本發(fā)明屬于中藥檢測，具體涉及一種桃膠的鑒別方法及其應用。

背景技術：

1、樹脂類中藥包括乳香、沒藥、桃膠、蘇合香、蘆薈、安息香、血竭、阿魏、兒茶等，多為植物體滲出的天然樹脂或樹脂加工品，這些樹脂通常具有獨特的藥理作用,被廣泛應用于中醫(yī)臨床，是中藥的重要組成部分。滲出的樹脂按是否經過人為加工可以分為天然樹脂和加工樹脂兩大類，其中加工樹脂類中藥外觀顏色一般比較均一，質量也相對穩(wěn)定可控，不容易直接摻假。而天然樹脂受自然環(huán)境等因素影響，導致其本身外觀顏色、大小、質地等往往存在很大差異，外觀非常不均一，容易出現(xiàn)直接摻假問題。

2、桃膠、乳香和沒藥均為天然樹脂，桃膠的性狀包括外形、氣味和大小等均與乳香和沒藥非常相近，所以市場上常常會出現(xiàn)桃膠假冒乳香和沒藥的情況。乳香和沒藥價格相近，在中醫(yī)臨床及中成藥生產方面兩者用量均比較大，全部依賴進口，故兩者價格相對較高；而桃膠產量較大，價格相對便宜，僅為乳香和沒藥的1/4～1/3，面對利益誘惑，有些不法商販會用桃膠假冒乳香和沒藥，但目前缺乏有效檢測手段，故無法對此假冒情況進行檢測確認。桃膠具有和血養(yǎng)血的功效，與乳香和沒藥的活血行氣功效相近，且桃膠藥食兩用，合理使用對人體有益無害，但臨床上卻無法代替乳香和沒藥使用，桃膠偏重于和血，而乳香和沒藥偏重于活血，桃膠與乳香和沒藥的功效雖然有些相近，但也存在差異，故臨床上不能混用。

3、因為乳香和沒藥的質量標準存在明顯缺陷，所以無法對易混淆樣品桃膠進行區(qū)別?，F(xiàn)行2020年版《中國藥典》乳香的專屬性的鑒別方法為氣相色譜法鑒別α-蒎烯，而α-蒎烯在其易混淆的沒藥、桃膠中普遍存在，所以該方法不具有專屬性；現(xiàn)行2020年版《中國藥典》沒藥的專屬性的鑒別方法是用沒藥對照藥材作為對照物質，薄層色譜法鑒別沒藥中所含的某些未知揮發(fā)性成分，但其主要的揮發(fā)性成分在乳香和桃膠中也普遍存在，所以該鑒別方法專屬性也不強。2020年版《中國藥典》雖沒有收載桃膠，但藥典中有多種中成藥如參精止渴丸、健腦丸等使用了桃膠，均沒有對桃膠進行定性鑒別。故亟需建立一種桃膠及含桃膠制劑的專屬性鑒別方法，以控制相關藥品的質量。

4、目前乳香和沒藥的臨床應用研究較多，而關于乳香和沒藥的質量控制方面研究較少，質量控制相關研究多集中在揮發(fā)油含量方面，而真?zhèn)舞b別研究較少，對桃膠的相關研究更少。目前乳香和沒藥的真?zhèn)舞b別方法主要有外觀性狀、薄層色譜、氣相色譜、液相色譜和紅外光譜法等，這些方法均缺乏專屬性。

技術實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術中鑒別桃膠專屬性差的問題，本發(fā)明提供了一種桃膠的鑒別方法及其應用，能夠對乳香和沒藥中是否摻雜桃膠進行鑒別，對含桃膠的制劑中的桃膠進行定性檢測，專屬性好。

2、本發(fā)明通過以下方法制備：

3、一種桃膠的鑒別方法，包括以下步驟：

4、（1）制備待檢測樣品的供試品溶液，使用液相色譜-高分辨質譜聯(lián)用儀檢測，獲得負離子流圖；

5、（2）以 m/z=301.07±0.01單電荷為桃膠特征離子提取步驟（1）中負離子流圖的離子圖，若檢測出該離子，則待檢測樣品中含有桃膠成分。

6、進一步地，步驟（1）中供試品溶液的制備方法為：取待檢測樣品粉末，加入甲醇溶液超聲溶解，離心后取上清液，過濾得供試品溶液。

7、進一步地，步驟（1）中所述的甲醇溶液為體積濃度50%的甲醇溶液，超聲的條件為功率500～1000w、頻率40～50khz下超聲30min。

8、進一步地，步驟（1）中每20mg待檢測樣品粉末加入10ml甲醇溶液。

9、進一步地，步驟（1）中液相色譜條件為：thermo?hypersil?gold?c18?色譜柱，100mm×2.1mm，3μm；柱溫30℃，流動相a為0.1%甲酸水溶液，流動相b為含有0.1%甲酸的乙腈，梯度洗脫，進樣量為5μl，流速0.3ml/min；

