一種檢測扎那米韋及含扎那米韋制劑中雜質(zhì)的hplc測定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種檢測扎那米韋及含扎那米韋制劑中雜質(zhì)的HPLC測定方法，選用親水作用色譜法（hydrophilic?interaction?liquid?chromatography,HILIC）來分離扎那米韋及其有關(guān)物質(zhì)，具體是以色譜柱為HILIC柱，流動相選自極性有機溶劑-緩沖鹽溶液、極性有機溶劑-弱酸溶液或者極性有機溶劑水溶液，檢測波長200nm~240nm等作為檢查扎那米韋及含扎那米韋的相關(guān)制劑中雜質(zhì)的測定方法。本發(fā)明的測定方法可快速準確的檢測出扎那米韋的工藝雜質(zhì)和降解產(chǎn)物，具有操作簡捷、靈敏度高、重復性好、結(jié)果可靠的特點。
【專利說明】一種檢測扎那米韋及含扎那米韋制劑中雜質(zhì)的HPLC測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測扎那米韋及含扎那米韋制劑中雜質(zhì)的HPLC測定方法，屬于藥物雜質(zhì)分析檢測領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]扎那米韋由葛蘭素史克公司研發(fā)，于1999年8月由美國FDA批準上市，主要用于治療A型和B型流感，與羅氏公司研發(fā)的磷酸奧司他韋膠囊(商品名:達菲)為目前國際上公認的流感治療藥物。扎那米韋是自1993年金剛乙胺上市后第一個獲得批準的流感治療藥，也是第一個神經(jīng)氨酸酶抑制劑類流感病毒治療藥。其化學名為:5-乙酰氨基_4-[(氨基亞氨基甲基)_氨基]_2，6-氫-3，4，5-三去氧-D-丙三醇基-D-半乳糖-2-烯醇酸。分子式C12H2tlN4O7，相對分子量332.3。本品為白色或類白色粉末，20°C是水中的溶解度約為18mg/ml ο
[0003]現(xiàn)有的扎那米韋雜質(zhì)分析技術(shù)中色譜柱的選擇主要有C18色譜柱和氨基柱兩類，但都存在明顯缺陷。反相體系以C18色譜柱為代表對扎那米韋均不保留，盡管通過選用離子對試劑，能夠適當增加扎那米韋的保留，但分析時間過長，不適合作為雜質(zhì)質(zhì)量控制的分析方法。另一方面由于扎那米韋顯弱酸性，易在氨基柱中鍵合吸附，造成色譜分離不穩(wěn)定，因此氨基色譜柱不適用于定量定性用。
[0004]HILIC柱是一種新型的色譜柱，是正相色譜的變體，其保留強度與溶質(zhì)極性成正比，而與流動相成反比。HILIC色譜使用極性固定相，與高有機相比例的流動相。極性固定相從吸附水或其他極性溶劑使固定相表面建立一層水層或極性層，而流動相的主體則是非質(zhì)子化溶劑。HILIC色譜是多重保留機制同時作用的過程，而首先發(fā)生的是液液分配。在分析過程中化合物在流動相與固定相表面的水層或極性層之間進行液液分配，極性化合物傾向于分配進入高極性的水層或極性層獲得保留，之后還能與固定相表面發(fā)生吸附作用和/或離子交換作用進一步增強保留，因此HILIC色譜能夠使極性分析物得到好的保留與分離，并能夠提供相對于反相色譜近乎正交的選擇性。
[0005]HILIC色譜柱適用于在反相色譜柱上不保留的化合物的分離，尤其是對強極性化合物的保留能力增強。除了對極性化合物表現(xiàn)出優(yōu)異保留能力外，HILIC色譜柱能夠提高LC/ES1-MS (液質(zhì)聯(lián)用(電噴霧離子源))響應(yīng)信號，樣品溶液直接兼容SPE (固相萃取)洗脫齊U，并且與傳統(tǒng)反相HPLC具有互補的選擇性。
[0006]HILIC硅膠柱還具有壽命長，與各種LC (高效液相)檢測器兼容，色譜柱間重現(xiàn)性好的特點。
[0007]因此，鑒于扎那米韋及含扎那米韋制劑中雜質(zhì)的現(xiàn)有檢測技術(shù)的缺陷，對應(yīng)用HILIC色譜柱檢查扎那米韋及含扎那米韋的相關(guān)制劑中雜質(zhì)的測定方法進行研究是十分必要的。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的在于通過對固定相、流動相、檢測波長等方面的改進，提供一種檢測扎那米韋及含扎那米韋制劑中雜質(zhì)的HPLC測定方法。該發(fā)明選用HILIC柱進行檢測，不但扎那米韋能夠得到適當保留，而且流動相配制簡單，重現(xiàn)性好，分析時間合適，與MS (質(zhì)譜)匹配度好，靈敏度高，分析方法穩(wěn)定，柱壽命長等優(yōu)勢。
[0009]本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下:
[0010]本發(fā)明提供了一種檢測扎那米韋及含扎那米韋制劑中雜質(zhì)的HPLC測定方法，其特征在于:固定相選用HILIC色譜柱，分離機制為親水作用色譜法(hydrophilicinteraction liquid chromatography, HILIC),流動相選自極性有機溶劑_緩沖鹽溶液或極性有機溶劑-弱酸溶液或極性有機溶劑水溶液，檢測波長范圍為200nnT240nm。其中HILIC色譜柱為極性固定相，所述極性固定相選自未衍生化硅膠或修飾氨基、氰基和羥基等極性基團的硅膠柱等。
[0011]進一步，流動相為乙腈-緩沖鹽溶液或乙腈-弱酸溶液或乙腈-水溶液，優(yōu)選乙腈-緩沖鹽溶液。再進一步，所述的流動相中乙腈與緩沖鹽溶液的比例為50-90:50-10，優(yōu)選60-70:40-30，所述的流動相中乙腈與弱酸溶液的比例為50-90:5(TlO，優(yōu)選60-70:40~30，所述的流動相中乙腈與水的比例為50~90:50~10，優(yōu)選60~70:40~30。
