專(zhuān)利名稱(chēng)：提高離心前紅細(xì)胞的聚焦作用和/或凝集作用的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種減小紅細(xì)胞間相互排斥的自然趨勢(shì)的方法。尤其是，本發(fā)明涉及一種使抗凝全血的離心樣品中紅細(xì)胞層和淡黃色膜(buffy coat)粒細(xì)胞層之間的界面清晰的方法。
U.S.專(zhuān)利4,027,660；4,082,085；4,137,755；和5,086,784涉及一種設(shè)備和工藝，該設(shè)備和工藝可物理性地拉伸在透明管中，如毛細(xì)管中離心血樣的血液組分層。然后，血細(xì)胞參數(shù)的測(cè)定由U.S.專(zhuān)利4,156,570和4,558,947中公開(kāi)的儀器完成。正如U.S.專(zhuān)利4,779,976中描述的，此技術(shù)已經(jīng)被應(yīng)用在獸醫(yī)上。上述技術(shù)通常稱(chēng)之為定量淡黃色膜分析(“q.b.c.a.”)技術(shù)。
此技術(shù)的研究者遇到了被稱(chēng)之為“流動(dòng)”現(xiàn)象的問(wèn)題，該現(xiàn)象與上述的q.b.c.a.技術(shù)有關(guān)。此流動(dòng)問(wèn)題部分是由于紅細(xì)胞組分上升至淡黃色膜的粒細(xì)胞層的結(jié)果；部分是由于粒細(xì)胞沉降至離心的紅細(xì)胞層上部的結(jié)果，二者都是由于紅細(xì)胞和粒細(xì)胞密度的部分重疊。
一些解決方法被設(shè)計(jì)來(lái)減小流動(dòng)。一種解決方法涉及了利用添加劑，如草酸鉀，來(lái)減少紅細(xì)胞的水分，即增加了紅細(xì)胞的密度。此解決方法在U.S.專(zhuān)利4,159,896和4,181,609中說(shuō)明。但此解決方法不能完全地消除流動(dòng)問(wèn)題。
另一種解決流動(dòng)問(wèn)題的嘗試在U.S.專(zhuān)利4,695,553中探討。此解決方法是，血樣首先在管中以一個(gè)方向離心，然后將管反放入離心機(jī)，使血樣在管中以相反方向離心。此方法的原理是，在第一次離心步驟中，最輕的紅細(xì)胞會(huì)將在壓積的紅細(xì)胞層的上部；然后當(dāng)再次反方向離心后，最輕的紅細(xì)胞可與上面覆蓋的重的紅細(xì)胞接合，因此可以不上升至粒細(xì)胞界面。這種解決方法很麻煩，需要大量的技術(shù)人員完成。
第三個(gè)解決流動(dòng)問(wèn)題的方法涉及，向血樣中加入抗體，或其它對(duì)紅細(xì)胞表面抗原具有特異性的結(jié)合劑。一種適當(dāng)?shù)目贵w是種特異性抗血型糖蛋白抗體。此抗體可使相鄰紅細(xì)胞彼此結(jié)合，由此導(dǎo)致紅細(xì)胞附聚。U.S.4,594,165和U.S.4,940,668描述了與上述q.b.c.a.技術(shù)有關(guān)的紅細(xì)胞附聚引發(fā)抗體的應(yīng)用。為了使抗體發(fā)揮其預(yù)期的作用，各個(gè)紅細(xì)胞在離心步驟前必須能夠彼此相對(duì)靠近，使抗體可以將相鄰紅細(xì)胞彼此結(jié)合起來(lái)。
