乳膠顆粒進行標記。[0036]1)紅色乳膠液制備取紅色乳膠0.10ml，加滅菌蒸餾水0.40ml，再加 0.02MpH8.2硼酸緩沖液2ml，混合后即為25倍稀釋的乳膠液；[0037]2) TP抗原乳膠標記每ImL乳膠液加入150 μ g采用0.01MPH7.4PBS緩沖液稀釋的基因工程表達TP抗原，邊加邊搖，當出現肉眼可見的顆粒后，仍繼續(xù)加入，直至顆 粒消失，成為均勻的乳膠懸液為止；[0038]3)綠色乳膠液制備取綠色乳膠0.10ml，加滅菌蒸餾水0.40ml，再加 0.02MpH8.2硼酸緩沖液2ml，混合后即為25倍稀釋的乳膠液；[0039]4) HBsAg單克隆抗體乳膠標記每ImL乳膠液加入200 μ g采用0.01MPH7.4PBS緩沖液稀釋的抗HBsAg單克隆抗體，邊加邊搖，當出現肉眼可見的顆粒后，仍繼續(xù)加 入，直至顆粒消失，成為均勻的乳膠懸液為止；[0040]5)黑色乳膠液制備取黑色乳膠0.10ml，加滅菌蒸餾水0.40ml，再加 0.02MpH8.2硼酸緩沖液2ml，混合后即為25倍稀釋的乳膠液；[0041]6) HCV抗原乳膠標記每mL乳膠液加入65 μ g采用0.01MPH7.4PBS緩沖液稀釋的基因工程表達HCV抗原，邊加邊搖，當出現肉眼可見的顆粒后，仍繼續(xù)加入，直至 顆粒消失，成為均勻的乳膠懸液為止。[0042]步驟3、結合墊的包被。[0043]將步驟2中的三種乳膠標記后的乳膠懸液按照1 1 1的體積比例進行混合 后，加入與乳膠懸液混合液同樣體積的磷酸緩沖液(配方及制備20gBSA，25g蔗糖， 3Gpvpk-30, 0.2gNaN3NaC18g, KC10.2g, Na2HP04 · 12H202.9g, KH2P040.2g,用蒸 餾水定容至1000ml)進行稀釋獲得乳膠標記物稀釋液，均勻滴加于結合墊2 (材質包括但 不限于玻璃纖維素膜，聚酯膜或者無紡布)上，每100平方厘米結合墊2滴加20ml乳膠 標記物稀釋液，干燥后，在該結合墊2上包被的乳膠標記物就是三種不同顏色的乳膠顆 粒，然后將該結合墊2封裝，置于4°C備用。[0044]步驟4、樣品墊的處理。[0045]將樣品墊1(材質包括但不限于玻璃纖維素膜，聚酯膜或者無紡布)浸泡 于0.01MPH7.4磷酸鹽緩沖液(配方及制備20gBSA，25g蔗糖，3Gpvpk_30， 0.2gNaN3NaC18g, KC10.2g，Na2HP04 · 12H202.9g, KH2P040.2g,用蒸餾水定容至 1000ml)中30分鐘后，于37°C烘干，封裝，置于4°C備用。[0046]步驟5、檢測試紙的組裝。[0047]將上述經過處理后的樣品墊1、結合墊2、檢測膜結構3和吸水墊4 (材質為吸水 性材料，包括但不限于吸水紙、濾油紙燈)首尾相接地粘附在PVC背襯7上(如圖1所示)，然后將其切成3mm寬的小條，封裝。4-8°C保存。[0048]步驟6、將得到的檢測試紙裝入如圖3所示的具有多個觀察窗的塑料卡中，獲得 所述的檢測卡。[0049]可知，本實用新型提供的多窗口、多檢測指標檢測卡，包括檢測試紙與塑料卡 套8，其中[0050]該檢測試紙具有一個PVC背襯7，在該PVC背襯7上粘附有首尾相接的樣品墊 1、結合墊2、檢測膜結構3和吸水墊4，該檢測膜結構3具有至少兩個包被膜32，每兩個 該包被膜32之間通過硝酸纖維素膜31相互連接，該至少兩個包被膜32與該結合墊2以 及該吸水墊4之間也通過硝酸纖維素膜31相連接；該結合墊2上包被有標記物，該標記 物是彩色乳膠顆粒，實際上也可以是膠體金顆粒或者磁顆粒；[0051 ] 該卡套8具有一個供該檢測試紙裝套于內的容置空間83，該卡套8對應該檢測試 紙的樣品墊1開設有一個加樣孔82，該卡套8還設有與該包被膜32的數量相等的觀察窗 81，各觀察窗81的位置分別與各包被膜32的位置和大小相對應，而該觀察窗的形狀可以 是長方形、圓形、三角形、四邊形、五邊形、六邊形或者橢圓形。[0052]在介紹上述檢測卡的制造過程后，再介紹上述檢測卡的使用方法如下[0053]選取10份血清樣本，所有樣本均以梅毒抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)、乙型 肝炎病毒表面抗原檢測試劑盒(酶聯免疫法)和丙型肝炎病毒抗體檢測試劑盒(酶聯免疫 法)進行檢測后獲得血清背景。