本發(fā)明屬于生物，具體涉及一種快速靈敏的真菌毒素檢測方法。

背景技術：

1、在食品、藥品和化妝品安全領域，由黃曲霉毒素、赭曲霉毒素等多種真菌毒素引起的食品、藥品和化妝品污染是引發(fā)安全問題的主要原因之一。目前，常用的真菌毒素測定方法有熒光、高效液相色譜法(hplc)、液相色譜-串聯質譜法(lc-ms)、酶聯免疫吸附法(elisa)、和電化學傳感器等。這些方法都需要高精尖大型復雜的儀器并且預處理流程繁瑣復雜，耗時較長，無法滿足進行現場快速分析并且隨時隨地的靈活檢測需求。常見的黃曲霉毒素比色傳感器有fe3o4@aunps納米粒子-核酸適配體和il@sio2/ssm/核酸適配體-mos2/au/核酸適配體，此類方法雖然無需高精尖大型復雜儀器，但試劑配制繁多，所需原料試劑近20種，甚至涉及昂貴的高分子材料，僅試劑配制時間便高達1-3天，并且需要用到氮吹、縮聚反應、水浴老化、凝膠改性、真空干燥、高壓反應等一系列復雜操作，非專業(yè)人士無法制備。此類比色法僅用于檢測黃曲霉毒素m或黃曲霉毒素b1，范圍窄。因此，有必要開發(fā)一種便捷、經濟、高速的分析方法來補充傳統(tǒng)的分析方法以滿足現場監(jiān)管的需求。

技術實現思路

1、本發(fā)明第一方面的目的，在于提供一種復合物。

2、本發(fā)明第二方面的目的，在于提供本發(fā)明第一方面復合物的制備方法。

3、本發(fā)明第三方面的目的，在于提供一種比色傳感器。

4、本發(fā)明第四方面的目的，在于提供一種試劑盒。

5、本發(fā)明第五方面的目的，在于提供一種檢測真菌毒素的方法。

6、為了實現本發(fā)明上述的目的，本發(fā)明采取的技術方案是：

7、本發(fā)明的第一個方面，提供一種復合物，其特征在于：

8、由金納米顆粒和適配體組成，所述適配體與真菌毒素特異性結合。

9、優(yōu)選地，所述適配體包括核酸適配體、蛋白適配體中的至少一種。

10、優(yōu)選地，所述適配體包括核酸適配體。

11、優(yōu)選地，所述適配體連接在所述金納米顆粒上。

12、優(yōu)選地，所述真菌毒素黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、伏馬菌毒素、赭曲霉毒素、t-2毒素、嘔吐毒素、展青霉素的至少一種。

13、優(yōu)選地，所述真菌毒素包括黃曲霉毒素、赭曲霉毒素中的至少一種。

14、優(yōu)選地，所述黃曲霉素包括黃曲霉毒素b1、黃曲霉毒素b2、黃曲霉毒素g1、黃曲霉毒素g2中的至少一種。

15、優(yōu)選地，所述赭曲霉毒素包括赭曲霉毒素a、赭曲霉毒素b、赭曲霉毒素c中的至少一種。

16、優(yōu)選地，所述真菌毒素為黃曲霉毒素b1時，所述適配體的核酸序列如seq?id?no：1所示。

17、優(yōu)選地，所述真菌毒素為赭曲霉毒素a時，所述適配體的核酸序列如seq?id?no：2所示。

18、本發(fā)明的第二個方面，提供本發(fā)明第一方面復合物的制備方法，其特征在于：

19、將所述金納米顆粒與所述適配體混合，孵育，得到。

20、本發(fā)明的第三個方面，提供一種比色傳感器，包括本發(fā)明第一個方面的復合物。

21、優(yōu)選地，所述比色傳感器包括鹽溶液。

22、優(yōu)選地，所述鹽溶液包括nacl溶液。

23、優(yōu)選地，所述nacl溶液的濃度為24～40mm。

24、本發(fā)明的第四個方面，提供一種檢測真菌毒素的試劑盒，包括本發(fā)明第三個方面的比色傳感器、和比色卡。

25、優(yōu)選地，所述試劑盒還包括可以用于定量分析的檢測儀器。

26、本發(fā)明的第五個方面，提供一種檢測真菌毒素的方法，其特征在于：使用本發(fā)明第三個方面的比色傳感器、或本發(fā)明第四個方面的試劑盒對樣品進行檢測。