在通過(guò)q.b.c.a.技術(shù)對(duì)抗凝全血樣品進(jìn)行分析時(shí)，尤其是采用紅細(xì)胞特異性抗體時(shí)，一個(gè)復(fù)雜化因素是紅細(xì)胞之間彼此排斥的自然趨勢(shì)。排斥現(xiàn)象是由于“Z-電位”產(chǎn)生的，該電位是由于紅細(xì)胞表面負(fù)電荷的存在，而電荷的存在是因?yàn)榧t細(xì)胞膜上的唾液酸根導(dǎo)致的。
血中的紅細(xì)胞還有一種聚集的趨勢(shì)并形成為“紅細(xì)胞錢(qián)串”或“幣堆”。紅細(xì)胞錢(qián)串化趨勢(shì)是影響透明管中全血樣品的紅細(xì)胞沉降速度測(cè)定的因素，也影響比重。U.S.4,135,819中探討了紅細(xì)胞錢(qián)串化現(xiàn)象。全血樣品中的紅細(xì)胞成錢(qián)串化趨勢(shì)的相反作用是上述的Z-電位排斥現(xiàn)象。
1975年9月2日批準(zhǔn)的U.S.專(zhuān)利3,902,964，D.J Greenspan描述了一種方法和裝置，可利用化學(xué)手段從血組成中分離出血漿或血清。此專(zhuān)利提出將正電性聚合物，如聚凝胺和血細(xì)胞凝集素植物提取物-植物血凝素，加入到血樣中以提高血液中成分的凝集作用及這些成分由血清和血漿中的沉積。Greenspan發(fā)明的目的是將上述血樣組分不通過(guò)離心即能夠產(chǎn)生快速重力性地分離。Greenspan發(fā)明提出，一個(gè)正電性聚合物與一個(gè)植物血凝素結(jié)合，實(shí)際上可將血樣中的組分從血漿或血清中分離出來(lái)而不用離心血樣。此參考文件并沒(méi)有討論任何關(guān)于解決抗凝全血離心樣品中，紅細(xì)胞層和粒細(xì)胞層之間的清晰輪廓界面問(wèn)題的解決方法。則根據(jù)上述Greenspan專(zhuān)利的說(shuō)教不能認(rèn)定其對(duì)離心抗凝人全血中流動(dòng)現(xiàn)象的反作用有重要的改進(jìn)作用。
需要一定程度地中和或減小動(dòng)物和人的紅細(xì)胞Z-電位，來(lái)提高紅細(xì)胞聚集作用，紅細(xì)胞錢(qián)串化和凝集作用，以改善上述人和動(dòng)物的q.b.c.a技術(shù)。
本發(fā)明涉及一種提高人和動(dòng)物的，尤其是奶牛的，紅細(xì)胞錢(qián)串化或其它聚集作用趨勢(shì)的方法。本發(fā)明的實(shí)施顯著地減小了紅細(xì)胞Z-電位導(dǎo)致的排斥力強(qiáng)度。由受試者血樣中存在的結(jié)合劑所產(chǎn)生的紅細(xì)胞聚集作用；錢(qián)串化作用；或凝集作用，可被一定程度地提高，能有效地使離心的抗凝全血樣品中紅細(xì)胞和粒細(xì)胞層間的界面清晰。
本發(fā)明涉及向血樣中添加復(fù)合試劑，其中該試劑將中和或減小紅細(xì)胞Z-電位的排斥作用。應(yīng)用的試劑包括高分子量陽(yáng)離子大分子物質(zhì)的結(jié)合物，即分子量約大于50,000道爾頓的物質(zhì)。溶液中適當(dāng)試劑結(jié)合物將形成混合物分子團(tuán)，該分子團(tuán)可成為紅細(xì)胞聚集和錢(qián)串化的引發(fā)劑。特別是，試劑結(jié)合物包括將以下物質(zhì)結(jié)合聚凝胺；魚(yú)精蛋白硫酸鹽；陽(yáng)離子抗生素，如萬(wàn)古霉素；聚乙二醇(PEG)；羥基二乙基淀粉(HES)；聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；和高分子量葡聚糖。