專利名稱：一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中抗生素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種食品安全分析方法，具體是指采用肉眼和紫外可見光譜儀的聯(lián)合使用，用于檢測牛奶中殘留的抗生素含量。本方法屬于食品分析領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
抗生素是一種在臨床上最常用的藥物之一，對動物和人體內(nèi)感染性疾病的防治，具有神奇的功效。但是抗生素的過度使用會給人類的生活帶嚴(yán)重的危害，比如青霉素引起的過敏反應(yīng)以及細(xì)菌的耐藥性等?？股貫E用已經(jīng)成為一個全球性的公共健康問題。為了確保消費者的安全，一些國際組織和食品藥品監(jiān)管部門明確規(guī)范了抗生素的用量，并且對一些抗生素的最大殘留量做了做了規(guī)范，如在牛奶中，卡那霉素的量不能超過150ygkg-1 (ng mL—1),鏈霉素的量不能超過200 μ g kg_\新霉素的量不能超過500 μ g kg'目前抗生素在牛奶中的用量受到了嚴(yán)格的限制，尋找一種能夠同時檢測牛奶中殘留的多種抗生素的方法是保障食品安全的迫切需要。目前，檢測抗生素的方法包括傳統(tǒng)的抑制微生物生長的方法，液相色譜法，氣相色譜法，毛細(xì)管電泳以及近年來發(fā)展起來的一些新方法，如免疫分析方法，生物傳感器等，但是這些方法或多或少存在一些不足，比如，色譜法中需要昂貴的儀器，操作過程繁瑣，需要的時間長等，使其在實際應(yīng)用中受到限制，因此，很有必要建立一種更加簡便，快速且能夠?qū)崿F(xiàn)現(xiàn)場檢測食品中殘留抗生素的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于將納米技術(shù)引入抗生素的檢測應(yīng)用中，提供一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中多種抗生素(如單硫酸卡那霉素，硫酸新霉素，硫酸鏈霉素和硫酸伯來霉素)的方法，該方法具有簡單，快速，靈敏的優(yōu)點，可用于現(xiàn)場食品檢測。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所提出的抗生素快速檢測方法，采用肉眼和紫外可見光譜分析相結(jié)合的方法，從而實現(xiàn)抗生素的現(xiàn)場檢測。其特征在于:1.以鄰苯二酚紫為還原劑來制備納米金，在納米金的制備過程中因抗生素的加入而影響納米金的合成及其存在狀態(tài)，從而引起納米金的顏色發(fā)生改變，進(jìn)而實現(xiàn)抗生素的可視化檢測。2.在制備納米金時，所采用的溶劑為0.01M, pH = 7.0的磷酸緩沖溶液。在磷酸鹽緩沖液中依次加入氯化金溶液，十烷基三甲基溴化銨，鄰苯二酚紫，搖勻后，觀察溶液顏色的變化，并測定其紫外可見光譜圖，但不局限于上述試劑的加入順序。3.鄰苯二酚紫，氯金酸和十烷基三甲基溴化銨的濃度分別為8.0X10_5M，
1.0 X10-4M 和 1.0Χ10-6Μ。4.在沒有加入抗生素時，合成的納米金處于分散狀態(tài)，溶液呈現(xiàn)酒紅色，但當(dāng)體系中引入抗生素后，納米金的合成受到影響，導(dǎo)致納米金的存在狀態(tài)及顏色發(fā)生改變。5.這種方法涉及紫外可見光譜最大吸收峰的紅移，即分散的納米金在530nm處有最大吸收，而聚集的納米金在670nm處有最大吸收。
6.在處理紫外可見光譜數(shù)據(jù)時，在一定的抗生素濃度范圍內(nèi)，納米金在670nm處的吸收值與抗生素含量的對數(shù)呈線性關(guān)系。本發(fā)明的有益效果是:I)可以在室溫下一步合成納米金，并且在納米金合成的過程對抗生素進(jìn)行可視化檢測。2)操作簡單，具有較好的選擇性和較高的靈敏度。3)可以應(yīng)用到牛奶中抗生素的檢測。


圖1是檢測四種抗生素的機理示意圖。圖2是鄰苯二酚紫與卡那霉素等抗生素的氫鍵作用示意圖。圖3是卡那霉素等抗生素的定量檢測。
具體實施例方式
