一種阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法，可有效解決對(duì)阿維菌素的快速檢測(cè)問(wèn)題，方法是，PVC基板上自左至右覆蓋有引水玻璃纖維層、載體玻璃纖維層、硝酸纖維層和吸水棉漿板層，吸水棉漿板層和硝酸纖維層的1/2處上面覆蓋有右部覆膜，引水玻璃纖維層、載體玻璃纖維層和硝酸纖維層的1/2處上面覆蓋有左部覆膜，硝酸纖維層上自上而下包被有一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn)，載體玻璃纖維層上吸附包被有膠體金標(biāo)記物，本發(fā)明結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，易生產(chǎn)制備，使用方便，準(zhǔn)確率高，效果好，有效用于快速檢測(cè)阿維菌素，是檢測(cè)阿維菌素上的創(chuàng)新，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益巨大。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物檢測(cè)，特別是一種阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]阿維菌素作為一種十六元大環(huán)內(nèi)酯新型殺蟲(chóng)劑，由鏈霉菌中阿維鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)生，因化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎、作用機(jī)制獨(dú)特(干擾蟲(chóng)體的神經(jīng)生理活動(dòng)，刺激釋放Y-氨基丁酸，從而抑制節(jié)肢動(dòng)物的神經(jīng)傳導(dǎo))、殺蟲(chóng)活性強(qiáng)，具有廣譜、高效、持效、相對(duì)安全等特點(diǎn)，符合現(xiàn)代生態(tài)農(nóng)藥要求，被廣泛用于體內(nèi)外各種線(xiàn)蟲(chóng)，節(jié)肢動(dòng)物類(lèi)寄生蟲(chóng)和昆蟲(chóng)等的驅(qū)殺。目前全球正大面積推廣使用阿維菌素產(chǎn)品。但隨著害蟲(chóng)抗性提高，阿維菌素用藥量不斷增加，對(duì)環(huán)境及人類(lèi)、動(dòng)植物危害也日益顯現(xiàn)，主要表現(xiàn)為田間土壤的藥物殘留、人和動(dòng)物中樞和外周神經(jīng)癥狀，如震顫、共濟(jì)失調(diào)、精神抑郁、高度昏迷乃至死亡，并產(chǎn)生胚胎毒性。按世界衛(wèi)生組織(WTO) 5級(jí)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)，將其列為高毒化合物。
[0003]鑒于此，土壤及動(dòng)植物產(chǎn)品中阿維菌素藥物殘留檢測(cè)成為國(guó)家重點(diǎn)監(jiān)控指標(biāo)，阿維菌素藥物殘留檢測(cè)方法也成為重點(diǎn)研究?jī)?nèi)容。目前，關(guān)于阿維菌素殘留檢測(cè)方法主要為色譜檢測(cè)法和免疫檢測(cè)法，色譜檢測(cè)法有薄層色譜法、液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等，這些檢測(cè)方法存在樣品前處理復(fù)雜、需要專(zhuān)業(yè)操作人員、需要昂貴儀器花費(fèi)較高等不足，常用于阿維菌素藥物殘留的確證分析；免疫檢測(cè)法有酶聯(lián)免疫法，此方法簡(jiǎn)單、快速，避免了色譜檢測(cè)法的不足，適合于快速、大量樣品篩查，極易推廣。膠體金免疫層析技術(shù)(goldimmunochromatographic assay, GICA)是在酶聯(lián)免疫法基礎(chǔ)上發(fā)展的又一種新型快速免疫檢測(cè)技術(shù)，阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條即是在膠體金免疫層析技術(shù)基礎(chǔ)上融合現(xiàn)代單克隆抗體技術(shù)、新材料技術(shù)建立的一種簡(jiǎn)單、快速、經(jīng)濟(jì)的免疫檢測(cè)方法，該檢測(cè)試紙條操作較酶聯(lián)免疫法更簡(jiǎn)單、快速、更易判斷結(jié)果，是又一種新型、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保的檢測(cè)阿維菌素的技術(shù)方法。目前阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條在國(guó)內(nèi)外尚為空白。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法，可有效解決對(duì)阿維菌素的快速檢測(cè)問(wèn)題。