本發(fā)明中所用的術(shù)語(yǔ)“分子團(tuán)”涉及亞顯微顆粒，該種顆粒在溶液，尤其在哺乳動(dòng)物的抗凝全血中，具有熱力學(xué)穩(wěn)定性。分子團(tuán)由二個(gè)或更多的大分子形成，至少其中之一在分子團(tuán)上形成正電性外層，該正電性層中和或減小由紅細(xì)胞Z-電位產(chǎn)生的排斥力強(qiáng)度。優(yōu)選在含水溶液中形成高分子分子團(tuán)，例如與抗凝全血樣品混合的生理鹽水。某些超高分子量帶正電荷物質(zhì)，如PVP，也可單獨(dú)或與其它上述試劑結(jié)合使用。
為了滿(mǎn)足在抗凝全血的離心樣品中制備清晰紅細(xì)胞-粒細(xì)胞界面的需要，本發(fā)明還試圖向血樣中加入紅細(xì)胞特異性結(jié)合劑，如抗血型糖蛋白抗體或植物凝血素，并與上述大分子劑結(jié)合。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種處理抗凝全血樣品的方法，以提高血樣中紅細(xì)胞成錢(qián)串化或其它聚集作用的趨勢(shì)。
本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供一種方法，其中由紅細(xì)胞Z-電位導(dǎo)致的紅細(xì)胞排斥作用可被抑制。
本發(fā)明又一個(gè)目的是提供一種方法，其中血樣與含有一種或多種可一定程度地提高紅細(xì)胞聚集作用的高分子量陽(yáng)離子物質(zhì)進(jìn)行混合，它們將在血樣離心時(shí)通過(guò)紅細(xì)胞密度依重力沉降出層次。
本發(fā)明另一個(gè)目的是提供一種方法，其中血樣還可與能使紅細(xì)胞凝集的結(jié)合劑混合，它們?cè)谘獦与x心時(shí)通過(guò)紅細(xì)胞密度依重力沉降出層次。
本發(fā)明的這些和其它的目的及進(jìn)步，將通過(guò)下列結(jié)合有附圖的本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施例具體說(shuō)明，使所屬領(lǐng)域技術(shù)人員更易理解。
附圖簡(jiǎn)述

圖1.是一個(gè)透明樣品管的透視圖，該透明樣品管含有離心血樣和細(xì)胞層拉伸插入物；圖2.是一個(gè)紅細(xì)胞彼此排斥狀態(tài)的圖解說(shuō)明，該彼此排斥狀態(tài)是由于其表面負(fù)電荷導(dǎo)致的；圖3.是一個(gè)由葡聚糖和聚凝胺結(jié)合形成的分子團(tuán)的圖示，其中該分子團(tuán)具有表面正電荷；圖4.是一個(gè)狀態(tài)圖示，該狀態(tài)是當(dāng)分子團(tuán)加入到血樣中，通過(guò)減小或中和Z-電位的影響，使相鄰紅細(xì)胞更加緊密聚集情形。
圖5.是一個(gè)狀態(tài)的圖示，在該狀態(tài)中，分子團(tuán)加入到血樣中起減小或中和紅細(xì)胞彼此排斥強(qiáng)度的作用，以使血樣中紅細(xì)胞特異性結(jié)合劑將各個(gè)紅細(xì)胞凝集。