[0012]再進一步，所述的緩沖鹽溶液選自甲酸銨緩沖鹽體系、乙酸銨緩沖鹽體系、磷酸鹽緩沖鹽體系或者它們之間任意配比形成的混合溶液，優(yōu)選甲酸銨緩沖鹽體系或乙酸銨緩沖鹽體系。其中所述甲酸銨緩沖鹽體系選自甲酸銨溶液、甲酸銨加甲酸溶液、甲酸銨加乙酸溶液；所述乙酸銨緩沖鹽溶 液選自乙酸銨溶液、乙酸銨加甲酸溶液、乙酸銨加乙酸溶液。
[0013]再進一步，所述緩沖鹽溶液優(yōu)選甲酸銨溶液。
[0014]再進一步，所述緩沖鹽溶液的濃度范圍為lmlT200mM，優(yōu)選lmlTlOmM。
[0015]再進一步，所述的緩沖鹽溶液體系的pH范圍為5.0-8.0，優(yōu)選6.0^7.0。
[0016]再進一步，所述的弱酸溶液選自甲酸水溶液、乙酸水溶液。
[0017]再進一步，所述的弱酸溶液的濃度范圍為lmlT200mM，優(yōu)選lmlTlOmM。
[0018]再進一步，所述的弱酸溶液的pH范圍為5.0-8.0，優(yōu)選6.0-7.0。
[0019]再進一步，所述的檢測波長的范圍為200nnT240nm，其中在210nm和234nm雙波長下，扎那米韋及其有關(guān)物質(zhì)均能被檢測到。
[0020]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，主要優(yōu)勢在于:
[0021]HILIC色譜柱對極性化合物具有優(yōu)異的保留能力，能夠提高LC/ES1-MS (液質(zhì)聯(lián)用(電噴霧離子源))響應(yīng)信號，樣品溶液直接兼容SPE (固相萃取)洗脫劑，并且與傳統(tǒng)反相HPLC具有互補的選擇性。該發(fā)明選用HILIC柱進行檢測，不但扎那米韋能夠得到適當保留，而且流動相配制簡單，重現(xiàn)性好，分析時間合適，與MS (質(zhì)譜)匹配度好，靈敏度高，分析方法穩(wěn)定，柱壽命長等優(yōu)勢。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0022]圖1為210nm波長項下扎那米韋的紫外吸收圖譜。
[0023]圖2為234nm波長項下扎那米韋的紫外吸收圖譜。
[0024]圖3為210nm波長項下檢測到的酸破壞樣品中的雜質(zhì)圖譜。[0025]圖4為234nm波長項下檢測到的酸破壞樣品中的雜質(zhì)圖譜。
[0026]圖5為210nm波長項下檢測到的堿破壞樣品中的雜質(zhì)圖譜。
[0027]圖6為234nm波長項下檢測到的堿破壞樣品中的雜質(zhì)圖譜。
[0028]圖7為210nm波長項下檢測到的氧化破壞樣品中的雜質(zhì)圖譜。
[0029]圖8為234nm波長項下檢測到的氧化破壞樣品中的雜質(zhì)圖譜。
[0030]圖9為210nm波長項下檢測到的光破壞樣品中的雜質(zhì)圖譜。
[0031]圖10為234nm波長項下檢測到的光破壞樣品中的雜質(zhì)圖譜。
[0032]圖11為已有檢測方法在210nm波長下各添加雜質(zhì)的雜質(zhì)圖譜。
[0033]圖12為已有檢測方法在234nm波長項下各添加雜質(zhì)的雜質(zhì)圖譜。
具體實施方案
[0034]以下是本發(fā)明的具體實施例，用以對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步的說明，而非對本發(fā)明的限制。
[0035]以下實施例中檢測所用的扎那米韋原料藥及吸入粉霧劑均由南京先聲東元制藥有限公司提供，批號為96110201。
[0036]實施例1:1.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑適量，精密稱定，加適量的水超聲溶解后，加流動相稀釋制成每Iml中含扎那米韋20mg的溶液，作為供試品溶液。
[0037]1.2儀器與色譜條件:
[0038]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0039]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0040]流動相:乙腈:1OmM甲酸銨(ρΗ6.5) =65:35 ；
[0041]流速:0.5ml/min ;
[0042]柱溫:25°C；
[0043]檢測波長:2IOnm和 234nm ；
[0044]1.3測定:取5μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜(附圖1、圖2)。
[0045]實施例2:
[0046]2.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg,加流動相配成0.5mg/ml的供試液,力口0.lmol/L的鹽酸溶液2ml，放置，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml中和，作為酸破環(huán)樣品溶液。
[0047]2.2儀器與色譜條件:
[0048]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0049]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0050]流動相:乙腈:1OmM甲酸銨(ρΗ6.5) =65:35 ；
[0051]流速:0.5ml/min ;
[0052]柱溫:25°C；
[0053]檢測波長:2IOnm和 234nm ；
[0054]2.3測定:取5μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜(附圖3、圖4)。
[0055]實施例3:
[0056]3.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg,加流動相配成0.5mg/ml的供試液,加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml，放置，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml中和，作為堿破環(huán)樣品溶液。
