一種色譜法測(cè)定樣品中揮發(fā)性麻醉藥濃度的方法
【專(zhuān)利摘要】本方法公開(kāi)了一種自動(dòng)頂空氣相色譜法測(cè)定揮發(fā)性麻醉藥濃度的方法。該方法適用于揮發(fā)性麻醉藥，例如甲氧氟烷、安氟烷、異氟烷、七氟烷和地氟烷在樣品中的濃度測(cè)定。樣品可以為含有待測(cè)物的溶液，也可以為含有待測(cè)物的離體生物學(xué)樣品，如血液、尿液、組織液中。該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，適用于實(shí)驗(yàn)室樣品測(cè)定分析，也適用臨床監(jiān)測(cè)大量樣品結(jié)果測(cè)定。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種色譜法測(cè)定樣品中揮發(fā)性麻醉藥濃度的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種用自動(dòng)頂空氣相色譜法測(cè)定樣品中揮發(fā)性麻醉藥濃度的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]揮發(fā)性麻醉藥與一般靜脈麻醉藥最后目的完全一樣，但在吸入途徑給藥時(shí)，首先必須在麻醉環(huán)路系統(tǒng)內(nèi)達(dá)到一定濃度以后，經(jīng)過(guò)肺以濃度分壓差吸收入血中，再經(jīng)循環(huán)系統(tǒng)分布至周?chē)M織，到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮其麻醉作用，所以說(shuō)測(cè)定血液中揮發(fā)性麻醉藥如甲氧氟烷、安氟烷、異氟烷、七氟烷和地氟烷等的血藥濃度是非常關(guān)鍵的指標(biāo)。
[0003]劉進(jìn)、劉明政等(二次平衡法測(cè)定吸入麻醉藥液/氣分配系數(shù).《中華麻醉藥學(xué)雜志》，1996，16 (12):604?607.)公開(kāi)了一種用注射器頂空二次平衡法測(cè)定吸入麻醉藥濃度的方法。該方法首先需配制及校正麻醉藥標(biāo)準(zhǔn)氣如異氟烷標(biāo)準(zhǔn)氣，過(guò)程包括1、用注射器抽取血液5?7ml ;2、在37°C恒溫水浴條件下振搖水浴I小時(shí)使異氟烷在血、氣兩相中達(dá)到第一次平衡(共約2.5小時(shí))；3、在37°C恒溫水浴條件下振搖水浴使異氟烷在血、氣兩相中達(dá)到第二次平衡(I?1.5小時(shí))；4、通過(guò)氣相色譜儀測(cè)定兩次平衡的氣相中的異氟烷濃度，記錄兩次平衡前后注射器內(nèi)氣相和液相的體積；5、計(jì)算血中異氟烷濃度。
[0004]該法測(cè)量準(zhǔn)確，同時(shí)可計(jì)算出麻醉藥的液/氣分配系數(shù)，但樣品前處理過(guò)程耗時(shí)較長(zhǎng)，兩次平衡時(shí)間累計(jì)3.5小時(shí)，完全測(cè)定一個(gè)樣品需時(shí)4小時(shí)，測(cè)定效率低，且在實(shí)際運(yùn)用過(guò)程中，血制樣品無(wú)法在注射器內(nèi)長(zhǎng)久儲(chǔ)存，血液變性后會(huì)對(duì)測(cè)定的結(jié)果有影響，故該方法不適合進(jìn)行大批量樣品的測(cè)定處理，所以無(wú)法滿(mǎn)足臨床監(jiān)測(cè)快速測(cè)定和批量處理的需要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供了一種用自動(dòng)頂空氣相色譜法測(cè)定揮發(fā)性麻醉藥濃度的方法。該方法克服了現(xiàn)有技術(shù)中標(biāo)準(zhǔn)品制備及樣品處理繁瑣、測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)、存儲(chǔ)不便的缺點(diǎn)，提供了一種簡(jiǎn)便，快速，高效，準(zhǔn)確，且能廣泛處理大批樣品的揮發(fā)性麻醉藥濃度測(cè)定的方法及在臨床監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明的目的是提供一種用自動(dòng)頂空氣相色譜法測(cè)定樣品中揮發(fā)性麻醉藥濃度的方法。
[0007]具體地說(shuō)，本發(fā)明提供了一種測(cè)定樣品中揮發(fā)性麻醉藥濃度的方法，其采用自動(dòng)頂空氣相色譜法對(duì)包含揮發(fā)性麻醉藥的樣品進(jìn)行檢測(cè)，這里，所述的樣品為包含揮發(fā)性麻醉藥的溶液，可選自含有揮發(fā)性麻醉藥的有機(jī)溶劑和/或無(wú)機(jī)溶劑的溶液，或者離體的生物學(xué)樣品，例如血液、尿液或組織液。
[0008]在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述的揮發(fā)性麻醉藥選自甲氧氟烷、安氟烷、異氟烷、七氟烷或地氟烷。