27、優(yōu)選地，所述樣品包括食品、藥品、化妝品中的至少一種。

28、優(yōu)選地，所述檢測包括以下步驟：將樣品與所述復合物混合，觀察混合體系的顏色變化或紫外-可見吸收光譜變化。

29、優(yōu)選地，所述紫外-可見吸收廣譜變化具體為計算620nm處和520nm處的吸光度比值，通過標準曲線法，得到真菌毒素含量。

30、本發(fā)明的有益效果是：

31、本發(fā)明針對真菌毒素檢測效率問題，提供一種用于檢測真菌毒素的復合物，并改進了一種快速靈敏的真菌毒素現場檢測方法?；诮鸺{米顆粒-適配體的比色傳感器，肉眼可以看出這一過程中溶液顏色的變化，通過此體系的顏色變化可以直觀可視化的實現定性分析，通過紫外分光光度計測定吸光度可以實現定量分析。操作便捷、經濟、耗時短以及涉及真菌毒素范圍廣，無需專業(yè)儀器設備及專業(yè)技術人員便可現場測定食品、藥品和化妝品中真菌毒素。

32、本專利的優(yōu)點在于，整個檢測流程僅涉及5種試劑原料，試劑配制方法簡單，金納米顆粒(aunps)的制備僅需煮沸15分鐘便可完成。試劑配制及樣品檢測總耗時不到2小時，檢測速率極快。覆蓋范圍廣，通過更換不同真菌毒素適配體來檢測多種真菌毒素，而不僅僅局限于一種真菌毒素。結果采用比色法，肉眼便可進行定性分析，無需采用大型精密檢測設備，無需專業(yè)技術人員便可簡單、快速、現場測定食品、藥品和化妝品中真菌毒素的含量。并且檢出限低至0.0018ng/ml，比其他比色傳感器靈敏100倍。

技術特征：

1.一種復合物，其特征在于：

2.根據權利要求1所述的復合物，其特征在于：

3.根據權利要求2所述的復合物，其特征在于：

4.權利要求1～3任一項所述復合物的制備方法，其特征在于：

5.一種比色傳感器，包括權利要求1～3任一項所述的復合物。

6.一種檢測真菌毒素的試劑盒，包括權利要求5所述的比色傳感器、和比色卡；

7.權利要求1～3任一項所述的復合物、權利要求5所述的比色傳感器、和/或權利要求6所述的試劑盒在檢測真菌毒素中的應用。

8.一種檢測真菌毒素的方法，其特征在于，使用權利要求5所述的比色傳感器、和/或權利要求6所述的試劑盒對樣品進行檢測；

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：

技術總結
本發(fā)明屬于生物技術領域，具體涉及一種快速靈敏的真菌毒素檢測方法。本發(fā)明針對真菌毒素檢測效率問題，提供一種用于檢測真菌毒素的復合物，并改進了一種快速靈敏的真菌毒素現場檢測方法?；诮鸺{米顆粒?適配體的比色傳感器，肉眼可以看出這一過程中溶液顏色的變化，通過此體系的顏色變化可以直觀可視化的實現定性分析，通過紫外分光光度計測定吸光度可以實現定量分析。操作便捷、經濟、耗時短以及涉及真菌毒素范圍廣，無需專業(yè)儀器設備及專業(yè)技術人員便可現場測定食品、藥品和化妝品中真菌毒素。

技術研發(fā)人員：靳貴英,曹宏梅,范茜芙,袁煥合,何淑欣
受保護的技術使用者：廣東省藥品檢驗所（廣東省藥品質量研究所、廣東省口岸藥品檢驗所）
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/9/9