[0005]本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，該試紙條是由，PVC基板上自左至右覆蓋有引水玻璃纖維層、載體玻璃纖維層、硝酸纖維層和吸水棉漿板層，吸水棉漿板層和硝酸纖維層的1/2處上面覆蓋有右部覆膜(又稱(chēng)上部覆膜)，引水玻璃纖維層、載體玻璃纖維層和硝酸纖維層的1/2處上面覆蓋有左部覆膜(又稱(chēng)下部覆膜)，硝酸纖維層上自上而下(自右向左)包被有一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn)，載體玻璃纖維層上吸附包被有膠體金標(biāo)記物，其制備方法由以下步驟實(shí)現(xiàn):
1、制備單克隆抗體膠體金標(biāo)記物:
將含有抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體的小鼠腹水與醋酸緩沖液混合，再加入辛酸，離心，得上清液，過(guò)濾，調(diào)pH值后，加入硫酸銨溶解，離心沉淀，沉淀物用磷酸鹽緩沖液(PBS)溶解，再用磷酸鹽緩沖液透析，成單克隆抗體膠體金標(biāo)記物；
2、制備膠體金溶液:
將煮沸的蒸餾水中氯金酸溶液和檸檬酸三鈉溶液，攪拌成深紅色，冷卻，調(diào)pH值至等電點(diǎn)或弱堿性，成膠體金溶液；
3、制備膠體金標(biāo)記物:取膠體金溶液加入單克隆抗體膠體金標(biāo)記物，攪拌反應(yīng)，加入牛血清白蛋白，離心，得沉淀，用PBS稀釋?zhuān)赡z體金標(biāo)記物；
4、固化膠體金標(biāo)記物:在載體玻璃纖維層上吸附包被膠體金標(biāo)記物，干燥，將膠體金標(biāo)記物固化在載體玻璃纖維層上；
5、包被膜制備:取抗鼠免疫球蛋白抗體、阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物，分別包被于硝酸纖維層上，自上而下(自右向左)形成包被的一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn)；
6、切割:將包括吸附有膠體金標(biāo)記物的載體玻璃纖維層、包被抗鼠免疫球蛋白抗體、阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的硝酸纖維層后的試紙條載體切割成長(zhǎng)條，即成本發(fā)明試紙條。
[0006]本發(fā)明結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，易生產(chǎn)制備，使用方便，準(zhǔn)確率高，效果好，有效用于快速檢測(cè)阿維菌素，是檢測(cè)阿維菌素上的創(chuàng)新，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益巨大。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0007]圖1為本發(fā)明的結(jié)構(gòu)立體圖。

【具體實(shí)施方式】
[0008]以下結(jié)合附圖和具體情況對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作詳細(xì)說(shuō)明。
[0009]本發(fā)明在具體實(shí)施中，該試紙條是由PVC基板I上自左至右覆蓋有引水玻璃纖維層3、載體玻璃纖維層4、硝酸纖維層2和吸水棉漿板層5，吸水棉漿板層5和硝酸纖維層2的1/2處上面覆蓋有右部覆膜(又稱(chēng)上部覆膜)6，引水玻璃纖維層3、載體玻璃纖維層4和硝酸纖維層2的1/2處上面覆蓋有左部覆膜(又稱(chēng)下部覆膜)7，硝酸纖維層2上自上而下(自右向左)包被有一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn)，載體玻璃纖維層4上吸附包被有膠體金標(biāo)記物，其制備方法由以下步驟實(shí)現(xiàn):
1、制備單克隆抗體膠體金標(biāo)記物:
將以體積計(jì)的:1份含有抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體的小鼠腹水與2份60mM醋酸緩沖液混合，室溫(18?25°C)攪拌下逐滴加入辛酸，每Iml小鼠腹水加入33 μ I辛酸，混勻，室溫放置30分鐘，15000轉(zhuǎn)/分4°C離心20分鐘，得上清液，上清液用玻璃棉過(guò)濾，棄沉淀，過(guò)濾后的上清液用NaOH調(diào)pH值至7.2，加入硫酸銨，每Iml pH7.2上清液加入0.277g硫酸銨，快速使硫酸銨溶解，室溫?cái)嚢?0分鐘，15000轉(zhuǎn)/分4 °C離心20分鐘，棄上清液，得沉淀物，沉淀物用原小鼠腹水1/2體積的0.0lM磷酸鹽緩沖液(PBS)溶液溶解，再用0.0lM磷酸鹽緩沖液(PBS) 4°C透析48小時(shí)，成單克隆抗體膠體金標(biāo)記物；