[0009]在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述的自動(dòng)頂空氣相色譜法包括采用自動(dòng)頂空進(jìn)樣器進(jìn)樣。
[0010]在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種測(cè)定樣品中揮發(fā)性麻醉藥濃度方法，其采用自動(dòng)頂空氣相色譜法，包括如下步驟:
[0011](I)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
[0012]實(shí)驗(yàn)儀器為Agilent6890N氣相色譜儀；色譜柱為極性毛細(xì)管柱，采用升序升溫；進(jìn)樣口溫度為100?200°C，檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)，檢查溫度200?300°C ；載氣為氮?dú)狻錃饣蚝?；待測(cè)揮發(fā)性麻醉藥的色譜峰與雜質(zhì)峰分離度大于2.5 ;自動(dòng)頂空進(jìn)樣，85°C保溫30min，定量環(huán)與傳輸線(xiàn)溫度90?150°C，進(jìn)樣量0.5?Iml ；
[0013](2)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液的制備
[0014]取揮發(fā)性麻醉藥適量，精密稱(chēng)定，加溶劑溶解并稀釋制成儲(chǔ)備液，并用儲(chǔ)備液稀釋成6?10份不同濃度溶液作為標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液，分別取0.5?Iml置頂空瓶，封瓶即得；
[0015](3)供試品溶液的制備取待測(cè)溶液0.5?Iml置頂空瓶，封瓶即得；
[0016](4)測(cè)定分別取標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液與供試品溶液，用自動(dòng)頂空進(jìn)樣器注入氣相色譜儀測(cè)定、計(jì)算，即得。
[0017]在本發(fā)明的實(shí)施方案中，其中，步驟(I)中色譜柱為極性毛細(xì)管柱，優(yōu)選DB-WAX等以聚乙二醇為填充柱的毛細(xì)管柱。
[0018]在本發(fā)明的實(shí)施方案中，其中，步驟(I)中優(yōu)選進(jìn)樣口溫度為100?200°C，檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)，檢測(cè)器溫度200?300°C ;采用升序升溫；優(yōu)選起始40?60°C維持2?lOmin，以5?10°C /min速度升至150?200°C，維持2?lOmin。
[0019]在本發(fā)明的實(shí)施方案中，其中，步驟(I)中優(yōu)選的載氣為氮?dú)?，流速?.0?3.0ml/min，分流比為 1:1 ?1: 100。
[0020]在本發(fā)明的實(shí)施方案中，其中，步驟(2)中溶劑優(yōu)選為水或含有體積比為10?100 %的N，N- 二甲基甲酰胺或二甲基亞砜的水溶液。
[0021]在本發(fā)明的實(shí)施方案中，其中，步驟⑷中優(yōu)選的頂空預(yù)熱條件為70?90°C保溫20 ?30mino
[0022]本發(fā)明提供的檢測(cè)方法，用自動(dòng)頂空氣相色譜法測(cè)定含有揮發(fā)性麻醉藥樣品的標(biāo)準(zhǔn)值和測(cè)量值(即標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和樣品曲線(xiàn))，計(jì)算出樣品中揮發(fā)性麻醉藥濃度，及該方法在臨床監(jiān)測(cè)和實(shí)驗(yàn)室分析中的應(yīng)用
[0023]本發(fā)明的有益技術(shù)效果:
[0024]本發(fā)明為揮發(fā)性麻醉藥的濃度測(cè)定提供了簡(jiǎn)便、快速，準(zhǔn)確的通用方法。
[0025]1、極大簡(jiǎn)化了樣品處理過(guò)程，僅需在試驗(yàn)中抽取0.5?Iml血液或其他液體樣品至頂空瓶中壓蓋密封即可。
[0026]2、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)由配制揮發(fā)性麻醉藥標(biāo)準(zhǔn)氣該成較易稀釋配制的標(biāo)準(zhǔn)液，結(jié)果同樣精確。
[0027]3、極大縮短了樣品檢測(cè)時(shí)間，如用注射器二次平衡做一個(gè)樣品最低需耗時(shí)3小時(shí)，且一天同時(shí)測(cè)定樣品受水浴箱限制不可能批量進(jìn)行，而用自動(dòng)頂空進(jìn)樣一天可測(cè)定30?40個(gè)樣品，且完全自動(dòng)測(cè)定無(wú)需手動(dòng)進(jìn)樣。
[0028]4、使用頂空自動(dòng)進(jìn)樣，可以避免生物樣品帶入的雜質(zhì)對(duì)分析造成干擾，減少對(duì)色譜柱及進(jìn)樣口的污染從而確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確無(wú)誤。