1.利用磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉配置緩沖溶液，并用二次水配置鄰苯二酚紫、氯化金、抗生素等溶液；在緩沖溶液中依次加入氯化金溶液，十烷基三甲基溴化銨(DTAB)，鄰苯二酚紫(PCV)，搖勻后，觀察溶液顏色的變化，并測定其紫外可見光譜圖；2.在緩沖溶液中依次加入氯化金溶液，十烷基三甲基溴化銨(DTAB)，不同濃度的抗生素水溶液，或是添加有已知濃度抗生素的牛奶樣品溶液，鄰苯二酚紫，搖勻后，觀察溶液顏色的變化，并測定其紫外可見光譜圖；3.所采用的溶劑為0.01M, pH = 7.0的磷酸緩沖液，鄰苯二酚紫，氯金酸和DTAB的濃度分別為 8 X IO^5M, 1.0X KT4M 和 1.0XlO-6M04.在沒有加入抗生素時，合成的納米金處于分散狀態(tài)，溶液呈現(xiàn)酒紅色(圖1a)，但當(dāng)體系中引入抗生素后，由于抗生素與鄰苯二酚紫的氫鍵作用(圖2)，導(dǎo)致納米金的合成受到影響。表現(xiàn)在納米金的狀態(tài)從分散狀態(tài)變成聚集狀態(tài)，同時溶液的顏色由酒紅色變?yōu)樗{(lán)色(圖1b)再到渾濁的顏色(圖1c)，相應(yīng)的紫外可見吸收光譜也發(fā)生變化，通過測定納米金在670nm的吸收值，就可以對抗生素進(jìn)行定量分析(圖3)。上面結(jié)合附圖對本發(fā)明優(yōu)選的具體實施方式
和實施例作了詳細(xì)的說明，但是本發(fā)明并不限于上述實施方式和實施例，在本領(lǐng)域技術(shù)人員所具備的知識范圍內(nèi)，還可以在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下作出各種變化。
權(quán)利要求
1.一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中抗生素的方法，其特征在于:以鄰苯二酚紫為還原劑來制備納米金，在納米金的制備過程中因抗生素的加入而影響納米金的合成及其存在狀態(tài)，從而引起納米金的顏色發(fā)生改變，進(jìn)而實現(xiàn)抗生素的可視化檢測。
2.如權(quán)利要求1所述的一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中抗生素的方法，其特征在于:在制備納米金時，所采用的溶劑為0.0lM, pH = 7.0的磷酸緩沖溶液。
3.如權(quán)利要求1所述的一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中抗生素的方法，其特征在于:在磷酸鹽緩沖液中依次加入氯化金溶液，十烷基三甲基溴化銨，鄰苯二酚紫，搖勻后，觀察溶液顏色的變化，并測定其紫外可見光譜圖，但不局限于上述試劑的加入順序。
4.如權(quán)利要求1所述的一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中抗生素的方法，其特征在于:鄰苯二酚紫，氯金酸和十烷基三甲基溴化銨的濃度分別為8.0\10_%，1.0\10_4皿和 1.0XlO-6M0
5.如權(quán)利要求1所述的一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中抗生素的方法，其特征在于:在沒有加入抗生素時，合成的納米金處于分散狀態(tài)，溶液呈現(xiàn)酒紅色，但當(dāng)體系中引入抗生素后，納米金的合成受到影響，導(dǎo)致納米金的存在狀態(tài)及顏色發(fā)生改變。
6.如權(quán)利要求1所述的一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中抗生素的方法，其特征在于:這種方法涉及紫外可見光譜最大吸收峰的紅移，即分散的納米金在530nm處有最大吸收，聚集的納米金在670nm處有最大吸收。
7.如權(quán)利要求1所述的一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中抗生素的方法，其特征在于:在處理紫外可見光譜數(shù)據(jù)時，將納米金在670nm處的吸收值與抗生素的含量建立定量關(guān)系。
全文摘要
本發(fā)明提出了一種基于納米金的可視化快速檢測牛奶中抗生素的方法。本發(fā)明的主要特征在于利用鄰苯二酚紫還原氯金酸來制備納米金。在納米金合成的過程中因抗生素(單硫酸卡那霉素，硫酸新霉素，硫酸鏈霉素和硫酸伯來霉素)的加入影響了納米金的合成，使其顏色發(fā)生變化，利用肉眼和紫外可見吸收光譜儀可以對抗生素進(jìn)行定量檢測。該方法操作簡單，快速，具有較高的靈敏度和較好的選擇性，可以應(yīng)用到牛奶中抗生素的檢測。
文檔編號G01N21/78GK103149207SQ20131006903
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月5日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月5日
發(fā)明者趙紅, 張曉芳, 張陽, 何裕建, 李向軍, 袁倬斌 申請人:中國科學(xué)院大學(xué)