完成發(fā)明的最優(yōu)選方式將附圖作為參考，附圖1表示在本發(fā)明試驗(yàn)方法中優(yōu)選的血液取樣和測(cè)試的裝置類(lèi)型。該裝置包括抗凝全血樣品可在其中抽取和離心的透明管2。透明管2含有通常為圓柱形的血細(xì)胞層拉伸插子6，該插子具有特定的比重，并能在管2的離心抗凝全血樣品紅細(xì)胞層8中漂浮。管2的底部用蓋4封閉，以保證管2樣品的離心。當(dāng)血樣在管2中離心時(shí)，其各組成按照特定的比重沉降分層。最重層是紅細(xì)胞層8；然后依次為淡黃色膜10；和血漿層12。淡黃色膜10有三個(gè)主要組成層，即，粒細(xì)胞層14，淋巴細(xì)胞/單核細(xì)胞層16，和血小板層18。紅細(xì)胞層8和粒細(xì)胞層14間的界面20是清晰的和明確的分界，這是由于在血樣中加入了高分子量的陽(yáng)離子大分子結(jié)合物，并同時(shí)加入紅細(xì)胞結(jié)合劑，或在某些情況下可不加后者。
附圖2.圖示了一種狀態(tài)；在該狀態(tài)中，抗凝全血樣品的相鄰紅細(xì)胞22趨于彼此排斥，這是由于Z電位的表面負(fù)電荷造成的；當(dāng)排斥達(dá)到一定程度時(shí)，將干擾相鄰細(xì)胞22上的紅細(xì)胞特異性結(jié)合劑24將細(xì)胞22彼此凝集的能力。為了造成結(jié)合劑引起的相鄰紅細(xì)胞22的聚集，結(jié)合劑單體24必須能附著在各紅細(xì)胞22表面膜上。圖2.表示，在某些情況下，由Z-電位排斥力產(chǎn)生的相鄰紅細(xì)胞間的空隙很大，使結(jié)合劑單體24無(wú)法使相鄰紅細(xì)胞22聚集。
圖3.是本發(fā)明所述的分子團(tuán)形成的圖示。分子團(tuán)通常由字符M表示，并由一群大分子形成。實(shí)際中的分子團(tuán)M包括由許多核心葡聚糖分子D，許多聚凝胺分子組成的外表面。葡聚糖分子D提供了分子團(tuán)M的預(yù)期體積；聚凝胺分子P提供了預(yù)期的分子團(tuán)M的表面正電荷，如圖3.所示。
附圖4.是一個(gè)狀態(tài)的圖示，在該狀態(tài)中?？鼓獦悠返母叻肿恿筷?yáng)離子分子團(tuán)引發(fā)紅細(xì)胞錢(qián)串化和其它的紅細(xì)胞聚集。在圖4.中數(shù)字22代表各個(gè)紅細(xì)胞，字符M代表陽(yáng)離子性高分子量的改善紅細(xì)胞錢(qián)串化或紅細(xì)胞聚集的分子團(tuán)，如PVP。陽(yáng)離子分子團(tuán)或大分子M的混合物分配在紅細(xì)胞22之間，并有效地使紅細(xì)胞22盡可能地彼此接近。由于陽(yáng)離子高分子分子團(tuán)或大分子M的摻入，紅細(xì)胞22的聚集作用提高了。
附圖5.是一種狀態(tài)的圖示，該狀態(tài)中分子團(tuán)或大分子M引發(fā)了錢(qián)串化或其它紅細(xì)胞聚集的形成，并達(dá)到一定程度以滿(mǎn)足紅細(xì)胞結(jié)合劑24凝集紅細(xì)胞22的需要。
上述確定技術(shù)的特定應(yīng)用涉及了抗凝牛全血離心樣品的q.b.c.a.技術(shù)。牛血迄今為止被證明不能用q.b.c.a.技術(shù)分析。原因是牛紅細(xì)胞表現(xiàn)出的異常高的Z-電位。
從抗凝牛全血樣品中抽取紅細(xì)胞，先不結(jié)合上述類(lèi)型的高分子量分子團(tuán)或大分子而進(jìn)行沉積，在顯微鏡下顯示出零堆積，聚集或錢(qián)串化?？鼓Ｈc抗體混合；用高分子量陽(yáng)離子分子分離；然后在上述q.b.c.a.的含插子管裝置中離心。結(jié)果得到一個(gè)離心混合物，該混合物在紅細(xì)胞/粒細(xì)胞間得到一個(gè)不清晰和含糊的界面，該界面無(wú)法提供臨床可接受的測(cè)量量度，應(yīng)用于以q.b.c.a.技術(shù)為依據(jù)的白細(xì)胞和血小板差示計(jì)數(shù)。