10、高分辨質譜條件為：qe-plus高分辨質譜儀，電噴霧離子源，負離子模式，噴霧電壓為3.5kv，離子傳輸毛細管溫度為360℃，s-lens傳輸效率設置為50.0%，鞘氣流速35l/min，輔助氣流速15l/min，輔助氣加熱溫度300℃。

11、進一步地，所述的梯度洗脫條件為：0～3min，5％b；3～10min，5％～9％b；10～32min，9％～21％b；32～40min，21％～30％b；40～48min，30％～80％b；48～50min，80％～90％b；50～52min，90％～100％b；52～55min，100％b；55～56min，100％～5％b；56～60min，5％b。

12、進一步地，所述的待檢測樣品為乳香、沒藥、桃膠或含乳香、沒藥、桃膠中任意一種或多種的中藥制劑。

13、本發(fā)明中，所述的桃膠的鑒別方法在判斷乳香、沒藥或其中藥制劑中是否摻雜桃膠中的應用。

14、離子模式的選擇及專屬的特征離子選擇十分重要，經大量試驗，雖然采用電噴霧正離子模式可以得到更豐富的離子峰，但經過驗證，響應較高的離子峰均缺乏專屬性，不能作為專屬性特征離子，說明桃膠、乳香和沒藥之間含有大量的相同成分，只是成分的相對含量存在一些差異，該大量的相同成分經質譜數(shù)據(jù)判斷主要是各種揮發(fā)性成分。而采用電噴霧負離子模式進行離子化，通過分析采集的巨量離子信息，確認 m/z=301.07（z=1）為桃膠的特征離子，可以用于鑒定桃膠的真?zhèn)?、桃膠是否假冒乳香和沒藥以及麻黃止嗽丸中桃膠的鑒別。

15、本發(fā)明取得的有益效果

16、（1）本發(fā)明桃膠的鑒別方法通過對桃膠特征離子的檢測實現(xiàn)了對桃膠的定性鑒別，可實現(xiàn)對桃膠假冒乳香和沒藥的真?zhèn)舞b別；

17、（2）本發(fā)明桃膠的鑒別方法專屬性好，重現(xiàn)性好，通過對桃膠特征離子的檢測實現(xiàn)對含桃膠中藥制劑的定性檢測，且該方法無需對照樣品，成本低。

技術特征：

1.一種桃膠的鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的桃膠的鑒別方法，其特征在于，步驟（1）中供試品溶液的制備方法為：取待檢測樣品粉末，加入甲醇溶液超聲溶解，離心后取上清液，過濾得供試品溶液。

3.根據(jù)權利要求2所述的桃膠的鑒別方法，其特征在于，步驟（1）中所述的甲醇溶液為體積濃度50%的甲醇溶液，超聲的條件為功率500～1000w、頻率40～50khz下超聲30min。

4.根據(jù)權利要求2所述的桃膠的鑒別方法，其特征在于，步驟（1）中每20mg待檢測樣品粉末加入10ml甲醇溶液。

5.根據(jù)權利要求1所述的桃膠的鑒別方法，其特征在于，步驟（1）中液相色譜條件為：thermo?hypersil?gold?c18?色譜柱，100mm×2.1mm，3μm；柱溫30℃，流動相a為0.1%甲酸水溶液，流動相b為含有0.1%甲酸的乙腈，梯度洗脫，進樣量為5μl，流速0.3ml/min；

6.根據(jù)權利要求5所述的桃膠的鑒別方法，其特征在于，所述梯度洗脫的條件為：0～3min，5％b；3～10min，5％～9％b；10～32min，9％～21％b；32～40min，21％～30％b；40～48min，30％～80％b；48～50min，80％～90％b；50～52min，90％～100％b；52～55min，100％b；55～56min，100％～5％b；56～60min，5％b。

7.根據(jù)權利要求1所述的桃膠的鑒別方法，其特征在于，所述的待檢測樣品為乳香、沒藥、桃膠或含乳香、沒藥、桃膠中任意一種或多種的中藥制劑。

8.一種權利要求1～7任一項所述的桃膠的鑒別方法在判斷乳香、沒藥或其中藥制劑中是否摻雜桃膠中的應用。

技術總結
本發(fā)明公開了一種桃膠的鑒別方法及其應用，屬于中藥檢測技術領域。制備待檢測樣品的供試品溶液，使用液相色譜?高分辨質譜聯(lián)用儀檢測，獲得負離子流圖；以m/z=301.07±0.01單電荷為桃膠特征離子提取負離子流圖的離子圖，若檢測出該離子，則待檢測樣品中含有桃膠成分。本發(fā)明桃膠的鑒別方法通過對桃膠特征離子的檢測實現(xiàn)了對桃膠的定性鑒別，可實現(xiàn)對桃膠假冒乳香和沒藥的真?zhèn)舞b別；本發(fā)明桃膠的鑒別方法專屬性好，重現(xiàn)性好，通過對桃膠特征離子的檢測實現(xiàn)對含桃膠中藥制劑的定性檢測，且該方法無需對照樣品，成本低。

技術研發(fā)人員：王作承,張丹,王玉團,隋曉慧,王坤
受保護的技術使用者：山東中醫(yī)藥大學
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/9/29