該10份血清采用實施例1中制備的檢測試紙檢測結果如 表1所示，顯示了該檢測試紙具有良好的檢測效果。[0054]表1.10份樣本檢測試劑條檢測結果[0055]血清編號檢測試紙檢測結果樣本背景顯色檢測線結果判斷TP抗體HBsAgHCV抗體1紅色/條狀TP抗體陽性，HBsAg、 HCV抗體陰性+--2綠色/橢圓形HBsAg陽性，TP抗 體、HCV抗體陰性-+-3黑色/十 字形HCV抗體陽性，TP抗 體、HBsAg陰生--+4紅色/條狀、TP抗體、HBsAg陽++-[0056]
權利要求1.一種多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于包括檢測試紙與卡套，其中 該檢測試紙具有一個PVC背襯，在該PVC背襯上粘附有首尾相接的樣品墊、結合墊、檢測膜結構和吸水墊，該檢測膜結構具有至少兩個包被膜，每兩個該包被膜之間通 過硝酸纖維素膜相互連接，該至少兩個包被膜與該結合墊以及該吸水墊之間也通過硝酸 纖維素膜相連接；該卡套具有一個供該檢測試紙裝套于內的容置空間，該卡套對應該檢測試紙的樣品 墊開設有一個加樣孔，該卡套還設有與該檢測膜結構位置相對應的至少一個觀察窗。
2.根據權利要求1所述的多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于該至少兩個包 被膜以及該硝酸纖維素膜為一體結構。
3.根據權利要求2所述的多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于該包被膜是通 過在該硝酸纖維素膜上包被抗原原料所形成。
4.根據權利要求1或3所述的多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于該至少兩個 包被膜的形狀互不相同。
5.根據權利要求4所述的多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于該包被膜的形 狀為條形、菱形、圓形或者十字形。
6.根據權利要求1所述的多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于該結合墊上包 被有標記物。
7.根據權利要求6所述的多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于該標記物是膠 體金顆粒、彩色乳膠顆?；蛘叽蓬w粒。
8.根據權利要求1所述的多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于該觀察窗是長 方形、圓形、三角形、四邊形、五邊形、六邊形或者橢圓形。
9.根據權利要求1所述的多窗口、多檢測指標檢測卡，其特征在于該觀察窗的數 目與該包被膜的數量相等，各觀察窗的位置分別與各包被膜的位置相對應。
專利摘要本實用新型公開了一種多窗口、多檢測指標檢測卡，包括檢測試紙和塑料卡套，該檢測試紙是在PVC背襯上按順序依次粘附有樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊，而該塑料卡套包括加樣孔以及多個用來觀察檢測的窗口。本實用新型可以同時檢測多個指標物質，該硝酸纖維素膜上包被了多種原料，可以同時進行多個檢定指標的檢定；結合墊上可以包括多種標記物，可以使不同檢測線顯示不同的顏色；產品具有多個觀察窗，可以同時觀察多個檢測指標。本實用新型的檢測卡有操作簡便、檢測快速、同時進行多個檢測指標、不同指標可以清晰分辨等顯著優(yōu)點。
文檔編號G01N33/558GK201804007SQ20102029138
公開日2011年4月20日 申請日期2010年8月13日 優(yōu)先權日2010年8月13日
發(fā)明者李益民, 羅海峰 申請人:北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司