相反的，當(dāng)高分子量分子團(tuán)結(jié)合物的鹽溶液，特定情況下和大分子，與抗凝牛全血混合，在顯微鏡下可觀察到顯著的紅細(xì)胞聚集或錢(qián)串化。特別有效的是高分子量試劑包括由聚凝胺和葡聚糖形成的分子團(tuán)；聚凝胺和PVP形成的分子團(tuán)；和陽(yáng)離子PVP大分子。發(fā)現(xiàn)與含有上述試劑的鹽溶液混合的牛血樣，經(jīng)沉積，在顯微鏡下觀察到的結(jié)果是大量紅細(xì)胞形成聚集或錢(qián)串。當(dāng)抗凝牛血樣單獨(dú)與含有聚凝胺和葡聚糖試劑二者之一的鹽溶液混合時(shí)，證明不能產(chǎn)生顯著的紅細(xì)胞聚集或錢(qián)串形成。
根據(jù)本發(fā)明方案，抗凝牛全血樣品與含分子團(tuán)的鹽溶液混合，該分子團(tuán)由聚凝胺和葡聚糖組成?；旌衔镌诂F(xiàn)有技術(shù)所用的q.b.c.a.的含插子管的裝置中離心，所得沉降分離混合物顯示出一個(gè)清晰并良好分界的紅細(xì)胞-粒細(xì)胞界面，此界面足夠提供臨床可接受的量度，應(yīng)用在根據(jù)q.b.c.a.技術(shù)手段的白細(xì)胞計(jì)差示數(shù)，及血細(xì)胞比容，血紅蛋白和血小板計(jì)數(shù)。
通過(guò)q.b.c.a.技術(shù)測(cè)定牛血清時(shí)，首先優(yōu)選的應(yīng)用溶液是由約65mg聚凝胺和約65mg葡聚糖/ml鹽水形成的分子團(tuán)組成。上述混合物使紅細(xì)胞產(chǎn)生足夠的聚集，以便能夠進(jìn)行精確的白細(xì)胞和血小板差示計(jì)數(shù)，并可在抗凝牛全血的離心樣品中進(jìn)行精確的紅細(xì)胞比容和血紅蛋白讀數(shù)。血液相對(duì)于鹽水的可行性濃度在約2∶1到約10∶1的范圍。
通過(guò)q.b.c.a.技術(shù)測(cè)定牛血清時(shí)，第二優(yōu)選的應(yīng)用方案是由約65mg聚凝胺和約65mgPVP/ml鹽水形成的分子團(tuán)組成。上述混合物使紅細(xì)胞產(chǎn)生足夠的聚集，以便能夠進(jìn)行精確的白細(xì)胞和血小板差示計(jì)數(shù)，并可在抗凝牛全血的離心樣品中進(jìn)行精確的紅細(xì)胞比容和血紅蛋白讀數(shù)。血液相對(duì)鹽水的可行性濃度在約2∶1到約10∶1的范圍。
通過(guò)q.b.c.a.技術(shù)測(cè)定牛血清時(shí)，第三優(yōu)選的應(yīng)用方案是由65mgPVP的大分子/ml鹽水組成。上述混合物也可使紅細(xì)胞產(chǎn)生足夠的聚集，以便能夠進(jìn)行精確的白細(xì)胞差示計(jì)數(shù)，并可在抗凝牛全血的離心樣品中進(jìn)行精確的紅細(xì)胞比容，血紅蛋白，和血小板計(jì)數(shù)的讀數(shù)。血液相對(duì)于鹽水的可行性濃度在約2∶1到約10∶1的范圍。
在牛血分析中，最優(yōu)選應(yīng)用的分子團(tuán)和大分子的鹽水溶液濃度的確定，是由IDEXX Laboratories，Inc.的Messers. John Roche，PaulWeiss和Travis Waldron工作室完成的。