[0057]3.2儀器與色譜條件:
[0058]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0059]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0060]流動相:乙腈:1OmM甲酸銨(ρΗ6.5) =65:35 ；
[0061]流速:0.5ml/min ;
[0062]柱溫:25°C;
[0063]檢測波長:2IOnm和 234nm ；
[0064]3.3測定:取5μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜(附圖5、圖6)。
[0065]實施例4:
[0066]4.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg,用流動相配成0.5mg/ml的供試液,加過氧化氫一滴，室溫放置，作為氧化破壞樣品溶液。
[0067]4.2儀器與色譜條件:
[0068]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0069]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0070]流動相:乙腈:1OmM甲酸銨(pH6.5) =65:35 ；
[0071]流速:0.5ml/min ;
[0072]柱溫:25°C;
[0073]檢測波長:2IOnm和 234nm ；
[0074]4.3測定:取5μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜(附圖7、圖8)。
[0075]實施例5:
[0076]5.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg用流動相配成0.5mg/ml的供試液于45001x的強光中放置數(shù)天，作為光破壞樣品溶液。
[0077]5.2儀器與色譜條件:
[0078]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0079]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0080]流動相:乙腈:1OmM甲酸銨(ρΗ6.5) =65:35 ；
[0081]流速:0.5ml/min ;
[0082]柱溫:25°C；
[0083]檢測波長:2IOnm和 234nm ；
[0084]5.3測定:取5μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜(附圖9、圖10)。
[0085]實施例6:
[0086]6.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg,加流動相配成0.5mg/ml的供試液,力口
0.lmol/L的鹽酸溶液2ml，放置，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml中和，作為酸破環(huán)樣品；取吸入粉霧劑約10mg，加流動相配成0.5mg/ml的供試液，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml，放置，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml中和，作為堿破壞樣品；取吸入粉霧劑約10mg，用流動相配成0.5mg/ml的供試液，加過氧化氫一滴，室溫放置，作為氧化破壞樣品。
[0087]6.2儀器與色譜條件:[0088]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0089]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 5 μ m)；
[0090]流動相:乙腈:水=70:30 ；
[0091]流速:lml/min;
[0092]柱溫:30°C；
[0093]檢測波長:200nm和 240nm ；
[0094]6.3測定:取10 μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜，主峰及各雜質(zhì)在色譜柱上可分離開。
[0095]實施例7:
[0096]7.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg,加流動相配成0.5mg/ml的供試液,加
0.lmol/L的鹽酸溶液2ml，放置，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml中和，作為酸破環(huán)樣品；取吸入粉霧劑約10mg，加流動相配成0.5mg/ml的供試液，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml，放置，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml中和，作為堿破壞樣品；取吸入粉霧劑約10mg，用流動相配成0.5mg/ml的供試液，加過氧化氫一滴，室溫放置，作為氧化破壞樣品。
[0097]7.2儀器與色譜條件:
[0098]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0099]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0100]流動相:乙腈:水=70:30 ；
[0101]流速:lml/min;
[0102]柱溫:25°C;
[0103]檢測波長:200nm和 234nm ；