2、制備膠體金溶液:
將蒸餾水煮沸4?6分鐘，每100mL蒸餾水中加入質(zhì)量濃度1%的氯金酸溶液1ml和質(zhì)量濃度1%的檸檬酸三鈉溶液15?20ml，攪拌至溶液呈深紅色，冷至室溫，調(diào)pH值至抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體的等電點(diǎn)或弱堿性(pH值7.35?7.44)，成抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體預(yù)標(biāo)記的膠體金溶液；
3、制備膠體金標(biāo)記物:取步驟(2)制備的膠體金溶液100ml，加入步驟(I)制備的單克隆抗體膠體金標(biāo)記物I?lOPg/ml，攪拌反應(yīng)2分鐘，加入質(zhì)量濃度10%的牛血清白蛋白(BSA)，每Iml膠體金溶液中加入15μ1質(zhì)量濃度10%的牛血清白蛋白，4°C下15000轉(zhuǎn)/分離心40分鐘，棄上清，得沉淀，沉淀用PBS稀釋至原膠體金溶液體積的30%?40%，成膠體金標(biāo)記物；
4、固化膠體金標(biāo)記物:在載體玻璃纖維層4上吸附包被膠體金標(biāo)記物，干燥，將膠體金標(biāo)記物固化在載體玻璃纖維層上；
5、包被膜制備:取抗鼠免疫球蛋白抗體、阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物，分別包被于硝酸纖維層2上，自上而下(自右向左)形成包被的一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn)，其中，抗鼠免疫球蛋白抗體包被濃度為0.5?5mg/ml，阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物包被濃度為0.05?2mg/ml ；
6、切割:將包括吸附有膠體金標(biāo)記物的載體玻璃纖維層4、包被抗鼠免疫球蛋白抗體、阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的硝酸纖維層2后的試紙條載體切割成長(zhǎng)條，即成本發(fā)明試紙條。
[0010]本發(fā)明在具體實(shí)施中，所述的試紙條為長(zhǎng)6.5?8.0 cm、寬0.3?0.4 cm的長(zhǎng)方條;
所述的步驟(2)中質(zhì)量濃度1%的檸檬酸三鈉溶液的加入量可為16?18ml、或17ml ； 所述的步驟(3)中單克隆抗體膠體金標(biāo)記物的加入量為4?8Pg/ml、或6Pg/ml ；
所述的步驟(5)中抗鼠免疫球蛋白抗體包被濃度為I?4mg/ml、或3?4 mg/ml ;阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物包被濃度為I?1.5mg/ml、或1.2?1.8mg/ml。
[0011]由上述可知，本發(fā)明的試紙條包括基材PVC板1、粘附于基材中部的硝酸纖維膜(自上而下包被有一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn))2、粘附于基材下部(本實(shí)施例中上、下部以試紙條使用時(shí)樣品泳動(dòng)方向?yàn)闇?zhǔn))的引水玻璃纖維3、載體玻璃纖維(包被抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體膠體金標(biāo)記物)4、粘附于基材上部的吸水棉漿板5、上部覆膜6及下部覆膜7。硝酸纖維膜(自上而下包被有一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn))2、引水玻璃纖維3、載體玻璃纖維(包被抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體膠體金標(biāo)記物)4和吸水棉漿板5端面緊密接觸。實(shí)施例中，膠體金溶液制備中1%檸檬酸三鈉溶液量為18ml，載體玻璃纖維(包被抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體膠體金標(biāo)記物)4中抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體膠體金標(biāo)記物濃度為5Pg/ml ;中部硝酸纖維膜(自上而下包被有一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn))2中質(zhì)控線(xiàn)包被的抗鼠免疫球蛋白抗體包被濃度為lmg/ml,檢測(cè)線(xiàn)包被的阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物包被濃度為0.5mg/mL.