上述確認(rèn)技術(shù)的另一個(gè)應(yīng)用涉及了抗凝全血離心樣品的q.b.c.a.技術(shù)，其中該血樣表現(xiàn)出流動(dòng)問(wèn)題。如上所述，具有確定的過(guò)度流動(dòng)的人血液，至今為止被證明還難以用q.b.c.a.技術(shù)分析。此現(xiàn)象的原因還不清楚。
已知具有“流動(dòng)”作用的人抗凝全血樣品，與聚凝胺和葡聚糖分子團(tuán)的鹽溶液混合，然后用圖1所示并描述的q.b.c.a.技術(shù)裝置進(jìn)行離心。結(jié)果得到了一種離心混合物，該混合物雖然改善了流動(dòng)問(wèn)題，但仍不足以提供臨床可接受量度，應(yīng)用于以q.b.c.a.技術(shù)為依據(jù)的白細(xì)胞差示計(jì)數(shù)，或血細(xì)胞比容和血紅蛋白計(jì)數(shù)中。同樣，流動(dòng)性血樣和單獨(dú)一種較高分子量試劑的混合物，或流動(dòng)性血樣和抗血型糖蛋白抗體的混合物，都不能改善流動(dòng)作用。
當(dāng)流動(dòng)性血樣與聚凝胺和葡聚糖分子團(tuán)的結(jié)合物混合，并再結(jié)合抗血型糖蛋白抗體，粒細(xì)胞-紅細(xì)胞的分離得到了改善；且在具有合理百分比的離心流動(dòng)性血樣中，上述兩種細(xì)胞層間的界面明顯清晰了。當(dāng)與聚凝胺-葡聚糖分子團(tuán)溶液和抗血型糖蛋白抗體結(jié)合時(shí)，約一半的流動(dòng)性測(cè)試血樣被證明其細(xì)胞分離程度顯著提高，可確保應(yīng)用q.b.c.a.技術(shù)來(lái)完成精確白細(xì)胞和血小板差示計(jì)數(shù)，及紅細(xì)胞比容和血紅蛋白讀數(shù)。
特別是，流動(dòng)性人血液與抗血型糖蛋白抗體，和含有約65mg和約65mg葡聚糖/ml鹽水的分子團(tuán)的鹽溶液進(jìn)行混合。將此血液-試劑混合物沉積，在顯微鏡下可觀察到產(chǎn)生了大量的紅細(xì)胞聚集或紅細(xì)胞錢(qián)串的形成。對(duì)于分析流動(dòng)性人血樣，血液與紅細(xì)胞聚集劑溶液的比濃度，優(yōu)選范圍約是2∶1至10∶1。由一個(gè)極常規(guī)的方法也可得到相似的結(jié)果，該方法是將適當(dāng)濃度的結(jié)合劑和/或紅細(xì)胞-聚集劑，在血樣管壁上形成一層干的溶于血液的包被層。當(dāng)與紅細(xì)胞結(jié)合劑結(jié)合時(shí)，上述聚凝胺-PVP分子團(tuán)和PVP大分子也可有效的減小流動(dòng)問(wèn)題。
因此容易理解的是，單獨(dú)向血樣中加入陽(yáng)離子高分子量分子團(tuán)化合物的結(jié)合物，或加入陽(yáng)離子大分子試劑，或某些情況下，與紅細(xì)胞特異性結(jié)合試劑結(jié)合，將顯著地提高紅細(xì)胞聚集，成錢(qián)串化和凝集的能力。按此方法處理的血樣可因此在q.b.c.a.技術(shù)中更易于精確地分析。尤其是，處理的抗凝牛全血樣品可應(yīng)用上述技術(shù)分析，處理的流動(dòng)性人血樣品也可應(yīng)用上述技術(shù)得到更好地分析。
由于在不超出本發(fā)明原理的范圍內(nèi)，即可做出與本發(fā)明公開(kāi)實(shí)施例的許多變化和不同，本發(fā)明不局限于這些其它方式，但以所附權(quán)利要求書(shū)中所要求的為限。