[0029]5、經(jīng)穩(wěn)定性考察，揮發(fā)性麻醉藥如異氟烷能在頂空瓶中可保存7天之久，儲(chǔ)存方便，結(jié)果見(jiàn)表1。
[0030]表1異氟烷樣品常溫25°C條件下15天留樣穩(wěn)定性考察
[0031]

【權(quán)利要求】
1.一種樣品中揮發(fā)性麻醉藥濃度的測(cè)定方法，其特征在于:采用自動(dòng)頂空氣相色譜法對(duì)包含揮發(fā)性麻醉藥的離體的生物學(xué)樣品進(jìn)行檢測(cè)，所述的樣品為包含揮發(fā)性麻醉藥的溶液，選自含有揮發(fā)性麻醉藥的有機(jī)溶劑和/或無(wú)機(jī)溶劑的溶液，或者離體的生物學(xué)樣品；揮發(fā)性麻醉藥選自甲氧氟烷、安氟烷、異氟烷、七氟烷或地氟烷； 包括如下步驟: (1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 檢測(cè)儀為Agilent6890N氣相色譜儀；色譜柱為DB-WAX聚乙二醇毛細(xì)管柱，采用程序升溫；進(jìn)樣口溫度為100?200°C，載氣為氮?dú)狻錃饣蚝?；待測(cè)揮發(fā)性麻醉藥的色譜峰與雜質(zhì)峰分離度應(yīng)大于2.5;自動(dòng)頂空進(jìn)樣；流速為1.0?3.0ml/min，分流比為1:1?I: 100;檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度200?300°C ;采用升序升溫；起始40?60°C維持2?lOmin，以5?10°C /min速度升至150?200°C，維持2?1min (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液的制備 取揮發(fā)性麻醉藥適量，精密稱(chēng)定，加溶劑溶解并稀釋制成儲(chǔ)備液，并用儲(chǔ)備液稀釋成6?10份不同濃度溶液作為標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液，分別取0.5?Iml置頂空瓶，封瓶即得；溶劑選自水或含有體積比為10?100% N, N-二甲基甲酰胺或者二甲基亞砜的水溶液； (3)供試品溶液的制備 取待測(cè)溶液0.5?Iml置頂空瓶，封瓶即得； (4)測(cè)定 分別取標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液與供試品溶液，用自動(dòng)頂空進(jìn)樣器注入氣相色譜儀測(cè)定、計(jì)算，即得；頂空預(yù)熱方式為70?90°C，保溫20?30min。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于:所述離體的生物學(xué)樣品為血液、尿液或組織液。
3.一種血液樣品中七氟烷濃度的測(cè)定方法，其特征在于: (1)色譜條件:Agilent6890N氣相色譜儀，DB-WAX毛細(xì)管色譜柱，進(jìn)樣口溫度160°C，載氣為高純氮，柱流量為2ml/min ;程序升溫,起始60°C維持2min,以10°C /min速度升至200°C，維持2min，共運(yùn)行ISmin ;檢測(cè)器為火焰離子化檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度為300°C，自動(dòng)頂空進(jìn)樣，85°C保溫30min，定量環(huán)溫度90°C，傳輸線(xiàn)溫度120°C，進(jìn)樣量Iml ； (2)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制 取七氟烷對(duì)照品適量，用N，N- 二甲基甲酰胺溶解并稀釋?zhuān)瞥擅縄ml含14mg的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液； (3)樣品處理與測(cè)定 用七氟烷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液倍比稀釋9次，各取100 μ I分別加至已加入Iml水的頂空瓶中壓蓋密封，即為七氟烷標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液；以七氟烷峰面積對(duì)濃度線(xiàn)性回歸，得出回歸方程；精密量取待測(cè)血樣Iml至頂空瓶中壓蓋密封，平行6份，測(cè)得的樣品七氟烷峰面積通過(guò)回歸方程計(jì)算出樣品中七氟烷的濃度。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK104198607SQ201410456542
【公開(kāi)日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2010年12月16日 優(yōu)先權(quán)日:2010年12月16日
【發(fā)明者】易斌, 羅楠, 劉進(jìn), 張文勝, 袁瑛 申請(qǐng)人:宜昌人福藥業(yè)有限責(zé)任公司