[0012]本發(fā)明使用時(shí)，將纖維膜一端豎向插入樣品中浸沒(méi)下部引水玻璃纖維，或?qū)悠返沃猎嚰垪l下部引水玻璃纖維上，在微孔膜的滲濾作用或毛細(xì)管虹吸作用下，樣品沿試紙條向吸水棉漿板方向泳動(dòng)。本發(fā)明檢測(cè)原理是阿維菌素與抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體膠體金標(biāo)記物反應(yīng)形成標(biāo)記抗原一抗體復(fù)合物，采用的是競(jìng)爭(zhēng)抑制法，如果樣品中含有阿維菌素，樣品泳動(dòng)至包被有阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn)時(shí)則兩者同時(shí)競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體膠體金標(biāo)記物，泳動(dòng)至包被有抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)時(shí)抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體膠體金標(biāo)記物與抗鼠免疫球蛋白抗體發(fā)生反應(yīng)，顯示出現(xiàn)一條紅色線(xiàn)條(質(zhì)控線(xiàn))或者兩條紅色線(xiàn)條(一條反應(yīng)線(xiàn)、一條質(zhì)控線(xiàn)，但質(zhì)控線(xiàn)紅色線(xiàn)條較反應(yīng)線(xiàn)紅色線(xiàn)條深)，結(jié)果判斷為陽(yáng)性；如果樣品中不含有阿維菌素，樣品泳動(dòng)至包被有阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn)時(shí)只有阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物與抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體膠體金標(biāo)記物反應(yīng)，泳動(dòng)至包被有抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)時(shí)抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體膠體金標(biāo)記物與抗鼠免疫球蛋白抗體發(fā)生反應(yīng)，顯示出現(xiàn)兩條紅色線(xiàn)條(一條反應(yīng)線(xiàn)、一條質(zhì)控線(xiàn)，但質(zhì)控線(xiàn)紅色線(xiàn)條較反應(yīng)線(xiàn)紅色線(xiàn)條色淺或紅色顏色一致)，結(jié)果判斷為陰性。如果加樣后，質(zhì)控線(xiàn)處不出現(xiàn)紅色線(xiàn)條，則表明試紙條檢測(cè)結(jié)果無(wú)效或試紙條已失效。本發(fā)明通過(guò)試紙條中檢測(cè)線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)的比色半定量檢測(cè)動(dòng)植物食品或土壤中阿維菌素藥物殘留。利用本試紙條，5?10分鐘即可對(duì)動(dòng)植物食品或土壤中阿維菌素藥物殘留進(jìn)行簡(jiǎn)單、快速檢測(cè)，適用于相關(guān)檢疫檢測(cè)部門(mén)、進(jìn)出口檢疫檢測(cè)部門(mén)及實(shí)驗(yàn)室中阿維菌素藥物殘留的快速檢測(cè)或大規(guī)模篩查。
[0013]本發(fā)明不僅可以填補(bǔ)阿維菌素在快速檢測(cè)領(lǐng)域的空白，而且具有色譜檢測(cè)方法無(wú)法比擬的簡(jiǎn)單、快速、便于篩查大量樣品等優(yōu)點(diǎn)，是一種在動(dòng)植物食品或土壤中簡(jiǎn)單、快速檢測(cè)阿維菌素藥物殘留的新型技術(shù)，適用于相關(guān)檢疫檢測(cè)部門(mén)、進(jìn)出口檢疫檢測(cè)部門(mén)及實(shí)驗(yàn)室中阿維菌素藥物殘留的快速檢測(cè)或大規(guī)模篩查，簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，經(jīng)對(duì)58批殺蟲(chóng)藥物和38處田地土壤進(jìn)行檢測(cè)，準(zhǔn)確率達(dá)99%以上，表明本發(fā)明試紙條具有很強(qiáng)的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益巨大。
【權(quán)利要求】