權(quán)利要求
1.一種在離心抗凝全血樣品的紅細(xì)胞層和粒細(xì)胞層間形成良好確定的和清晰的界面的方法，該方法包括的步驟如下a)將一定量的分子團(tuán)與血樣混合以提供一種血液-分子團(tuán)混合物，該分子團(tuán)由至少兩種不同的高分子量顆粒組成，并具有表面正電荷；及b)在透明管中離心血液-分子團(tuán)混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中的方法，其中的步驟還包括將該血液-分子團(tuán)混合物與紅細(xì)胞特異性結(jié)合劑在該離心步驟前進(jìn)行混合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中的方法，其中所述血樣為牛血。
4.根據(jù)權(quán)利要求1中的方法，其中該高分子量顆粒是選自一組由聚凝胺，魚(yú)精蛋白硫酸鹽，陽(yáng)離子抗生素，聚乙二醇(PEG)，羥基二乙基淀粉(HES)，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，和葡聚糖組成的試劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1中的方法，其中該分子團(tuán)由聚凝胺和葡聚糖的混合物形成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1中的方法，其中該分子團(tuán)是由聚凝胺和PVP形成的。
7.一種在離心抗凝牛全血樣品的牛紅細(xì)胞層和牛粒細(xì)胞層間形成良好確定的和清晰的界面的方法，該方法包括的步驟如下a)將一定量的分子團(tuán)與牛血樣混合以提供一種牛血液-分子團(tuán)混合物，該分子團(tuán)由至少兩種不同的高分子量顆粒組成，并具有表面正電荷；及b)在透明管中離心牛血液-分子團(tuán)混合物。
8.一種在離心抗凝全血樣品的紅細(xì)胞層和粒細(xì)胞層間形成良好確定的和清晰的界面的方法，該方法包括的步驟如下a)將一定量的分子團(tuán)與血樣混合以提供一種血液-分子團(tuán)混合物，該分子團(tuán)由一群葡聚糖和聚凝胺組成；及b)在透明管中離心血液-分子團(tuán)混合物。
9.一種在離心抗凝全血樣品的紅細(xì)胞層和粒細(xì)胞層間形成良好確定的和清晰的界面的方法，該方法包括的步驟如下a)將一定量的分子團(tuán)與血樣混合形成一種血液-分子團(tuán)混合物，該分子團(tuán)由一組聚乙烯吡咯烷酮和聚凝胺組成；及b)在透明管中離心血液-分子團(tuán)混合物。
10.一種減少抗凝全血樣品中由紅細(xì)胞Z電位導(dǎo)致的排斥力強(qiáng)度的方法，該方法包括的步驟是，通過(guò)將一定量的分子團(tuán)與血樣混合，形成一種抗凝的血液-分子團(tuán)混合物，該分子團(tuán)由至少兩種不同的高分子量顆粒組成，并具有表面正電荷。
11.根據(jù)權(quán)利要求10中的方法，其中該高分子顆粒包括葡聚糖和聚凝胺。
12.根據(jù)權(quán)利要求10中的方法，其中該高分子顆粒包括聚乙烯吡咯烷酮和聚凝胺。
13.一種在離心抗凝全血樣品的紅細(xì)胞層和粒細(xì)胞層間形成良好確定的和清晰的界面的方法，該方法包括的步驟如下a)將一定量的分子團(tuán)與血樣混合形成一種血液-分子團(tuán)混合物，該分子團(tuán)由一組聚乙烯吡咯烷酮和聚凝胺組成；及b)在透明管中離心血液-分子團(tuán)混合物。