[0104]7.3測定:取20 μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜，主峰及各雜質(zhì)在色譜柱上可分離開。
[0105]實施例8:
[0106]8.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg,加流動相配成0.5mg/ml的供試液,加
0.lmol/L的鹽酸溶液2ml，放置，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml中和，作為酸破環(huán)樣品；取吸入粉霧劑約10mg，加流動相配成0.5mg/ml的供試液，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml，放置，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml中和，作為堿破壞樣品；取吸入粉霧劑約10mg，用流動相配成0.5mg/ml的供試液，加過氧化氫一滴，室溫放置，作為氧化破壞樣品。
[0107]8.2儀器與色譜條件:
[0108]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0109]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0110]流動相:乙腈:IOmM甲酸銨=65:35 ;
[0111]流速:lml/min;
[0112]柱溫:25°C;
[0113]檢測波長:200nm和 234nm ；
[0114]8.3測定:取20 μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜，主峰及各雜質(zhì)在色譜柱上可分離開。
[0115]實施例9:[0116]9.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg,加流動相配成0.5mg/ml的供試液,加
0.lmol/L的鹽酸溶液2ml，放置，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml中和，作為酸破環(huán)樣品；取吸入粉霧劑約10mg，加流動相配成0.5mg/ml的供試液，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml，放置，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml中和，作為堿破壞樣品；取吸入粉霧劑約10mg，用流動相配成0.5mg/ml的供試液，加過氧化氫一滴，室溫放置，作為氧化破壞樣品。
[0117]9.2儀器與色譜條件:
[0118]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0119]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0120]流動相:乙腈:IOOmM甲酸銨=60:40 ；
[0121]流速:lml/min;
[0122]柱溫:25°C;
[0123]檢測波長:200nm和 234nm ；
[0124]9.3測定:取20 μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜，主峰及各雜質(zhì)在色譜柱上可分離開。
[0125]實施例10:
[0126]10.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg,加流動相配成0.5mg/ml的供試液，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml，放置，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml中和，作為酸破環(huán)樣品；取吸入粉霧劑約10mg，加流動相配成0.5mg/ml的供試液，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml，放置，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml中和，作為堿破壞樣品；取吸入粉霧劑約10mg，用流動相配成0.5mg/ml的供試液，加過氧化氫一滴，室溫放置，作為氧化破壞樣品。
[0127]10.2儀器與色譜條件:
[0128]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0129]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0130]流動相:乙腈:IOmM乙酸銨=70:30 ；
[0131]流速:2ml/min；
[0132]柱溫:20°C;
[0133]檢測波長:2IOnm和 234nm ；
[0134]10.3測定:取20 μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜，主峰及各雜質(zhì)在色譜柱上分離度良好，峰形好。
[0135]實施例11:
[0136]11.1樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約IOmg,加流動相配成0.5mg/ml的供試液，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml，放置，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml中和，作為酸破環(huán)樣品；取吸入粉霧劑約10mg，加流動相配成0.5mg/ml的供試液，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml，放置，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml中和，作為堿破壞樣品；取吸入粉霧劑約10mg，用流動相配成0.5mg/ml的供試液，加過氧化氫一滴，室溫放置，作為氧化破壞樣品；