1.一種阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法，其特征在于，該試紙條是PVC基板(I)上自左至右覆蓋有引水玻璃纖維層(3)、載體玻璃纖維層(4)、硝酸纖維層(2)和吸水棉漿板層(5)，吸水棉漿板層(5)和硝酸纖維層(2)的1/2處上面覆蓋有右部覆膜(6)，引水玻璃纖維層(3)、載體玻璃纖維層(4)和硝酸纖維層(2)的1/2處上面覆蓋有左部覆膜(7)，硝酸纖維層(2)上自上而下包被有一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn)，載體玻璃纖維層(4)上吸附包被有膠體金標(biāo)記物，其制備方法由以下步驟實(shí)現(xiàn): (1)、制備單克隆抗體膠體金標(biāo)記物: 將以體積計(jì)的:1份含有抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體的小鼠腹水與2份60mM醋酸緩沖液混合，室溫?cái)嚢柘轮鸬渭尤胄了?，每Iml小鼠腹水加入33 μ I辛酸，混勻，室溫放置30分鐘，15000轉(zhuǎn)/分4°C離心20分鐘，得上清液，上清液用玻璃棉過(guò)濾，棄沉淀，過(guò)濾后的上清液用NaOH調(diào)pH值至7.2，加入硫酸銨，每Iml pH7.2上清液加入0.277g硫酸銨，快速使硫酸銨溶解，室溫?cái)嚢?0分鐘，15000轉(zhuǎn)/分4 °C離心20分鐘，棄上清液，得沉淀物，沉淀物用原小鼠腹水1/2體積的0.0lM磷酸鹽緩沖液溶液溶解，再用0.0lM磷酸鹽緩沖液4°C透析48小時(shí),成單克隆抗體膠體金標(biāo)記物； (2)、制備膠體金溶液: 將蒸餾水煮沸4?6分鐘，每100mL蒸餾水中加入質(zhì)量濃度1%的氯金酸溶液1ml和質(zhì)量濃度1%的檸檬酸三鈉溶液15?20ml，攪拌至溶液呈深紅色，冷至室溫，調(diào)pH值至抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體的等電點(diǎn)或弱堿性，成抗阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體預(yù)標(biāo)記的膠體金溶液； (3)、制備膠體金標(biāo)記物:取步驟(3)制備的膠體金溶液100ml，加入步驟(2)制備的單克隆抗體膠體金標(biāo)記物I?lOPg/ml，攪拌反應(yīng)2分鐘，加入質(zhì)量濃度10%的牛血清白蛋白，每Iml膠體金溶液中加入15μ1質(zhì)量濃度10%的牛血清白蛋白，4°C下15000轉(zhuǎn)/分離心40分鐘，棄上清，得沉淀，沉淀用PBS稀釋至原膠體金溶液體積的30%?40%，成膠體金標(biāo)記物； (4)、固化膠體金標(biāo)記物:在載體玻璃纖維層(4)上吸附包被膠體金標(biāo)記物，干燥，將膠體金標(biāo)記物固化在載體玻璃纖維層上； (5)、包被膜制備:取抗鼠免疫球蛋白抗體、阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物，分別包被于硝酸纖維層(2)上，自上而下形成包被的一條抗鼠免疫球蛋白抗體的質(zhì)控線(xiàn)、一條阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)線(xiàn)，其中，抗鼠免疫球蛋白抗體包被濃度為0.5?5mg/ml，阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物包被濃度為0.05?2mg/ml ； (6)、切割:將包括吸附有膠體金標(biāo)記物的載體玻璃纖維層(4)、包被抗鼠免疫球蛋白抗體、阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的硝酸纖維層(2)后的試紙條載體切割成長(zhǎng)條，即成本發(fā)明試紙條。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法，其特征在于，所述的試紙條為長(zhǎng)6.5?8.0 cm、寬0.3?0.4 cm的長(zhǎng)方條。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法，其特征在于，所述的步驟(2)中質(zhì)量濃度1%的檸檬酸三鈉溶液的加入量可為16?18ml、或17ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法，其特征在于，所述的步驟(3)中單克隆抗體膠體金標(biāo)記物的加入量為4?8Pg/ml、或6Pg/ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿維菌素膠體金檢測(cè)試紙條的制備方法，其特征在于，所述的步驟(5)中抗鼠免疫球蛋白抗體包被濃度為I?4mg/ml、或3?4 mg/ml ;阿維菌素蛋白質(zhì)偶聯(lián)物包被濃度為I?1.5mg/ml、或1.2?1.8mg/ml。
【文檔編號(hào)】G01N33/577GK104407146SQ201410727583
【公開(kāi)日】2015年3月11日 申請(qǐng)日期:2014年12月2日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月2日
【發(fā)明者】劉麗, 王玉金, 王亞南, 楊書(shū)豪, 安明理, 何蔚葒, 杜迅, 李?yuàn)檴? 陳國(guó)參 申請(qǐng)人:河南省科學(xué)院生物研究所有限責(zé)任公司