14.一種減少抗凝全血樣品中由紅細(xì)胞Z電位導(dǎo)致的排斥力強(qiáng)度的方法，該方法包括的步驟是，通過(guò)將一定量的分子團(tuán)與血樣混合，形成一種抗凝的血液-分子團(tuán)混合物，該分子團(tuán)由至少兩種不同的高分子量顆粒組成，并具有表面正電荷。
15.一種在離心抗凝全血樣品的紅細(xì)胞層和粒細(xì)胞層間形成良好確定的和清晰的界面的方法，該方法包括的步驟如下a)提供一種抗凝全血和陽(yáng)離子大分子試劑的混合物；及b)在透明管中離心血液一試劑混合物。
16.根據(jù)權(quán)利要求15中的方法，其中該大分子試劑是聚乙烯吡咯烷酮。
17.根據(jù)權(quán)利要求15中的方法，其中所述血樣是牛血液。
18.一種減小抗凝全血樣品中由紅細(xì)胞Z電位導(dǎo)致的排斥力強(qiáng)度的方法，該方法包括的步驟是，通過(guò)將一定量陽(yáng)離子大分子與血樣混合，形成一種抗凝的血液-陽(yáng)離子大分子混合物。
19.根據(jù)權(quán)利要求18中的方法，其中該大分子試劑是聚乙烯吡咯烷酮。
20.根據(jù)權(quán)利要求18中的方法，其中血樣是牛血液。
21.一種含水介質(zhì)中分子團(tuán)溶液，該分子團(tuán)由一組大分子試劑組成，該試劑包括一個(gè)核芯的大分子組分和一表面大分子組分，該表面大分子組分為分子團(tuán)提供了表面正電荷。
22.根據(jù)權(quán)利要求21中的溶液，其中該含水介質(zhì)是鹽溶液。
23.根據(jù)權(quán)利要求21中的溶液，其中該分子團(tuán)是由一組葡聚糖和聚凝胺組成。
24.根據(jù)權(quán)利要求21中的溶液，其中該分子團(tuán)由一組聚乙烯吡咯烷酮和聚凝胺組成。
25.一種血液分析裝置，包括一透明血液管，該管有一個(gè)接收和容納血樣的腔體，該管腔被一層干燥試劑包涂，該試劑溶于血液并包括大分子試劑，該大分子試劑能夠在溶液中形成分子團(tuán)，并有效地抑制管中抗凝全血的紅細(xì)胞Z-電位。
全文摘要
哺乳動(dòng)物抗凝全血樣品與試劑的結(jié)合物混合,該試劑可減小哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞彼此間具有的天然排斥力。然后,經(jīng)處理的血樣在含有淡黃色膜擴(kuò)展插子的管中離心,在管中該插子可物理性的擴(kuò)展血樣的淡黃色膜組成的軸向長(zhǎng)度。通過(guò)減小紅細(xì)胞彼此間排斥的傾向,得到紅細(xì)胞和淡黃色膜間的一個(gè)清晰的界限。加入血樣中的凝集試劑的作用也會(huì)提高。上述方法和試劑首次使精確分析抗凝牛全血的離心樣品,并得到血細(xì)胞比容,及白細(xì)胞差示計(jì)數(shù)成為可能。另外,具有流動(dòng)性?xún)A向的人血樣品,也可通過(guò)加入適當(dāng)降低紅細(xì)胞排斥試劑及凝集試劑,進(jìn)行精確分析。
文檔編號(hào)G01N33/50GK1196486SQ97126498
公開(kāi)日1998年10月21日 申請(qǐng)日期1997年11月21日 優(yōu)先權(quán)日1996年11月22日
發(fā)明者S·C·沃德羅, R·A·萊文 申請(qǐng)人:S·C·沃德羅, R·A·萊文