[0137]11.2儀器與色譜條件:
[0138]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0139]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0140]流動相:乙腈:IOmM甲酸銨=70:30 ；[0141]流速:0.8ml/min ；
[0142]柱溫:25°C;
[0143]檢測波長:220nm和 234nm ；
[0144]11.3測定:取20 μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜，主峰及各雜質(zhì)在色譜柱上分離度良好。
[0145]實施例12:
[0146]12.1樣品溶液配制:樣品溶液配制:取吸入粉霧劑約10mg，加流動相配成0.5mg/ml的供試液，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml，放置，加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml中和，作為酸破環(huán)樣品；取吸入粉霧劑約IOmg,加流動相配成0.5mg/ml的供試液,加0.lmol/L的氫氧化鈉溶液2ml，放置，加0.lmol/L的鹽酸溶液2ml中和，作為堿破壞樣品；取吸入粉霧劑約IOmg,用流動相配成0.5mg/ml的供試液,加過氧化氫一滴,室溫放置,作為氧化破壞樣品;
[0147]12.2儀器與色譜條件:
[0148]儀器:Agilent 1200高效液相色譜儀；
[0149]色譜柱:WatersHILIC Silica(4.6*150mm, 3 μ m)；
[0150]流動相:乙腈:5mM甲酸銨=65:35 ；
[0151]流速:2ml/min；
[0152]柱溫:30°C;
[0153]檢測波長:2IOnm和 234nm ；
[0154]12.3測定:取20 μ I注入高效液相色譜儀，記錄圖譜，主峰及各雜質(zhì)在色譜柱上可分離開，出峰時間較實施例4略有提前。
[0155]實施例2?實施例12檢測結(jié)果比較，見表I。
[0156]表I實施例實施例12檢測結(jié)果比較
[0157]
【權(quán)利要求】
1.一種檢測扎那米韋及含扎那米韋制劑中雜質(zhì)的HPLC測定方法，其特征在于，色譜柱為HILIC分析柱，流動相選自極性有機溶劑-緩沖鹽溶液、極性有機溶劑-弱酸溶液或者極性有機溶劑水溶液，檢測波長范圍為200nnT240nm，色譜柱溫度范圍為15~40°C，流動相流速選擇范圍為0.3~2ml/min。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于=HILIC分析柱為極性固定相，所述極性固定相選自未衍生化硅膠或修飾極性基團的硅膠柱。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:流動相為乙腈-緩沖鹽溶液，其中所述的緩沖鹽溶液濃度為f200mM，優(yōu)選濃度為f IOmM,緩沖鹽溶液的pH范圍為5.0-8.0，優(yōu)選pH范圍為6.0-7.0，流動相中乙腈與緩沖鹽溶液的體積比為50-90:50-10，優(yōu)選體積比為60~70:40~30。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于:所述的緩沖鹽溶液選自甲酸銨緩沖鹽體系、乙酸銨緩沖鹽體系、磷酸鹽緩沖鹽體系或者它們之間任意配比形成的混合溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于:所述的甲酸銨緩沖鹽體系選自甲酸銨溶液、甲酸銨加甲酸溶液、或者甲酸銨加乙酸溶液；所述的乙酸銨緩沖鹽溶液選自乙酸銨溶液、乙酸銨加甲酸溶液、或者乙酸銨加乙酸溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:流動相為乙腈-弱酸溶液，其中所述弱酸溶液濃度為f200mM ，優(yōu)選濃度為flOmM，弱酸溶液的pH范圍為5.0-8.0，優(yōu)選pH范圍為6.0-7.0，流動相中乙腈與弱酸溶液的體積比為50~90:50~10，優(yōu)選體積比為60~70:40~30。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于:所述弱酸溶液選自甲酸水溶液或乙酸水溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:流動相為乙腈-水溶液，所述乙腈與水的體積比為50~90:50~10，優(yōu)選體積比為60~70:40~30。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于色譜柱溫度范圍為2(T30°C，流動相流速選擇范圍為0.3^1.0ml/min。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項所述的方法，其特征在于:含扎那米韋的相關(guān)制劑選自片劑、膠囊劑、顆粒劑、注射劑、控釋、緩釋制劑或扎那米韋的復方制劑。
【文檔編號】G01N30/02GK104007185SQ201310058607
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2013年2月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年2月25日
【發(fā)明者】馮慧敏, 張斐, 許向陽, 檀愛民 申請人:江蘇先聲藥物研究有限公司, 江蘇先聲藥業(yè)有限公司